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Discusin de resultados:

En las grficas de las muestras se pueden observar bacterias


Staphilococcus aureus que han sido sometidas a tres tipos de
colorantes bsicos distintos, bajo la tcnica de tincin simple.
El primer colorante empleado fue azul de metileno que es un
compuesto qumico heterocclico aromtico cuya reaccin se da a
menor velocidad, toma de 30 a 60 segundos para teir una
preparacin microbiana. El cristal violeta es un colorante
trifenilmetano, que usualmente requiere slo 10 segundos pues es
ms reactivo. La carbolfucsina contiene cido brico, fenol, resorcinol,
fucsina, acetona, alcohol y agua, es an ms rpido que los
anteriores, generalmente requiere solo 5 segundos, su reactividad es
tan grande que con frecuencia sobretie. (Rodriguez et al. 2005).
Se conoce que la muestra observada es Gram positiva y por ende
presenta una cantidad considerable de cido teicoico que permite la
absorcin y retencin de los tres colorantes. Sin embargo; el grado de
coloracin est muy relacionado con la naturaleza fsico qumica del
colorante y el tiempo de tincin. En general un colorante, est
constitudo fundamentalmente por un anillo bencnico al que se nen
distintos radicales, de los cuales uno ser coloreado y corresponder
al radical cromforo que frecuentemente es de carcter nitroso o de
tipo amido, alqueno, ciano, tiociano, etc. Por otro lado, al anillo
bencnico se le unirn radicales no coloreados o auxcromos que
pueden ser de tipo hidroxilo, amino, metilo, vanilo, etc, que no
poseen capacidad tintorial pero que proporcionan estabilidad al
colorante. As pues, a mayor nmero de radicales cromforos mayor
ser el poder colorante de la solucin y menor el tiempo de tincin.
En la prctica empleamos distintos tiempos de coloracin con
respecto a la bibliografa, para el azul de metileno consideramos dos
minutos, en cuanto al cristal violeta treinta segundos y con la
carbolfucsina diez segundos. Al extender el tiempo de contacto de los
colorantes con las bacterias no obtuvimos mejores resultados, ya que
realizamos una prueba de diez segundos con cristal violeta y la
coloracin result mayor. Comprobamos de esta manera que el
tiempo ms adecuado de tincin depende del nmero de radicales
cromoforos en el colorante.
Por otro lado, en las tres muestras se observan diferentes
caractersticas, la ms resaltante corresponde al cristal violeta ya que
se aprecia una gran cantidad de microorganismos y la coloracin es
ms notoria en cuanto a las muestras con azul de metileno y
carbolfucsina; suponemos que el peptidoglucano tiene mayor afinidad
con el cristal violeta. As mismo, la variacin en cuanto a la cantidad
de microorganismos, se debe a errores cometidos por el alumno;
como coger una pequea cantidad de bacterias usando el asa de

klle y el lavado del portaobjeto para quitar el exceso de colorante,


ya que se debe tener en consideracin el chorro que cae sobre la
lmina, si cae directamente sobre la muestra por ms que los
microorganismos estn fijados pueden desprenderse.
Cabe mencionar que existen otros factores que afectan una tincin:
Pureza, concentracin, pH, conservacin y elaboracin del colorante.
Adems de la temperatura,
cantidad de muestra,
frotis y
mordientes (Granados, 2003).
CONCLUSIONES:
Se logr observar con los tres colorantes la morfologa y
asociacin de Staphylococcus aureus, reconociendo su forma
esfrica (coco) y el tipo de unin estafilococos (racimos).
Se aplic la metodologa de forma de correcta, de tal manera
que logramos aprender a fijar y teir con colorantes bsicos a
las bacterias.
Se observ que la muestra con mejor coloracin fue la del
cristal violeta, ya que las de azul de metileno y carbolfucsina
eran ms difusas.
BIBLIOGRAFA:
-Granados, R y Villaverde, C. (1997). Microbiologa (1Ed.) Madrid.
Espaa. PARANINFO S.A. Pgina. 223 225.
-Tortora, Gerard; Funke, Berdell y Case, Christine (2007). Introduccin
a la Microbiologa (9 Ed.) Buenos Aires. Argentina. EDITORIAL
MDICA PANAMERICANA S.A. Pgina. 68 70.
-Covadonga, Ana. (2010). Tcnicas bsicas de Microbiologa. Reduca
(Biologa). V 3 (5). 15 20.
-Rodriguez Evelyn. (2005). Bacteriologa general: Principios y
prcticas de laboratorio. (1 Ed.) EDITORIAL DE LA UNIVERSIDAD DE
COSTA RICA. Pgina 55-56.

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