Anda di halaman 1dari 2

Kromatografi Preparatif

Metode kromatografi dapat dimanfaatkan secara luas untuk pemisahan


analitik dan preparatif. Biasanya, kromatografi analitik dipakai pada tahap
permulaan untuk semua cuplikan, dan kromatografi preparatif hanya dilakukan jika
diperlukan fraksi murni dari campuran (biasanya digunakan untuk pemurnian)
seperti pada KLT preparatif.
Kromatografi Lapis Tipis Preparatif merupakan proses isolasi yang terjadi
berdasarkan perbedaan daya serap dan daya partisi serta kelarutan dari komponenkomponen kimia yang akan bergerak mengikuti kepolaran eluen oleh karena daya
serap adsorben terhadap komponen kimia tidak sama, maka komponen bergerak
dengan

kecepatan

yang

berbeda

sehingga

hal

inilah

yang

menyebabkan

pemisahan.
Seperti halnya KLT secara umum, KLT Preparatif juga melibatkan fase diam
dan fase gerak. Dimana fase diamnya adalah sebuah plat dengan ukuran ketebalan
bervariasi. Untuk jumlah sampel 10-100 mg, dapat dipisahkan dengan mengunakan
KLT Preparatif dengan adsorben silika gel atau aluminium oksida, dengan ukuran
20x20 cm dan tebal 1 mm, jika tebalnya di dua kalikan, maka banyaknya sampel
yang dapat dipisahkan bertambah 50%, seperti halnya KLT biasa, adsorben yang
paling umum digunakan pada KLT Preparatif adalah silika gel.
Sebelum ditotolkan pada plat KLT Preparatif, sampel dilarutkan terlebih
dahulu dalam sedikit pelarut. Pelarut yang baik adalah pelarut yang mudah
menguap, misalnya n-heksana, diklorometana atu etil asetat. Karena jika pelarut
yang digunakan tidak mudah menguap, maka akan terjadi pelebaran pita.
Konsentrasi sampel juga sebaiknya hanya 5-10%. Sampel yang ditotolkan harus
berbentuk pita yang sesempit mungkin karena baik tidaknya pemisahan juga
bergantung pada lebarnya pita.
Setelah plat KLT Preparatif dielusi, pita yang kedudukannya telah diketahui
dikerok dari plat. Selanjutnya senyawa harus diekstraksi dari adsorben dengan
pelarut yang sesuai (5 ml pelarut untuk 1 gram adsorben). Diupayakan untuk
menggunakan pelarut yang paling nonpolar yang mungkin. Harus diperhatikan
bahwa makin lama senyawa kontak dengan adsorben, maka makin besar
kemungkinan senyawa tersebut mengalami peruraian. Selanjutnya ekstrak yang

diperoleh
membran.

disaring

menggunakan

corong

berkaca masir atau

menggunakan