CURSO: Microbiologa
CICLO: VIII
SECCION: 2B
GRUPO: I
LIMA PERU
2015
INTRODUCCIN
Los antibiticos son sustancias normalmente de bajo peso molecular producidas por seres
vivos (antibiticos naturales) o modificadas artificialmente a partir de ellas (antibiticos
semisintticos), que a pequeas concentraciones tienen efectos antimicrobianos
(microbicidas o microbiostticos), tras ser administrados por va adecuada a un organismo
receptor.
La mayor parte de los antibiticos proceden del metabolismo secundario de
microorganismos procariotas (actinomicetos, Bacillus, etc.) o eucariotas (hongos de los
gneros Penicillium, Cephalosporium, etc.).
Se conocen unos 5.000 antibiticos distintos, y cada ao se descubre unos 300 nuevos,
pero en clnica solo se usa un 1% de los descubiertos. Su importancia econmica se pone
de manifiesto al pensar en las 100.000 Tm. de antibiticos producidas al ao, por un valor
equivalente a 3.000 millones de euros, lo cual representa una de las industrias
biotecnolgicas ms importantes.
se puede ver por su espectro, son tiles incluso contra bacterias que viven como parsitos
intracelulares (como las Rickettsias), debido a que su carcter hidrofbico facilita su
difusin a travs de membranas.
Mecanismo de accin: provocan que la unin del aa-ARNt al sitio A del ribosoma sea
inestable y est distorsionada, con lo cual se evita la elongacin de la cadena. In
vitro actan tanto frente a ribosomas 70S como frente a los 80S. Entonces, por qu in
vivo slo inhiben a las bacterias? La explicacin est en el hecho de que las bacterias
transportan complejos tetraciclina-Mg de forma suicida, cosa que no ocurre en eucariotas.
Los aminoglucsidos constituyen un grupo amplio y variado de antibiticos de amplio
espectro, producidos por diversas especies de Streptomyces. Como se puede ver en las
figuras, todos tienen en comn varios rasgos qumicos: son muy polares, policatinicos;
presentan un anillo de aminociclitol (un ciclohexitol o inositol con grupo amino); uno o ms
azcares, incluyendo al menos un aminoazcar (aparte del aminociclitol).
Mecanismo de accin: se unen a los poli ribosomas que estn traduciendo el
ARNm, provocando errores en la lectura del ARNm, al distorsionar la estructura del
ribosoma. Por lo tanto, la bacteria comienza a sintetizar protenas defectuosas; con un
efecto final que es bactericida.
MUELLER HINTON CALDO
Este medio ha sido recomendado universalmente para la prueba de sensibilidad de los
antimicrobianos en medio lquido.
Fundamento
Medio nutritivo adecuado para facilitar el crecimiento de numerosos microorganismos.
Al igual que su presentacin en forma de agar, el caldo Mueller Hinton muestra buena
reproducibilidad de los resultados lote a lote, tiene un bajo contenido de inhibidores
especialmente para sulfamidas, trimetoprima y tetraciclina. Puede ser suplementado para
el crecimiento de bacterias exigentes y con ciertos cationes para el antibiograma de
Pseudomonas frente a aminoglucsidos
ESCALA DE MC FARLAND
La utilidad de la escala es poder realizar suspensiones bacterianas ajustadas a un patrn,
generalmente se suele usar el 0,5 Mc Farland, para esto se toma una muestra de nuestra
bacteria y la inoculamos en un tubo con solucin salina, en el momento en que se
produzca un poco de turbidez ya estamos en el 0,5 (de forma visual).
La finalidad, es establecer una relacin entre una precipitacin qumica y una suspensin
bacteriana. Creamos 10 estndares (en la tabla aparece la composicin de estos) y por
espectrofotometra, creamos una recta patrn, de forma que vamos a poder detectar la
concentracin de nuestras diluciones bacterianas (de manera aproximada, ya que depende
COMPETENCIAS
Aplica mtodos para evaluar la actividad antimicrobiana in vitro.
Obtiene la concentracin mnima inhibitoria de antibiticos en estudio.
MATERIALES Y EQUIPOS
Tubos de ensayo
Hisopos
Pipetas estriles
Cultivo de S. Aureus
de E. Coli
Cultivo
PROCEDIMIENTO
Mtodo de difusin en agar
Preparar una dilucin de la bacteria en estudio equivalente a 0,5 de la escala de Mc
Farland.
TUBO
Cl2Ba 1%
SO4H2 1%
u.f.c/ml
0,1
9,9
3,0x108
0,2
9,8
6,0x108
0,3
9,7
9,0x108
0,4
9,6
1,2x109
0,5
9,5
1,5x109
0,6
9,4
1,8x109
0,7
9,3
2,1x109
0,8
9,2
2,4x109
0,9
9,1
2.7x109
10
1,0
9,0
3,0x109
Los cultivos de caldo se dejan incubar a 35C hasta que aparece una turbidez
ligeramente visible (generalmente 2 a 5 hs). La turbidez se ajusta con suero fisiolgico
estril o caldo para obtener una turbidez visualmente comparable a la de un estndar
preparado previamente (llamado 0.5 de Mc Farland). Este estndar debe agitarse antes
de usar y ser comparado en forma visual con el inculo preparado.
Para ello se miran ambos tubos al mismo tiempo contra un fondo blanco con una lnea
negra como contraste Este mtodo es recomendado cuando el cultivo tiene ms de 24 hs
de incubacin.
Siembra en una placa de agar Muller- Hilton con un hisopo el cultivo de E. Coli.
agar MullerHilton
Hisopado con E.
Coli
Agar divido en 4
para colocarle los
discos de
antibiticos
Colocar 4 Discos de
antibiticos amoxicilina
gentamicina
ciproffloxacino y
doxiciclina
Durante 24 horas
en una
temperatura de
37c.
Siembra en una placa de agar Muller- Hilton con un hisopo el cultivo de s. aureus
Tomar un hisopo estril y
sumergirlo en el caldo de
estafilococos ureos
Colocar 4 Discos de
antibiticos amoxicilina
gentamicina ciproffloxacino
y doxiciclina.
Durante 24 horas en
una temperatura de
37c.
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
A las 24 horas medir los halos de inhibicin en mm e interpretar los resultados para
clasificarlos como sensibles, intermedios o resistentes.
-
CATEGORAS DE INTERPRETACIN:
-
Amoxicilina
DOXICICLINA
CONCLUSIONES.
RECOMENDACIONES.
-Los discos que pertenecen a la familia de los betalactamicos pierden su potencia al estar
frente al calor.