CURITIBA
2013
CURITIBA
2013
FICHA CATALOGRFICA
TERMO DE APROVAO
Universidade
Federal
do
Paran,
pela
seguinte
examinadora:
________________________________
Prof. Dr. Andr Bellin Mariano
Orientador NPDEAS, UFPR
________________________________
Prof. Dra. Marilda Munaro
Departamento de Engenharia e Cincia dos Materiais, UFPR
________________________________
Prof. Dr. Pedro Augusto Arroyo
Departamento de Engenharia Qumica, UEM
banca
AGRADECIMENTOS
O que conta
Na vida (sabedoria)
Que o contrrio se prove
sem qualquer teoria
Tirar dez
Naquela prova dos nove
(autor desconhecido)
RESUMO
ABSTRACT
Current studies show the great potential of using microalgae for biodiesel
production and energy generation due to its simple structure, fast growth and
high lipid content. The improvement of production processes and the reduction
of the costs are the main challenges to be overcome in the development of this
technology. As the culture medium corresponds to 75% of the production cost
of biomass, this study aimed to evaluate the use of manure from swine as an
alternative to synthetic culture medium in the cultivation of microalgae. The
swine wastewater is rich in phosphorous and nitrogen and is configured as a
serious environmental problem if discarded improperly. Based on these data, it
was proposed three dilutions of manure in water (5%, 10% and 30%). The best
results were obtained in airlift reactor cultivation at the dilution of 10%, with cell
growth of 5199 458 x104 cl.mL-1 and effective biomass gain of
1.44 0.04 g.L-1. These results are 70% and 40% higher when compared to the
control medium. The lipid profile of the fatty acids present in the oil consisted of
29.12% saturated, 49.08% monounsaturated and 20.5% polyunsaturated. Oil
production in 15 days of culture with swine wastewater corresponded to
360 mg.L-1, 46% higher than the control cultive. The conversion of oil to
biodiesel consisted of 98.73% in 12 hours. Furthermore, it was evaluated the
capacity of microalgae to remove nutrients from wastewater and it was reached
an average decrease of 94.5% of ammoniacal nitrogen, organic nitrogen and
total nitrogen. The results could prove the efficiency of the use of pig waste as
culture medium and nutrient source for microalgae, the viability of biodiesel
production and the consequent bioremediation of this manure, demonstrating
the potential that the cultivation of microalgae shows in the production of
biofuels and the environmental suitability of effluents.
LISTA DE FIGURAS
DE
ARTIGOS
RELACIONANDO
Scenedesmus
COM
(B)
BOMBA
DE
CIRCULAO
EXPERIMENTOS
EM
ESCALA
LABORATORIAL....................................................................... 72
FIGURA 22 RESULTADOS DOS CULTIVOS CONTROLE (MEIO CHU) E
COM DEJETO SUNO DILUIDO A 10% REALIZADOS EM
REATOR AIRLIFT. (A) DENSIDADE CELULAR, (B) BIOMASSA
SECA, (C) ABSORBANCIA EM 540 nm, (D) pH. ...................... 74
SUNO
EM
REATOR
AIRLIFT
(LIPIDEOS
SOLVENTES) ........................................................................... 76
FIGURA 24 CONVERSO DO LEO DE MICROALGAS A BIODIESEL POR
ESTERIFICAO ENZIMTICA............................................... 82
FIGURA 25 ATIVIDADES E EXPERIMENTOS EM REATOR AIRLIFT ....... 85
LISTA DE TABELAS
TABELA 01 TRABALHOS
REALIZADOS
COM
MICROALGA
NO BRASIL
DE
2008
A 2012
(VALORES
EXPRESSOS EM m) ............................................................... 29
TABELA 03 COMPARATIVO DE PREOS ENTRE O DIESEL FSSIL E
BIODIESEL DE 2008 A 2012 (R$/m) ....................................... 30
TABELA 04 RENDIMENTO
ANUAL
DE
LEO
PARA
PLANTAS
LIPIDICO
EM
DIFERENTES
ESPCIES
DE
MICROALGAS .......................................................................... 77
TABELA 15 COMPOSIO DE CIDOS GRAXOS DE MICROALGAS DO
GNERO Scenedesmus ........................................................... 78
LISTA DE SIGLAS
ABIOVE
BHT
Butilhidroxitolueno
CEPPA
CONAMA
DBO
DQO
EMPRAPA
IBGE
KOH
Hidrxido de potssio
NPDEAS
PVC
TECPAR
LISTA DE ABREVIATURAS
cl
Clulas
Grama
pg
Picograma
ha
Hectare
Kg
Quilograma
Litro
Metros cbicos
mg
Miligrama
Mha
Mega hectare
mm
Milmetros
min
Minutos
mL
Mililitros
Nitrognio
nm
Nanmetros
Fsforo
rpm
Watts
Graus Celsius
Teste T de Student
LISTA DE SMBOLOS
Porcentagem
R$
Real
Delta
SUMRIO
1 INTRODUO ............................................................................................ 19
1.1 ORGANIZAO DO DOCUMENTO ........................................................ 20
2 REVISO BIBLIOGRFICA ....................................................................... 22
2.1 MICROALGAS ......................................................................................... 22
2.1.1 Chlorella sp. .......................................................................................... 23
2.1.2 Spirulina sp............................................................................................ 24
2.1.3 Dunaliella salina .................................................................................... 24
2.1.4 Haematococcus pluvialis ....................................................................... 25
2.1.5 Scenedesmus sp. .................................................................................. 25
2.2 BIODIESEL .............................................................................................. 27
2.2.1 Biodiesel de microalgas......................................................................... 30
2.3 DEJETO SUNO ....................................................................................... 32
2.4 FORMAS DE PRODUO DE MICROALGAS ........................................ 37
2.4.1 Sistemas abertos ................................................................................... 38
2.4.2 Sistemas fechados ................................................................................ 39
2.5 CULTIVO DE MICROALGAS NO NPDEAS ............................................. 41
3 DESAFIOS E OBJETIVOS ......................................................................... 45
3.1 OBJETIVO GERAL .................................................................................. 45
3.1.1 Metas..................................................................................................... 45
4 MATERIAIS E MTODOS .......................................................................... 48
4.1 SELEO DAS MICROALGAS ............................................................... 48
4.2 COLETA E MANUTENO DO EFLUENTE SUNO BIODIGERIDO ...... 49
4.3 MEIO DE CULTIVO E CONDIES DE CULTIVO ................................. 49
4.4 AVALIAO DO CULTIVO ...................................................................... 52
4.4.1 Determinao da densidade celular ...................................................... 52
4.4.2 Determinao da absorbncia............................................................... 53
4.4.3 Determinao de biomassa seca .......................................................... 54
4.4.4 Determinao de lipdeo totais .............................................................. 56
4.4.5 Determinao do pH dos cultivos .......................................................... 58
4.5 RECUPERAO DA BIOMASSA ............................................................ 59
19
1 INTRODUO
20
21
microalgas
no
Ncleo
de
Pesquisa
Desenvolvimento
de
Energia
22
2 REVISO BIBLIOGRFICA
2.1 MICROALGAS
23
Chlorela
sp.
Spirulina
sp.,
utilizadas
principalmente
para
24
mais
elevadas
(AZEREDO,
2012).
Possui
interesse
econmico
25
por exemplo a ustrlia, China, Israel e Estados Unidos (del CAMPO, GARCAGONZLEZ e GUERRERO, 2007). Sob condies ideais de temperatura e
luminosidade, a taxa de -caroteno em biomassa seca de 10% (BENAMOTZ, 1999). O custo de produo da microalga Dunaliella salina de
aproximadamente 3,2 dlares por quilograma (KITTO, 2012), enquanto que o
preo comercializao da biomassa seca varia de 215 a 2150 euros por
quilograma (BRENNAN e OWENDE; 2010).
possveis.
Isso
faz
com
que
os
custos
se
elevem
26
utilizam energia luminosa, carbono e nutrientes para gerar biomassa que pode
ser posteriormente utilizada como matria-prima para diversos produtos, como
biocombustveis (MATA, MARTINS e CAETANO, 2010). Como a espcie
utilizada nesse trabalho foi a Scenedesmus sp., fez-se um levantamento da
literatura sobre os objetos de estudos recentes realizados com essa microalga.
Esse levantamento pode ser observado na TABELA 01.
TABELA 01 - TRABALHOS REALIZADOS COM A MICROALGA Scenedesmus sp. (1996 2013)
OBJETO DE ESTUDO
MICROALGA
AUTORES
Scenedesmus acuminatus
Scenedesmus sp.
Scenedesmus obliquus
(2010)
Suplementao
Scenedesmus obliquus
Bishop (1996);
alimentar
Scenedesmus sp.
Biorremediao de
resduos
Scenedesmus incrassatulus
biocombustveis
Scenedesmus obliquus
27
2.2 BIODIESEL
28
Agncia
Nacional
do
Petrleo,
Gs
Natural
29
2008
2009
2010
2011
2012
leo de soja
801.320
(69%)
1.250.577
(78%)
1.960.822
(82%)
2.152.298
(81%)
2.042.730
(75%)
Sebo bovino
206.966
(18%)
258.035
(16%)
327.074
(14%)
357.664
(13%)
469.215
(17%)
leo de Algodo
18.353
(2%)
59.631
(4%)
57.458
(2%)
84.711
(3%)
123.325
(5%)
Outras
140.489
(12%)
40.206
(2%)
41.086
(2%)
78.088
(3%)
83.683
(3%)
Total
1.167.128
(100%)
1.608.448
(100%)
2.386.438
(100%)
2.672.760
(100%)
2.718.954
(100%)
interesse
econmico
da
produo
de
biodiesel
aumente
30
2008
2009
2010
2011
2012
1.844,33
1.838,00
1.769,33
1.791,33
1.858,67
2.256,11
2.279,48
2.102,33
2.214,00
2.384,20
31
32
172
0,02
1540
Soja
446
0,04
592
Canola
1190
0,12
223
Coco
2689
0,27
99
leo de palma
5950
0,60
45
Microalga
136.900
13,69
Microalga
58.700
5,87
4,5
Microalga
19.567
1,96
13,5
FONTE: Adaptado de Chisti (2007)
a
NOTA: Para atender 50% de todos os combustveis necessrios aos transportes no EUA;
b
70% leo (peso por) em biomassa;
c
30% leo (peso por) em biomassa;
d
10% leo (peso por) em biomassa
33
ANO
EFETIVO DE REBANHO
ANO
EFETIVO DE REBANHO
1990
33.623.186
2000
31.562.111
1991
34.290.275
2001
32.605.102
1992
35.532.168
2002
32.013.227
1993
34.184.187
2003
32.304.905
1994
35.141.839
2004
33.085.299
1995
36.062.103
2005
34.063.934
1996
29.202.182
2006
35.173.824
1997
29.637.109
2007
35.945.015
1998
30.006.946
2008
36.819.017
1999
30.838.616
2009
38.045.454
34
NUTRIENTES
-1
Nitrognio amoniacal
0,92
Nitrognio orgnico
0,21
Nitrognio total
1,15
Fsforo total
0,34
extremamente
poluentes.
DBO
desses
resduos
aproximadamente 200 vezes maior que a dos esgotos comuns, sendo a DBO
do esgoto domstico de 200 mg.L-1 enquanto a de resduos sunos de
40.000 mg.L-1 (TECPAR, 2002).
A prtica da digesto anaerbia, apesar de combinar a remoo de
matria orgnica e produo de biogs para diversos fins, apresenta alguns
inconvenientes como a baixa remoo de nutrientes (nitrognio e fsforo), a
necessidade de um complexo sistema de controle de processos e variveis e a
35
25 100 kg
(KG/DIA)
ESTERCO E
DEJETOS
ARMAZENAMENTO
URINA
LQUIDOS
(m /ANIMAIS.MS)
(KG/DIA)
(L/DIA)
ESTERCO +
DEJETOS
URINA
LQUIDOS
2,3
4,9
7,0
0,16
0,25
3,6
11,0
16,0
0,34
0,48
6,4
18,0
27,0
0,52
0,81
Macho
3,0
6,0
9,0
0,18
0,28
Leites
0,35
0,95
1,40
0,04
0,05
Mdia
2,35
5,8
8,6
0,17
0,27
Porcas de
reposio,
cobrio e
gestantes
Porcas em
lactao com
leites
36
37
Vrios
artigos,
trabalhando
com
microalga
Scenedesmus,
sistemas
de
produo
so:
tanque
aberto,
lagoa
tipo
pista
38
NaNO3
0,25
CaCl2.2H2O
0,025
MgSO4.7H2O
0,075
K2HPO4
0,075
KH2PO4
0,175
Cloreto de sdio
NaCl
0.025
Trplex III/EDTA
C10H14N2Na2O8.2H2O
0,05
Hidrxido de potssio
KOH
0,031
FeSO4
0,00498
cido brico
H3BO3
0,01142
ZnSO4.7H2O
8,82 10
MnCl2.4H2O
1,44 10
Molibdato de sdio
NaMoO4.2H2O
1,19 10
CuSO4.5H2O
1,57 10
Co(NO3)2.6H2O
0,49 10
-6
-6
-6
-6
-6
39
40
Fotobiorreatores
tubulares
compactos,
construdos
com
vidro
vantagens
de
fotobiorreatores
tubulares
so
melhor
41
FIGURA 03
42
43
C
3
44
Transient
modeling
photobioreactor.
and
simulation
of
growth
compact
rate
in
to
predict
PVC
45
3 DESAFIOS E OBJETIVOS
3.1.1 Metas
46
47
METAS
ESTRATGIAS
Coletar e caracterizar o
resduo suno biodigerido
Avaliao de densidade
celular, anlise de
absorbncia, determinao de
biomassa seca, e anlise de
pH
Produzir biomassa de
microalgas em FBR tipo Airlift
de 12 L em condies
externas avaliando
produtividade em biomassa,
leo e composio de lipdeos
Avaliao de densidade
celular, anlise de
absorbncia, determinao de
biomassa seca, anlise de
pH, determinao de lipdeos
totais e anlise do perfil
lipdico
Avaliar a eficincia de
biorremediao do resduo
suno em relao aos
parmetros fosfato e
nitrognio total, orgnico,
amoniacal
48
4 MATERIAIS E MTODOS
49
50
3,72
20,93
109,40
130,32
10%
7,43
41,86
218,79
260,65
30%
22,30
125,58
656,36
781,94
CHU
61,58
41,18*
100 mL
de
solues-estoque
de
meio
de
cultivo
51
52
parmetros:
determinao
da
densidade
celular,
anlise
53
FIGURA 11 CURVA TPICA DE CRESCIMENTO CELULAR. (1) FASE LAG, (2) FASE DE
CRESCIMENTO EXPONENCIAL, (3) FASE DE CRESCIMENTO LINEAR, (4)
FASE ESTACIONRIA, (5) FASE DE DECLNIO
FONTE: Adaptado de Mata, Martins e Caetano (2010)
54
55
Bs ( g.L1 )
F2 F1
V
(1)
onde:
Bs biomassa seca da amostra (g.L-1)
F1 massa do microfiltro seco (g)
F2 massa do microfiltro com biomassa seca (g);
V volume de cultivo filtrado (L).
56
57
Lipdeos (mg.L1 )
V2 V1 B 1000
C
(2)
onde:
V1 massa do vial vazio (g);
V2 massa do vial com lipdeos (g);
B biomassa seca do cultivo (g.L-1);
C biomassa seca (g);
Lipdeos
V V1 100
(%) 2
C
(3)
58
relacionado
uma
grande
presena
de
clulas
e,
59
FIGURA 14
60
4.6 EXTRAO
ANLISE
DO
PERFIL
LIPDICO
DO
LEO
DE
MICROALGAS
61
62
63
64
5 RESULTADOS E DISCUSSO
65
66
1600
1600
CHU
CHU
5%
1200
1000
800
600
**
* *
1400
10%
** **
**
1400
400
200
0
0
10
15
Tempo (dias)
**** *
*
*
1200
* *
1000
800
600
400
200
0
0
10
Tempo (dias)
15
1600
CHU
**
1400
30%
1200
1000
800
600
400
* *
* *
* *
200
0
0
10
Tempo (dias)
15
67
0,7
CHU
CHU
0,6
10%
5%
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
* *
**
* **
**
0,5
0,4
0,3
*
0,2
* *
0,1
0,0
0,6
**
0,0
0
10
15
Tempo (dias)
10
Tempo (dias)
15
0,7
CHU
0,6
30%
0,5
0,4
0,3
*
0,2
* *
* *
*
*
*
** *
0,1
* *
0,0
10
Tempo (dias)
15
FIGURA 18
68
69
1,0
CHU
0,9
0,6
0,4
0,3
0,2
0,7
0,6
***
0,5
0,4
0,3
**
0,2
0,1
0,1
0,0
10%
0,8
0,7
0,5
CHU
0,9
5%
0,8
0,0
0
10
15
Tempo (dias)
10
Tempo (dias)
15
1,0
CHU
0,9
30%
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
**
**
0,2
0,1
0,0
10
Tempo (dias)
15
70
15 DIAS
CLULASx
4
10 .mL
-1
-1
pg.CLULAS
-1
(mg.mL )
EM ESCALA
LABORATORIAL
SECA EM
CHU
0,39
1149
34
5% EFLUENTE SUNO
0,4
835
48
0,61
1259
48
0,09
434
21
71
*
** *
*
*
* *
9,5
9,0
8,5
* *
9,5
9,0
8,0
7,5
7,0
*
* *
*
*
* *
* **
7,5
7,0
CHU
6,5
CHU
6,5
5%
6,0
10%
6,0
5,5
*
* ***
8,5
pH
pH
8,0
* ** *
10,0
5,5
10
15
Tempo (dias)
10
Tempo (dias)
15
10,0
9,5
9,0
8,5
pH
8,0
* **
* **
*
***
** **
7,5
7,0
CHU
6,5
30%
6,0
5,5
C
FIGURA 20
10
Tempo (dias)
15
72
Dessa forma, aps a experimentao em escala laboratorial, observouse um melhor desempenho de crescimento de microalgas na diluio de 10%
em todos os parmetros avaliados. De posse dessa informao, foi realizado
um cultivo comparando essa melhor condio com o meio de cultivo CHU nos
reatores tipo airlift.
5.2
73
74
6000
CHU
4000
3000
10%
*
*
**
1000
1,2
1,0
* *
0,8
0,6
0,4
**
**
0,0
0
0
10
15
Tempo (dias)
10
15
Tempo (dias)
12,0
CHU
6
10%
* **
11,0
*
* ***
*
** *
9,0
8,0
2
1
10%
10,0
**
CHU
pH
1,4
0,2
**
**
* * *
7,0
6,0
10%
1,6
2000
CHU
1,8
5000
** **
2,0
10
Tempo (dias)
15
10
15
Tempo (dias)
CHU
3041
33
1,4
5199
27
75
76
25,68% 3,02 de lipdeos em biomassa seca para o cultivo com dejeto suno e
24,56% 2,78 para o cultivo com meio sinttico. Desta forma, pode-se
perceber que o teor de lipdeos na biomassa de microalgas foi o mesmo,
independentemente do meio de cultivo utilizado. Contudo, o mesmo no pode
ser afirmado em relao produtividade em leo dos dois cultivos. A TABELA
13 mostra um comparativo de produtividade de lipdeos totais em funo do
volume dos cultivos. Apesar dos teores de lipdeos serem semelhantes nas
duas condies analisadas, o cultivo em dejeto suno resultou em maior
quantidade de biomassa seca. Isso fez com que a produtividade de lipdeos
apresentada nesse cultivo seja 46% maior que a produtividade do cultivo em
meio sinttico.
77
sanitrio. Vale ressaltar que esse estudo foi realizado durante um perodo de
30 dias. Abou-Shanab et al. (2013), em trabalho tambm realizado com
Scenedesmus sp. utilizando efluente suno como meio de cultivo, alcanaram
concentrao lipdica de aproximadamente 31%.
TABELA 13
10 48
Dunaliella salina
6 25
Dunaliella sp.
17,5 67
Haematococcus pluvialis
25
Scenedesmus obliquus
11 55
Scenedesmus quadricauda
1,9 18,4
Scenedesmus sp.
19,6 21,1
Spirulina platensis
4 16,6
Spirulina mxima
49
78
79
TABELA 15
graxos
saturados
contedo
reduzido
de
cidos
graxos
80
C4:0
C6:0
C8:0
C10:0
C12:0
C14:0
C15:0
C16:0
C17:0
C18:0
C14:1
C15:1
C16:1
C16:2
C17:1
C18:1n9c
C18:1n9t
C18:2n6t
C18:2n6c
C18:3n3
C18:3n6
C20:0
C20:1
C20:2
C20:3n3
C20:5
C21:0
C22:0
C22:1
C22:2
C22:6n3
C23:0
C24:0
C24:1
0
0
0
0
0
0
0
24,5
0
4,62
0
0
3,66
0
0
45,42
0,43
0,89
13,08
6,76
0
0
0
0,67
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
11,30
0
3,54
0
0
0
0
0
22,45
0
0
54,62
8,11
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
TEOR (%)
0
0
0
0
0
0
0
11,40
0
3,60
0
0
0
0
0
25,20
0
0
53,6
6,2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
3
0
2
0
0
0
0
0
57*
22*
16*
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1,12
0
42,70
0,11
4,55
0
0
0
0
0,06
39,37
0
0
10,62
0,21
0
0,39
0,17
0
0
0
0
0,58
0
0
0
0
0,06
0,06
continua
81
Saturados (AGS)
29,1
14,80
Monoinsaturados
49,5
22,50
(AGMI)
Poli-insaturados
21,4
62,70
(AGPI)
FONTE: O autor (2013)
NOTA: 1) Ferrari et al. (2005)
2) Ramos et al. (2009)
* Ismeros no informados pelos autores
TEOR (%)
15
49,5
25,20
57
39,70
59,80
38
10,8
82
100
90
Converso (%)
80
70
60
50
40
30
20
P. sumatrense
10
A. fumigatus
0
1
7
Tempo (horas)
11
13
83
-1
7,43 mg P.L
0,05 mg P.L
-1
-1
99,3
-1
41,86 mg.L
7,53 mg.L
-1
97,1
82,0
-1
99,6
80 99
Scenedesmus obliquus
Resduo municipal
autoclavado
continua
84
99
Arthrouspira
plantensis
Efluente da indstria de
laticnio biodigerido
Green, Lundquist e
Oswald (1995)
99
Mix
99
Mix
96
Mix
Efluente da indstria de
laticnio biodigerido
100
Chlorella sp.
Efluente da indstria de
laticnio biodigerido
Presente estudo
99,6
Scenedesmus sp.
ao
consumo
humano
desde
que
tratada
pelos
mtodos
85
86
6 CONCLUSO
87
88
REFERNCIAS
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ANEXOS
104
105
106
107