Pre ANTIGENOS FEBRILES PRELABORATORIO

1) Qu y cules son los antgenos febriles?

Los Antgenos Febriles o Reacciones Febriles son pruebas indirectas
utilizadas como auxiliares en el diagnstico de enfermedades
bacterianas (salmonelosis, fiebre tifoidea y paratifoidea, brucelosis) o
rickettsiales (tifo)

ANTIGENOS FEBRILES
Antgeno
Paratfico "A"

Nombre
Antgc
enoNombre
genrico: A Paratfico "B"
genrico: A
ntgeno
ntgeno
Febril
Febril
Paratfico A
Paratfico B
Cepa: Salm
onella
paratyphi A
2,12:a:-.
Presentacin
: Fco. Gotero
con 5,0mL
No.
Catlogo: 13
-SA01

Antgeno
Tfico "O"

Cepa: Salm
onella
paratyphi B
1,4,5,12:b:1,
2.
Presentacin
: Fco. Gotero
con 5,0mL
No.
Catlogo: 14
-SB01

Nombre
Antgeno Tfico"H"Nombre
genrico: A
genrico: A
ntgeno
ntgeno
Febril Tfico
Febril Tfico
O
H
Cepa: Salm
Cepa: Salm
onella typhi
onella typhi
9,12
9,12 (vi):d:-.
Presentacin
Presentacin
: Fco. Gotero
: Fco. Gotero
con 5,0mL

No.
Catlogo: 15
-SO01

Antgeno
Proteus vulgaris
Ox-19

No.
Catlogo: 16
-SD01

Nombre
Antgeno BrucellaNombre
genrico: P
abortus
genrico: B
roteus
rucella
vulgaris Oxabortus
19
Cepa: Prote
us vulgaris
Ox 19
Presentacin
: Fco. Gotero
con 5,0mL
No.
Catlogo: 17
-PV01

Control
Febriles

con 5,0mL

Cepa: Bruce
lla abortus
99s
Presentacin
: Fco. Gotero
con 5,0mL
No.
Catlogo: 15
-SO01

PositivoAnticuerpos
Control NegativoAnticuerpos
de
conejo
Febriles
de conejo no
reactivos a
reactivos a
estos
estos
antgenos.
antgenos.

No.
Catlogo:18PF01

No.
Catlogo: 19
-NF01

2) Que otro nombre recibe la prueba para determinacin de antgenos

febriles?
Reacciones febriles.

3) Que entiende usted por titulo de anticuerpo?

Titulo de anticuerpo: Es un examen de laboratorio que mide el
nivel de anticuerpos en una muestra de sangre
4) Que ttulos de ac tienen importancia clnica en cada uno de los
casos de ag febriles?

Pos laboratorio inmunologa gua 4

1. Qu importancia tiene un resultado negativo en la prueba de Ag
febriles?
Una reaccin negativa no excluye el diagnstico de fiebre tifoidea en el
contexto de un cuadro clnico compatible. Y no descarta la enfermedad.

Se

debe

buscar

otras

entidades

nosolgicas

que

causes

fiebre.

2. Los resultados positivos en la prueba de Ag febriles son

diagnsticos? Justifique.
Considerando solo el resultado de positivo o negativo de cada antgeno (aun
sin considerar cuantificacin en tubo), de acuerdo con los resultados obtenidos,
la utilidad clnica de los antgenos febriles tfico O y Brucella son totalmente
cuestionables para descartar o confirmar diagnsticos de infeccin por sus
respectivos patgenos, ya que un paciente con manifestaciones clnicas de
infeccin gastrointestinal tiene las mismas probabilidades de resultar positivo
para estos antgenos, con respecto un sujeto sano (p > 0.05)
3. Por qu en zonas geogrficas con elevada prevalencia de
enfermedades febriles se recomiendan diluir antes de iniciar el
ensayo en porta?
No se soy turista.
4. Caso clnico: paciente, 22 aos, varn, soldado, procede de zona
rural del municipio de tierralta, que ingresa a la emergencia del
hospital, con una enfermedad de 10 das de evolucin, inicio
brusco y curso progresivo, caracterizada por: fiebre alta (39.6C),
escalofros, malestar general, cefalea, diaforesis, anorexia
(excesivo sudor), nauseas, vmitos y deposicin liquida en regular
cantidad sin moco ni sangre, con pujo y tenesmo, 3 a 4 veces por
da. En los antecedentes personales el paciente manifiesta probable
paludismo en septiembre de 2008, recibi tratamiento por dos
semanas con cloroquina y primaquina. Niega antecedentes de
fiebre tifoidea, alergias medicamentosas o haber recibido
transfusiones sanguneas.
En la orden emitida por el mdico se pide realizar pruebas de antgeno
febriles para los cuales se obtuvieron los siguientes resultados:

Tfico O: 1/320
Tfico H: 1/40
Paratfico A: negativo
Paratfico B: negativo
Proteus OX-19: negativo
Brucella abortus: negativo

Segn los anteriores datos responda:

a) Con que enfermedad hara usted un diagnostico diferencial,
teniendo en cuenta los signos y sntomas que presenta el paciente.

El resultado de Tfico O y H (salmonella Typhi) puede decirnos si se tiene o

no fiebre tifoidea El resultado de Tfico O de 1:320, puede decirnos que usted
tiene fiebre tifoidea.
b) Con que pruebas realizara este diagnostico diferencial.
Un conteo sanguneo completo (CSC) mostrar un alto nmero de glbulos
blancos en la sangre.
Un hemocultivo durante la primera semana de la fiebre puede mostrar la
bacteria Salmonella typhi.
Otros exmenes que pueden ayudar a diagnosticar esta afeccin son:

Examen de orina ELISA para buscar la bacteria que causa la fiebre

tifoidea.

Estudio de anticuerpos fluorescentes para buscar sustancias especficas

para la bacteria de la fiebre tifoidea.

Conteo de plaquetas (ser bajo).

Coprocultivo.

c) Teniendo en cuenta el titulo de anticuerpos obtenidos usted

pensara que esta frente a una infeccin aguda o pasada? Sustente
su respuesta.
Tfico O: 1/320: esto podra ser una infeccin aguda, ya que la
concentracin del suero es bajo, es decir, la concentracin de anticuerpos
tambin debera bajar y aun asi este aglutina con el antgeno, lo que
significa que los anticuerpos estn en una gran concentracin
Tfico H: 1/40: Cuando los resultados del examen de reacciones febriles
los ttulos son de 1:80 o menores, indican memoria inmunolgica, o sea, que en
algn momento previo de su vida estuvo en contacto con bacterias que
provocan enfermedades febriles (fiebre tifoidea, salmonelosis, brucelosis, entre
otras) y su cuerpo desarroll defensas contra ellas.

5. Por que se utiliza Proteus para el diagnostico de Ac contra

Riketsia?

1. Grupo Tifus: tifo epidmico, por Rickettsia prowazekii, transmitido por

piojos (Poulex ivitans), y tifo clsico endmico, por Rickettsia typha por la
pulga.
2. Grupo de Fiebre manchada: Rickettsia rickettsii, que implica ms de 30
especies, transmitido principalmente por caros y pulgas (Fiebre manchada
de las montaas rocallosas).
3. Tifus Scrub: Orientia tsutsugamushi, tambin llamado tifo de los
matorrales, transmitido por caros.
El Grupo del Tifus reacciona con Proteus Ox19, el grupo de la fiebre
manchada reacciona con Proteus Ox2 y Ox19 y el Tifus Scrub
con Proteus OxK

AGLUTINACION PASIVA
Pre-laboratorio N 5
Pre-laboratorio N 5
1.
2.
3.
4.
5.

Qu factores pueden alterar la prueba ASTO?

Qu ttulos de ASTO tienen significado clnico?
En qu entidades se puede encontrar resultados positivos de PCR?
Cules son los valores normales de PCR?
Guarda alguna relacin el resultado de PCR con el de ASTO o
antgenos febriles?
6. Qu valores de FR tienen importancia clnica?
7. Qu muestra se podra utilizar adems de suero para detectar el FR,
como alternativa diagnostica en la artritis inicial?
8. Utilizando la simbologa describa en la tabla y teniendo en cuanta el
fundamento inmunolgico de cada prueba, complete el esquema de
cmo es una reaccin positiva y negativa para cada una de las
pruebas aqu sealadas: ASTO, PCR y RA.

Solucin:
1/ Para esta prueba, es importante el momento en el que se realice.
Usted puede obtener un resultado negativo falso si est infectado por la
bacteria estreptococo, pero no se ha acumulado la cantidad suficiente de
anticuerpos en su sangre. La cantidad de anticuerpos tarda de cuatro a
cinco semanas en alcanzar el valor mximo.
S el reactivo no est en condiciones adecuadas el resultado ser errneo.

2/ Los resultados son normales cuando son negativos, lo que significa que
no tiene anticuerpos contra la bacteria estreptococo en su sangre. Dado que
la cantidad de anticuerpos tarda en aumentar en su sangre despus de que
usted se infecta, es posible que necesite repetir la prueba de ttulos de ASO
dos semanas despus de su primera muestra de sangre.
Un resultado positivo significa que se han encontrado anticuerpos y que
usted puede tener o haber tenido una infeccin reciente por estreptococos.
Sin embargo, en un caso de cada cinco, esta prueba no mostrar un
aumento en los anticuerpos si tiene una enfermedad como la fiebre
reumtica. Su mdico puede pedir otra prueba de anticuerpos o cultivos de
su sangre y tejidos para confirmar si tiene usted una infeccin activa.
3/ Se eleva muy rpido en procesos inflamatorios e infecciosos siendo una
medicin directa de stos; tambin puede elevarse en procesos de necrosis
tisular, neoplasias y reacciones de hipersensibilidad, tambin en
enfermedades reumticas.
4/ Los valores normales de la protena C reactiva se encuentran entre 0,6 y
6 mg/l
Los resultados generalmente se reportan en una de dos formas:
Menos de 40-60 u/ml
Ttulo menor de 1:80
5/ su relacin se basa en que todas estas pruebas se fundamentan en la
capacidad de determinar un anticuerpo especifico producido por el cuerpo
en respuesta a la exposicin a un antgeno y as confirmar la presencia de
ese antgeno en el organismo.
6/ Los valores de la protena C reactiva normales van aumentando con el
estmulo inflamatorio hasta alcanzar un pico mximo en 24-72 horas,
regresando generalmente a la normalidad a los 7-10 das; puede ser normal
hasta 10 mg/l por lo que valores superiores se asocian a infecciones
bacterianas agudas, enfermedades inflamatorias como la artritis reumatoide
o las vasculitis.
Un resultado de ms de 40 UI PUDIERA considerarse anormal, los resultados
pueden llegar hasta las 2000 UI o ms, o pueden expresarse con un nmero
menor indicando la dilucin de la sangre a la cual se midi el FR (titulacin).
7/ Las muestras de lquidos corporales se deben obtener siguiendo los
mismos procedimientos que para cualquier otro anlisis de laboratorio. Son
preferibles las muestras de suero o plasma recin obtenidas. No se
recomienda el uso de muestras de sangre entera u orina. El volumen
ptimo, para una copa de 0.5 ml, es de 0.3 ml de muestra.
8/

Antgeno
Anticuerpo
PCR:
-anti-PCR
PCR

suero:

Ltex

ASTO:
-estreptolicina O
anti-esterptolicina O
ltex

suero:

Pos- laboratorio
1. Caso clnico.
Paciente de 25 aos de edad de sexo masculino llega al hospital San
Jernimo de Montera refiriendo dolor de garganta, fiebre, malestar general,
dolores musculares, molestias al tragar y presencia de ganglios del cuello
inflamados. El mdico tratante solicita una prueba de ASTO, al realizar la
prueba el resultado fue: Aglutinacin hasta la dilucin 1/ 16.
a. Cul es la concentracin aproximada de ASTO en la muestra?
3200 Ul/ml
b. Cmo interpretara usted este resultado, Explique?
La presencia de ttulos altos de antiestreptolisinas O, indican una
infeccin por la bacteria Estreptococo beta-hemolticos del tipo A. Los
ttulos muy altos estn asociados al estado de portador crnico
farngeo. Tambin en el 80-85% de los pacientes con fiebre reumtica
aguda (dentro de los dos primeros meses) y en el 95% de
glomerulonefritis aguda
c. De acuerdo a la inmunologa de la infeccin que resultado esperara
usted encontrar en un cuadro hemtico de este paciente?

Hemoglobina:
Hematocritos:
Eritrocitos:
Leucocitos:

GUIA 6
Prelaboratorio
1. QUE SON AC NO TREPONEMICOS Y TREPONEMICOS?

en las pruebas serolgicas pueden distinguirse dos tipos de

pruebas: pruebas no treponmicas(que detectan el efecto que produce el
treponema pallidum en el organismo, como VDRL o RPR) o pruebas
treponmicas (que detectan los anticuerpos que genera el organismo
contra el treponema, como son las pruebas FTA-ABS, EIA, TPHA y MHTPA).
Las pruebas no treponmicas se utilizan sobre todo para determinar el
estadio de evolucin de la enfermedad o para ver si un tratamiento ha
dado resultado. Estas pruebas se realizan haciendo distintas diluciones del
suero del paciente y observando la cantidad ms alta en la que sale
positivo. Por eso los resultados son del tipo 1:2, 1:4 con los que muchos
de vosotros os encontris en vuestros diagnsticos.
Las pruebas treponmicas detectan anticuerpos contra el treponema, pero
su interpretacin puede ser subjetiva y muchas veces depende de la
experiencia del observador, y no permiten conocer si la enfermedad est en
activo, puesto que estas pruebas suelen dar siempre positivo (de por vida)
cuando una persona ha tenido la sfilis aunque ya se haya curado (por
ejemplo, en las pruebas FTA-ABS la deteccin IgG siempre ser positiva en
un paciente que haya padecido sfilis, y la IgM es positiva en una infeccin
reciente pero luego se vuelve negativa).
2 que es la floculacin? Describala

Segn la definicin de la IUPAC, floculacin es "un proceso de contacto y

adhesin mediante el cual las partculas de una forma de dispersin grupos
de mayor tamao." La floculacin es sinnimo de aglomeracin,
agregacin, y coagulacin/coalescencia.
Los floculos se agregan y sedimentan en rango estrecho de Ag/Ac
3.por que se dice que las pruebas de VDRL y RPR son pruebas
presuntivas?

4.A QUE SE DEBE EL FENOMENO DE PROZONA Y PROSTZONA?

fenmeno de Prozona, que consiste en serologa VDRL no reactiva,

falsamente negativa, que debemostener en cuenta en estos pacientes
para hacer estudios adicionales que nos encaminen a diagnstico y
tratamiento acertado.
Prozona se da en la zona donde existe exceso de Ac frente al Ag, donde no
se produce precipitacin, originando falsos (-) por altas [ ] de Ac. Esta
dificultad se elimina con diluciones seriadas estndar del suero.
Postzona, se da en la zona de exceso de Ag, donde tampoco se da la
precipitacin, dando tb falsos (-).
5.QUE AFECCIONES PUEDEN PROVOCAR REACTIVIDAD DEL VDRL Y RPR?

6.EN EL CASO DE VDRLY RPR QUE TITULOS DE Ac TIENEN SIGNIFICADO

CLINICO?
VDRL
En la prueba de VDRL, el suero del paciente es inactivado a 56 C por 30
minutos, si se usa liquido cefalorraqudeo (LCR) slo se debe centrifugar
Luego la muestra se mezcla con un antgeno, que es una solucin buffer
salina de cardiolipina y lecitina adosadas a partculas de colesterol. Esta
prueba se puede realizar en lmina y ser observada al microscopio como un
precipitado de partculas finas (floculacin), o se puede realizar en un tubo
de ensayo y ser leda macroscpicamente.
RPR
El RPR es una prueba diseada para detectar reagina en el suero de manera
rpida, no requiere inactivacin por calor La muestra se mezcla con una
suspensin que posee cardiolipina, lecitina y colesterol en partculas de
carbn. Si la muestra es positiva se observa pequeos grumos negros
(floculacin). El resultado se reporta como reactivo o no reactivo; todos
aquellos reactivos deben ser diluidos seriadamente para realizar la
titulacin, y se reporta la dilucin ms alta que exhibe reaccin.
TRUST Y USR
Estas pruebas son menos usadas que el VDRL y la RPR. El TRUST (Toulidine
red unheated serum test) es una prueba desarrollada para el despistaje de
la sfilis, el principio es similar al del VDRL, pero no es necesario inactivar el
suero y el rojo de toluidina se encarga de dar color a la reaccin. La
sensibilidad y especificidad son similares a la prueba de RPR.
La USR (Unheated serum reagin) tiene la ventaja que es poco costosa,
tampoco requiere de inactivacin de suero por calor y, al igual que otras
pruebas no treponmicas, tiene buena sens
FTA-ABS
La FTA-ABS es un mtodo de observacin directo, que se utiliza como
confirmacin cuando una de las pruebas no-treponmicas es positiva. Es el
mtodo de eleccin para el diagnstico de la sfilis primaria a partir de las
dos semanas despus del contagio.
ibilidad y especificidad14-15.
Hemaglutinacin
Este mtodo utiliza glbulos rojos de pollo o carnero como fase slida los

cuales estn sensibilizados con Treponema pallidum, que se encuentran

adheridos a la membrana del hemate.
ELISA (Enzyme-Linked lmmunoabsorbent Assay)
Durante la infeccin por Treponema pallidum se producen anticuerpos
inespecficos, contra antgenos comunes a todas las espiroquetas y
anticuerpos especficos contra Treponema pallidum. En la enfermedad
temprana los anticuerpos son IgM, luego rpidamente aparecen anticuerpos
IgG que son los predominantes durante el tiempo.
Western blot
El Western Blot, tambin denominado inmunoblot, es una tcnica que
detecta anticuerpos para eptopes especficos en antgenos, previamente
separados por electroforesis de alta resolucin. La electroforesis separa los
componentes antignicos por sus diferentes pesos moleculares.
Reaccin en Cadena a la Polimerasa (PCR)
La tcnica de reaccin en cadena a la polimerasa (PCR), amplifica o replica
varias veces secuencias especficas de ADN de una muestra, Se utiliza dos
porciones cortas de ADN denominados cebadores o iniciadores o "primers",
estos son oligonucletidos sintticos de ADN o ARN cuya secuencia es
conocida, que luego de fusionarse (hibridizarse) a un ADN complementario,
actan como una plantilla para sintetizar nuevo ADN, esto es un proceso
enzimtico repetido en varios ciclos trmicos.