El ovocito: estructura, desarrollo

y evaluacin de la calidad de la
puesta

M.Sc. Beatriz Angeles

Primera fase de desarrollo ovrico

Ovario en alevn de
lubina
ta= tnica albugnea
(tejido conectivo con
msculos de fibra lisa y
vasos sanguneos)
Opn= folculos
perinucleolares

Laminillas
ovricas

50
Carrillo et al, 2009

Previtelognesis

ovogonias y ovocitos primarios

Ovogonias: divisin mittica
(ncleo grande y un nucleolo)
Ovocitos primarios: clulas
somticas separan ovocitos
contiguos y forman unidad
folicular definitiva (capa
folicular o granulosa y lmina
basal, y teca que rodea los
folculos (tejido conjuntivo
vascularizado)

opn= ovocito perinucleolar

opnt= ovocito perinucleolar tardo
CO= cavidad ovrica
Carrillo et al, 2009

Previtelognesis

Ovocitos primarios antes de iniciar vitelognesis

presentan transformaciones que afectan ncleo,
nucleolo y citoplasma.
Estado perinucleolar (aparicin de nucleolos
situados en la periferia del ncleo)
Incremento del volumen (aprox. 100 veces) y se
rodea de clulas foliculares.
Se originan alveolos corticales (mucopolisacridos
y glicoprotenas) formando un anillo alrededor del
ncleo y son desplazados hacia la periferia del
ovocito se liberan durante la fecundacin

Vitelognesis

Acumulacin de material de reserva (vitelo) por

efecto del E2 y de la accin de la FSH
plasmtica.
La FSH estimula la actividad de la aromatasa de
los folculos ovricos.
Vitelo (protenas, glucgeno y lpidos)
transportado por va sangunea, atraviesa
envoltura folicular y membrana plasmtica del
ovocito.

Vitelognesis

Acumulacin de material de
reserva en forma de vitelo
Captacin de vitelogenina
(glicolipofosfoprotena
heptica) por micropinocitosis
de la sangre, y formacin de
grnulos de vitelo
(Vg+glucgeno+glicolpidos).
En huevos pelgicos
coalescencia del vitelo y
formacin de gotas de grasa

a
zr
gv

PV

V
zr

Zr= zona radiata

N = ncleo
l= lpidos
a= alveolos corticales
gv= grnulos de vitelo
Carrillo et al, 2009

Maduracin final del

ovocito

El ovocito continua y completa la

primera divisin meitica, y progresa
hasta la metafase de la 2da divisin
meitica.
Se da migracin del ncleo o vescula
germinal al polo animal.
Ruptura de la vescula germinal,
condensacin de cromosomas y
emisin del primer corpsculo polar
(fin de la primera divisin meitica)

Maduracin final del ovocito

Granulos de vitelo y
vacuolas lipdicas sufren
coalescencia y en peces
marinos se incrementa el
volumen ovocitario por
hidratacin
En este proceso actan las
uniones entre el ovocito y
la envuelta folicular.

Parenti, 2004

Maduracin final del ovocito

MIH o EIM (hormona esteroide inductora de

la maduracin) est relacionado con la unin
entre clulas foliculares y ovocito) permite
paso de nutrientes y factores hormonales
entre ambos
Ovulacin es la liberacin del ovocito al lumen
ovrico o al celoma abdominal.
Ruptura de la cubierta folicular por accin de
enzimas proteolticas y por contraccin del
folculo

Atresia

Degeneracin y absorcin de ovocitos en

cualquier fase de su desarrollo.
Los cuerpos atrsicos son ms frecuentes en
la postpuesta
Atresia= hipertrofia de las clulas foliculares,
fragmentacin de la capa radiada y posterior
digestinOcurre de forma natural o puede ser
provocada por estrs ambiental o deficiencias
hormonales

Control hormonal de la
vitelognesis

E2 acta a nivel gonadal para estimular el

desarrollo ovocitario pero tambin para controlar
la expresin de los genes de los tejidos no
gonadales requeridos para el crecimiento de los
ovocitos.
E2 induce la produccin en el hgado de la
coriogenina H (formacin del corion) y
vitelogenina (complejo fosfolipdico para
desarrollo ovocito y alimentacin embrionaria).

Vitelogenesis
17a, 20b
dihidroxiprogesterona

Ng/ml

testosterona

Vitelogenina

estradiol

previtelognesis

vitelogenesis maduracin

ovulacin

Vitelognesis: Acumulacin de reservas vitelinas en forma de grnulos

Durante la vitelognesis los ovocitos se mantienen en la
primera profase meitica

Control hormonal de la
vitelognesis

Vitelogenina, producida en mayor proporcin

por hembras, permite realizar ensayos para
determinar el sexo fenotpico del pez o para
evaluar el efecto feminizante de poluentes.
Tratamientos con estrgenos en machos
pueden generar la sntesis de vitelogenina en
pequeas proporciones en el testculo
(tilapia).

Control hormonal de la
vitelognesis

Los andrgenos pueden inducir la produccin

de vitelogenina en hepatocitos en trucha,
este efecto es bloqueado con el tamoxifen
(bloqueador de receptores), indica que la
estimulacin ocurre a nivel de receptores de
estrgenos.
La vitelogenina se encuentra relacionada con
el control de retroalimentacin de los niveles
de estrgeno. (>vitelogenina <estrgeno).

Calidad de la puesta

Determinacin de la calidad de
los ovocitos

La produccin acucola puede verse afectada

seriamente por la cantidad y calidad de los
huevos producidos en el desove.
La calidad de los huevos puede ser definida
como la capacidad de producir alevines
viables
Los huevos de buena calidad son aquellos
que tienen bajas tasa de mortalidad en la
fertilizacin, embrionaje, eclosin y primer
desarrollo larval (Bromage et al)

Determinacin de la calidad de
los ovocitos

Dada por factores intrnsecos (edad de la madre,

gentica, composicin de la yema, morfologa, etc.) y
extrnsecos (maduracin, manipulacin, condiciones de
incubacin, calidad del agua, etc.).
Primeras evaluaciones: tamao ovocito, gota lipdica, %
fertilizacin, desarrollo embrionario, sobrevivencia larval
Actualmente: simetra de las primeras clulas,
composicin del vitelo, enzimas clave del metabolismo
intermediario, y herramientas moleculares, etc.

Criterios utilizados para seleccionar

desoves de buena calidad

Fecundidad o numero de huevos producidos por

desove
Tamao, forma y transparencia de los huevos
Porcentaje de huevos boyantes (>50%)
Porcentaje de fertilizacin de los huevos (>70%)
Aspecto del corion
Simetra en los 1ros estados de clivaje
% de huevos eclosionados
Supervivencia larvaria
Composicin qumica de los huevos
Silva (Ed), 2005

Determinacin de la calidad de
los ovocitos

Las tcnicas de evaluacin permiten mejorar las

condiciones de maduracin de los reproductores y
la produccin de alevinos.
Los factores paternos y maternos operan en
diferentes tiempos y de diferentes manera.
Efectos paternos se observan la primera fase
(densidad espermtica, motilidad), y los maternos
posteriormente (sobrevivencia embrionaria).

Determinacin de la calidad de
los ovocitos

Con fertilizacin externa: ovocitos

pelgicos o demersales.
Diferencia: estado de desarrollo
larval al momento de la eclosin.
Huevos pelgicos larvas ciegas
con boca y ano cerrado.
Huevos demersales huevos con
ojo, larvas nadadoras con boca
grande, pueden alimentarse de
dietas formuladas (finalizada la
reabsorcin del saco vitelino).

Determinacin de la calidad de
los ovocitos

Periodo de incubacin mayor en larvas

demersales que en pelgicas (depende de T)
(p ej. Trucha: 30 das, gamitana:12-18
horas),
Desarrollo embrionario (sujetos a factores
externos) Reabsorcin del saco vitelino:
trucha: 15-18 das, gamitana:3-5 das
Los parmetros de calidad son diferentes
entre ambos.

Evaluacin en ovocitos extrados

manualmente

Evaluacin de la calidad en desoves

naturales

Evaluacin de los ovocitos

peces amaznicos
Seleccin por
Caractersticas

Obtencin de muestras
de ovocitos
Solucin de Gilson
30 min

Medicin del dimetro

De los oocitos (n>200)
Calculo de la frecuencia de
Distribucin y valor modal

Solucin de Serra
1-2 min
Observacin de la posicin
Del ncleo en el ovocito
(n> 200)

Realizar la induccin

Seleccin de reproductores peces

amaznicos

Por caractersticas externas

Por biopsia ovrica (posicin del ncleo en el
ovocito) Solucin aclaradora: Liq. Serra
(etanol:formol:acido actico glacial= 7:2:1)

Ncleo ausente

Shoking

Sifoneo de los huevos y se dejan

caer libremente desde una altura
de 50cm.
Eliminacin de embriones dbiles.
Lote se coloca en salmuera (60-70
gr sal/L agua) por 10 min
Se limpian las estructuras de
incubacin
Se sigue el periodo de incubacin
(queda un 30% del tiempo) o se
realiza el empaque y envo.