Reporte de prctica de laboratorio

Aislamiento e identificacin de enterobacterias del

agua
Introduccin
Eneterobcaterias (Enterobacteriaceae)
Son una familia de bacterias Gram negativas que contiene ms de 30 gneros y ms
de 100 especies que pueden tener morfologa de bacilos o cocos. Los miembros de
esta familia forman parte de la flora al (llamados coliformes) y de otros rganos del ser
humano y de otras especies animales. Algunas especies pueden vivir en tierra, en
plantas o en animales acuticos, o tambin se les pueden encontrar en el suelo o en el
agua.
En la definicin clsica de una Enterobacteriaceae se usan siete criterios bsicos,
adicional a la aparicin de nuevos mtodos taxonmicos para incluir a ciertos gneros
que no cumplen con todos los siguientes criterios, pero que forman parte de esta
familia:

Son bacterias gramnegativas, la mayora bacilos, otros cocobacilos y

otros pleomrficos.
No son exigentes, son de fcil cultivo.

Son oxidasa negativo, es decir, carecen de la enzima citocromo oxidasa.

Son capaces de reducir nitrato en nitrito.

Son anaerbicos facultativos.

Son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaerbicas con o sin la

produccin de gas (en especial glucosa y lactosa), y oxidadores de una amplia
gama de substratos en condiciones aerbicas.

Muchos gneros tienen un flagelo que sirve para desplazarse, aunque

algunos gneros no son mviles.

Algunos de estos miembros se asocian a enfermedades en el hombre como: Shigella,

Salmonella, Yersinia pestis.

A grandes rasgos los pasos para la identifiacin de las enterobacterias utilizados en

esta prctica son:
Determinar si alguna de las bacterias recolectadas pertenece al gnero de
Enterobacteriaceae ya sea por medio de tincin de Gram (para revelar bacilos y
cocobacilos), tambin por medio de las caractersticas morfolgicas de la colonia en
crecimiento, y por ltimo el uso de pruebas bioqumicas que reaccionan con las
enzimas del metabolismo que caracterizan a las bacterias.
El mtodo de aislamiento usado fue el Agar MacConkey, ste es un medio diferencial
para la seleccin y recuperacin de Enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos
entricos relacionados. Contiene sales biliares y cristal violeta que inhiben el
crecimiento de bacterias grampositivas y de algunas gramnegativas exigentes.
Contiene lactosa como nica fuente de carbono. Las bacterias fermentadoras de
lactosa producen colonias que tienen distintos tonos de color rojo, debido al cambio por
la produccin de cidos mixtos del colorante indicador rojo neutro (color rojo a un pH
menor de 6.8). Las colonias de bacterias no fermentadoras de lactosa aparecen sin
color y transparentes.
Las pruebas bioqumicas utilizadas se realizaron con el fin de identificar en las
bacterias: utilizacin de carbohidratos, produccin de catalasa, produccin de indol,
rojo de metilo (produccin de cidos fuertes a partir de glucosa), prueba de
Voges.Proskauer (conservacin de acetil-metil-carbonil), utilizacin de citrato,
produccin de ureasa, produccin de cido sulfhdrico, movilidad, reduccin de nitratos.

Objetivos
Objetivo General
-Aprender a utilizar los mtodos bsicos para el aislamiento e identificacin de
Enterobacterias a partir de muestras de agua.
Objetivos especficos.
-Aprender a sembrar una muestra de bacterias a partir de estra cruzada para
obtener colonias aisladas.
-Observar y determinar las caractersticas microscpicas y macroscpicas de
las colonias aisladas.
-Aprender a obtener un cultivo puro.
-Realizar las pruebas bioqumicas para identificar Enterobacterias y conocer su
fundamento terico.
-Interpretar las pruebas bioqumicas e identificar las colonias aisladas.
-Que la metodologa utilizada en esta prctica sea de apoyo para el desarrollo
del proyecto de investigacin modular.

Metodologa (Bitcora)

Primera Sesin
Preparacin de muestras y cultivo en un medio selectivo
-Se solicit el material en interlaboratorio de cristalera-reactivos y en el
interlaboratorio de equipo lo necesario para trabajar en esta sesin.
Pasos realizados
1.- Se esteriliz la zona de trabajo con solucin de Hipoclorito de Sodio al
10% y el mechero encendido sobre la mesa.
2.- Se procedi a la siembra del cultivo (por duplicado) con la muestra
de agua sucia en el medio agar MacConkey
3.- Realizamos la dilucin de la muestra de agua sucia en tubo de 16 x
150mm agregando 9ml de SSI estril y 1ml de muestra; agitamos 5
veces procurando que el tapn no se mojara.
4.- Se etiquetaron las cajas de Petri para la identificacin del tipo de
bacteria cultivada con datos como: equipo, grupo, nmero de muestra y
fecha.
5.- Procedimos a sembrar por duplicado tanto a la muestra de agua
concentrada, como a la diluida.
6.- Tomamos una pequea porcin de agua sucia con un hisopo, se
descarg su contenido en la caja de agar MacConkey estril
correspondiente.
7.- Esterilizamos el asa bacteriolgica al rojo vivo en la flama del
mechero, la enfriamos en un borde del agar, y estriamos el inculo
(estra cruzada).
8.- Repetimos estos pasos para las muestras correspondientes.
9.- Se sellaron por los extremos las cajas de siembra.
10.- Guardamos las cajas de agar MacConkey con la tapa hacia abajo en
la estufa, para su incubacin a 37 C durante 24 horas.

11.- Para concluir la sesin, limpiamos la zona de trabajo de nuevo con

la solucin de Hipoclorito de Sodio al 10%, vertimos en los frascos de las
muestras y enjuagamos las pipetas con este mismo compuesto durante
20 minutos.
-Se devolvi el material solicitado en buenas condiciones al
interlaboratorio de cristalera-reactivos y al interlaboratorio de equipo
--Fin primera sesin-Segunda sesin
Aislamiento y observacin de las caractersticas macroscpicas
y microscpicas de las enterobacterias.
Con el resultado favorable por el crecimiento de las bacterias en el
cultivo de Agar MacConkey continuamos con la realizacin de la segunda
sesin y consiste en tres puntos muy destacables.
I.

Seleccin de las colonias desarrolladas en el Agar MacConkey.

II.
Resiembra de las colonias desarrolladas en el Agar MacConkey
para obtener un cultivo puro de bacterias.
III.

Observacin microscpica de los cultivos seleccionados.

Seleccin de las colonias desarrolladas en el Agar

MacConkey.
Se observaron las caractersticas macroscpicas morfolgicas de cada
una de las colonias bacterianas.
Se seleccionaron 6 colonias aisladas que presentaran las siguientes
caractersticas (2 de cada tipo):
-Colonias rojas
-Colonias levemente rosadas
-Colonias blancas
Resiembra de las colonias desarrolladas en el Agar
MacConkey para obtener un cultivo puro de bacterias.

1.- Para realizar la separacin de colonias nos ayudamos con el asa

bacteriolgica estril; de cada una de las colonias observadas
macroscpicamente se obtendr un cultivo puro.
2.- Con una nueva caja de Agar marcada previamente y con ayuda del
asa depositamos y separamos las diferentes colonias, realizando una
estra cerrada.
3.- Al concluir la resiembra en las cajas de Agar los hemos sellado y
etiquetado para observar su posterior desarrollo, para que este
procedimiento tenga xito, el cultivo necesita permanecer a una
temperatura de 37 C durante 24 horas.
Observacin microscpica de los cultivos seleccionados.
El procedimiento utilizado en esta ocasin es la Tincin de Gram para
poder diferenciar las estructuras de la pared celular de las distintas
colonias de bacterias, en este caso: rojas, rosadas, blancas y
transparentes.
La tincin involucra el cristal violeta, como colorante primario, yodocristal violeta, alcohol-acetona y safranina. Las bacterias gramnegativas
aparecen rojas o rosadas al observarlos por el microscopio debido a que
se tien con la safranina.
a) Preparacin del Frotis: Antes de realizar la observacin de los
cultivos puros seleccionados tomamos muy en cuenta las indicaciones
para a preparacin del frotis:
1.- Se lavaron y desinfectaron con alcohol-acetona los porta objetos con
la intencin de librarlos de toda imperfeccin, esto para la mejor
observacin microscpica de las bacterias.
2.- Para la observacin se recogi y deposito en los porta objetos una
pequea porcin de colonia aislada.
3.- Cada porta objetos fue marcado para su mejor identificacin,
procurando no utilizar grandes cantidades de colorantes y trabajando
dentro de la zona estril.
4.- La muestra de colonias fueron mescladas homogneamente con SSI
estril y su fijacin fue dada por el calor del mechero procurando no
calcinar las bacterias.

b) Tincin de Gram
5.- Se cubri el frotis con cristal violeta durante 1 minuto, despus se
escurri el colorante y se lavo con la solucin de lugol. Se cubri el frotis
con lugol durante 1 minuto.
6.- Con un goteo suave de agua se elimino el exceso de lugol y
posteriormente con un goteo lento de uno de los extremos con alcoholacetona durante 30 segundos se eliminaron los excesos de colorantes.
7.- Por ultimo se cubri la preparacin con safranina durante 1 minuto y
lavamos con agua de la llave, dejamos secar la preparacin al aire
perfectamente para evitar que la observacin se vea obstruida por algn
contaminante.
8.- En la observacin microscpica pudimos notar peculiares
caractersticas en diferentes enfoques: con el objetivo 10X (seco dbil) el
objetivo 40X (seco fuerte) y con el objetivo 100X (inmersin) este ultimo
con ayuda de una gota de aceite de inmersin.
9.- Al terminar la observacin de las diferentes muestras limpiamos,
ordenamos y desinfectamos nuestro lugar de trabajo con la solucin de
Hipoclorito de Sodio al 10%.
10.-Los cultivos puros fueron guardados para la prxima sesin en la
estufa a 37C.
--Fin segunda sesin
Tercera sesin
Pruebas bioqumicas para enterobacterias.
1.- Se solicit el material en el interlaboratorio de cristalera y reactivos
y en el interlaboratorio de equipo lo necesario para trabajar en esta
sesin, esterilizamos la zona de trabajo con la solucin de Hipoclorito de
Sodio al 10% y el mechero encendido sobre la mesa.
2.- En la resiembra se observ el crecimiento de tres colonias: rosadas,
blancas y rojas en los dos medios de cultivo.
3.- Lavamos los portaobjetos con agua y jabn, para desengrasarlos,
colocamos unas gotas de alcohol acetona y frotamos la superficie
inmediatamente con una toalla de papel secante.

4.- Procedimos a realizar la observacin de cada muestra aislada de

bacterias por Tincin de Gram para determinar sus caractersticas.
5.- Etiquetamos los tubos de medio de cultivo y procedimos a realizar las
siguientes pruebas.
a) PRUEBA CATALASA
Colocamos con el asa bacteriolgica una porcin del cultivo puro
de las bacterias del medio MacConkey sobre el portaobjetos,
agregamos una gotita de agua oxigenada sobre la muestra.
b) PRUEBA OXIDASA
Con el asa bacteriolgica colocamos una porcin del cultivo puro y
lo extendimos sobre un papel filtro whatman No. 1 esteril de 2 x 3
cm y sobre ste adicionamos dos gotas del reactivo para la prueba
oxidasa.
c) VOGES PROSKAUER
Con el asa bacteriolgica tomamos un inoculo denso del cultivo
puro y lo resuspendimos en dos tubos de caldo VP-RM (VogesProskauer/ Rojo de metilo), dos tubos por colonia aislada.
d) CITRATO DE SIMMONS
Con el asa bacteriolgica tomamos un inoculo ligero del cultivo
puro y lo sembramos en forma de estra abierta sobre el rea
inclinada del medio inclinado de Citrato de Simmons, cuidando no
puncionar la capa profunda del medio, ya que sirve de control de
color.

e) INDOL
Con el asa bacteriolgica recta, colectamos un inoculo poco denso del
cultivo puro de bacterias y lo sembramos por picadura en el medio SIM
introducindolo por el centro hasta 3mm del fondo del tubo y extrajimos
el asa siguiendo la estra formada al picar el medio.
f) CALDO UREA

Con el asa bacteriolgica colectamos un inoculo poco denso del cultivo

puro de bacterias y lo sembramos en el caldo urea.
g) AGAR HIERRO TRIPLE AZUCAR (TSI)
Con el asa bacteriolgica recta, colecta un inoculo poco denso del cultivo
puro de bacterias lo sembramos por picadura en el fondo y en forma de
estra en la superficie.
6.- Incubamos los tubos de las pruebas 3, 4, 5, 6 y 7 a una temperatura
de 37 durante 24 horas.
7.- Para concluir la sesin, limpiamos la zona de trabajo con la solucin
de Hipoclorito de Sodio al 10% y se regres el material solicitado en
buenas condiciones.
--Fin tercera sesin-Cuarta sesin
Identificacin de las enterobacterias.
1.- Se solicit el material necesario en interlaboratorio de
cristalera/reactivos y en interlaboratorio de equipo para trabajar en esta
4 sesin, se procedi a esterilizar la zona de trabajo con la solucin de
Hipoclorito de Sodio al 10% y el mechero encendido sobre la mesa.
2.- Una vez que nos fueron entregadas las resiembras, que se realizaron
por triplicado en tubos, segn la clase de colonias que se presentaron
(control, rojo e incoloro), se procedi a realizar las siguientes pruebas
bioqumicas:
a) Voges-Proskauer. Usando una pipeta de 1ml adicionamos a cada
una de las resiembras de caldo Voges-Proskauer contenidas en tubos, los
siguientes reactivos:
a) 0.6 ml de solucin etlica de -naftol al 5%
b) 0.2 ml de solucin de KOH al 40%
Dejamos en reposo 15 minutos las 3 muestras (control, rojo, incoloro)
b) Rojo de Metilo. Se agregan 2 gotas del indicador rojo de metilo,
usando gotero del frasco a 3 muestras del caldo Voges-Proskauer,
agitamos unos segundos.

c) Citrato de Simmons. Se realiza una observacin macroscpica de

cada una de las muestras (control, rojo, incoloro).
d) Indol. Se agregaron 2 gotas de reactivo Kovac al tubo inoculado del
medio SIM, se deja reposar durante 3 minutos.
e) Acido sulfhdrico (H2S). Se realiza una observacin macroscpica
de cada una de las muestras (control, rojo, incoloro).
f) Movilidad. Se realiza una observacin macroscpica de cada una de
las muestras (control, rojo, incoloro).
g) TSI (hierro triple azcar). Se realiza una observacin macroscpica
de cada una de las muestras (control, rojo, incoloro).
Manejo de material contaminado
Para concluir la sesin:
-Limpiamos y desinfectamos la zona de trabajo con la solucin de
Hipoclorito de Sodio al 10%
-Recogimos y depositamos la basura en el lugar destinado para ello
-Quitamos las etiquetas a los tubos y los llevamos al lugar indicado para
su esterilizacin
-Regresamos a laboratorio con tubos estriles y procedimos a lavarlos
con agua de la llave y jabn
-Colocamos los tubos boca abajo en las gradillas con el fin de escurrir el
exceso de agua en ellos
-Se devolvieron los tubos limpios y desinfectados al tcnico
laboratorista, para su resguardo
-- Fin cuarta sesin-Resultados

Cultivos obtenidos

Cultivo diluido 1

Preparacin de la siembra
Cultivo concentrado 1

Cultivo concentrado 2

Tabla 1 de resultados
MORFOLOGIA COLONIAL
Caracterstica
Forma

Colonia 1
Puntiforme, circular

Colonia 2
Puntiforme, circular

Colonia3
Puntiforme, circular

Color
Elevacin
Borde
Consistencia
Tamao
Opacidad
Superficie
Tincin de
Gram

Roja
Alta
Ondulados, erosionado
Pegajosa
Grande
Notable
Rugosa, anillos
concntricos
Negativa

Rosada
Baja
Erosionado, lobulado
Pegajosa
Chica
Poca
Lisa, con anillos
concntricos
Negativa

Blanca
Alta
Ondulados, erosionado
Pegajosa
Grande
Poca
Lisa, con anillos
concntricos
Negativa

Resiembras

Resiembra 1

Resiembra 2

Pruebas Bioqumicas
Resultado

Colonia roja

Colonia rosada

Colonia blanca

Catalasa

Positiva, se
observaron
demasiadas
burbujas

Positiva

Positiva

Resultado
Oxidasa

Colonia roja
Negativa,
tercera en
teirse

Colonia rosada
Negativa,
segunda en
teirse

Colonia blanca
Negativa, fue la
primera en
teirse

MUESTR
A
Control
Rojo
Incoloro
(Rosada)

TSI

GAS

H2S

Sin
cambio

Sin
cambio

Sin
cambi
o

A/a

Alc/a

RM

VP

Retardad
a
Retardad
a

Sin
cambi
o

IND

CIT

Sin
Sin
cambio cambio

URE

MOV

Sin
cambio

Sin
cambio

(-)(+)

(-)(+)

Tincin de Gram
Colonia Roja (Tincin roja -)
Colonia Rosa
roja -)

Objetivo 10x

Objetivo 40x
Objetivo 40x

Colonia Blanca
(Tincin roja -)
(Tincin

Objetivo 10x

Objetivo 10x

Objetivo 40x

Objetivo 100x
Objetivo 100x

Objetivo 100x
Discusin de resultados

De acuerdo con la metodologa planteada en la prctica, todos los

cultivos se realizaron con xito, promoviendo la seleccin de bacterias
por el Medio agar MacConkey. Para nuestras resiembras, conseguimos
cultivos totalmente puros a la observacin macroscpicamente.
Para nuestra observacin microscpica, obtuvimos las tres colonias con
resultado gramnegativo, lo cual nos confirma la presencia de
enterobacterias de acuerdo a la teora.
En la prueba de catalasa, las 3 colonias mostraron una reaccin
positiva, ya que la mayora de las bacterias descomponen el H2O2,
exceptuando el gnero estreptococo. Para la prueba de Oxidasa,
conseguimos los resultados esperados debido a que todas las
enterobacterias dan una reaccin negativa, exceptuando el gnero
pseudomona y Neiseria.
De acuerdo a la segunda tabla de pruebas bioqumicas, obtuvimos para
la colonia incolora, dos tipos de bacterias muy similares, los cuales son
H. Alves, y S. marcescens. Para nuestra colonia roja, se observ la
presencia de K. Pneumoniae, todas las colonias analizadas coincidieron
con 8 de los 9 casos que se plantearon.
Conclusin
El desarrollo de la prctica de aislamiento e identificacin de
enterobacterias del agua se logr con xito al cultivar, obtener e
identificar el tipo de bacterias de nuestra muestra; los procedimientos
realizados a lo largo de las 4 sesiones fueron de gran ayuda al equipo al

aprender a utilizar el equipo de laboratorio, y as aprovecharlo en el

proyecto de investigacin.
Las microrganismos que observamos son Enterobacterias gracias a la
comparacin de nuestros resultados con el manual de prcticas que
sirvi como gua para la identificacin.
Conforme los conocimientos tericos (que se estudiaron das previos a la
semana de prctica), se fueron logrando los resultados esperados
gracias al estricto cumplimiento de la metodologa, lo cual nos dicta la
manera de trabajar, de seguir un procedimiento que podr aplicarse
posteriormente en los estudios de carrera de cada miembro del equipo.
Cuestionario
1. Explica el fundamento de los diferentes mtodos fsicos y
qumicos de esterilizacin
Es necesario preparar la zona estril para el trabajo microbiolgico, para
asegurar que los microorganismos detectados provengan de las
muestras estudiadas y no se trate de contaminacin procedente del
medio ambiente o de la persona que realiza el trabajo.
Estos distintos mtodos deben garantizar la destruccin total de todos
los microorganismos presentes en la sustancia o material esterilizado.
2.

Explica las ventajas y desventajas de los mtodos de la

pregunta anterior e indica cuando es recomendable utilizar cada
uno de estos
La esterilizacin se realiza con desinfectantes o antispticos, que son
productos qumicos. El desinfectante se utiliza en objetos inanimados,
por el contrario los antispticos inhiben el crecimiento de los
microorganismos y no son suficientemente txicos, por lo cual pueden
ser aplicados en los tejidos vivos.
En los mtodos fsicos encontramos a la esterilizacin con ayuda del
calor, es el mtodo ms utilizado. Se puede emplear el calor seco,
empleando hornos a una temperatura de 170 o el calor hmedo
utilizando autoclaves, el cual se produce cuando el vapor el agua a
presin se genera y desnaturaliza las protenas destruyendo al
microorganismo.

3. Indica los principales agentes desinfectantes y antispticos

utilizados en la desinfeccin
Alcoholes, Hipoclorito de sodio y detergentes
4. Qu tipo de sustancias suelen utilizarse comnmente para
desinfectar superficies?
Hipoclorito de sodio y benzal

5. Explica cual es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la

zona estril para el trabajo microbiolgico y seala que factores
influyen en la creacin de la zona estril
Para asegurarnos de que la zona en donde trabajaremos tenga, adems
de una desinfeccin una esterilizacin total, ya que los desinfectantes
muchas veces no eliminan esporas, al encender el mechero nos
aseguramos de que nuestra rea de trabajo este totalmente estril al
brindar calor a las superficie.
6. Menciona otros mtodos usados en la industria en los
laboratorio de investigacin para crear zonas de trabajo
estriles

7. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los

tubos y las pipetas des pues de concluir la sesin
-Los microorganismos contaminaran el rea.
-Pueden extraviarse los materiales
8. Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la
mesa de trabajo despus de concluir cada sesin
La presencia de los microrganismos con los que se trabajaron no es
eliminada y puede contaminar el rea de las dems personas que
continen trabajando en ese lugar, y por tanto tambin causar
enfermedades, resultados no deseados, pruebas bioqumicas errneas,
etc.
9.-Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de
sus partes e indica su funcin.

Sistema ptico
o OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla
la imagen del objetivo.
o

OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la

imagen de sta.

CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos

sobre la preparacin.

DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el

condensador.

FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Sistema mecnico
o

SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie

o base y el brazo.

PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.

CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede

ser monocular, binocular, etc.

REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos.

Permite, al girar, cambiar los objetivos.

TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el

enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto.

10.- Explica qu tipo de bacterias pueden aislarse en el agua

Vibrio, Pseudomonas, E coli, entre otras. De manera general casi todas
las bacterias sobreviven en el agua.
11.- Explica cul es el motivo de sembrar diluciones del agua.
Esto se realiza principalmente para que al momento de observar el
crecimiento de bacterias, no tengamos un nmero muy alto de
microrganismos y sea ms fcil identificar las colonias, por tanto esto
hace mucho ms sencillo y eficaz el trabajo.
12.- Explica el fundamento del aislamiento por estra cruzada
Utilizamos la tcnica de aislamiento por estra cruzada para que esta nos
ayude a que cada clula bacteriana comience a diferenciarse, de esta
manera se forman colonias caractersticas que pueden ser observadas e
identificadas a simple vista.
13.- Explica qu tipo de bacterias pueden aislarse en agar
MacConkey
El agar MacConkey se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram
negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite
diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de
agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae se
desarrollan en el mismo.
14.- Explica a qu se le llama medio de cultivo bacteriolgico
Es un medio idneo para el crecimiento de cierto tipo de colonias de
bacterias, donde se incluyen los nutrientes necesarios para su
alimentacin y divisin. Gracias a esto tenemos 3 tipos de medios de
cultivo: selectivos, no selectivos y de enriquecimiento.
15.- Explica qu es un medio de cultivo enriquecido.

Un medio de cultivo enriquecido son aquellos que contienen

suplementos que permiten aumentar el nmero de un tipo de bacterias
e inhibir el crecimiento de otras.
16.- Explica qu es un medio de cultivo selectivo.
Estos medios de cultivo permiten el crecimiento selectivo de uno o
varios tipos de bacterias.
17.- Describe las caractersticas de la pared celular de las
bacterias grampositivas y gramnegativas, resaltando sus
diferencias.
La envoltura celular de las bacterias Gram-positivas comprende
la membrana citoplasmtica y una pared celular compuesta por una
gruesa capa depeptidoglicano, que rodea a la anterior. La pared celular
se une a la membrana citoplasmtica mediante molculas de cido
lipoteicoico. La capa de peptidoglicanoconfiere una gran resistencia a
estas bacterias y es la responsable de retener el tinte durante la tincin
de Gram.
A diferencia de las Gram-negativas, las Gram-positivas no presentan una
segunda membrana lipdica externa a la pared celular y esta pared es
mucho ms gruesa.
18.- Cmo se definen las bacterias coliformes?
La denominacin genrica coliformes designa a un grupo de especies
bacterianas que tienen ciertas caractersticas bioqumicas en comn e
importancia relevante como indicadores de contaminacin del agua y los
alimentos.
Coliforme significa con forma de coli, refirindose a la bacteria principal
del grupo, la Escherichia coli.
19.- Qu indica la presencia de bacterias coliformes en el agua?
Tradicionalmente se los ha considerado como indicadores de
contaminacin fecal en el control de calidad del agua destinada al
consumo humano en razn de que, en los medios acuticos, los
coliformes son ms resistentes que las bacterias patgenas intestinales
y porque su origen es principalmente fecal. Por tanto, su ausencia indica
que el agua es bacteriolgicamente segura.
20.- Cul es la importancia clnica de las bacterias coliformes?

Producen una respuesta inmune lo que provoca que nuestro cuerpo se

encuentre siempre alerta para contraatacar a un antgeno
21.- Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
No, como se comprueba en la prctica podemos presencia a las
bacterias coliformes en distintos sitio como agua, frutas y alimentos.
Donde el medio sea indicado ah se dar su colonizacin.
22.- Qu implicaciones epidemiolgicas tienen la presencia de
enterobacterias en la muestra de agua que colectaste?
Puede causar infecciones gastrointestinales y servir como un foco de
enfermedad.
23.- Qu enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse
en el agua contaminada con materia fecal?
Botulismo, Ascariasis, Clera, Criptosporiodiosis, Giardasis, Hepatitis,
Poliomielitis, Salmonelosis, Colitis, Reflujo Gastroesofagico, Amibiasis,
Pirosis, Tricuriasis, Teniasis, Shigelosis, Fiebre tifoidea - paratifoidea,
Diarreas, Clonorquiasis, Dracunculosis, Paludismo. Etc.
24.- Qu significan las siglas IMViC?
Indol (I)/Rojo de Metilo (M)/Vogues-Proskauer (Vi)/Citrato (C)

25.- Cul es el objetivo de realizar las pruebas de identificacin

IMViC?
Permite identificar enterobacterias, organismos causantes de infecciones
intestinales, mediante el uso de las propiedades qumicas y reacciones
enzimticas a sustratos especficos
26.- Por qu razn no es recomendable utilizar el asa
bacteriolgica para realizar la prueba de oxidasa?
Por qu la prueba de oxidasa tiene como fundamento demostrar la
presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidacin del
citocromo que es reducido por el oxigeno molecular que produce agua o
perxido de hidrogeno segn la especie bacteriana. Los metales pueden
interferir de manera oxidativa ya que las enzimas estn ntimamente
relacionadas a la cadena de transporte de electrones.

27.- Determina el nmero de bacterias que hay en una colonia

despus de 24 horas de incubacin. Recuerda que una colonia
de enterobacterias se origina a partir de una sola bacteria (UFC)
y estas se dividen en un tiempo promedio de 30 minutos.
Si consideramos que cada bacteria se divide cada 30 minutos,
tendremos al cabo de 24 hrs un aproximado de 281,474,976,710,656
bacterias.
Ejemplo:
1 bacteria
A los 30 minutos = 2 bacterias