PREPARACION EXTRACTIVAS DE PRODUCTOS NATURALES Y

EXTRACTOS ESTANDARIZADOS
RECOLECCIN DE DROGAS VEGETALES PARA INVESTIGACIN
Ataucusi K., Javier B., Lava J., Mendoza M, Torres F.
Laboratorio de Farmacognosia; Departamento Acadmico de farmacognosia,
Bromatologa y Toxicologa; UNMSM
Pregrado en Farmacia y Bioqumica

RESUMEN:

La panizara (Satureja panicera); es una planta nativa arbustiva de la familia de

Labiceas, oriunda de la sierra ancashina. Su forma uso es en infusin cuando se
secan las hojas, tiene un tratamiento medicinal antiespasmdico. El objetivo es
detectar la posible presencia de ciertos grupos de metabolitos secundarios
mediante anlisis fitoqumico preliminar (determinacin de alcaloides, saponinas,
flavonoides) y despus realizar el tamizaje fitoquimico del extraxto estabilizado.
Tambin se analiz sus propiedades fisicoqumicas como el ndice de refraccin,
el factor de retencin del extracto respecto a los estndares rutina y cido t
Palabras clave: anlisis fitoqumico, Satureja, Panicera.
ABSTRACT:

The panizara (Satureja panicera); is a, a native of Sierra ancashina shrub native

plant of the family Labiatae. Its shape is infused use when the leaves are dried,
has an antispasmodic medicinal treatment. The aim is to detect the possible
presence of certain groups of secondary metabolites by preliminary phytochemical
analysis (determination of alkaloids, saponins, flavonoids) and then perform the
phytochemical screening extraxto stabilized.
Keywords: phytochemical analysis, Satureja, Panicera.

Estudios Fitoqumicos y Fisicoqumicos cualitativos de la especie

INTRODUCCION
En el Ecosistema Andino del Per y
principalmente en la Regin Inca, se
desarrolla un importante germoplasma
vegetal de vida silvestre y con
propiedades curativas reportadas por la
Medicina Tradicional y la Etnobotnica.
Entre muchas de ellas se menciona a
la panizara (Satureja panicera). La
panizara (Satureja panicera); es una
planta nativa arbustiva de la familia de
Labiceas, oriunda de la sierra
ancashina. Este arbusto es frondoso en
la parte superior; erecto y pubescente.
Su tallo es ramificado desde la base y
posee hojas pequeas y aserradas muy
se caracterizan por crecer entre los 2500
a 4200 m.s.n.m., que alcanza una altura
aproximada entre 1 m a 1.2 m, esta
planta es caracterstica de la provincia de
Pallasca, como en su capital Cabana. Su
forma uso es en infusin cuando se
secan las hojas, tiene un tratamiento
medicinal antiespasmdico (1)
Se ha realizado el estudio Fsico Qumico
de la Satureja para determinar que tipos
de
metabolitos
secundarios
se
encuentran en nuestra planta.

MATERIALES Y METODOS

marcha
postestandarizacin.

fitoqumica

Marcha fitoqumica preliminar

Para realizar este mtodo se procedi
a tomar 50 mL del extracto
hidroalcohlico, se procedi a filtrar
usando papel filtro, embudo de vidrio,
beaker de 250 mL de capacidad.
Luego se concentr lo filtrado en
Bao Mara para lo cual se esper a
que se evapore hasta del volumen
total, es decir, al final se tuvo un
volumen aproximado de 12,5 mL.
Posterior a esto se procedi a verter
2 mL de muestra resultante a 3 tubos
de ensayo. Al primer tubo se adicion
4 gotas de HCl y reactivo de
Dragendorff para ver si presentaba la
coloracin positiva caracterstica para
este reactivo. Para el segundo tubo
se adicion H2O al doble de volumen,
espuma, se agit por 1 minuto y se
esper a su resultado. Para el tercer
tubo se adicion virutas de Mg
metlico y HCl (c) esperando su
posterior
coloracin
rojiza
caracterstica de los flavonoides. ()

Muestra a analizar
La muestra que se analiz fue el
extracto hidroalcohlico, luego de
macerarse durante 7 das se procedi
a realizar las siguientes pruebas para
su
estandarizacin:
Marcha
fitoqumica inicial, cromatografa en
papel y en capa fina, medicin de su
ndice de refraccin y su posterior

Cromatografa en papel
Mtodo que no se pudo realizar por
escasez de papel whatman N1. Solo
mencionaremos
cmo
debera
realizarse para lo cual se tom como
muestra al extracto lquido, se
procedi
a
usar
un
capilar
previamente modificado para las

Estudios Fitoqumicos y Fisicoqumicos cualitativos de la especie

correctas 30 punteadas se debe

hacer en la parte baja de la
cromatoplaca,
la
cual
debi
establecerse cul era el lmite del
frente de solventes y la base para la
aplicacin de las punciones. Se debi
usar como sistema de solventes al nbutanol : etanol : agua (4 :2 :1) y
como revelador a la solucin de
reactivo de Tollens (10,5 C por 10
min).
Cromatografa en capa fina
Se
procedi
a
realizar
2
cromatoplacas para las dos pruebas
cromatogrficas que se realizaron
estas con soporte de Silicagel GF
254. La primera muestra a analizar
fue el extracto, se tom algunos
mililitros con el capilar y se procedi a
punzar cuidadosamente en la base
de la cromatoplaca, por supuesto
siempre
teniendo
una
altura
adecuada para que el sistema de
solventes (acetato de etilo : metanol :
agua 100 : 13,5 : 10) y verificar en
todo momento que la corrida
cromatogrfica no vaya a pasar el
lmite del frente de solventes. Para
esta primera prueba se tuvo como
estndar al reactivo Rutina 0,1% y
revelador al tricloruro frrico en
etanol. (5)

Para
la
segunda
corrida
cromatogrfica se tuvo el mismo
soporte a la silicagel, mas se cambi
al sistema de solventes que fueron el

acetato de etilo: etanol 1 :3, como

estndar al cido glico 0,1% y como
relevador al tricloruro frrico en
etanol. Las cromatografas realizadas
en este laboratorio se fundamentan
en principios de arrastre de solventes
voltiles a travs de la silicagel, el
sistema de solventes o la silicagel
sern los medios por los que viajen
los metabolitos secundarios del
extracto analizado dependiendo de su
polaidad y mediante propiedades
fisicoqumicas tambin por adhesin.
Las cromatografas realizadas nos
sirven para purificar los metabolitos
que se encuentren en la planta por
analizar.
Utilizacin del refractmetro
Para este mtodo de anlisis se uso
el refractmetro proporcionado por la
ctedra de Farmacognosia, se uso
como solvente estndar al agua, se
tuvo en cuenta la temperatura
ambiental
y
la
pericia
del
manipulador.
Screening fitoqumico
Para detectar la presencia o ausencia
de metabolitos secundarios se
procedi a realizar la marcha
fitoqumica
posterior
a
su
estandarizacin, para los cuales se
usaron diversos reactivos especficos
para reconocer a los metabolitos
secundarios de la muestra. (3)

Estudios Fitoqumicos y Fisicoqumicos cualitativos de la especie

a) Determinacin de fenoles.
Para la prueba colorimtrica se utiliz
cloruro frrico (FeCl3) para la
identificacin de fenoles. Para esto se
hecho 1 mL del extracto ms 4 gotas
de FeCl3 al 10%. Si presenta un
cambio a verde oscuro indica la
presencia de fenoles o taninos de tipo
catecol
(flavonoides
o
taninos
condensados); si presentan
un
cambio de color a azul oscuro indica
la presencia de fenoles o taninos
piroglicos (hidrosolubles). (2)

b) Determinacin de Flavonoides.
Se reconoce por ensayo de Shinoda.
Para esto se toma 1mL. De extracto
se le aade 1mL. De HCl cc. y 2
virutas de magnesio metalico. Si nos
da una cloracin amarillo rojizo es
positivo para isoflavonas, si la
coloracin es rojo a magenta hay
presencia de flavononoles, si la
coloracin es amarillo a rojo hay la
presencia de flavonas y flavonoles;
debido a que estos presentan un
nucleo benzopirona, produciendo
coloraciones entre rosadas, rojizas y
amarillas, caso que no sucede con
las chalconas, auronas donde no hay
coloracin. (2)
c) Determinacin de alcaloides:
Reactivo de Dragendorff: Se
utiliz
1mL.
De
extracto
acidificado con HCl al 10%, luego
se le adicion 3 gotas de reactivo,

cuando el reativo da positivo se

tiene que percibir un precipitado
naranja. Este reactivo contiene
Yoduro de potasio y bismuto.
Reactivo de Mayer: Se adiciono
1mL. Del extracto con 3 gotas del
reactivo, el extracto tambin debe
estar acidificado con HCl 10%.
Este reactivo contiene Yoduro de
mercurio y potasio. Cuando da
positiva la reaccin se debe mostrar
un precipitado blanco. (6)

Reactivo de Sonnenschein: se
adiciona 1mL. De extracto acidificado
con 3 gotas del reactivo. El cambio de
color que da positivo debe ser
amarillo verdoso. Este reactivo
contiene cido fosfomolibdico. (7)

Estudios Fitoqumicos y Fisicoqumicos cualitativos de la especie

Solvente: Silicagel Gf 254

(cromatofolios)

RESULTADOS

Sistema de solventes: Acetato de

etilo: metanol: agua (100: 13,5: 10).

I. MARCHA FITOQMICA
PRELIMINAR
TABLA 1. Marcha fitoqumica preliminar
de la Panizara.
Metabolitos

Reaccin

+/-

Coloracin

Alcaloides

Dragendorff

++

PP. Naranja

Mayer

PP. Blanco

Revelador: Solucin de Tricoluro

frrico en etanol.
Estndar: Rutina (0.1%).

Cromatografa en capa fina (2)

Muestra: Extracto lquido

Saponinas

Flavonoides

Prueba de
espuma

Shinoda

++

Capa de
espuma de1
cm por 10
min.
Rosada

Solvente: Silicagel Gf 254

(cromatofolios)
Sistema de solventes: Acetato de
etilo: etanol (1: 3).
Revelador: Solucin de Tricoluro
frrico en etanol.

NOTA: negativo (-), positivo trazas (+), abundante

(++).

Estndar: cido Tanico (0.1%).

Capa Fina 1:
Rfs= 3.4/5.85 = 0.58

II. CROMATOGRAFA
Cromatografa en capa fina (1)
Muestra: Extracto lquido

Rf M.P.= 4.9/5.85=0.83

Capa Fina2:
Rfs= 5.25/5.88 = 0.89 Rf M.P.= 5.10/5.88=0.87

Estudios Fitoqumicos y Fisicoqumicos cualitativos de la especie

III. PODER ROTATORIO

Ensayo de la Espuma

ndice de Refraccin: M.P. (Panizara)

Al agitar una solucin acuosa de una

muestra que sea o contenga
saponinas, se forma una espuma
estable como la obtenida al agitar la
solucin acuosa de un jabn. Puesto
que existen otras sustancias que
pueden formar tambin espuma, se
debe asumir este ensayo como una
prueba presuntiva de la presencia de
saponinas esteroides.

1.363 a 27.2 C

DISCUSIN
En la determinacin de alcaloides
podemos ver que para el reactivo de
Dragendorff nos dio positivo, es decir
se form un precipitado naranja
intenso. Esto se debi a que los
alcaloides al combinarse con el yodo
o metales pesados como bismuto,
mercurio,
tungsteno
forma
precipitados.
Para la determinacin de flavonoides
que resulto positivo con el reactivo de
shinoda
En la prueba con el reactivo de
Shinoda el extracto de panizara en
contacto con cido clorhdrico con
virutas de magnesio metlico se
genera hidrgeno, este ltimo reduce
al flavonoide ,lo cual se reconoce por
la coloracin naranaja - rojiza.
Para el reconocimiento de
saponinas nos result negativo.

las

las saponinas esteroides se pueden

reconocer fcilmente en los anlisis
fitoqumicos preliminares mediante
los ensayos de la espuma, hemlisis
de glbulos rojos, LiebermannBurchard
y
ensayos
para
carbohidratos.

Se corrobora al igual que los datos

especficos de las propiedades fsicas
el ndice de refraccin se utiliza para
el reconocimiento de los fitocomplejos
que existen en las plantas luego de
ser estabilizados.
CONCLUSIONES
Se concluye
que la
marcha
fotoqumica es una herramienta
importante en el reconocimiento
preliminar
de
los
metabolitos
secundarios de las plantas.
En base a los resultados concluimos
que hay presencia de flavonoides,
alcaloides, dando los resultados ms
notorios
al
momento
del
reconocimiento
de
alcaloides,
utilizando los reactivos Dragendorf y
Shinoda.
En la segunda cromatografa en capa
fina los Rf son semejantes tanto para
el estndar como para el extracto de
panizara.

Estudios Fitoqumicos y Fisicoqumicos cualitativos de la especie

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Mostacero
J.
Plantas
medicinales
del
Per,
taxonoma,
ecogeografa,
fenologa
y
etnobotnica.
Editorial ANR. Trujillo. 2011.
2. Kuklinski, C.; Farmacognosia:
Alcaloides. Barcelona, Espaa:
Ediciones Omega, S.A; 2003.
Pg. 167-179
3. Manual de laboratorio de
farmacognosia I. Universidad
Nacional Mayor de San
Marcos, Facultad de Farmacia
y
Bioqumica.
Lima-Per;
2015. Pg. 13-19
4. Brack
A.
Diccionario
Enciclopdico
de
plantas
medicinales en el Per.
Editorial CBC. Cusco. 1999.

5. Lock.O
.Investigacin
Fitoqumica,Mtodo
en
el
Estudio
de
ProductosNaturales.
Fondo
Editorial PUCP. Lima.1994, pp.
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6. Buneton J. Farmacognosia,
Fotoqumica de las plantas
medicinales. Editorial Acribia.
Zaragoza. 2001 Pg. 78-82
7. Fundamentos de tecnologa de
productos
fitoteraputicos.
Convenio
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Bello.
Santaf de Bogot, D.C.,
Colombia. 2000. Pg. 74-75