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III) La informacin celular

5) Replicacin del ADN

5) LA REPLICACIN DEL ADN

)CMO ES EL PROCESO DE REPLICACIN DEL ADN?


El ADN es una molcula formada por dos
hebras complementarias y antiparalelas. Una
de las primeras dudas que se plantearon fue
la de cmo se replicaba el ADN. A este
respecto haba dos hiptesis:
10) El ADN se replica de manera conservativa. Esto es, cada hebra de ADN forma una
copia y una clula hija recibe la molcula
original y la otra clula recibe la copia.
20) El ADN se replica de manera semiconservativa. Cada hebra de ADN forma una hebra
complementaria y cada clula hija recibe una
molcula de ADN que consta de una hebra
original y de su complementaria sintetizada
de nuevo.
Esta controversia
fue
MESELSON y STAHL con
elegantes experiencias.

resuelta
por
una serie de

Replicacin

ADN original

ADN original

Fig. 1

ADN copia

Replicacin conservativa.

Replicacin

ADN copia
y original

ADN original

Fig. 2

ADN original
y copia

Replicacin semiconservativa.

EXPERIENCIAS DE MESELSON Y STAHL.

3
3

15 N- 15N

15 N- 15N

Se cultivan bacterias E. coli en un medio con

15

N (nitrgeno

14 N- 14N

A continuacin, se cultivan las bacterias en nitrgeno 14 (14N)

pesado) durante cierto tiempo para que todo el ADN est

ms ligero durante 30 minutos, lo que dura un ciclo de replica-

formado por dos hebras de

cin. Si la hiptesis de la sntesis conservativa fuese la co-

15

N (15 N-15 N) ms pesadas. Si se

centrifu ga, este ADN ms pesado migra hacia el fondo del tubo

rrecta, se debera obtener lo que se ve en la figura, una banda

y se obtiene el resultado que se observa en la figura.

de ADN pesado (15 N-15 N) y otra con ADN ligero (14 N-14 N) pero...

14N -15N

15N -14N

14N -15N

.. lo que se obtiene en realidad es lo que se observa en la

14N- 14N

14N- 14N

15N -14N

Adems, si se da otro ciclo de replicacin en

14

N, se obtiene

figura: una sola banda en posicin intermedia, pues est

una banda de ADN mixto ( N- N) y otra de ADN (14 N-14 N), lo

formada por ADN mixto (15 N-14 N). Esto es, todas las clulas hijas

que tambin est de acuerdo con la hiptesis de la sntesis

tienen un ADN con una hebra con

semiconservativa.

15

N y otra con

14

N. La

14

15

hiptesis de la sntesis semiconservativa es la correcta.

J. L. Snchez Guilln

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III) La informacin celular

5) Replicacin del ADN

LA REPLICACIN SEMICONSERVATIVA DEL


ADN EN EUCARIOTAS
Cuando una clula se divide, o cuando se
originan los gametos, las nuevas clulas que
se forman deben contener la informacin
gentica que les permita sintetizar todas las
enzimas y el resto de las prote nas
necesarias para realizar sus funciones vitales.
sta es la principal razn por la que el ADN
debe replicarse.
La replicacin del ADN es el proceso segn
el cual una molcula de ADN de doble hlice
da lugar a otras dos molculas de ADN con
la misma secuencia de bases.
En la clula procaritica la replicacin parte
de un nico punto y progresa en ambas
direcciones hasta completarse. En la clula
eucaritica el proceso de replicacin del
ADN no empieza por los extremos de la
molcula sino que parte de varios puntos a
la vez y progresa en ambas direcciones
formando los llamados ojos de replicacin.
Primero se separan las dos hebras y, una
vez
separadas,
van
entrando
los
nucletidostrifosfato
complementarios
de
cada uno de los de las hebras originales del
ADN. Las enzimas ADN polimerasas los
unen entre s formando una hebra de ADN
complementaria de cada una de las hebras
del ADN original. Se dice que la sntesis de
ADN es semiconservativa porque cada una
de las molculas de ADN " hijas" est formada por una hebra de ADN original y otra
complementaria sintetizada de nuevo.

Cromosoma: arriba, en procariotas, abajo, en eucariotas.

Fig. 3 Replicacin del ADN en procariotas


y en eucariotas. En procariotas slo hay un
ojo de replicacin, mientras que en eucariotas
hay varios.

Fig. 4 Microfotografa al MET de un


fragmento de la doble hlice de un cromosoma
de eucariota replicndose.

Ojos de replicacin

Cromosoma
(doble hlice de ADN)
replisomas

Fig. 5 Cromosoma de eucariota


replicndose. El replisoma es un complejo
formado por todas las enzimas que intervienen
en el proceso de replicacin.

Hebra de ADN
A

ATP asa

Es de destacar que la direccin en la que


progresa la replicacin es la misma en
ambas hebras. Ahora bien, las enzimas que
unen los nucletidos slo pueden efectuar la
unin en direccin 5' 3'. Esto nos indica
que ambas hebras, al ser antiparalelas,
deben de sintetizarse de diferente manera.
a) Sntesis continua de la hebra en direccin
5' 3'. La sntesis de esta hebra no plantea
ningn problema. As, una vez separadas
ambas hebras, la ADN pol. III (una de las

J. L. Snchez Guilln

Helicasa

Topoisomerasa
Protenas
estabilizadoras

A
G
T

ADN polimerasas

Fig. 6
Enzimas y otras protenas que
forman el replisoma. Se muestra en este
esquema un detalle del recuadro de la figura
anterior.

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III) La informacin celular

5) Replicacin del ADN

enzimas que unen los nucletidos) va a


elongar la cadena en direccin 5' 3' a partir
de un primer o fragmento de ARN que
despus ser eliminado.
b) Sntesis discontinua. La hebra complementaria no se va a replicar en sentido
3' 5' sino que se replica discontinuamente
en direccin 5' 3'. Los diferentes fragmentos sintetizados, llamados fragmentos de
Okazaki, son posteriormente unidos entre s.
El proceso es complejo y consiste en lo siguiente: En primer lugar se sintetiza un pequeo fragmento de ARN, fragmento denominado primer. Partiendo de este primer se
sintetiza un fragmento de ADN en direccin
5' 3'. Al llegar al primer del fragmento
anteriormente sintetizado, ste es degradado
y se rellena el hueco con ADN. Se dice que
la replicacin es discontinua porque el ADN
se va a ir sintetizando en fragmentos que,
posteriormente, son soldados uno al otro.

Fig. 9

Fig. 7

Sntesis continua.

G C

G C

G G

1er fragmento sintetizado

2 fragmento sintetizado

Fig. 8

Sntesis discontinua.

Replicacin del ADN. Acontecimientos que se dan en un replisoma.

J. L. Snchez Guilln

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