ANTIBIOGRAMA

CURSO:

ALUMNO:
CICLO:

BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR

CABOS SNCHEZ, JEISSON DAVID

VI A

TRUJILLO PER
2011

I.- INTRODUCCIN:

El antibiograma es la prueba microbiolgica que se realiza para

determinar la sensibilidad de una colonia bacteriana a un antibitico o
grupo de antibiticos.
El antibiograma, una vez realizado, da la siguiente informacin:

Grado de sensibilidad de la colonia bacteriana a un determinado

antibitico.

Diferencia de sensibilidad por parte de la colonia a diferentes

antibiticos.

Con esta informacin, se clasifica el efecto del antibitico sobre esa

determinada colonia en: Resistente (R), Intermedio (I) y Sensible (S).
En el mbito clnico, el estudio sobre la bacteria causante de la infeccin
y sobre el antibiograma es entregado al mdico responsable del
paciente. Este ltimo es quien se encarga de decidir el tipo de
antibitico adecuado, dependiendo de los resultados del antibiograma y
de otros factores procedentes del paciente, como por ejemplo una
alergia a la penicilina.

Por qu realizar un antibiograma?

El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una
cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infeccin a
uno o varios antibiticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los
requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibitico.
El antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones
teraputicas individuales.
El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las
resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento epidemiolgico, a

escala de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un

pas, es como puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse
regularmente los espectros clnicos de los antibiticos y adoptarse
ciertas decisiones sanitarias, como el establecimiento de programas de
prevencin en los hospitales.
Hay pues un doble inters: Teraputico y epidemiolgico.

Cundo realizar un antibiograma?

Siempre que una toma bacteriolgica de finalidad diagnstica haya
permitido el aislamiento de una bacteria considerada responsable de la
infeccin.
Establecer esta responsabilidad exige una colaboracin entre el
bacterilogo y el clnico. En efecto, en ciertas circunstancias, el
microbilogo no podr determinar con certeza que el aislamiento de una
bacteria exige un antibiograma, sin los datos clnicos que le aporta el
mdico. Por ejemplo, una bacteria no patgena puede ser responsable
de la infeccin de un enfermo inmunodeprimido o en un lugar
determinado del organismo. La presencia de signos clnicos puede ser
tambin determinante para la realizacin de un antibiograma (por
ejemplo: la infeccin urinaria con un nmero reducido de grmenes).

II. OBJETIVOS:
La prctica tiene la finalidad de mostrar la sensibilidad in vitro de los
microorganismos frente a los antibiticos.

Esta prueba hoy en da forma parte del estudio bacteriolgico de los

grmenes y permite seleccionar el o los antibiticos adecuados en la
terapia especfica de infecciones bacteriolgicas.

III. MATERIAL Y METODOS:

Cultivo de germen: Staphylococcus aureus
Antibiticos

Dibekacina: DBK (verde)

Norfloxaxina: Nrf (Nrf 10)
Claritromicina: CLR (CLR 15)
Gentamicina: Gm (GTM 10)
Ampicilina: Am (Am 10)

Procedimiento:
Disco difusor

En una placa de Petri, se siembra la bacteria por "siembra en csped"

para que esta pueda crecer de manera homognea por toda la placa.
Acto seguido, se colocan los discos difusores, unas pequeas cpsulas
que contienen antibitico, que liberan al medio. Las placas se incuban y
pasado el tiempo pertinente (vara segn la especie de bacteria) se
observa. Las bacterias habrn crecido por toda la placa salvo en las
zonas impregnadas con el antibitico.
Dado que la concentracin de antibitico es menor a mayor distancia
del disco difusor, llegar un momento en que la bacteria crecer

tolerando la nfima concentracin de antibitico. A esta distancia se le

denomina "radio de inhibicin".
Las propias empresas farmacuticas que distribuyen los discos difusores
tabulan, en centmetros, el radio de inhibicin que debera provocar tal
antibitico para ser considerado Sensible, Intermedio o Resistente. El
bacterilogo se ocupa de medir con regla el radio y considerarlo segn
las tablas.

IV. RESULTADO:
Antibiticos

Dibekacina: DBK (verde)...sensible

Norfloxaxina: Nrf (Nrf 10)sensibilidad intermedia
Claritromicina: CLR (CLR 15).sensible
Gentamicina: Gm (GTM 10)..sensibilidad intermedia
Ampicilina: Am (Am 10)...resistente

V. CUESTIONARIO:
1. Cul es la resistencia del germen?
Dibekacina: DBK (verde)...sensible
Norfloxaxina: Nrf (Nrf 10)sensibilidad intermedia
Claritromicina: CLR (CLR 15).sensible
Gentamicina: Gm (GTM 10)..sensibilidad intermedia

 Ampicilina: Am (Am 10)...resistente

2. A cul antibitico es sensible?

Dibekacina: DBK (verde)...sensible
Claritromicina: CLR (CLR 15).sensible

3. Grado de sensibilidad de mayor a menor?

Dibekacinadimetro 3.6 cm
Claritromicinadimetro 2.7 cm
Norfloxaxina.dimetro 1.7 cm
Gentamicina..dimetro 1.3 cm
Ampicilina.dimetro 0 cm

4. Revise

mecanismos

tipos

de

accin

de

los

antibiticos

Debido a que los antibiticos tienen efectos sobre una diversidad

de bacterias, sus mecanismos de accin difieren basados en las
caractersticas vitales de cada organismo y que, por lo general,
son objetivos que no existen en las clulas de mamferos:

Pared celular
Algunos antibiticos ejercen su funcin en regiones y orgnulos
intracelulares, por lo que son ineficaces en bacterias que contengan una
pared celular, a menos que se logre inhibir la sntesis de esta estructura
exterior, presente en muchas bacterias, pero no en animales. Muchos
antibiticos

van

dirigidos

bloquear

la

sntesis,

exportacin,

organizacin o formacin de la pared celular, especficamente los

enlaces cruzados del peptidoglucano, el principal componente de la
pared celular, sin interferir con los componentes intracelulares. Esto
permite alterar la composicin intracelular del microorganismo por

medio de la presin osmtica. Como la maquinaria intracelular

permanece intacta, ello aumenta la presin interna sobre la membrana
hasta el punto en que sta cede, el contenido celular se libera al
exterior, y la bacteria muere. Tambin permiten la entrada de otros
agentes antimicrobianos que no pueden atravesar la pared celular. 3
Algunos ejemplos clsicos son:

La bacitracina: del grupo de los pptidos, inhibe al transportador

lipdico del peptidoglucano hacia el exterior de la clula.

La penicilina: en el grupo de los betalactmicos, inhibe la

transpeptidacin, una reaccin en la que se producen los enlaces
cruzados de la pared celular y bloquea los inhibidores de las
autolisinas.

Las cefalosporinas: otro tipo de molculas que inhiben la

transpeptidacin, por unin a las protenas PBPs, implicadas en la
ltima fase de la formacin de la pared celular.

Membrana celular
Ciertos antibiticos pueden lesionar directa o indirectamente al inhibir
la sntesis de los constituyentes la integridad de la membrana celular
de las bacterias y de ciertos hongos. Las polimixinas, por ejemplo, son
antibiticos que actan como surfactante o detergente que reacciona
con los lpidos de la membrana celular de las bacterias. Ello destruye la
integridad de la permeabilidad de la membrana. Los elementos
hidrosolubles y algunos que son txicos para el germen, pueden as
entrar sin restriccin al interior celular. La gramicidina A forma poros o
canales en las bicapas lipdicas.

Accin sobre cidos nucledos (ADN y ARN) y protenas

Algunos antibiticos actan bloqueando la sntesis del ADN, ARN,
ribosomas, cidos nucledos o las enzimas que participan en la sntesis
de las protenas, resultando en protenas defectuosas. La mitomicina es
un compuesto con estructura asimtrica y que se fija a las hlices del
ADN e inhibe o bloquea la expresin de la enzima ADN polimerasa y, por
ende, la replicacin del ADN y el ensamblaje de las protenas. La
actinomicina, por su parte, ejerce su mecanismo en la misma manera
que la mitomicina, solo que es una molcula simtrica.
Las sulfamidas son anlogos estructurales de molculas biolgicas y
tienen parecido a las molculas normalmente usadas por la clula diana.
Al hacer uso de estas molculas farmacolgicas, las vas metablicas del
microorganismo son bloqueadas, provocando una inhibicin en la
produccin de bases nitrogenadas y, eventualmente, la muerte celular.
Las quinolonas y fluoroquinolonas actan sobre enzimas bacterianas del
tipo girasas y topoisomerasas del ADN, responsables de la topologa de
los cromosomas, alterando el control celular sobre la replicacin
bacteriana y produciendo una alteracin en la lectura del mensaje
gentico.

Accin sobre los ribosomas

Aproximadamente la mitad de los antibiticos actan por inhibicin de
los ribosomas bacterianos, los orgnulos responsables de la sntesis de
protenas y que son distintos en composicin de los ribosomas en
mamferos. Algunos ejemplos incluyen los aminoglucsidos (se unen de
forma irreversible a la subunidad 30S del ribosoma), las tetraciclinas
(bloquean la unin del ARNt aminoacil al complejo ARNm-ribosoma),

eritromicina (se fijan de manera especfica a la porcin 50S de los

ribosomas bacterianos) y la doxiciclina.

5. Revise mecanismos de defensa natural y adquirida

Inmunidad innata
Este tipo de inmunidad te protege del ingreso o permanencia de
microorganismos u otras partculas extraas en tu organismo. Los
principales componentes de esta inmunidad son las barreras fsicas,
mecnicas o qumicas, y clulas fagocitarias (neutrfilos, macrfagos)
(Fig. 9). Estos componentes se caracterizan por estar presentes desde el
nacimiento del individuo, ser inespecficos y no dejar memoria despus
de su accin.
Barreras naturales
La piel evita la invasin de muchos microorganismos si no existe alguna
lesin, picadura de insecto o quemadura. El organismo tambin cuenta
con las membranas mucosas, que revisten las vas respiratorias e
intestino. Estas membranas producen secreciones que combaten los
microorganismos y evitan infecciones. Adems de las mucosas, las vas
respiratorias

constan

de

cilios

que

expulsan

las

partculas

microorganismos hacia el exterior. Tambin actan como barreras el

cido estomacal, el reflejo de la tos y enzimas en las lgrimas y grasas
de la piel.

Fagocitos y complemento
Cuando las barreras naturales no controlan el ingreso de patgenos, se
activan otros mecanismos de defensa inespecficos. Este tipo de
respuesta es mediada por:

Fagocitos: que incluyen neutrfilos y macrfagos y se caracterizan por

activarse de forma inmediata cuando cualquier sustancia extraa
penetra en el organismo (por ejemplo, despus de una herida). La
activacin consiste en la movilizacin de estas clulas hacia el foco de la
lesin, luego reconocen y toman contacto con la sustancia extraa y la
destruyen

mediante

el

proceso

de

fagocitosis

posterior

lisis

intracelular.
Complemento: complementa la accin de otros mecanismos de
defensa. Consiste en protenas presentes en el plasma que, luego de
activarse, sus

acciones

pueden

incluir

lisis

de

la

pared

celular,

recubrimiento de patgenos para facilitar la accin de fagocitos y

atraccin de linfocitos al sitio de la infeccin.
Inmunidad adaptativa
Has notado que algunas enfermedades infecciosas que padeciste en tu
infancia no se han repetido? La causa de esto se relaciona con la
inmunidad adaptativa o especfica, que tiene la capacidad de
reconocer una enorme variedad de sustancias extraas (antgenos) de
manera

especfica

recordarlas

(memoria),

permitiendo

una

respuesta ms rpida a nuevas exposiciones de un mismo agente

patgeno.
En la activacin de la inmunidad adaptativa se requiere que acten las
clulas

presentadoras

de

antgenos

(CPA),

las

cuales

exhiben

fragmentos de patgenos en la superficie, para que sean reconocidos

por linfocitos B y T. Las CPA pueden ser macrfagos, clulas dendrticas
y linfocitos B.
Existen dos tipos principales de inmunidad adaptativa:

Humoral: est a cargo de los linfocitos B y se caracteriza por la

produccin

de

anticuerpos,

un

grupo

complejo

de

protenas

denominadas inmunoglobulinas (Ig). Ante la presencia del antgeno los

linfocitos B se activan producindose dos tipos de clulas: plasmticas y
de memoria. Las clulas plasmticas producen los anticuerpos con los
que se combate la infeccin, mientras las clulas de memoria solo
actan despus de la segunda infeccin.
Celular: participan los linfocitos T, los cuales se originan en la mdula
sea, pero adquieren la capacidad de ser inmunocompetentes en el
timo. Los linfocitos T, gracias a la produccin de protenas, se encargan
de destruir clulas infectadas por virus o aquellas que han sido
modificadas (como las cancerosas). Los linfocitos T actan cuando virus
o bacterias sobreviven en clulas infectadas. Los antgenos quedan
expuestos en las clulas afectadas como verdaderos marcadores
permitiendo

que

las

clulas

citotxicos

(T8)

reconozcan

especficamente la estructura de la clula que expone estos antgenos y

de esta manera se activen los linfocitos. La activacin produce la
proliferacin de clulas T y la diferenciacin de las clulas hijas en
clones de clulas de memoria; estas clulas son inactivas durante la
infeccin inicial, pero se activan en una segunda exposicin al antgeno
extrao.
Vacunas
En ms de una oportunidad te han vacunado. Como sabes, las vacunas
previenen el contagio de enfermedades infecciosas. La vacunacin se
relaciona con la inmunidad activa, ya que el organismo genera una
inmunorespuesta contra los antgenos contenidos en la vacuna,
formando clulas de memoria que actan ante la presencia del
patgeno. La vacunacin explota la capacidad del sistema inmunolgico
de generar una respuesta inmune frente a alguna forma alterada de un

patgeno determinado. Este procedimiento permite el desarrollo de

clulas con memoria inmunolgica que confieren proteccin a lo largo
de toda la vida del organismo vacunado. Diferentes tipos de vacunas
han sido utilizadas a lo largo del tiempo. Las bacterias y virus muertos
han sido y continan siendo utilizadas en determinadas circunstancias.
Las vacunas creadas con la utilizacin de microorganismos vivos
atenuados resultan ser mejores inmungenos que las anteriores, pero
presentan el riesgo de la reversin del patgeno alterado a la forma
virulenta y son, por lo tanto, peligrosos. Cada vez es ms frecuente el
uso de la tecnologa del ADN recombinante para obtener protenas que
generan una respuesta inmune. Se estn desarrollando las llamadas
vacunas de ADN. Para ello, los genes que codifican protenas de inters
son insertados en plsmidos adecuados, los que luego son inyectados
dentro de clulas musculares de manera que la protena se puede
expresar en forma prolongada. El procedimiento produce una buena
respuesta humoral como tambin una especial estimulacin de los
linfocitos

citotxicos.

La posibilidad de transferir genes con el fin de reemplazar, corregir o

modificar la accin de otros genes permite pensar en la posibilidad de
mejorar una gran variedad de enfermedades, entre ellas el cncer.
A continuacin un cuadro resumen con los principales hitos en la historia
de la inmunizacin artificial, durante el siglo XX.

6. Importancia clnica y epidemiolgica

El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una
cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infeccin a
uno o varios antibiticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los
requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibitico.
El antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones
teraputicas individuales.

El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las

resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento epidemiolgico, a
escala de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un
pas, es como puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse
regularmente los espectros clnicos de los antibiticos y adoptarse
ciertas decisiones sanitarias, como el establecimiento de programas de
prevencin en los hospitales.

7. ESQUEMATICE A LA BACTERIA E SU LUGAR DE ACCION

DBK SENSIBLE
DIAMETRO 3.6 CM

GTM SENSIBILIDAD
INTERMEDIA DIMETRO
AMPICILINA

NRF SENSIBILIDAD INTERMEDIA

DIMETRO 1.7 CM

1.3 CM

RESISTENTE

CLR SENSIBLE DIMETRO 2.7 CM

VI. BIBLIOGRAFA:
http://es.wikipedia.org/wiki/Antibiograma
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioAntibioticos.htm
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioAntibioticos.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Antibi%C3%B3tico
http://www.educarchile.cl/Portal.Base/Web/VerContenido.aspx?
GUID=123.456.789.000&ID=133198

VII. ANEXOS: