do
cido
delta
1 Referncia
TOMOKUMI K; OGATA M - Clin. Chem., v. 18, p.1354-1356, 1972.
(TESTE MODIFICADO APENAS PARA FINS DIDTICOS
TOXICOLOGIA ANLITICA ATRAVS DA ESPECTROSCOPIA
UV/Vis.) NO DEVE SER UTILIZADO PARA EXAMES CLNICOS.
2- INTRODUO INTRODUO ESPECTROSCOPIA
Fundamento:
3 - Equipamentos e reagentes:
2.1 - Espectrofotmetro, regio visvel, duplo feixe
2.2 - Banho de gua fervente
2.3- Soluo padro estoque d e ALA (50 mg/L)
Preparo da soluo: dissolver 0,0064 g de cloridrato de -ALA em H2O e completar
volume para 100 mL com gua destilada. Esta soluo estvel por cerca de 2 meses,
quando guardada sob refrigerao (4C).
2.4 - Soluo tampo acetato - pH 4,6
Preparo da soluo: dissolver 13,6 g de acetato de sdio triidratado em 70 mL de gua
destilada e 5,7 mL de cido actico concentrado. Completar o volume para 100mL com
gua destilada.
2.5 - Reativo de Ehrlich modificado (preparar no momento do uso)
Preparo do reativo: dissolver 1 g de p-dimetilamino benzaldedo em 30 mL de cido
actico concentrado, adicionar 5 mL de cido perclrico 60%, 5 mL de gua destilada e
completar o volume para 50 mL com cido actico concentrado.
2.6 - Acetatoacetato de etila
2.7 - Acetato de etila
3 - Mtodo Analtico
3.1 - Fator de Calibrao (Fc)
Caso no seja possvel construir a curva de calibrao, usar o Fc para a quantificao
do ALA nas amostras de urina, empregando-se o padro de 10 mg/L ou de 5,0 mg/L.
Clculos:
[Am] = fc x Aam
fc = [Pa]
Apa
sendo:
[Am] = concentrao da amostra
[Pa] = concentrao do padro
urina
sol. padres de uso
sol. tampo
acetoacetato
padro
1 mL
1 mL
200 L
branco de urina
1 mL
1 mL
-
CH3
CH 2
CH 2
CH 3
acetoacetato de etila
NH2
ALA
H
O
R3
R2
CH 3
HOOC
(CH2)2 COOH
( HC )
2 2
CH 3
3HC
Ehrlich
N
H
R2
3HC
R3
N
H
composto colorido
CH 3
CH
composto cclico
6- ATIVIDADES COMPLEMENTARES:
1.RELATRIO
2.EXPLIQUE O FUNDAMENTOS DA ESPECTROSCOPIA DA REGIO DO UV/VIS
3.QUANTO MAIOR A CONCENTRAO MENOS COLORIDO SER A SOLUO NA ANLISE NO
ESPECTRO DE LUZ VSIVEL EXPLIQUE SE V OU F E JUSTIFIQUE.
4.QUAL A FINALIDADE DO DOSEAMENTO DE ALA?
5.QUAL OUTRO MTODO PODE SER UTILIZADO PARA DOSEAMENTO DO ALA?
6. EXPLIQUE O MECANISMO DE TOXICIDADE DO Pb NA FISIOLOGIA DO ALA?