Manipulacin gentica.
La ingeniera gentica es la tecnologa del control y transferencia de ADN de un
organismo a otro, lo que posibilita la creacin de nuevas especies, la correccin de defectos
genticos y la fabricacin de numerosos compuestos.
ndice
2 Tcnicas
o 2.1 La tecnologa del ADN recombinante
o 2.2 La secuenciacin del ADN
o 2.3 La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
3 Biotecnologa gentica
o 3.1 Terapia gentica
o 3.2 Implicaciones ticas
6 Logros
7 Vase tambin
8 Bibliografa relacionada
9 Referencias
10 Enlaces externos
Los granos de trigo modificados genticamente con bacterias como las que colonizaron esta
placa de Petri son casi inmunes contra una enfermedad mictica que destruye las races. El
gel de secuenciacin en el fondo muestra el cdigo gentico de las enzimas bacterianas que
sintetizan antibiticos naturales.
En 1953 se descubri el fenmeno llamado de restriccin: ciertos fagos (virus bacteriano)
que parasitan a E. coli podan desarrollarse en ciertas cepas de esta bacteria, pero no podan
hacerlo en otras (se dice que estn "restringidos" en determinadas cepas).
A finales de los 60, Werner Arber, en Basilea, descubre las enzimas de restriccin
responsables de ese fenmeno: la cepa de bacteria restrictiva, que produce unas
endonucleasas ("enzimas de restriccin, o restrictasas") que escinden el ADN del fago
crecido en otra cepa diferente.
Esas primeras enzimas de restriccin eran inespecficas en cuanto al sitio del ADN donde
cortaban, pero en 1970 Hamilton O. Smith, en Baltimore, descubre un nuevo tipo de
enzima de restriccin totalmente especfica: capaz de reconocer una determinada secuencia
de ADN, de unos pocos pares de bases, y de cortar en ambas cadenas en lugares concretos.
En 1972, Mertz y Davis aadieron a una mezcla de ADN de diferentes orgenes una enzima
ADN-ligasa, procurando que se reparasen los enlaces fosfodister. Y esto les hizo darse
cuenta de que podan constituir la base para la produccin de molculas recombinantes in
vitro, con material gentico de diferentes especies.
Pero este ADN recombinante, generado en el tubo de ensayo, es inerte, no es ms que una
macromolcula hbrida que por s sola no hace nada. Si queremos que el ADN
recombinante haga algo, hay que introducirlo en clulas vivas que sean capaces de expresar
su informacin gentica.
Esto nos lleva ya a la idea de lo que es la Ingeniera Gentica: la formacin in vitro de
nuevas combinaciones de material gentico, por medio de la insercin de un ADN de
inters en un vehculo gentico (vector), de modo que tras su introduccin en un organismo
hospedero el ADN hbrido (recombinante) se pueda multiplicar, propagar, y eventualmente
expresarse.
donantes para la urgencia de trasplantes. En este campo se estn intentando realizar cerdos
transgnicos que posean rganos compatibles con los del hombre.
El ADN es una base fundamental de informacin que poseen todos los organismos vivos,
hasta el ms simple y pequeo. Esta informacin est a su vez dividida en determinada
cantidad espacios llamado loci (plural) o locus (singular); que es donde se encuentran
insertados los genes, que varan dependiendo de la especie. A su vez, cada gen contiene la
informacin necesaria para que la clula sintetice una protena, por lo que el genoma y, en
consecuencia, el proteoma, van a ser los responsables de las caractersticas del individuo.
Los genes controlan todos los aspectos de la vida de cada organismo, incluyendo
metabolismo, forma, desarrollo y reproduccin. Por ejemplo, una protena X har que en el
individuo se manifieste el rasgo de "pelo oscuro", mientras que la protena Y determinar el
rasgo de "pelo claro".
Vemos entonces que la carga gentica de un determinado organismo no puede ser idntica a
la de otro, aunque se trate de la misma especie. Sin embargo, debe ser en rasgos generales
similar para que la reproduccin se pueda concretar, ya que una de las propiedades ms
importantes del ADN, y por la cual se ha dicho que fue posible la evolucin, es la de
dividirse y fusionarse con el ADN de otro individuo de la misma especie para lograr
descendencia diversificada.
Otra particularidad de esta molcula es su universalidad. A raz del concepto de gen, surgen
algunas incgnitas: Son compatibles las cargas genticas de especies distintas? Puede el
gen de una especie funcionar y manifestarse en otra completamente distinta? Se puede
aislar y manipular el ADN?
Tcnicas
La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas, entre las que
destacan:
Se pueden unir genes extraos a los plsmidos con mucha facilidad, y despus ser
transportados como pasajeros al interior de las clulas de E. coli.
ADN del fago lambda. Es otro vector que puede ser utilizado para introducir genes en
bacterias. Cuando el ADN recombinado del fago lambda, con su gen pasajero, se mezcla
con la cubierta del virus lambda, se producen partculas fgicas infecciosas, si el tamao del
ADN recombinado no es muy distinto del ADN natural del virus lambda.
Los procesos de clonacin y de aislamiento de estos fragmentos se inician con la
construccin de una biblioteca de ADN o un banco de ADN. stas estn formadas por todas
las molculas de plsmidos o fagos recombinantes originados al unir un ADN a un vector.
Las bibliotecas deben cumplir la caracterstica de poder introducirse en clulas donde cada
recombinante pueda aplicarse in vivo.
Como "molde" se utiliza una de las cadenas del fragmento de ADN que se va a
secuenciar.
Biotecnologa gentica
En la dcada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de las biotecnologas
gracias a la elaboracin de nuevas tcnicas que permiten llegar directamente al material que
est en el origen de todas las caractersticas y procesos vitales, es decir, el ADN. Este
conjunto de tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el nombre de ingeniera
gentica.
Su objetivo es la manipulacin in Vitro del ADN, la introduccin de este ADN as
modificado en clulas vivas y la incorporacin del mismo como parte del material
hereditario de dichas clulas. De este modo, ADN de diversas procedencias, por ejemplo, la
fraccin de ADN humano regula la sntesis de insulina, puede introducirse en bacterias de
manera que pasa a formar parte de su genoma y lograr as que la bacteria adquiera la
capacidad de elaborar insulina.
Terapia gentica
La terapia gentica consiste en sustituir o aadir, segn el caso, una copia normal de la
regin defectuosa del ADN para poder solucionar y restablecer la funcin alterada, evitando
Implicaciones ticas
La ingeniera tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de los ms importantes son la
medicina y la creacin de nuevas especies o mejora de las existentes. El progreso en estos
mbitos puede aportar resultados capaces de aliviar algunos problemas de gran importancia,
pero no se debe olvidar que la explotacin comercial de las tecnologas requeridas slo est
al alcance de unas pocas empresas multinacionales. Como era de esperar, la tradicional
dependencia econmica de los pases subdesarrollados tiene en la ingeniera gentica un
nuevo elemento de desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingeniera gentica puede
plantear graves problemas ticos. Hay opiniones muy diversas sobre dnde han de situarse
los lmites de manipulacin del material que est en la base de todos los procesos vitales.
Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores mostraron su
preocupacin por los riesgo que se pueden realizar con dichas tcnicas, en varios pases se
crearon comits para discutir el uso y la aplicacin de tcnicas de ingeniera gentica.
Lamentablemente est limitada por fuerzas polticas y por la presin de las empresas
involucradas en el desarrollo y la comercializacin de los productos biotecnologas.1
Es necesario la participacin de cada ciudadano sobre la informacin para tener un criterio
respecto al tema ya que esto no puede ser resuelto solo por expertos, quien tiene la decisin
final es la sociedad en decidir qu se debe hacer.2
Ratones knockout.
Logros
El 7 de marzo de 2010 fue publicado en lnea y rectificado el 25 de marzo del mismo ao
en la revista Nature, una de las revistas cientficas ms prestigiosas del mundo, una
investigacin del Cinvestav Irapuato en colaboracin con cientficos de Estados Unidos y
Francia en la cual hallaron una protena llamada argonauta 9 con la que se podra llegar a
inducir la clonacin natural de las plantas, esto tendra un fuerte impacto en la industria de
semillas, y algunos dicen que podra revolucionar la produccin agrcola internacional.
Prueba de Paternidad
polimrficos; esto quiere decir que existen muchas variaciones genticas (alelos) de ese mismo
marcador en la poblacin. Los marcadores nucleares ms utilizados son los "microsatlites" y
existe un gran nmero de ellos en el genoma humano. .
Del DNA mitocondrial existen solo dos marcadores polimrficos de "variacin de secuencia",
las regiones HVR1 y HVR2, que se utilizan para identificar individuos. Los microsatlites
permiten representar en un electroferograma, aspectos de la estructura del DNA de una persona
en forma de espigas paralelas. Cada individuo presenta un cdigo de espigas de DNA nico.
El anlisis del DNA mitocondrial permite distinguir variaciones directamente en la secuencia
de niucletidos del DNA.
De cada uno de los marcadores nucleares existen dos copias, idnticas (homocigotos) o desiguales
(heterocigoto), en el DNA de un individuo. Una de las copias es heredada por la madre y la otra por
el padre del individuo. Si los 2 marcadores son iguales se observa una sola espiga y si los 2
marcadores son diferentes se observan 2 espigas.
Del DNA mitocondrial existen mltiples copias idnticas y todas son heredadas por la madre de tal
manera que todos los hijos de una mujer tienen el mismo DNA mitocondrial. .
Igualmente todos los tos o tas del lado materno de un individuo tienen el DNA mitocondrial idntico
a l mismo..
Para realizar el estudio se puede utilizar cualquier tejido o fluido biolgico que contenga
clulas, incluyendo sangre, hueso, semen, cabello, lquido amnitico, etc.
Para los casos de Paternidad se toma un exudado de la mucosa bucal o 1-2 ml. de sangre de la
madre, el hijo y el supuesto padre.
Se purifica el DNA de la muestra biolgica y los marcadores se amplifican mediante la tcnica de Reaccin
en Cadena de la Polimerasa (PCR) multiplex, utilizando el sistema "Ampf STR identifiler PCR amplification
kit", que contiene 15 marcadores microsatlites y un marcador para identificar el sexo (Amelogenina)
marcados con fluorescencia; se separan mediante electroforesis capilar y detectan en un analizador
automtico de DNA. Las variaciones en el DNA mitocondrial se detectan mediante la tcnica de
secuenciacin de DNA.
En el anlisis de paternidad se investiga si la posicin de una de las espigas de cada marcador gentico del
hijo coincide con una de las espigas de cada marcador gentico del padre putativo.
Para ello, primero se asignan las espigas de DNA de origen materno en el genotipo del hijo, puesto que la
madre no tiene duda de la maternidad; las espigas de DNA restantes en el genotipo del hijo deben coincidir
con la mitad de las espigas del DNA del padre.
Cules son los resultados que se pueden obtener con la prueba del DNA?
Una vez que se ha realizado el anlisis comparativo de DNA para investigar la paternidad, existen dos
resultados posibles.
Primero, cuando el patrn gentico no coincide entre el hijo y el supuesto padre, en cuando menos tres
marcadores genticos, la exclusin es absoluta. Para este caso, no se requiere una base de datos de gentica de
poblacin de los marcadores utilizados.
Segundo, el resultado puede ser de inclusin, en el caso que el supuesto padre comparte con el hijo una espiga
de DNA en cada marcador gentico analizado. Sin embargo, para este ltimo caso es necesario calcular la
Probabilidad de que la Coincidencia gentica sea al Azar (PCA).
La PCA se calcula en base a las frecuencias de los alelos de cada marcador gentico encontrados en la
poblacin mexicana. En los casos de inclusin, se utilizan 15 marcadores genticos, suficientes para alcanzar
una PCA igual o menos de 1 en 1000 millones.
Otras Pruebas de DNA
Maternidad:
Del DNA mitocondrial existen mltiples copias idnticas y todas son heredadas por la madre, de tal manera
que todos los hijos de una madre tienen el mismo DNA mitocondrial.
Hermandad:
Del DNA mitocondrial existen mltiples copias idnticas y todas son heredadas por la madre, se utiliza a
menudo para demostrar el parentesco maternal entre hermanos relacionados con la madre.
Relacin Abuelos Nietos:
Igualmente todos los nietos y nietas del lado materno de un individuo tienen el DNA mitocondrial idntico a
la madre.
Relacin Tos Sobrinos:
Igualmente todos los tos o tas del lado materno de un individuo tienen el DNA mitocondrial idntico a la
madre.
Patrn Gentico Individual:
Del DNA mitocondrial existen mltiples copias idnticas y todas son heredadas por la madre, de tal manera
que todos los hijos de una madre tienen el mismo DNA mitocondrial.
Herencias:
Base nitrogenada
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Apareamiento A=T con dos puentes de hidrgeno. Los puentes de hidrgeno se muestran
como lneas discontinuas.
Las bases nitrogenadas son compuestos orgnicos cclicos, que incluyen dos o ms tomos
de nitrgeno. Son parte fundamental de los nuclesidos, nucletidos, nucletidos cclicos
(mensajeros intracelulares), dinucletidos (poderes reductores) y cidos nucleicos.
Biolgicamente existen seis bases nitrogenadas principales (en realidad hay muchas ms),
que se clasifican en tres grupos, bases isoaloxaznicas (derivadas de la estructura de la
isoaloxazina), bases pricas o purinas (derivadas de la estructura de la purina) y bases
pirimidinas (derivadas de la estructura de la pirimidina). La flavina (F) es isoaloxaznica,
la adenina (A) y la guanina (G) son pricas, y la timina (T), la citosina (C) y el uracilo (U)
son pirimidnicas. Por comodidad, cada una de las bases se representa por la letra indicada.
Las bases A, T, G y C se encuentran en el ADN, mientras que en el ARN en lugar de timina
aparece el uracilo.
ndice
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2 Estructura
o 2.1 Isoaloxazinas
o 2.2 Purinas
o 2.3 Pirimidinas
[editar] Estructura
[editar] Isoaloxazinas
Base nitrogenada
Nuclesido
Flavina
Riboflavina
F
[editar] Purinas
Base nitrogenada
Nuclesido
Adenina
Adenosina
A
Guanina
Guanosina
G
[editar] Pirimidinas
Base nitrogenada
Nuclesido
Timina
Timidina
T
Citosina
Citidina
C
Uracilo
Uridina
Cronograma celular
Todas las actividades bioqumicas de la clula viva, incluyendo la multitud de
reacciones sintticas que producen sus molculas constituyentes (carbohidratos,
lpidos y protenas) dependen de diferentes enzimas especficas; an la sntesis de
enzimas depende de enzimas[1], cuya especificidad es el resultado de su estructura
primaria: la secuencia lneal de aminocidos en la molcula. El cmo y cundo se
construye esa estructura es responsabilidad del ADN[2].
Puesto que los pares de bases se asocian asimtricamente (tomando como referencia el
esqueleto de fosfato-azcar), un surco entre los hilos es ms ancho que el otro.
stos se llaman: el surco principal y el de menor importancia. Ambos proporcionan
oportunidades para las interacciones de las base-especficas, pero el surco principal satisface
mejor esa tarea y se observa ms a menudo como el sitio obligatorio y primario para comenzar
las transcripciones.
Existen muchos tipos de ARNt y cada uno es capaz de reconocer determinados grupos
de tres bases (codones) del ARNm. A cada triplete de nucletidos, los ARN de
transferencia hacen corresponder uno de los veinte aminocidos[3] que constituyen las
mayores cadenas polipptidas, las protenas. La informacin es inscripta de un trazo en
el ADN bacteriano[4], pero en los organismos superiores se ha descubierto hace una
decena de aos que la informacin gentica constituye un mosaico en los que la
informacin til es interrumpida por secuencias no codificantes, aparentemente
intiles, llamadas intrones (las secuencias codificantes son llamadas exones).En la
clula eucariote, en principio, el ARNm transcribe todo, intrones includos.
Las secuencias supernumerarias formarn los lazos que sern cortados al mismo
tiempo que los pedazos tiles del ARN sern recolectados. Este proceso es llamado
engrosado (el cual puede dar origen a ms de una forma diferente de empalme o
empalmes alternativos de los que puede resultar la formacin de ms de un
polipptido funcional, a partir de una trascripcin inicialmente idntica[5]); recin
entonces, la molcula engrosada de ARN mensajero maduro atraviesa la membrana
nuclear por los poros nucleares, ayudada por protenas particulares de ribo-ncleoprotenas (RNPs m).
En resumen, hasta aqu ...
Grfico 3. Trascripcin y traduccin del ADN en la clula eucariota
CLULA EUCARIOTA
detalle
TRANSCRIPCIN
TRADUCCIN
13 genes que codifican para ARNs mensajeros, y por lo tanto para 13 protenas.
22 genes que codifican para 22 tARNs (ARNs de transferencial) y 2 genes que
codifican para dos rRNAs mitocondriales (RNAs ribosmicos).
Adems de las protenas que la mitocondria puede sintetizar por si misma, necesita
importar algunas otras sintetizadas en el ncleo.
De igual forma, los lpidos que forman las membranas externa e interna de la
mitocondria son importadas.
En el cuadro a la
derecha, la
frmula qumica
de los
aminocidos (en
color negro la
parte comn,
mientras que en
color azul puede
verse la parte
variable, que da
a los
aminocidos
distinto
comportamiento:
naranja =
aminocidos
hidrfobos;
verde =
aminocidos
polares;
magenta =
aminocidos
cidos; ciano =
aminocidos
bsicos
El primer genoma cuya secuencia completa de nucletidos fue conocida, fue la del ADN del
bacterifago X174, descubierto por Frederick Sanger, lo que le vali su segundo premio Nbel,
en 1980. Cuando comenz, los enunciados bsicos eran:
NOTAS:
[1]
La enzima es una protena globular -tal como se explic en la nota 12- que acelera
las reacciones qumicas, cada enzima lo hace sobre una sustancia en particular: es un
catalizador que opera disminuyendo la energa de activacin del modo necesario para
una reaccin al formar una asociacin pasajera con las molculas con las que reacciona
-llamadas sustrato-, tambin puede debilitar los enlaces qumicos existentes,
facilitando la formacin de nuevos; como resultado, la reaccin ocurre ms
rpidamente. El nombre de cada tipo de enzima est dado por el sustrato sobre el que
acta + el sufijo -asa (v.gr., la sacarasa es la enzima que actuando sobre la sacarosa,
cataliza para glucosa y fructuosa)
[2]
En 1941, el equipo formado por los cientficos Edward Tatum y George Beadle, a la
sazn en el laboratorio establecido en 1909 por Thomas Morgan en la Universidad de
Columbia, cuna de la gentica norteamericana, pudo establecer, sobre la evidencia de
los experimentos realizados en un moho rojo del pan -la Neurospora crassa-, que las
mutaciones genticas daban como resultado la prdida de la capacidad para sintetizar
diferentes aminocidos. Estos experimentos, sumados a la evidencia circunstancial
dada por la abundancia de ARN en el citoplasma -lugar donde se lleva a cabo la mayor
parte de los procesos de sntesis de protenas-, llevaron a Francis Crick a establecer el
llamado dogma central de la gentica molecular: la informacin gentica
contenida en el ADN fluye hacia el ARN, el que a su vez especfica protenas,
un camino de una sola va que permite afirmar la influencia del genotipo (ADN) sobre el
fenotipo, al dictar la secuencia de las protenas; sin embargo, stas no alteran el
genotipo, es decir, las protenas no envan instrucciones al genotipo. La excepcin al
dogma central es un proceso conocido como trascripcin inversa, en la cual la
informacin codificada por ciertos virus de ARN se transcribe a ADN.
[3]
Los aminocidos son cidos en los cuales uno o ms tomos de carbono tienen un
grupo amino (derivado del amonaco en el que uno o ms tomos de hidrgeno se han
sustitudo por radicales hidrocarbonados), de los 70 conocidos, slo 20 se encuentran
en las protenas y ellos son:
no polares
polares
de carga +
de carga -
cido ribonucleico
ARN redirige aqu. Para otras acepciones, vase ARN (desambiguacin).
RNA redirige aqu. Para otras acepciones, vase RNA (desambiguacin).
ARN mensajero.
El cido ribonucleico (ARN o RNA) es un cido nucleico formado por una cadena de ribonucletidos.
Est presente tanto en las clulasprocariotas como en las eucariotas, y es el nico material gentico de
ciertos virus (virus ARN). El ARN celular es lineal y de hebra sencilla, pero en el genoma de algunos
virus es de doble hebra.
En los organismos celulares desempea diversas funciones. Es la molcula que dirige las etapas
intermedias de la sntesis proteica; el ADN no puede actuar solo, y se vale del ARN para transferir esta
informacin vital durante la sntesis de protenas (produccin de las protenas que necesita la clula
para sus actividades y su desarrollo). Varios tipos de ARN regulan la expresin gnica, mientras que
otros tienen actividadcataltica. El ARN es, pues, mucho ms verstil que el ADN.
ndice
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1 Descubrimiento e historia
2 Estructura qumica
3 Estructura secundaria
4 Estructura terciaria
5 Biosntesis
6 Tipos de ARN
6.1 ARN implicados en la sntesis de protenas
6.2.7 Riboswitch
6.3 ARN con actividad cataltica
6.3.1 Ribozimas
6.3.2 Espliceosoma
[editar]Descubrimiento
e historia
Los cidos nucleicos fueron descubiertos en 1868 por Friedrich Miescher, que los llam nuclena ya que
los aisl del ncleo celular.1 Ms tarde, se comprob que las clulas procariotas, que carecen de ncleo,
tambin contenan cidos nucleicos. El papel del ARN en la sntesis de protenas fue sospechado
en 1939.2 Severo Ochoa gan el Premio Nobel de Medicina en 1959 tras descubrir cmo se sintetizaba
el ARN.3
En 1965 Robert W. Holley hall la secuencia de 77 nucletidos de un ARN de transferencia de
una levadura,4 con lo que obtuvo el Premio Nobel de Medicina en 1968. En 1967, Carl Woese comprob
las propiedades catalticas de algunos ARN y sugiri que las primeras formas de vida usaron ARN como
portador de la informacin gentica tanto como catalizador de sus reacciones metablicas (hiptesis del
mundo de ARN).5 6 En 1976, Walter Fiers y sus colaboradores determinaron la secuencia completa del
ARN del genoma de un virus ARN (bacterifago MS2).7
En 1990 se descubri en Petunia que genes introducidos pueden silenciar genes similares de la misma
planta, lo que condujo al descubrimiento del ARN interferente.8 9 Aproximadamente al mismo tiempo se
hallaron los micro ARN, pequeas molculas de 22 nucletidos que tenan algn papel en
eldesarrollo de Caenorhabditis elegans.10 El descubrimiento de ARN que regulan la expresin gnica ha
permitido el desarrollo de medicamentos hechos de ARN, como los ARN pequeos de interferencia que
silencian genes.11
[editar]Estructura
qumica
Como el ADN, el ARN est formado por una cadena de monmeros repetitivos llamados nucletidos.
Los nucletidos se unen uno tras otro mediante enlaces fosfodister cargados negativamente.
Cada nucletido est formado por una molcula de monosacrido de cinco carbonos (pentosa)
llamada ribosa(desoxirribosa en el ADN), un grupo fosfato, y uno de cuatro posibles compuestos
nitrogenados llamados bases: adenina, guanina, uracilo (timina en el ADN) y citosina.
ARN
ADN
Pentosa
Ribosa
Desoxirribosa
Purinas
Adenina y Guanina
Adenina y Guanina
Pirimidinas
Citosina y Uracilo
Citosina y Timina
Los carbonos de la ribosa se numeran de 1' a 5' en sentido horario. La base nitrogenada se une al
carbono 1'; el grupo fosfato se une al carbono 5' y al carbono 3' de la ribosa del siguiente nucletido. El
fosfato tiene una carga negativa a pH fisiolgico lo que confiere al ARN carcter polianinico. Las
bases pricas (adenina y guanina) pueden formar puentes de hidrgeno con las pirimidnicas (uracilo y
citosina) segn el esquema C=G y A=U.12 Adems, son posibles otras interacciones, como el
apilamiento de bases13 o tetrabucles con apareamientos G=A.12
Muchos ARN contienen adems de los nucletidos habituales, nucletidos modificados, que se originan
por transformacin de los nucletidos tpicos; son carcatersticos de los ARN de transferencia (ARNt) y
el ARN ribosmico (ARNr); tambin se encuentran nucletidos metilados en el ARN
mensajero eucaritico.14
[editar]Estructura
secundaria
A diferencia del ADN, las molculas de ARN son de cadena simple y no suelen formar dobles hlices
extensas. No obstante, s se pliega como resultado de la presencia de regiones cortas con
apareamiento intramolecular de bases, es decir, pares de bases formados por secuencias
[editar]Estructura
terciaria
La estructura terciaria del ARN es el resultado del apilamiento de bases y de los enlaces por puente de
hidrgeno entre diferentes partes de la molcula. Los ARNt son un buen ejemplo; en disolucin, estn
plegados en forma de "L" compacta estabilizada por apareamientos de Watson y Crick convencionales
(A=U, C=G) y por interacciones de bases entre dos o ms nucletidos, como tripletes de bases; las
bases pueden donar tomos dehidrgeno para unirse al esqueleto fosfodister; el OH del carbono 2' de
la ribosa es tambin un importante dador y aceptor de hidrgenos.
[editar]Biosntesis
Artculo principal: Transcripcin gentica.
La biosntesis de ARN est catalizada normalmente por la enzima ARN polimerasa que usa una hebra
de ADN como molde, proceso conocido con el nombre de transcripcin. Por tanto, todos los ARN
celulares provienen de copias de genes presentes en el ADN.
La transcripcin comienza con el reconocimiento por parte de la enzima de un promotor, una secuencia
caracterstica de nucletidos en el ADN situada antes del segmento que va a transcribirse; la doble
hlice del ADN es abierta por la actividad helicasa de la propia enzima. A continuacin, la ARN
polimerasa progresa a lo largo de la hebra de ADN en sentido 3' 5', sintetizando una molcula
complementaria de ARN; este proceso se conoce como elongacin, y el crecimiento de la molcula de
ARN se produce en sentido 5' 3'. La secuencia de nucletidos del ADN determina tambin dnde
acaba la sntesis del ARN, gracias a que posee secuencias caractersticas que la ARN polimerasa
reconoce como seales de terminacin.18
Tras la transcripcin, la mayora de los ARN son modificados por enzimas. Por ejemplo, al pre-ARN
mensajero eucariota recin transcrito se le aade un nucletido de guanina modificado (7Metilguanosina) en el extremo 5' por medio de un puente de trifosfato formando un enlace 5' 5' nico,
tambin conocido como "capucha" o "caperuza", y una larga secuencia de nucletidos de adenina en el
extremo 3' (cola poli-A); posteriormente se le eliminan los intrones (segmentos no codificantes) en un
proceso conocido como splicing.
En virus, hay tambin varias ARN polimerasas ARN-dependientes que usan ARN como molde para la
sntesis de nuevas molculas de ARN. Por ejemplo, varios virus ARN, como los poliovirus, usan este tipo
de enzimas para replicar su genoma.19 20
[editar]Tipos
de ARN
El ARN mensajero (ARNm) es el tipo de ARN que lleva la informacin del ADN a los ribosomas, el lugar
de la sntesis de protenas. La secuencia de nucletidos del ARNm determina la secuencia
de aminocidos de la protena.21 Por ello, el ARNm es denominado ARN codificante.
No obstante, muchos ARN no codifican protenas, y reciben el nombre de ARN no codificantes; se
originan a partir de genes propios (genes ARN), o son los intrones rechazados durante el proceso
de splicing. Son ARN no codificantes el ARN de transferencia (ARNt) y el ARN ribosmico (ARNr), que
son elementos fundamentales en el proceso de traduccin, y diversos tipos de ARN reguladores.22
Ciertos ARN no codificantes, denominados ribozimas, son capaces de catalizar reacciones qumicas
como cortar y unir otras molculas de ARN,23 o formar enlaces peptdicos entreaminocidos en el
ribosoma durante la sntesis de protenas.24
[editar]ARN
Ribosoma 50S mostrando el ARNr (amarillo), las protenas (azul) y elcentro activo, la adenina 2486 (rojo).
[editar]ARN mensajero
El ARN mensajero (ARNm o RNAm) lleva la informacin sobre la secuencia de aminocidos de
la protena desde el ADN, lugar en que est inscrita, hasta el ribosoma, lugar en que se sintetizan las
protenas de la clula. Es, por tanto, una molcula intermediaria entre el ADN y la protena y el apelativo
de "mensajero" es del todo descriptivo. En eucariotas, el ARNm se sintetiza en
el nucleoplasma del ncleo celular y de all accede al citosol, donde se hallan los ribosomas, a travs de
los poros de la envoltura nuclear.
[editar]ARN de transferencia
Los ARN de transferencia (ARNt o tRNA) son cortos polmeros de unos 80 nucletidos que transfiere un
aminocido especfico al polipptido en crecimiento; se unen a lugares especficos del ribosoma durante
la traduccin. Tienen un sitio especfico para la fijacin del aminocido (extremo 3') y
unanticodn formado por un triplete de nucletidos que se une al codn complementario del ARNm
mediante puentes de hidrgeno.22
[editar]ARN ribosmico
El ARN ribosmico (ARNr o RNAr) se halla combinado con protenas para formar los ribosomas, donde
representa unas 2/3 partes de los mismos. En procariotas, la subunidad mayor del ribosoma contiene
dos molculas de ARNr y la subunidad menor, una. En los eucariotas, la subunidad mayor contiene tres
molculas de ARNr y la menor, una. En ambos casos, sobre el armazn constituido por los ARNr se
asocian protenas especficas. El ARNr es muy abundante y representa el 80% del ARN hallado en
el citoplasma de las clulas eucariotas.25 Los ARN ribosmicos son el componente cataltico de los
ribosomas; se encargan de crear los enlaces peptdicos entre los aminocidos del polipptido en
formacin durante la sntesis de protenas; actan, pues, como ribozimas.
[editar]ARN
reguladores
Muchos tipos de ARN regulan la expresin gnica gracias a que son complementarios de regiones
especficas del ARNm o de genes del ADN.
[editar]ARN de interferencia
Los ARN interferentes (ARNi o iRNA) son molculas de ARN que suprimen la expresin de genes
especficos mediante mecanismos conocidos globalmente como ribointerferencia o interferencia por
ARN. Los ARN interferentes son molculas pequeas (de 20 a 25 nuclotidos) que se generan por
fragmentacin de precursores ms largos. Se pueden clasificar en tres grandes grupos: 26
[editar]Micro ARN
Los micro ARN (miARN o RNAmi) son cadenas cortas de 21 22 nucletidos hallados en clulas
eucariotas que se generan a partir de precursores especficos codificados en el genoma. Al transcribirse,
se pliegan en horquillas intramoleculares y luego se unen a enzimas formando un complejo efector que
puede bloquear la traduccin del ARNm o acelerar su degradacin comenzando por la eliminacin
enzimtica de la cola poli A.27 28
[editar]ARN antisentido
Un ARN antisentido es la hebra complementaria (no codificadora) de un hebra ARNm (codificadora). La
mayora inhiben genes, pero unos pocos activan la transcripcin. 37 El ARN antisentido se aparea con su
ARNm complementario formando una molcula de doble hebra que no puede traducirse y es degradada
enzimticamente.38 La introduccin de un transgen codificante para un ARNm antisentido es una tcnica
usada para bloquear la expresin de un gen de inters. Un mARN antisentido marcado radioactivamente
puede usarse para mostrar el nivel de transcripcin de genes en varios tipos de clulas. Algunos tipos
estructurales antisentidos son experimentales, ya que se usan como terapia antisentido.
[editar]Riboswitch
Un riboswitch es una parte del ARNm (cido ribonucleico mensajero) al cual pueden unirse pequeas
molculas que afectan la actividad del gen. 41 42 43 Por tanto, un ARNm que contenga un riboswitch est
directamente implicado en la regulacin de su propia actividad que depende de la presencia o ausencia
de la molcula sealizadora. Tales riboswitchs se hallan en la regin no traducida 5' (5'-UTR), situada
antes del codn de inicio (AUG), y/o en la regin no traducida 3' (3'-UTR), tambin llamada secuancia de
arrastre,14 situada entre el codn de terminacin (UAG, UAA o UGA) y la cola poli A. 43
[editar]ARN
[editar]Ribozimas
El ARN puede actuar como biocatalizador. Ciertos ARN se asocian a protenas
formando ribonucleoprotenas y se ha comprobado que es la subunidad de ARN la que lleva a cabo las
reacciones catalticas; estos ARN realizan las reacciones in vitro en ausencia de protena. Se conocen
cinco tipos de ribozimas; tres de ellos llevan a cabo reacciones de automodificacin, como eliminacin
de intrones o autocorte, mientras que los otros (ribonucleasa P y ARN ribosmico) actan sobre
substratos distintos.14 As, la ribonucleasa P corta un ARN precursor en molculas de ARNt, 44 mientras
que el ARN ribosmico realiza el enlace peptdico durante la sntesis proteica ribosomal.
[editar]Espliceosoma
Los intrones son separados del pre-ARNm durante el proceso conocido como splicing por los
espliceosomas, que contienen numerosos ARN pequeos nucleares (ARNpn o snRNA).45 En otros
casos, los propios intrones actan como ribozimas y se separan a si mismos de los exones.46
Los ARN pequeos nucleolares (ARNpno o snoRNA), hallados en el nuclolo y en los cuerpos de Cajal,
dirigen la modificacin de nucletidos de otros ARN; 22 el proceso consiste en transformar alguna de las
cuatro bases nitrogenadas tpicas (A, C, U, G) en otras. Los ARNpno se asocian con enzimas y los
guan aparendose con secuencias especficas del ARN al que modificarn. Los ARNr y los ARNt
contienen muchos nucletidos modificados.47 48
[editar]ARN
mitocondrial
La mitocondrias tienen su propio aparato de sntesis proteica, que incluye ARNr (en los ribosomas),
ARNt y ARNm. Los ARN mitocondriales (ARNmt o mtARN) representan el 4% del ARN celular total. Son
transcritos por una ARN polimerasa mitocondrial especfica.14
[editar]Genomas
de ARN
El ADN es la molcula portadora de la informacin gentica en todos los organismos celulares, pero, al
igual que el ADN, el ARN puede guardar informacin gentica. Los virus ARN carecen por completo de
ADN y su genoma est formado por ARN, el cual codifica las protenas del virus, como las de
la cpside y algunos enzimas. Dichos enzimas realizan la replicacin del genoma vrico.
Los viroides son otro tipo de patgenos que consisten exclusivamente en una molcula de ARN que no
codifica ninguna protena y que es replicado por la maquinaria de la clulahospedadora.49
[editar]Hiptesis
La hiptesis del mundo de ARN propone que el ARN fue la primera forma de vida en la Tierra,
desarrollando posteriormente una membrana celular a su alrededor y convirtindose as en la primera
clula. Se basa en la comprobacin de que el ARN puede contener informacin gentica, de un modo
anlogo a como lo hace el ADN, y que algunos tipos son capaces de llevar a cabo reacciones
metablicas, como autocorte o formacin de enlaces peptdicos.
Durante aos se especul en qu fue primero, el ADN o las enzimas, ya que las enzimas se sintetizan a
partir del ADN y la sntesis de ADN es llevada a cabo por enzimas. Si se supone que las primeras
formas de vida usaron el ARN tanto para almacenar su informacin gentica como realizar su
metabolismo, se supera este escollo. Experimentos con los ribozimas bsicos, como elARN viral Q-beta,
han demostrado que las estructuras de ARN autorreplicantes sencillas pueden resistir incluso a fuertes
presiones selectivas (como los terminadores de cadena de quiralidadopuesta).50
[editar]Problemas
de nomenclatura
Aunque en todo el mundo hispano ARN significa "cido Ribonucleico", internacionalmente esas siglas
significan "Adenosn RiboNucletido". Se debe tener en cuenta que el mundo de la investigacin se
mueve en ingls, y en ese idioma cualquiera que vea ARN entender Adenosn Ribonucletido, siendo
el cido ribonucleico RNA.[cita requerida]