FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGA

METODOS DE ANLISIS QUMICO

LABORATORIO N 4
DETERMINACIN DE PROTENA TOTAL
MTODO KJENDAHL
Objetivos

Reconocer y aplicar la valoracin acido-base por medio del mtodo Kjeldahl, para
el anlisis de muestras alimenticias.
Determinar el contenido de Nitrgeno presente en una muestra de Yogurt.
Comparar los resultados obtenidos por el mtodo de Kjeldahl y el porcentaje de
protena presente en la muestra de Yogurt.
Aplicar la valoracin acido-base por retroceso o indirecta.

Resumen
En la prctica de laboratorio se llev a cabo la determinacin del contenido de Nitrgeno
(% de protena) presente en una muestra de Yogurt (marca Alpina) a travs del Mtodo
Kjendahl. Este mtodo est basado en tres etapas, la primera se llama Digestin, en esta
se destruye la materia orgnica presente en el alimento con cido Sulfrico concentrado a
ebullicin y en presencia de catalizadores, en el que se forma Sulfato de Amonio. En la
segunda etapa, en la Destilacin al Sulfato de Amonio se le aade un exceso de solucin
de Hidrxido de Sodio, el cual permite que se libere Amonaco (presenta comportamiento
bsico). Finalmente la tercera etapa: la Titulacin, el Amoniaco es recogido en Acido
Brico en presencia de un indicador, formndose Borato cido de Amonio en la titulacin
directa.
En la titulacin indirecta o de retroceso aplicada en este caso a la muestra, el amoniaco
es recogido en Acido Clorhdrico con indicador fenolftalena y es valorado con Hidrxido
de Sodio hasta el cambio de color de la solucin.
Palabras Clave: Protena, Mtodo Kjendahl, valoracin acido - base, destilacin e
indicador.

Abstract:

In this laboratory practice was carried out the determination of the content of Nitrogen
(Protein percent) present in a sample of Yogurt (trade: Alpina) through the Kjendahl
Method. This method is based on three stages, the first one is called Digestion, in this part
is destroyed the organic matter present in the sample with Sulfuric Acid concentrated to a
boil and catalysts, producing Ammonium Sulfate. In the second stage: Distillation to the
Ammonium Sulfate is added a excess solution of Sodiumm Hydroxide which allows the
releasing of Ammoniac (base behavior). Finally, the third stage: the titration, the
Ammonium is collected in boric acid in the presence of an indicator, with the forming
Borate Acid Ammonium in the direct titration.
In the reverse titration or indirect, in this case applied to the sample, Ammonium is
collected in Hydrochloric Acid with phenolphthalein indicator and titrated with Sodium
Hydroxide until the color change of the solution.
Keywords: Protein, Kjendahl Method, Acid-Base Tritation, Distillation and indicator.

Metodologa:

Tablas de resultados:

Tabla primaria
Tabla No.1 Datos no procesados
[HCl]
0.1N
[NaOH]
0.243N
% protena terico (Yogurt)
12%
NaOH gastado
11.5 ml
Gramos de muestra
1.5489g
utilizada
Tabla secundaria:
Tabla No.2 Datos procesados
Gramos de muestra
1.5489 g

meq N
%N

1.7945
1.6

10.4

Clculos:
Directa
Inicialmente, se realiz un clculo terico de la cantidad de muestra que era necesaria
pesar para obtener el porcentaje de protena terico del alimento.
Nota: para este clculo se tuvo en cuenta el valor terico del porcentaje de protena en
embutidos: 2.9% y la solucin preparada en el laboratorio de HCl [0.1 N].

Protena=%NFactor alimento
%N =

Protena
Factor alimento

%N =

2.9
=0.4545 N
6.38

+=meq NH 3=meq N
meq H

vol ( mL ) HCl[ HCL ] N

g muestra=

14,08 mg N
1meqg N

)(

1 x 10 gN
100
1 mg

N
mg N
1g N
100
( 14,08
1meqg N )( 1 x 10 mg N )

5 ml HCl[ 0,1 ] N HCl

g muestra=

0.4545

g muestra=1.5489
Retroceso
Clculo de cantidad de muestra necesaria para realizar la volumetra por retroceso en el
mtodo Kjendahl:

meq totales HCl Rx con N H 4 OH=meq N que Rx con N H 4 OH =meq N

14,08 mg N
1meqg N
6.38 (Lacteos)

vol ( mL ) HCl[ HCL ] N

g muestra=

)(

mg N
1g N
100
( 14,08
)
(
1meqg N 1 x 10 mg N )

5 ml HCl[ 0,1 ] N HCl

g muestra=

1 x 103 gN
100
1 mg

6.38

g muestra=0.1103
Se hace titulacin con NaOH estandarizado [0.0937]N a la muestra, luego del proceso de
destilacin con exceso de HCl [0.0923]N

meq totales HClmeq N H 4 que no reaccionan=meq N

+=meq Rx con analito+ meq no Rx con analito

meq totales H

+meq no Rx con analito

meq Rx con analito=meq totales H

meq Rx con analito ( N)=10 ml HCl[ 0.1 ] N HCl11.5 ml NaOH[0,243] N NaOH

meq N=1.7945

Porcentaje de Nitrgeno y Protena en muestra

La masa de muestra analizada es de:

meq N
N=

1 x 10 eqg N
1 meqg N

1.5489 g

gN
factor alimento100
)( 114,08
eqg N )
g muestra

1.7945 meqg N
N=

1 x 103 eqg N
1 meqg N
1.5489 g muestra

gN
100
)( 14,08
1 eqg N )

N =1.6312

1.7945 meqg N
P=

)(

1 x 103 eqg N 14,08 g N

6,38100
1 meqg N
1eqg N
1.5489 g muestra

P=10.4074
Anlisis de resultados
En la determinacin de Nitrgeno en una muestra alimenticia, en este caso, el Yogurt,
mediante el mtodo de Kjeldahl se efectan una serie de reacciones que sern tenidas en
cuenta de acuerdo a las etapas en las que se desarrolla este mtodo:
1. Digestin: En esta etapa a la muestra alimenticia se le hace un proceso de
destruccin de materia orgnica con el fin de obtener el residuo inorgnico que
permita la determinacin de Nitrgeno, esta destruccin de materia orgnica se
lleva a cabo en el digestor y est dada por la adicin de 10ml de cido Sulfrico
concentrado a 1.5489g de muestra (Yogurt) a ebullicin y con 4g de catalizadores
para acelerar la reaccin, proceso que permite la formacin de Sulfato de Amonio
y el desprendimiento de xido de Azufre y Dixido de Carbono, como se muestra
a continuacin:

H
NH
( 4 )2 SO 4 +CO 2+ SO 2
[ 2 SO4 ]

Alimento (Yogurt )+

Muestra con cido Sulfrico y catalizadores en el digestor.

2. Destilacin: en esta etapa se usa el destilador de Kjendahl, donde el Sulfato de

Amonio se hace reaccionar con un exceso de solucin de Hidrxido de Sodio al
30%m/v, el cual permite que se libere Amonaco y se forme Sulfato de Sodio:

NH
NH
2( 4 OH )
( 4 )2 SO 4 + NaOH Na 2 S O4 +

Destilador de Kjendahl
3. Titulacin
3.1 Titulacin Directa: el Amoniaco liberado sobrante de la destilacin es
recogido en 10ml de Acido Brico al 4%m/v en presencia del indicador Tashiro
para observar el comportamiento bsico, donde la solucin cambia de color a
verde, en esta reaccin se forma Borato cido de Amonio:

NH 4 OH + H 3 B O3 NH 4 H 2 BO3

Finalmente el Borato cido de Amonio es valorado con Acido Clorhdrico a

0.1N, pero en este caso es valorado con la solucin de HCl preparada en una
anterior prctica de laboratorio, la cual se encuentra a una concentracin de
0.1N, se determina valorado el Borato cido de Amonio hasta observar el
cambio de color verde a morado de la solucin:

NH 4 H 2 B O3 + HCl H 3 B O3 + NH 4 Cl

3.2 Titulacin por retroceso: Se usaron 10 ml cido Clorhdrico de concentracin

0.1N, para recoger el Amoniaco, este se valor por retroceso con Hidrxido de
Sodio patrn de concentracin 0.243N y 3 gotas de fenolftalena como
indicador. Por diferencia se sabe la cantidad de Amoniaco, y por lo tanto
tambin se sabe la cantidad de Nitrgeno presente en la muestra original.
En esta titulacin se gastaron 11.5 ml de NaOH, y se calcul a partir de este
volumen, los mili equivalentes de Nitrgeno presentes en la muestra que
fueron de (1.7945) por la diferencia de los mili equivalentes totales (1) y los mili
equivalentes que no reaccionaron con el analito (2.7945).
Luego se realiz el clculo de porcentaje de Nitrgeno, y se encontr que el
yogurt contena una cantidad baja de nitrgeno con respecto al dato terico,
pues experimentalmente se encontr que el alimento contena un 1.6% de
Nitrgeno mientras que tericamente este debera contener un 2.9%. Sin
embargo, con los datos obtenidos experimentalmente se calculo el porcentaje
de Protena del yogurt, el cual contiene una cantidad protena del 10.4% que
respecto al valor terico de 12%. Con lo que se puede concluir que este
producto cumple con el porcentaje de Nitrgeno especificado lo que lo
convierte en un producto de alta calidad.

Conclusiones
Se determin mediante el mtodo de Kjeldahl el porcentaje de protena en una
muestra de lcteos (yogurt) dando un porcentaje de 10.4% que en correlacin al
valor terico de 12%, es alto el contenido proteico de dicha muestra de yogurt.
El mtodo de determinacin de protena empleado puede presentar errores que
pueden justificar de algn modo esta diferencia entre el valor experimental y
terico de porcentaje de protena en lcteos, como son: la inclusin de nitrgeno
no proteico la digestin incompleta de la muestra.
El mtodo de Kjeldahl es bastante preciso ya que es un sistema cerrado, en el
que no hay prdida de muestra, por lo que la confiabilidad del mtodo permite
asegurar el alto porcentaje de protena en muestra.
La titulacin por retroceso permiti valorar exactamente el exceso de cido
clorhdrico, mediante la adicin del volumen en exceso de NaOH. De esta manera,
se consigue que reaccione todo el analito y posteriormente se valora el exceso de
reactivo, por lo que se gasta menos reactivo al valorar y se puede observar la
estandarizacin por medio le fenolftalena.

Bibliografa
Panreac. (Sin fecha). Determinacin de Nitrgeno por el Mtodo Kjendahl.
Pginas: 1-3. [En lnea]. Consultado el 5 de Mayo de 2013. Disponible en:
http://www.panreac.es/pdf/determinacion_nitrogeno_esp.pdf
La gua qumica. (Sin fecha). Mtodo Kjeldahl. [En lnea]. Consultado el 5 de Mayo
de
2013.
Disponible
en:
Mtodo
Kjeldahl
|
La
Gua
de
Qumica http://quimica.laguia2000.com/quimica-organica/quimica-analitica/metodokjeldahl#ixzz2SRpR3oZE