Captulo 2 Agua y pH

C A P ITULO

Agua

pH

2
Peter J. Kennelly, PhD y Victor W. Rodwell, PhD

O B J E T I V
O S
Despus de
estudiar este
captulo, usted
debe ser capaz
de:

Describir las propiedades del agua que explican su tencin

de superficie, viscosidad, estado lquido a temperatura
ambiente, y poder solvente.
Usar formulas estructurales para presentar varios
compuestos orgnicos que pueden servir como donadores
de enlace de hidrogeno o como aceptores del mismo.
Explicar el papel que desempea la entropa de la
orientacin, en un ambiente acuoso, de las regiones polares
y no polares de macromolculas.
Indicar las contribuciones cuantitativas de los puentes de
sal, las alteraciones hidrofbicas y las fuerzas de Van der
Waals a la estabilidad de las macromolculas.
Explicar la relacin del pH con la acidez, alcalinidad y los
determinantes cuantitativos que caracterizan los cidos
dbiles y fuertes.
Calcular el cambio d pH que acompaa a la adicin de una
cantidad dada de cido o base a una solucin
amortiguadora.
Describir que hacen los amortiguadores, como lo hacen, y
las condiciones en las cuales un amortiguador es ms eficaz
en condiciones fisiolgicas o en otras condiciones.
Ilustrar como la ecuacin de Henderson-Hasselbalch puede
usarse para calcular el cambio neto de un polielectrlito a
un pH dado.

IMPORTANCIA BIOMDICA
El agua es el componente qumico predominante de los organismos vivos. Sus
singulares propiedades fsicas, que incluyen la capacidad para disolver una amplia
gama de molculas orgnicas e inorgnicas, se derivan de su estructura bipolar y
de su excepcional capacidad para formar enlaces de hidrgeno. La manera en que
el agua interacta con una biomolcula solvatada influye sobre la estructura de
ambas, tanto de la biomolcula como del agua. El agua, un excelente nuclefilo, es
un reactivo o un producto en muchas reacciones metablicas. La regulacin del
equilibrio del agua depende de mecanismos hipotalmicos que controlan la sed, de
la hormona antidiurtica (ADH), de la retencin o excrecin de agua por los riones,

Captulo 2 Agua y pH
y de la prdida por evaporacin. La diabetes inspida nefrognica, que comprende la
incapacidad para concentrar orina o para hacer ajustes a cambios sutiles de la
osmolaridad del lquido extracelular, se produce por falta de capacidad de respuesta
de los osmorreceptores de los tbulos renales a la ADH.
El agua tiene una propensin leve a disociarse hacia iones hidroxilo y protones.
La concentracin de protones, o acidez, de soluciones acuosas por lo general se
reporta usando la escala de pH logartmica. El bicarbonato y otros amortiguadores
en circunstancias normales mantienen el pH del lquido extracelular entre 7.35 y
7.45. Las alteraciones sospechadas del equilibrio acidobsico se verifican al medir
el pH de la sangre arterial y el contenido de CO 2 de la sangre venosa. Las causas
de acidosis (pH sanguneo < 7.35) son cetosis diabtica y acidosis lctica. La
alcalosis (pH > 7.45) puede presentarse despus de vmitos de contenido gstrico
cido.

EL AGUA ES UN SOLVENTE BIOLGICO IDEAL

Las molculas de agua forman dipolos

Una molcula de agua es un tetraedro irregular, un tanto asimtrico, con oxgeno en

su centro (figura 2-1). Los dos hidrgenos y los electrones no compartidos de los
dos orbitales sp3 -hibridados restantes ocupan los ngulos del tetraedro. El ngulo
de 105 grados entre los hidrgenos difiere un poco del ngulo tetradrico ideal, de
109.5 grados. El amoniaco tambin es tetradrico, con un ngulo de 107 grados
entre sus hidrgenos. El agua es un dipolo, una molcula con carga elctrica
distribuida de manera asimtrica en toda su estructura. El tomo de oxgeno
fuertemente electronegativo empuja los electrones en direccin contraria a los
ncleos de hidrgeno, lo que los deja con una carga positiva parcial, mientras que
sus dos pares de electrones no compartidos constituyen una regin de carga
negativa local.

FIGURA 2-1 La molcula de agua tiene geometra tetradrica

Una molcula con carga elctrica distribuida de manera asimtrica alrededor de su
estructura se denomina dipolo. La constante dielctrica alta del agua depende de
su dipolo fuerte. Como se describe de manera cuantitativa mediante la ley de
Coulomb, la fuerza de la interaccin F entre partculas que tienen carga opuesta es
inversamente proporcional a la constante dielctrica e del medio circundante. La
constante dielctrica para un vaco es la unidad; para el hexano es 1.9; para el
etanol, 24.3, y para el agua, 78.5. Por ende, el agua disminuye mucho la fuerza de
atraccin entre especies cargadas y polares en comparacin con ambientes libres
de agua que tienen constantes dielctricas ms bajas. Su fuerte dipolo y constante
dielctrica alta permiten al agua disolver grandes cantidades de compuestos
cargados, como las sales.

Las molculas de agua forman enlaces de hidrgeno

Un ncleo de hidrgeno parcialmente desprotegido, unido de manera covalente a
un tomo de oxgeno o de nitrgeno que extrae electrones, puede interactuar con
un par de electrones no compartidos sobre otro tomo de oxgeno o nitrgeno para

Captulo 2 Agua y pH
formar un enlace de hidrgeno. Dado que las molculas de agua tienen estas dos
caractersticas, la formacin de enlaces de hidrgeno favorece la autoasociacin de
molculas de agua hacia disposiciones orden nadas (fig. 2-2). La formacin de
enlaces de hidrgeno ejerce una profunda influencia sobre las propiedades fsicas
del agua, lo que explica su viscosidad, tensin superficial y punto de ebullicin
excepcionalmente altos. En promedio, cada molcula en agua lquida se asocia por
medio de enlaces de hidrgeno con otras 3.5. Estos enlaces son hasta cierto punto
dbil y transitorio, con una vida media de unos pocos nanosegundos o menos. La
ruptura de un enlace de hidrgeno en agua lquida slo requiere alrededor de 4.5
kcal/mol, menos de 5% de la energa necesaria para romper un enlace OH
covalente.
La formacin de enlaces de hidrgeno permite al agua disolver muchas
biomolculas orgnicas que contienen grupos funcionales que pueden participar en
la formacin de enlaces de hidrgeno. Los tomos de oxgeno de aldehdos, cetonas
y amidas, por ejemplo, proporcionan pares de electrones solitarios que tienen la
capacidad de servir como aceptores de hidrgeno. Los alcoholes y las aminas
pueden servir como aceptores de hidrgeno y como donadores de tomos de
hidrgeno desprotegidos para formacin de enlaces de hidrgeno (fig. 2-3).

FIGURA 2-1

Izquierda: asociacin de dos molculas de agua dipolares mediante un

enlace de hidrgeno (lnea punteada). Derecha: agrupacin de cuatro molculas de agua
con enlaces de hidrgeno. Note que el agua puede servir de manera simultnea como
donador y como aceptor de hidrgeno.

LA INTERACCIN CON AGUA

ESTRUCTURA DE BIOMOLCULAS
Los enlaces covalentes
molculas biolgicas

no

INFLUYE
covalentes

SOBRE

LA

estabilizan

El enlace covalente es la mayor fuerza que mantiene juntas a las molculas (cuadro
2-1). Las fuerzas no covalentes, aunque son de menor magnitud, hacen
contribuciones importantes a la estructura, estabilidad y competencia funcional de
macromolculas en las clulas vivas. Estas fuerzas, que pueden ser de atraccin o
de repulsin, comprenden interacciones tanto dentro de la biomolcula como entre
la misma y el agua, que es el principal componente del ambiente circundante.

CUADRO 2-1 Energa de enlace para tomos de importancia biolgica

Tipo
de enlace
O-O
S-S
C-N
S-H
C-C
C-O
N-H

Energa
(Kcal/mol)
34
51
70
80
82
84
94

Tipo
de enlace
O=O
C-H
C=S
O-H
C=C
C=N
C=O

Energa
(Kcal/mol)
96
99
108
110
147
147
164

Captulo 2 Agua y pH

Las biomolculas se pliegan para

colocar a grupos
polares y cargados sobre sus superficies
Casi todas las biomolculas son anfipticas; esto es, poseen regiones con alto
contenido de grupos funcionales cargados o polares, as como regiones con carcter
hidrofbico. Las protenas tienden a plegarse con los grupos R de aminocidos con
cadenas laterales hidrofbicas en el interior. Los aminocidos con cadenas laterales
de aminocidos cargadas o polares (p.ej., arginina, glutamato, serina) por lo general
estn presentes sobre la superficie en contacto con agua. Un modelo similar
prevalece en una bicapa de fosfolpidos, donde los grupos con cabeza cargada de
fosfatidil serina o fosfatidil etanolamina tienen contacto con agua, mientras que sus
cadenas la terales de cido graso (acilo) hidrofbicas se agrupan juntas y excluyen
el agua. Este modelo maximiza las oportunidades para la formacin de
interacciones de carga-dipolo, dipolo-dipolo, y formacin de enlaces de hidrgeno,
favorables desde el punto de vista energtico entre grupos polares sobre la
biomolcula y el agua. Tambin minimiza contactos desfavorables desde el punto
de vista energtico entre el agua y grupos hidrofbicos.

Interacciones hidrofbicas

El trmino interaccin hidrofbica (o hidrfoba) alude a la tendencia de

compuestos no polares a autoasociarse en un ambiente acuoso. Tal autoasociacin
no est impulsada por atraccin mutua ni por lo que a veces es denominado de
manera incorrecta como enlaces hidrofbicos. La autoasociacin minimiza
interacciones desfavorables desde el punto de vista energtico entre las molculas
de agua circundantes.
Dado que los hidrgenos de grupos no polares como los grupos metileno de
hidrocarburos no forman enlaces de hidrgeno, afectan la estructura del agua que
los rodea. Las molculas de agua adyacentes a un grupo hidrofbico tienen
restriccin en cuanto al nmero de orientaciones (grados de libertad) que les
permiten participar en el nmero mximo de enlaces de hidrgeno favorables desde
el punto de vista energtico. La formacin mxima de mltiples enlaces de
hidrgeno slo puede mantenerse al aumentar el orden de las molculas de agua
adyacentes, con una disminucin agregada de la entropa.
La segunda ley de la termodinmica establece que la energa libre ptima de una
mezcla de hidrocarburo agua est en funcin tanto de la entalpa mxima (por
formacin de enlaces de hidrgeno) como de la entropa mnima (grados mximos
de libertad). De este modo, las molculas no polares tienden a formar gotitas a fin
de minimizar el rea de superficie expuesta y reducir el nmero de molculas de
agua afectadas. De modo similar, en el ambiente acuoso de la clula viva las
porciones hidrofbicas de biopolmeros tienden a estar recluidas dentro de la
estructura de la molcula o dentro de una bicapa lpida, lo que minimiza el contacto
con agua.

Interacciones electrostticas

Las interacciones entre grupos cargados ayudan a dar forma a la estructura

biomolecular. Las interacciones electrostticas entre grupos que tienen carga
opuesta dentro de biomolculas o entre las mismas se denominan puentes de sal,
los cuales tienen fuerza comparable a la de los enlaces de hidrgeno, pero actan
en distancias mayores; por ende, a menudo facilitan el enlace de molculas y iones
cargados a protenas y cidos nucleicos.

Fuerzas de van der Waals

Surgen por atracciones entre dipolos transitorios generados por el movimiento

rpido de electrones de todos los tomos neutros. Las fuerzas de van der Waals
mucho ms dbiles que los enlaces de hidrgeno, pero potencialmente abundantes
disminuyen en trminos de la sexta potencia de la distancia que separa a los
tomos (figura 2-4). De este modo, actan en distancias muy cortas, por lo general
de 2 a 4 .

Captulo 2 Agua y pH

Columna1
60
40
20
0

-20
-40
-60
Columna1

FIGURA 2-4

La fuerza de interaccin de van der Waals varia con la distancia, R,

entre especies que interactan. La fuerza de interaccin entre especien que interactan
aumenta con la distancia decreciente hasta que son separadas por la distancia de contacto
de van der Waals (vase la marca con A). A continuacin sobreviene repulsin debido a la
interaccin entre los electrones de cada tomo de molcula. Si bien las interacciones de van
der Waals son en extremo dbiles, el efecto acumulativo es considerable para
macromolculas como DNA y protenas con muchos tomos en contacto estrecho.

Fuerzas mltiples estabilizan biomolculas

La doble hlice de DNA ilustra la contribucin de mltiples fuerzas a la estructura de

biomolculas. Si bien cada cadena de DNA individual se mantiene junta por medio
de enlaces covalentes, las dos hebras de la hlice se mantienen unidas de manera
exclusiva mediante interacciones no covalentes. Estas ltimas comprenden enlaces
de hidrgeno entre bases de nucletido (apareamiento de bases de Watson-Crick) e
interacciones de van der Waals entre las bases de purinay pirimidina apiladas. La
hlice presenta los grupos fosfato cargado y azcares ribosa polar del esqueleto a
agua mientras que resguarda dentro las bases nucletido relativamente
hidrofbicas. El esqueleto extendido maximiza la distancia entre fosfatos que tienen
carga negativa, lo que minimiza interacciones electrostticas desfavorables.

EL AGUA ES UN EXCELENTE NUCLEFILO

Las reacciones metablicas a menudo comprenden el ataque por pares solitarios de
electrones que residen sobre molculas ricas en electrones llamadas nuclefilos
sobre tomos con pocos electrones llamados electrfilos. Los nuclefilos y
electrfilos no necesariamente poseen una carga negativa o positiva formal.
El agua, cuyos dos pares solitarios de electrones sp3 tienen una carga negativa
parcial, (figura 2-1), es un excelente nuclefilo. Otros nuclefilos de importancia
biolgica son los tomos de oxgeno de fosfatos, alcoholes y cidos carboxlicos; el
azufre de tioles; el nitrgeno de aminas y el anillo imidazol de la histidina. Los
electrfilos comunes son los carbonos carbonilo en amidas, steres, aldehdos y
cetonas, y los tomos de fsforo de fosfosteres.
El ataque nucleoflico por agua a menudo origina la ruptura de los enlaces amida,
glucsido o ster que mantienen juntos a los biopolmeros. Este proceso recibe el
nombre de hidrlisis. A la inversa, cuando unidades de monmeros se unen para

Captulo 2 Agua y pH
formar biopolmeros como protenas o glucgeno, el agua es un producto, por
ejemplo, durante la formacin de un enlace peptdico entre dos aminocidos:

Si bien la hidrlisis es una reaccin favorecida desde el punto de vista

termodinmico, los enlaces amida y fosfoster de polipptidos y oligonucletidos
son estables en el ambiente acuoso de la clula. Esta conducta al parecer
paradjica refleja el hecho de que la termodinmica que rige el equilibrio de una
reaccin no determina la velocidad a la cual proceder. En las clulas, catalticos
protena llamadas enzimas aceleran el ndice de reacciones hidrolticas cuando es
necesario. Las proteasas catalizan la hidrlisis de protenas hacia los aminocidos
que las componen, mientras que las nucleasas catalizan la hidrlisis de los enlaces
fosfoster en el DNA y el
RNA. Se requiere control cuidadoso de las actividades de estas enzimas para
asegurar que slo acten sobre molculas blanco apropiadas en momentos
apropiados.

Muchas
reacciones
transferencia de grupo

metablicas

comprenden

Muchas de las reacciones enzimticas de las cuales depende la sntesis y

desintegracin de biomolculas comprenden la transferencia de un grupo qumico G
desde un donador D hacia un aceptor A para formar un complejo de aceptor-grupo,
A-G:
D-G + A <=> A-G + D

Por ejemplo, la hidrolisis y la fosforlisis de glucogeno comprenden la transferencia

de grupos glucosilo hacia agua o hacia ortofosfato. La constante de equilibrio para
la hidrolisis de enlaces covalentes favorece de manera significativa la formacin de
productos de divisin. Por el contrario, en muchos casos las reacciones de
transferencia de grupo a la cuales depende la biosntesis de macromolculas
comprenden la formacin no favorecida termodinmicamente de enlaces
covalentes. Los catalticos de enzimas desempean un papel crucial en la
superacin de estas barreras en virtud de su capacidad para enlazar directamente
entre si dos reacciones que en circunstancias normales estn separadas. Al unir una
reaccin de transferencia de grupo energticamente desfavorable con una reaccin
termodinmicamente favorable, como la hidrolisis del ATP, puede generarse una
nueva reaccin acoplada cuya carga general neta en energa libre favorece la
sntesis de biopolmeros.
Dado el carcter nucleofilico del agua y su alta concentracin en las clulas, Por
qu los biopolmeros como las protenas y el DNA son relativamente estables?,
adems, de qu modo la sntesis de biopolmeros puede ocurrir en un ambiente
acuoso, en apariencia prohidrolitico? Las propiedades de las enzimas son
fundamentales para ambas preguntas. En ausencia de catlisis enzimtica, incluso
las reacciones muy favorecidas desde el punto de vista termodinmico no
necesariamente tienen lugar con rapidez. El control preciso y diferencial de la

Captulo 2 Agua y pH
actividad enzimtica, as como el secuestro de enzimas en organelos especficos,
determinan en que situaciones fisiolgicas un biopolmero dado se sintetiza o o
degradara. Los biopolmeros recin sintetizados no se hidrolizan de inmediato, ya
que los sitios activos de enzimas biosisteticas secuestran sustratos en una
ambiente del cual es factible excluir en agua.

Las molculas de agua muestran una tendencia leve pero

importante a disociarse
La capacidad del agua para ionizarse, si bien es leve, tiene importancia
fundamental para la vida. Dado que el agua tiene la capacidad de actuar como una
cido y como una base, su ionizacin puede representarse como una transferencia
de protn intermolecular que forma un ion hidronio (H3O+) y un ion hidroxilo (OH-):
H2O + H2O H3O+ + OHEl protn transferido en realidad se relaciona con una agrupacin de molculas de
agua. Los protones existen en solucin no slo como H 3O, sino tambin como
multmeros tipo H5O2+ Y H7O3+. Sin embargo, el protn se representa de manera
sistemtica como H+, aun cuando de hecho est muy hidratado.
Dado que los iones hidronio e hidroxilo se recombinan de manera continua para
formar molculas de agua, es imposible declarar que un hidrgeno u oxgeno
individual est presente como un ion o formando parte de una molcula de agua. En
un instante es un ion, pero al siguiente forma parte de una molcula de agua; de
modo que no se consideran iones o molculas individuales. En lugar de eso, se hace
referencia a la probabilidad de que en cualquier instante en el tiempo un hidrgeno
estar presente como ion o como parte de una molcula de agua. Dado que 1 g de
agua contiene 3.46 1022 molculas, la ionizacin del agua puede describirse de
manera estadstica. Declarar que la probabilidad de que un hidrgeno exista como
un ion es de 0.01 significa que, en cualquier momento dado en el tiempo, un tomo
de hidrgeno tiene una probabilidad en 100 de ser un ion pero 99 probabilidades en
100 de formar parte de una molcula de agua. La probabilidad real de que un
tomo de hidrgeno en agua pura exista como un ion hidrgeno es de alrededor de
1.8x109. De este modo, la probabilidad de que forme parte de una molcula de
agua es de casi la unidad. Dicho de otra manera, por cada ion hidrgeno y cada ion
hidroxilo en agua pura, hay 1.8 mil millones o 1.8 109 molculas de agua. Sin
embargo, los iones hidrgeno y los iones hidroxilo contribuyen de manera
importante a las propiedades del agua.
Para la disociacin del agua,

+
H

OH

K=

Donde los corchetes representan concentraciones molares (estrictamente hablando,

actividades molares) y K es la constante de disociacin. Puesto que un mol pesa
18g, 1 litro (L) (1000g) de agua contiene 1000/18=55.56 mol. As, el agua pura es
55.56 molar. Dado que la probabilidad de que un hidrogeno es de 1.8x10 -9 la
concentracin molar de iones H+, (o iones OH-) en agua pura es el producto de la
probabilidad, 1.8x10-9, veces la concentracin de agua, 55.56 mol/L. El resultado es
1.0x10-7 mol/L.
Ahora es posible calcular K para es agua pura:

Captulo 2 Agua y pH

+
H

OH

K=

0.018x10-14 = 1.8x10-16 mol/L

La concentracin molar del agua, 55.56 mol/L, es demasiado grande como para que
la disociacin le afecte de manera significativa, de modo que se considera que, en
esencia, es constante. Asi, esta constante puede incorporarse en la constante de
disociacin K para proporcionar una nueva y til constante K W (W, de wter, agua)
llamada el producto ion para el agua. La relacin entre K W y K se muestra a
continuacin:

+
H

OH

K=

KW

mol/L

( K ) [ H 2 O ]

+
H

OH

(1.8x10-16 mol/L)(55.56 mol/L)

1.00x10-14 (mol/L)2

Note que la disociacin de K son mol por litro y las de K W son mol2 por L2. Como su
nombre lo siguiere, el producto ion K W es igual desde el punto de vista al producto
de las concentraciones molares de H+ y OH-:

Kw

+
H

OH

A 25C, K = (10-7)2, o 10-14 (mol/L)2; la temperatura por debajo de 25C es un poco

mayor de 10-14. Dentro de las limitaciones declaradas del efecto de la temperatura
KW es igual a 10-14 (mol/l)2 para todas las soluciones acuosas, incluso soluciones de
cidos o bases. Se usa KW para calcular el pH de soluciones acidas y bsicas.

EL pH ES EL LOGARITMO NEGATIVO DE LA CONCENTRACIN

DE ION HIDRGENO
El trmino pH fue introducido en 1909 por Srensen, quien lo defini como el
logaritmo negativo de la concentracin de ion hidrgeno:
pH = -log [H+].

Captulo 2 Agua y pH
Esta definicin, si bien no es rigurosa, es suficiente para muchos propsitos
bioqumicos; a fin de calcular el pH de una solucin:
1. Se calcula la concentracin de ion hidrgeno [H+].
2. Se calcula el logaritmo base 10 de [H+].
3. El pH es el negativo del valor que se encuentra en el paso 2.
Por ejemplo, para agua pura a 25C
pH = -log [H+] = -log 10-7 = -(-7) =7.0
Este valor tambin se conoce como la potencia (power

[ frances ]

o potennz

[ alemn ]

[ ingles ]

, puissant

del exponente, de ah el uso de p.

Los valores de pH bajos corresponden a concentraciones altas de H +, y los valores

de pH altos correspondes a concentraciones bajas de H+.
Los cidos son donadores de protones y las bases son aceptores de protones.
Los cidos fuertes (p. ej., HCL, H2SO4) se disocian por completo hacia aniones y
protones, incluso en soluciones fuertemente acidas (pH bajo); por su parte, los
cidos dbiles se disocian solo en parte en soluciones acdicas. De modo similar,
las bases fuertes (p. ej., KOH, NAOH)- no as las bases dbiles (p. ej., Ca[OH2])estn por completo disociadas a pH alto. Muchas sustancias bioqumicas son cidos
dbiles. Las excepciones son intermediarios fosforilados, cuyo grupo fosforilo
contiene dos protones disociables, el primero de los cuales es fuertemente acdico.
Los ejemplos que siguen ilustraran como calcular el pH de soluciones acdicas y
bsicas.
Ejemplo 1: Cul es el pH de una solucin cuya concentracin de ion hidrogeno
es de 3.2x10-4 mol/L?
pH = -log [H+]
= -log(3.2x10-4)
= -log(3.2) log(10-4)
= -0.5 + 4.0
= 3.5
Ejemplo 2: Cul es el pH de una solucin cuya concentracin de ion hidrxido
es de 4.0x10-4 mol/L? Primero se define una cantidad pOH que es igual a -log[OH -] y
que puede derivarse a partir de la definicin de KW:

+
H

Kw 10-14
OH

Por ende,
log[H+] + log[OH-] = log10-14

o bien

pH + pOH = 14
Para resolver el problema mediante este mtodo:
[OH-] = 4.0x10-4
pOH = - log[OH-]
= -log(4.0x10-4)
= -log(4.0) log(10-4)
= -0.60 + 4.0
= 3.4
Ahora

pH= 14 pOH = 14-3.4

= 10.6
Los ejemplos anteriores ilustran de modo la escala de pH logartmica facilita la
emisin de reporte y la comparacin de concentraciones de ion hidrogeno que

Captulo 2 Agua y pH
difieran por rdenes de magnitudes de otra, esto es, 0.00032 M (pH 3.5) y
0.000000000025 M (pH 10.6).
Ejemplo 3: Cules son los valores de pH de a) 2.0x10 -2 mol/L KOH y b) 2.0x10 -6
mol/L KOH? El OH- surge a partir de dos fuentes: KOH y agua. Dado que el pH est
determinado por el [H+] total, (y el pOH por el [OH -] total), ambas fuentes deben
considerarse. En el primer caso, a) la contribucin del agua [OH -] total es
insignificante; es imposible decir lo mismo para el segundo caso, b):

Una vez se ha llegado a una decisin acerca de la importancia de la contribucin

por el agua, es factible calcular el pH como se mencion.
Los ejemplos anteriores suponen que la base fuerte KOH est por completo
disociada en soluciones y que, entonces, la concentracin de iones OH - fue igual a
la del KOH ms de la presente al principio en el agua. Esta suposicin es vlida para
soluciones diluidas de bases o cidos fuertes, no asi para acidos o bases dbiles.
Dado que los electrolitos dbiles solo se disocian un poco en solucin, es necesario
usar la constante de disociacin para calcular la concentracin de [H +] (o de
[OH-]) producida por una molaridad dada de un cido (o base) dbil antes de
calcular el [H+] total (o el [OH-] total) y despus el pH.

Los grupos funcionales que son cidos dbiles tienen

gran importancia fisiolgica
Muchas sustancias bioqumicas poseen grupos funcionales que son dbiles. Los
grupos carboxilo, los grupos amino y los teres fosfato, cuya segunda disociacin
cae dentro del rango fisiolgico, estn presentes en protenas y cidos nucleicos, en
casi todas las coenzimas y en casi todos los metabolitos intermediarios. De este
modo, el conocimiento de la disociacin de cidos bases dbiles es bsico para
entender la influencia del pH intracelular sobre la estructura y la actividad biolgica.
La separaciones basadas en carga, como la electroforesis y la cromatografa de
intercambio inico, tambin se entiende mejor en trminos de la conducta de
disociacin de grupos funcionales.
La especie protonada (p. ej., HA o R-NH 3+) recibe la denominacin de cido, en
tanto que la especie no protonada (p. ej., A - o R-NH2) en su base conjugada. De
modo similar, puede hacerse referencia a una base (p. ej., A- o R-NH2) y su acido
conjugado (p. ej., HA o R-NH3+). Los acides dbiles representativas (columna
izquierda), sus bases conjugadas (al centro) y valores de pK a (columna derecha)
incluyen los siguientes.

Captulo 2 Agua y pH
Las fuerzas relativas de cidos y bases dbiles se expresan en funcin de sus
constantes de disociacin. A continuacin se muestran las expresiones para la
constante de disociacin (Ka) para dos cidos dbiles representativos, E-COOH y RNH3+.
R-COOH R-COO- + H+

Ka

RCOO

+
H

R-NH3+ R-NH2 + H+

Ka

+
H

+
RNH 3

[ RNH 2 ]

Dado que los valores numricos de K a para cidos dbiles son nmeros
exponenciales ms fuerte es el cido, ms bajo es el valor de pK a, donde
pKa = - logKa
Note que pKa se relaciona con Ka como el pH se relaciona con [H+]. Mientras ms
fuertes es el cido, ms bajo es el valor de pKa.
La pKa se usa para expresar las fuerzas relativas tanto de cidos como de bases.
Para cualquier acido dbil, su conjugado es una base fuerte; de modo similar, el
conjugado de una base fuerte es un cido dbil. Las fuerzas relativas de bases
se expresan en trminos de la pKa de sus cidos conjugados. Para
compuestos poliproticos que contienen ms de un protn disociable, se asigna un
numero subndice a cada disociacin, comenzando a partir de la unidad en orden
decreciente de acidez relativa. Para una disociacin del tipo
R-NH3+ -> R-NH2 + H+
La pKa es el pH al cual la concentracin del cido R-NH 3+ es igual a la de la base RNH2
A partir de las ecuaciones anteriores que relacionan la K a con el [H+] y con las
concentraciones de cido no disociado y su base conjugadas, cuando
[R-COO-] = [R-COOH]
O cuando
[R-NH2] = [R-NH3+]
Entonces
Ka = [H+]
De este modo, cuando las especias asociadas (protonada) y disociada (base
conjugada) estn presentes a iguales concentraciones, de ion hidrogeno [H +]
prevaleciente es igual desde el punto de vista numrico a la constante de
disociacin, Ka. Si se toman los logaritmos de ambos lados de la ecuacin anterior y
se multiplica por -1, las expresiones quedan como sigue:
Ka = [H+]
- logKa = - log[H+]
Dado que logKa se define como pK a y log[H+] define al pH, la ecuacin puede
rescribirse como
pKa = pH
Esto es, la pKa de un grupo acido es el pH al cual las especies protonada y
no protonada estn presentes a concentraciones iguales. La pKa para un

Captulo 2 Agua y pH
cido puede al aadir 0.5 equivalente de alcalino por equivalente de cido. El pH
resultante ser igual a la pKa del cido.

La ecuacin de Henderson-Hasselbalch describe

comportamiento de cidos dbiles y amortiguadores
La ecuacin de Hasselbalch se deduce a continuacin.
Un cido dbil, HA, se ioniza como sige:
HA H+ + ALa constante de equilibrio para la disociacin es

+
H

K a=

La multiplicacion cruzada da
[H+][A-] = Ka[HA]
Se dividen ambos lados por [A-]:

[H+] = Ka

Se toma el logaritmo a ambos lados:

log[H+] = log

[ HA ]

A
[ )
[ HA ]

Ka

= log Ka + log

[ HA ]

Se multiplica por -1:

-log[H+] = -log Ka - log

[ HA ]

Se sustituye el pH y la pKa para -log[H+] y logKa, respectivamente; entonces:

el

Captulo 2 Agua y pH

pH = pKa - log

[ HA ]

La inversin del ultimo termino elimina el signo de menos y de la ecuacin de

Henderson Hasselbalch:

pH = pKa + log

[ HA ]

La ecuacin de Henderson Hasselbalch tiene gran valor predictivo en equilibrios

protnicos. Por ejemplo,
Cuando exactamente la mitad de un cido neutralizada, [A-] = [HA]. En estas
condiciones:

pH = pKa + log

[ HA ]

pH = pKa + log

( 11 )

= pKa + 0

Por ende, cuando la mitad de un cido esta neutralizada, `H = `K a

Cuando la proporcin [A-]/[HA] = 100:1,

pH = pKa + log

[ HA ]

pH = pKa + log

( 1001 )

= pKa + 2

Cuando la proporcin [A-]/[HA] = 1:10,

pH = pKa + log

( 11 0)

= pKa + (-1)

Si la ecuacin se evala a proporciones de [A-]/[HA] que varan desde

10 hasta 10 y se grafican los valores de pH calculados, el grafico resultante
describe la curva de titulacin para un cido dbil (figura 2-5)
3

-3

Las soluciones de cidos dbiles y sus sales amortiguan

cambios del pH
Las soluciones de cidos o bases dbiles y sus conjugados muestran
amortiguacin, la capacidad para resistir a un cambio del pH despus de la
adicin de un cido o una base fuerte. Dado que muchas reacciones metablicas se
acompaan de liberacin o captacin de protones, casi todas las reacciones
intracelulares estn amortiguadas.
El metabolismo oxidativo produce CO 2, el anhdrido del cido carbnico, que de no
amortiguarse producira acidosis grave. El mantenimiento de un pH constante
comprende amortiguacin mediante fosfato, bicarbonato y protenas, que aceptan o
liberan protones para resistir a un cambio del pH. En

Captulo 2 Agua y pH

FIGURA 2-5: Curvas de titulacin para un cido de tipo HA

El pinto grueso, en el centro de la curva, indica el pKa de 5.0
experimentos donde se usan extractos de tejido o enzimas, el pH constante se
mantiene por medio de la adicin de amortiguadores como MES (cido [2Nmorfolino]- etanosulfnico, pKa 6.1), ortofosfato inorgnico (pK a7.2), HEPES (cido
N-hidroxietilpiperazina-N-2-etanosulfnico, pKa 6.8) o Tris (tris[hidroximetil]
aminometano, pK 8.3). El valor de pKa respecto al pH deseado es el principal
determinante de cul amortiguador se selecciona.
La amortiguacin se observa al usar un medidor de pH mientras se titula un cido o
una base dbil (fig.2-5). Tambin es factible calcular la desviacin de pH que
acompaa a la adicin de cido o base a una solucin amortiguada.
En el ejemplo, la solucin amortiguada (un cido dbil, pKa = 5.0 y su base
conjugada) se encuentra, al inicio en uno de los cuatro valores de pH; se calcula el
cambio de pH producido cuando se aade 0.1 mEq de KOH a 1mEq de cada
solucin.

Note que el cambio de pH por mEq de OH - aadido depende del pH inicial. La

solucin se resiste a cambios del pH con mayor eficacia a valores de pH cercanos al
pKa. Una solucin de un cido dbil y su base conjugada amortigua de

Captulo 2 Agua y pH
manera ms eficaz en el rango de pH de pKa + 1.0 unidades de pH. La figura
2-4 tambin ilustra la carga neta en una molcula del cido como una funcin del
pH. Una carga fraccionaria de -0.5 no significa que una molcula individual porta
una carga fraccionaria sino que la probabilidad es de 0.5 de que una molcula dada
tenga una carga negativa de unidad en cualquier momento dado en el tiempo. La
consideracin de la carga neta sobre macromolculas como una funcin del pH
proporciona la base para tcnicas de separacin, como la cromatografa de
intercambio de ion y la electroforesis.

La fuerza del cido depende de la estructura molecular

Muchos cidos de inters biolgico poseen ms de un grupo que se disocia. La
presencia de carga negativa adyacente obstaculiza la liberacin de un protn desde
un grupo cercano, lo que aumenta su pKa. Esto queda de manifiesto a partir de los
valores de pKa tres grupos que se pueden disociar de cido fosfrico y cido ctrico
(cuadro 2-2). El efecto de la carga adyacente disminuye con la distancia.
El segundo pKa para el cido succnico, que tiene dos grupos metileno entre sus
grupos carboxilo, es de 5.6, mientras que el segundo pKa para el cido glutrico,
que tiene un grupo metileno adicional, es de 5.4.

Los valores de pKa dependen de las propiedades del

medio
El pKa de un grupo funcional tambin est profundamente influido por el medio
circundante. El medio puede aumentar o disminuir el pKa dependiendo de si el cido
no disociado o su base conjugada es la especie cargada. El efecto de la constante
dielctrica sobre el pKa se observa al aadir etanol a agua. El pKa de un cido
carboxlico aumenta, mientras que la de una amina disminuye, porque el etanol
aminora la capacidad del agua para disolver una especie cargada. De este modo,
los valores de pKa de grupos que se estn disociando en los interiores de protenas,
estn muy afectados por su ambiente local, lo que incluye la presencia o ausencia
de agua.

RESUMEN

Captulo 2 Agua y pH

El

Los

compuestos que contienen O, N o S pueden servir como donadores o aceptores

de enlaces de hidrgeno.
Las macromolculas intercambian enlaces de hidrgeno de superficie interna por
enlaces de hidrgeno con agua. Las fuerzas entrpicas dictan que las
macromolculas exponen regiones polares a una interfaz acuosa y resguardan
regiones no polares.

Los

El

La

Los

agua forma agrupaciones de enlaces de hidrgeno consigo misma y con otros

donadores o aceptores de protones. Los enlaces de hidrgeno explican la tensin
superficial, viscosidad, estado lquido a temperatura ambiente y el poder solvente
del agua.

puentes de sal, las interacciones hidrofbicas y las fuerzas de van der Waals
participan en el mantenimiento de la estructura molecular.
pH es el logaritmo negativo de [H-]. Un pH bajo caracteriza a una solucin cida,
mientras que un pH alto denota una solucin bsica.
fuerza de cidos dbiles se expresa mediante el pKa, el logaritmo negativo de la
constante de disociacin de cido. Los cidos fuertes tienen valores de pKa bajos, en
tanto que los dbiles muestran valores de pKa altos.
amortiguadores resisten a un cambio del pH cuando se producen o consumen
protones. La capacidad amortiguadora mxima ocurre 1 unidad de pH a uno u otro
lado del pKa. Los amortiguadores fisiolgicos son bicarbonato, ortofosfato y protenas.

REFERENCIAS
Reese KM: Whence came the symbol pH. Chem & Eng News 2004;82:64.
Segel IM: Biochemical Calculations. Wiley, 1968.
Stillinger FH: Water revisited. Science 1980;209:451.
Suresh SJ, Naik VM: Hydrogen bond thermodynamic properties of water
from dielectric constant data. J Chem Phys 2000;113:9727.
Wiggins PM: Role of water in some biological processes. Microbiol
Rev 1990;54:432.