BIOQUMICA PDH, CICLO DE KREBS Y LANZADERAS

La respiracin celular se refiere a los procesos involucrados en el consumo de O2 y

formacin de CO2.
En la primera fase, los combustibles orgnicos (glucosa, cidos grasos, aminocidos) se
oxidan, dando generalmente grupos acetilo, o AcetilCoA.
En la segunda fase, estos compuestos de dos carbonos entran en el ciclo de Krebs, o de
los cidos tricarboxlicos (CTC), en el que se oxidan a CO2, con la reduccin de las coenzimas
NAD+ y FAD a NADH y FADH2.
En la tercera fase, estas coenzimas se reoxidan, dando protones y electrones. El oxgeno
es el aceptor final de estos electrones, que son transferidos a l a travs de la cadena de
transporte de electrones (CTE). La CTE genera adems un gradiente de protones a travs de
la MMI (quedando el espacio intermembrana cido, y la matriz alcalina). La energa potencial
de este gradiente se usa para sintetizar ATP en la fosforilacin oxidativa.
Los cidos grasos (AG) son el principal combustible del organismo. Ellos se almacenan en
el tejido adiposo, como TAG. En el ayuno, los AG se liberan a la sangre, circulando unidos a
albmina (mal llamados AG libres, o AGNEs), y se oxidan a AcetilCoA en diversos tejidos, en un
proceso llamado Beta-Oxidacin.
Los AG, en el hgado, tambin pueden formar cuerpos cetnicos (CC), capaces de
oxidarse. Los CC son la principal fuente de energa del cerebro en el ayuno prolongado. Las
oxidaciones de AG y CC usan NAD+ y FAD como coenzimas.
El CTC es la va de oxidacin de los combustibles, que tambin produce intermediarios de
otros procesos anablicos.
Antes de entrar al CTC, los combustibles deben degradarse a grupos acetilo, o a
AcetilCoA. Un ejemplo es el piruvato, producto de la gluclisis. El piruvato se oxida dando
AcetilCoA y CO2. Esta reaccin es catalizada por la Piruvato Deshidrogenasa (PDH), y no
forma parte del CTC. Tambin cabe aclarar que el piruvato no es la nica fuente de AcetilCoA.
El piruvato se obtiene por gluclisis, en el citoplasma, y de la degradacin de algunos
aminocidos. Sus destinos posibles son:
- Decarboxilacin oxidativa (por la PDH).
- Transaminacin a Alanina.
- Carboxilacin para generar Oxaloacetato.
- Reduccin a lactato.
PIRUVATO DESHIDROGENASA
Cataliza la decarboxilacin oxidativa del piruvato. Esta reaccin es muy exergnica, y por
tanto irreversible. La reaccin es:
Pir + NAD+ + CoASH ---> AcetilCoA + CO2 + NADH + H+
La PDH posee 3 subunidades catalticas:
- PDH
- Dihidropoil transacetilasa (dhp TA)
- Dihidropoil deshidrogenasa (dhp DH)
En la reaccin de la PDH participan adems 5 coenzimas:
- Pirofosfato de tiamina (PPT)
- cido lipoico
- CoASH
- FAD
- NAD+
La reaccin consta de 5 pasos:
1) Piruvato reacciona con el PPT, de la subunidad PDH, y se convierte a hidroxietilo.
2) El grupo acetilo y 2 electrones pasan al cido lipoico de la dhp (TA), formando el
acetitioester.
3) El acetilo pasa a la CoASH, formando el AcetilCoA.
4) El cido lipoico reducido es reoxidado por la dhp DH, que transfiere dos hidrgenos del cido
lipoico al FAD, formando FADH2.
5) Se transfiere un in hidruro (H-) al NAD+, regenerando la forma oxidada de FAD, y un
NADH. El complejo est listo para transformar otro piruvato en AcetilCoA.
Debido del importante papel de los grupos sulfhidrilo (SH) del cido lipoico en la reaccin,
un agente que los altere, por ejemplo el arsenito, inhibirn a la PDH.

REGULACIN DE LA PDH
El objetivo es que la actividad de la PDH aumente cuando se necesite AcetilCoA, o cuando
hay abundante sustrato.
1 - AcetilCoA y NADH, los productos de la reaccin, inhiben la reaccin directamente.
2 - La otra regulacin est mediada por una kinasa ATP dependiente que fosforila al complejo,
inactivndolo. La reactivacin la realiza una fosfatasa dependiente de magnesio y calcio.
La kinasa es inhibida (y por lo tanto la actividad de la PDH estimulada) por:
* ADP: El aumento del ADP indica consumo de ATP, lo que activa a la PDH.
* Piruvato, CoASH, y NAD+ (reactivos de la reaccin): Al aumentar la relacin NADH/NAD+ o
AcetilCoa/CoA, la kinasa se activa, y la actividad de la PDH disminuye.
3 - La insulina (en tejido adiposo) y las catecolaminas (en corazn), estimulan a la PDH.
ACETIL COENZIMA A
Se genera en la mayora de las vas catablicas. El grupo tiol de la coenzima A se usa
como aceptor y dador de grupos acilo en varias vas. AcetilCoA se genera con gasto de ATP, a
partir de la reaccin entre acetato y CoASH.
Los destinos del AcetilCoA pueden ser:
- Oxidacin completa del acetilo en el CTC.
- En hgado, conversin del exceso de Acetil CoA en cuerpo cetnicos.
- Transferencia de acetilos al citosol, para sintetizar esteroles y AG de cadena larga.
CICLO DE KREBS
Es el destino principal del AcetilCoA. En l, el grupo acetilo se oxida totalmente a CO2. El
CTC ocurre en la mitocondria. La serie de reacciones del ciclo son las siguientes:
1. ACETILCOA + OXALOACETATO ----> CITRATO + COASH
- Enzima: Citrato sintasa.
- Regulacin: Por aporte de sustratos (AcetilCoA y Oxaloacetato).
- Comentario: El citrato, adems de intermediario del CTC, funciona como regulador o fuente
de carbonos de otras vas:
* Fuente de equivalentes de reduccin para procesos citoslicos.
* Inhibe a la FFQ I, estimula a la AcetilCoA carboxilasa.
* Fuente de carbonos para sntesis de AG y esteroles.
2. CITRATO ----> (CIS-ACONITATO)--->ISOCITRATO
- Enzima: Aconitasa.
- Regulacin: La reaccin requiere de hierro.
3. ISOCITRATO + NAD+ ----> ALFA-CETOGLUTARATO + NADH + H+
- Enzima: Isocitrato DH.
- Regulacin: Requiere Mn++ o Mg++. Estimulada por baja relacin ATP/ADP, y NAD+/NADH.
- Comentario: Es la primera redox del ciclo. Se produce el primer CO2 (de dos) y el primer
NADH (de 3).
El alfa-cetoglutarato puede seguir en el CTC, o seguir una reaccin lateral: la glutamato DH
cataliza su aminacin a glutamato. La reaccin es reversible, por lo que el glutamato puede
utilizarse como sustrato para el CTC, previa conversin a alfa-cetoglutarato.
4. ALFA-CETOGLUTARATO----> SUCCINIL CoA
- Enzima: Alfa-cetoglutarato DH.
- Regulacin: Similar a la de la PDH, pero a diferencia de sta, no sufre fosfo/defosforilacin.
Utiliza NAD+ como cofactor.
- Comentario: Es muy similar a la PDH, funcional y estructuralmente. Posee 3 subunidades, y
tambin participan el pirofosfato de tiamina, cido lipoico, NAD+, FAD y CoASH. Cataliza la
segunda redox del ciclo, genera el segundo CO2, y el segundo NADH.
5. SUCCINIL CoA---->SUCCINATO
- Enzima: Succinil CoA sintasa.
- Comentario: El Succinil CoA es un compuesto con un enlace tioster de alta energa. En este
paso, hay una fosforilacin a nivel de sustrato, para almacenar esa energa en un GTP, que
se transforma en ATP. La fosforilacin a nivel de sustrato implica la formacin de un nuevo
enlace fosfato de alta energa, sin la participacin del oxgeno (a diferencia de la fosforilacin
oxidativa).
Succinil CoA tambin puede seguir una va lateral, la formacin de profirinas. Adems, el
Succinil CoA puede provenir no slo del alfa-cetoglutarato, sino tambin como producto de la
degradacin de aminocidos ramificados y AG.

6. SUCCINATO---->FUMARATO
- Enzima: Succinato DH.
- Regulacin: Inhibida por malonato (inhibidor competitivo del succinato), y oxaloacetato.
Estimulada por ATP y succinato. Utiliza FAD como cofactor.
- Comentario: El FAD se reduce a FADH2. La succinato DH es una ferrosulfoprotena, que
transfiere los electrones del FADH2 a la coenzima Q citocromo b de la cadena de transporte
deelectrones, reoxidando a la coenzima.
7. FUMARATO---->MALATO
- Enzima: Fumarasa.
- Comentario: El malato puede seguir una va lateral: se transportado el citosol, donde genera
oxaloacetato por la malato DH citoplasmtica. ste se utiliza como sustrato gluconeognico.
8. MALATO---->OXALOACETATO
- Enzima: Malato DH mitocondrial.
- Regulacin: Utiliza NAD+ como cofactor.
- Comentario: Aqu se genera el tercer y ltimo NADH.
REACCIONES IRREVERSIBLES
Las reacciones irreversibles del CTC son las catalizadas por:
- Citrato sintasa
- Isocitrato DH
- Alfa-Cetoglutarato DH
De ellas depende el gran delta G negativo del CTC, y por tanto su espontaneidad.
BALANCE
En el proceso de oxidacin total del grupo acetilo del Acetil CoA se producen 4
equivalentes de reduccin (3 NADH + H y 1 FADH2). Tambin se forma 1 GTP=ATP, en la
reaccin de la succinil CoA sintasa.
Clsicamente se considera que cada NADH + H produce 3 ATP, y cada FADH2, 2. Sin
embargo, en los ltimos aos se descubri que del NADH + H se obtienen 2,5 ATP, y del
FADH2, 1,5. Resumiendo, el balance del CTC es el siguiente:
Reaccin
Isocitrato-->Alfa CG
Alfa-CG-->SuccinilCoA
SuccinilCoA-->Succinato
Succinato-->Fumarato
Malato-->Oxaloacetato

Producto
NADH + H
NADH + H
GTP=ATP
FADH2
NADH + H

Viejo
3 ATP
3 ATP
1 ATP
2 ATP
3 ATP
-------12 ATP

Nuevo
2,5 ATP
2,5 ATP
1 ATP
1,5 ATP
2,5 ATP
---------10 ATP

REACCIONES ANAPLERTICAS O DE RELLENADO

En cada tejido hay varias vas metablicas, que usan intermediarios del CTC. Estos
intermediarios tienen 4 carbonos. Por ejemplo, en el SNC, el alfa-cetoglutarato se transforma
en glutamato, y ste despus en GABA.
En el ciclo, 2 C se incorporan con el acetilo, 2 C se eliminan como CO2, y hay 4 C en los
compuestos succinato, fumarato, malato, y oxaloacetato.
Si alguno de esos intermediarios entra en otra va, debe restaurarse. Las reacciones que
aportan intermediarios de 4 C se llaman anaplerticas. Las principales son:
* Piruvato + CO2----> Oxaloacetato, catalizada por la piruvato carboxilasa. Esta enzima
requiere de Acetil CoA y de biotina.
* Aminocidos (Ile, Val, Met)---->Succinil CoA, va de gran importancia en el hgado.
* Piruvato + NADPH + CO2---->Malato + NADP + H2O, catalizada por la enzima mlica.
REGULACIN DEL CTC
Depende del grado de utilizacin del ATP. Las seales importantes son la relacin
NAD/NADH, y ATP/ADP.
Las deshidrogenasas principales del CTC requieren de NAD+ y FAD, que se reoxidan en la
CTE, con la produccin de ATP. Por lo tanto, el CTC depende de la respiracin: una
interrupcin en el suministro de oxgeno, anula al CTC.
Tambin es necesario el aporte de ADP+Pi, sustrato para la ATP sintasa.
Los sitios principales de regulacin del CTC son:
- Isocitrato DH: Es estimulada alostricamente por ADP, e inhibida por NADH.
- Alfa-Cetoglutarato DH: No es alostrica, pero es inhibida por NADH y por Succinil CoA.

Ambas enzimas se estimulan por calcio. En tejidos como el muscular, el aumento del Ca++
intracelular significa alta actividad metablica.
- Citrato sintasa: Controla el ingresa de Acetil CoA al ciclo. Es una enzima simple, sin
regulacin alostrica. Su actividad se regula por las concentraciones de citrato (su producto,
que la inhibe), y oxaloacetato (su sustrato, que la estimula). Cuando la relacin NAD/NADH
sube, la de Oxaloacetato/Malato tambin. En el hgado, la relacin NAD/NADH determina si el
Acetil CoA entra al CTC, o se usa para la cetognesis.
SISTEMAS DE LANZADERAS
En la mitocondria, las coenzimas reducidas se reoxidan cediendo sus electrones a la CTE.
En las vas intramitocondriales, como el CTC y la reaccin de la PDH, esto es sencillo ya que
los complejos de la CTE tambin estn en la mitocondria.
En las reacciones de oxidorreduccin citoslicas, la reoxidacin es ms compleja, ya que
las coenzimas reducidas necesitan ceder sus electrones a la CTE, en la mitocondria. El NADH
no atraviesa la MMI. Por lo tanto, debe ceder sus equivalentes de reduccin a la CTE de otra
forma. Las lanzaderas son una serie de reacciones que transfieren equivalentes de reduccin
del NADH a la CTE. Estos equivalentes de reduccin, en forma de hidruro, pasan por una
redox citoslica aun compuesto que tiene un transportador en la MMI. As, se regenera el
NAD+ en el citosol, y los electrones van a la CTE.
- Lanzadera del glicerol 3-Fosfato
Predomina en msculo esqueltico y cerebro. La secuencia de reacciones es:
1. En el citosol, los electrones se transfieren del NADH a la dihidroxiacetona-P (DHAP),
formando glicerol-3P. La reaccin es catalizada por la glicerol-3P DH citoslica.
2. Glicerol-3P se transporta a la MMI, y all cede sus electrones a la glicerol 3P DH mitocondrial
(que utiliza FAD). Esto ocurre en la superficie de la MMI.
3. La glicerol 3P DH cataliza la reconversin de glicerol 3P a DHAP, reduciendo FAD a FADH2.
FADH2 cede sus electrones a la CoQ. Esto genera 2 molculas de ATP (o 1,5, segn nuevos
descubrimientos).
4. La DHAP vuelve al citosol.
- Lanzadera del Malato-Aspartato
Predomina en hgado y corazn. La secuencia de reacciones es:
1. NADH transfiere sus electrones al oxaloacetato, convirtindolo en malato, por la malato DH
citoslica. El oxaloacetato no puede atravesar la MMI. Para llegar al citosol, es transaminado
en la mitocondria a aspartato. El Asp se transporta al citosol, donde es transaminado de nuevo
a oxalacetato.
2. Malato es transportado a travs de la MMI a la matriz.
3. En la matriz se regenera el NADH por la malato DH mitocondrial.
4. El NADH se reoxida, cediendo sus electrones a la CTE, generando 3 ATP por NADH
reoxidado.
LANZADERA DEL GLICEROL-3P
Gluclisis

LANZADERA DEL MALATO-ASPARTATO

NADH

CITOSOL
NADH

NAD+

DHAP

NAD+

OA

CITOSOL
MAL

Glicerol 3P
Asp

DHAP

Glicerol 3P
FADH2

MMI

FAD

MMI

Asp

II
OA

MAL
NADH

NAD+