"Ao de la Inversin para el Desarrollo Rural y la

Seguridad Alimentaria".

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL E

INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

CURSO:
TEMA:

MICROBIOLOGIA GENERAL
AISLAMIENTO DE AZOTOBACTER

DOCENTE:

MCBGA: DOROTHY TORRES DE LEON

INTEGRANTES:
- COVEAS PALMA KEVIN ITALO
- DOMINGUEZ ZETA JOEL FRANCO.
- HUERTAS SILVA FABIO ADALBERTO
- IMAN RIVAS RONALD NELSON
- RAIMUNDO IPANAQUE EDWIN JAVIER
FECHA:

13/11/13

PIURA 2013
AISLAMIENTO DE AZOTOBACTER

Objetivos:
-

aislar la bacteria del genero azotobacter de una muestra de suelo miraflorino para
utilizarlo en la produccin de nitrgeno.
Comprobar que el azotobacter es un biodegradante
Determinarla existencia de azotobacter en los suelos miraflorinos.
El comportamiento de azotobacter frente a diferentes contaminantes del suelo.
Evaluar el comportamiento, crecimiento y desarrollo del microorganismo

Actualmente la mayora de cultivos agrcolas dependen de los fertilizantes qumicos

sintticos, los cuales proporcionan nutrimentos asimilables por las plantas.
Sin embargo, su uso prolongado ocasiona contaminacin ambiental y daos
ecolgicos, adems de un incremento en el costo de produccin y el impacto negativo
en la salud animal y humana.
La utilizacin de agroqumicos en los sistemas de produccin intensivos tiene una
clara accin sobre la microbiota del suelo, afectando directamente las numerosas
poblaciones de microorganismos nativos de inters biolgico expuestas a este tipo de
sustancias. Como consecuencia de la retencin de ciertos plaguicidas en las partculas
del suelo, microorganismos benficos, como muchas bacterias presentes en la
mayora de los sistemas agrcolas, pueden sufrir alteraciones bioqumicas,
disminuyendo su actividad como biofertilizantes y su efecto promotor del crecimiento
de las plantas.
Una alternativa es utilizar biofertilizantes para promover la agricultura orgnica y las
tecnologas limpias y seguras. Las bacterias fijadoras de nitrgeno (diazotrofas) fueron
las primeras en producirse comercialmente con fines de biofertilizacion. De este grupo,
las ms utilizadas como biofertilizantes corresponden al gnero Azotobacter, el cual
comprende siete especies a) A. chroococcum, b) A. vinelandii, c) A. beijerinckii,d) A.
paspali, e) A. armeniacus, f) A. nigricans y g) A. salinestris.
Los microorganismos de este gnero fijan asimbioticamente nitrgeno y son
solubilizadoras de fosfato. Adems realizan procesos de biodegradacin de
plaguicidas como el endosulfan.
En vida libre, fijan al menos 10 mg de N2 por gramo de carbohidrato consumido.
Los mtodos ms utilizados para aislar bacterias del genero Azotobacter incluyen el
aislamiento en medio libre de nitrgeno, enriquecimiento en solucin de Winogradsky y
posterior siembra en medio libre de nitrgeno, y siembra de grnulos individuales de
suelo en medio libre de nitrgeno. Para su identificacin preliminar se emplean
pruebas bioqumicas como la fermentacin de diferentes azucares.

HIPOTESIS
Entre los grupos microbianos reportados como organismos degradadores de
plaguicidas, muchas de las bacterias hetertrofas sealadas los utilizan como
sustratos, ya sea metabolizando las molculas o usndolas como nutriente y fuente de
energa. Se incluyen en este grupo bacterias como: Azotobacter sp., Pseudomonas
sp., Agrobacterium sp., Bacillus sp., Clostridium sp., Flavobacterium sp., entre otros.
El papel de las bacterias en la biodegradacin y transformacin de los plaguicidas en
el suelo es variable y depende de la disponibilidad, movilidad y toxicidad del
plaguicida, las propiedades fisicoqumicas del suelo y del plaguicida, entre otros
factores medioambientales.
Dentro de las bacterias diazotrficas, el gnero Azotobacter es uno de los ms
estudiados en la agricultura gracias a su alta capacidad de biodegradacin,
especialmente para la oxidacin de compuestos fenlicos sustituidos; este hecho
resulta de especial inters debido a que estas bacterias aumentan su actividad
biolgica en suelos agrcolas adicionados de residuos que poseen un alto contenido

en sustancias fenlicas, pudindose sugerir que estos microorganismos pueden

contribuir a la biotransformacin de este tipo de residuos cuando se usen como
fertilizantes.
En este contexto, estos diaztrofos son considerados por algunos investigadores como
bacterias ciertamente ideales para los procesos de descontaminacin de suelos
agrcolas con sustancias xenobiticas.

JUSTIFICACION
Desde hace tiempo el hombre se ha dedicado a cultivar los suelos los cuales con el
paso del tiempo han venido perdiendo sus nutrientes; debido a la sobreexplotacin y
uso de sustancias qumicas que utilizamos para la agricultura, las cuales originan el
empobrecimiento de los suelos y la baja productividad en los cultivos agrcolas.
Para lo cual nuestro proyecto est basado en el aislamiento de una bacteria nitrificante
del gnero azetobactereas que se encuentra en los suelos, ayudando as al pueblo
miraflorino en el desarrollo de las actividades agrcolas.
Con el aislamiento seleccionado de Azotobacter spp se realiz una evaluacin
cualitativa de solubilizacin de fosfatos siguiendo la tcnica descrita por Vsquez et al.
(2000) (14). Para tal fin el cultivo se igual al tubo 1 del patrn de Mc Farland y se
incub en agar picovskaya modificado (15), a temperatura de 30C por un periodo de
24- 48 horas. Se tom como efecto solubilizador la presencia de un halo de aclaracin
mayor a 5 mm alrededor del pitillo de 1 cm de dimetro. Para cuantificar la actividad
fosfatasa se emple la tcnica de p-nitrofenil fosfato (16). La actividad se evalu en
medio leche (medio de produccin) y medio Pikovskaya (17) (medio inductor) (17),
registrando el valor de absorbancia cada cuatro horas por un perodo de 24 horas.