EXPERIMENTO A
DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES Y ALBMINA EN SUERO
FUNDAMENTOS DEL METODO:
Determinacin de Protenas Totales:
Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico, en medio
alcalino, para dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya
intensidad es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.
Determinacin de Albmina:
La albmina reacciona especficamente (sin separacin previa) con la forma aninica
de la Bromo Cresolsulfon Ftalenas (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en
medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto al blanco
de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra.
REACTIVOS:
Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en NaOH 875 mmol/l y alquil aril
poli ter (AAP).
Reactivo BCF: solucin de Bromo Cresolsulfon Ftalenas (en polioxietiln lauril ter).
Suero Patrn: solucin de albmina y globulinas en estado nativo con ttulo conocido
de protenas (Biuret Kjeldhal) y albmina (unin BCF).
MATERIAL REQUERIDO:
Espectrofotmetro.
Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Tubos de ensayo.
Bao Mara a 37C.
Reloj timer.
fc = P.T. (g/dl) / S
Albmina (g/dl) = M x fc
fc = Alb. (g/dl) / S
Albmina (g/dl)
Relacin A/G = --------------------------------------Prot. Tot. (g/dl) - Alb. (g/dl)
VALORES DE REFERENCIA:
PROTENAS TOTALES: 6,1 a 7,9 g/dl.
ALBMINA: 3,5 a 4,8 g/dl.
RELACION A/G: 1,2 a 2,2
EXPERIMENTO B
DETERMINACIN DE CREATININA URINARIA
FUNDAMENTOS DEL METODO:
La Creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previa
desproteinizacin con cido pcrico, obtenindose un cromgeno que se mide a 510
nm.
REACTIVOS:
Reactivo 1: cido pcrico 41,4 mmol/l.
Reactivo 2: buffer glicina/NaOH 1 mol/l, pH final 12,4.
Standard: solucin de Creatinina 2 mg%
MATERIAL REQUERIDO:
Espectrofotmetro.
Tubos de ensayo.
Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Reloj timer.
PROCEDIMIENTO:
Recolectar orina de 24 horas.
Medir la diuresis, tomar una alcuota y efectuar una dilucin 1:50 de la misma.
VALORES DE REFERENCIA:
900 a 1,500 mg/24 horas.
CUESTIONARIO
1. CON LOS DATOS OBTENIDOS EN LOS EXPERIMENTOS, REALIZAR LA
VALORACIN NUTRICIONAL DE DICHA PERSONA SABIENDO QUE ES
2.
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4.
5.