U.C.S.M. P.P. Ing.

Biotecnolgica
Prcticas de Biologa celular I

I Semestre

PRACTICA N 3.
TINCIN DE WRIGHT O HEMOGRAMA
1.

MARCO TERICO:
Lleva el nombre de James Homer Wright, su descubridor, que la obtuvo
modificando la tincin de Romanowsky, en 1902.
La tincin de Wright es un tipo de tincin que facilita la diferenciacin de los tipos
de clulas de la sangre, es por ello que es una tcnica muy usada para el conteo
de los glbulos blancos. Esta tcnica de coloracin se utiliza para el examen de
hemograma que describe el tejido sanguneo desde el punto de vista cuantitativo y
morfolgico.
Es una solucin de buffer y alcohol metlico de un colorante cido (eosina) y otro
bsico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguneo al
portaobjetos, el buffer o amortiguador, mantiene el pH del colorante y favorece la
mejor absorcin por los diferentes componentes celulares, mientras que los
colorantes tienen afinidad segn su carcter cido o bsico. Las estructuras con
carcter cido tales como los cidos nucleicos o las protenas cidas son afines por
compuestos bsicos o catinicos como el azul de metileno contenido en la tincin,
por el contrario las estructuras de carcter bsico tales como la hemoglobna y
otras protenas bsicas son afines a compuestos cidos tales como la eosina
contenida en la tincin por lo que a la vista estas estructuras tendrn un color
rojo-rosado

2.

OBJETIVOS:
2.1.
2.1.
2.2.
2.2.

3.

EXPLICACIN EN AULA:

4.

Explicar el fundamento de la tincin de Wright.

Identificar y diferenciar los tipos de clulas en un frotis sanguneo.
Adquirir destrezas y habilidades en el manejo del microscopio ptico.
Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad,
responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

La tincin de Wright se encarga de caracterizar formas de la sangre:

eritrocitos, leucocitos, plaquetas.
Cuantificas los leucocitos: basfilos, monocitos, eosinofitos, linfocitos y
neutrofitos (abastonados y segmentados).
Para la Tincin de Wright: se necesita colorante de Whight que consiste en
Azul B (tie el ncleo) y Eosina (tie el citoplasma).

MATERIALES:
3.1. Material biolgico:
Sangre.
3.2. Material de vidrio:
Lminas portaobjetos.

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3.3. Utensilios:
Lancetas de Franke.
3.4. Otros:
Algodn.
3.5. Reactivos:
Aceite de inmersin.
Alcohol isoproplico.
Alcohol yodado.
Colorante de Wright.
3.6. Aparatos y equipos:
Microscopio ptico.
5.

PROCEDIMIENTO:
Realizar un extendido de la muestra de sangre. Secar.
Cubrir con el colorante Wright.
Agregar al colorante un volumen equivalente de agua destilada.
Lavar con agua corriente y secar.
Observar al microscopio.

6.

PROCEDIMIENTO DETALLADO:

Limpiar con algodn y alcohol el pulpejo del dedo medio o ndice.

Realizar la puncin con la lanceta de Franck.

Depositar dos gotas de sangre sobre el extremo de portaobjetos.

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Realizar el extendido. Con mtodo de los 2 portaobjetos.

Esperar a que seque.

Tincin de Wright :

Cubrir con Wright por 1.

Aadir H2O destilada sobre el portaobjeto durante 1

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7.

I Semestre

Retirar el colorante y poner a secar.

RESULTADOS Y DISCUSIN:

Linfocitos: Son los leucocitos de menor tamao

(entre
7
y
15 m),
y
representan
aproximadamente el 20 a 45% del total en
la sangre perifrica.
Presentan
un
gran ncleo esfrico que se tie de violeta-azul y
de escaso citoplasma. Se encarga de la
formacin de anticuerpos.

Monocitos: macrfagos. Los monocitos son un

tipo de glbulos blancos agranulocitos. Es el
leucocito de mayor tamao, llegando a medir
18 m, y representa del 4 al 8% de
los leucocitos en la sangre.

Eosinfilo: Son generados por mitosis de las

clulas precursoras en la mdula sea donde
permanecen unos cuatro das. Su tamao es
semejante
al
del neutrfilo (10-12 m).
Representan aproximadamente el
1a
4%.
Cumple la funcin inmunolgica sobre todo en
alergias y/o partidas.

Basfilo:

Neutrfilo:
son glbulos
blancos de
tipo granulocito. Miden de 9 a 12m y es el tipo
de leucocito ms abundante de la sangre en
el ser humano, representando en torno al 6070% de los mismos. Existen dos tipos:

Los basfilos conforman

el
tipo
de leucocito menos abundante en sangre. Tiene
ncleo irregular, difcil de ver por la granulacin
basfila
que
lo
cubre
casi
siempre. e
denomina basfilo a cualquier clula que se tie
fcilmente
con
colorantes bsicos (hematoxilina principalmente)
. Los basfilos son los responsables del inicio de
la respuesta alrgica Los basfilos son los responsables del inicio de la
respuesta alrgica. A ello se le llama que cumplen la funcin de defensa.
Representan aproximadamente el 0 a 4%.

Abastonado o juvenil: representa un 2-5%

Segmentado o maduro: representa un 45%

Eritrocitos:
tambin
llamados glbulos
rojos o hemates,
son
los elementos
formes cuantitativamente ms numerosos de

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la sangre. La cantidad considerada normal flucta entre 4.500.000 (en

la mujer) y 5.400.000 (en el hombre) por milmetro cbico (o microlitro) de
sangre, es decir, aproximadamente 1.000 veces ms que los leucocitos.

Leucocitos: Su tamao oscila entre los 8 y 20 m (micrmetros). Osilan

entre 6000 1000/m3.

Los eritrocitos se observarn de color naranja o rosado.

El citoplasma de los monocitos presentarn una tonalidad azul griscea con
grnulo rojizos bastante finos y sus vacuolas caractersticas.
El citoplasma de los linfocitos presentar varias tonalidades azules.
Los ncleos de los linfocitos y neutrfilos aparecern de color prpura
oscuro.
Los ncleos de los monocitos de color prpura algo ms claros (lila).
Los grnulos de los eosinfilos son de color rojo-anaranjado intenso.
Los grnulos de los basfilos prpura azulado muy oscuro. Los grnulos de
los neutrfilos se aprecian de color lila, bastante finos.
Las plaquetas toman coloracin violeta o prpura.

Tincin de Wright o hemograma:

100 X

8.

Se pudieron observar neutrfilos dos muy claramente.

Un linfocito

Y un montoncito de plaquetas

CONCLUSIONES:

A - ERITROCITOS
B - NEUTRFILOS
C - EOSINFILOS
D - LINFOCITO

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Es el principal mtodo de extraccin de sangre en el laboratorio de anlisis clnicos, ya

que es relativamente fcil de realizar.
VENTAJAS.
Nos permite hacer mltiples exmenes y en repetidas veces si se desea, con la
misma muestra.
Las alcuotas de plasma y suero pueden congelarse para futura referencia.
DESVENTAJAS
Puede provocar la coagulacin de la sangre si el procedimiento lleva mucho
tiempo.
Algunos componentes no son estables en sangre anticoagulada.
Puede dificultarse en nios, pacientes obesos en estado de shock.
Puede ocasionarse hemlisis de las muestras afectando ciertas
determinaciones, por las siguientes causas:
Por forzar el paso de la sangre al tubo
Por agitar el tubo enrgicamente
Por extraer sangre de un hematoma

9.
I.

CUESTIONARIO:

Dibujar los elementos formes (eritrocitos, leucocitos y plaquetas) de la

sangre observados a travs de un hemograma.

ERITROCITOS

LEUCOCITOS

PLAQUETAS

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II.

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Menciona las posibles causas que determinan

preparacin se observe precipitados de colorante:

que

en

la

Si en la preparacin se observa precipitados de colorante puede ser debido a varias

causas: lavado insuficiente al final del proceso, utilizacin de porta o cubreobjetos
sucios, mala filtracin del colorante, mala distribucin del colorante a lo largo de la
extensin por no mantenerse en posicin horizontal.
Durante la tincin el tampn fosfato controla el pH del colorante. Si el colorante es
demasiado cido la extensin resultar demasiado rojiza y si por el contrario es
demasiado alcalina la precipitacin presentar un aspecto azulado.
III.

Menciona brevemente la
leucocitos en la sangre:

funcin

Polinucleares

los

diferentes

Basfilos

Eosinofilos

Su funcin
principal es
la fagocitosis d
e bacterias y
hongos

Los
basfilos
son los
responsable
s del inicio
de la
respuesta
alrgica

Los eosinfilos
pueden regular la
respuesta alrgica y
las reacciones de
hipersensibilidad
mediante la
neutralizacin de la
histamina por
la histaminasa.

Linfocitos

de

Principalmente
encargadas de
la inmunidad
especfica o
adquirida.

Monocitos
Su principal funcin
es la de fagocitar, es
decir, comerse a
diferentes microorga
nismos o restos
celulares.

BIBLIOGRAFIA:

tipos

Mononucleares

Neutrfilos

10.

de

http://es.wikipedia.org/wiki/Linfocito
http://es.wikipedia.org/wiki/Monocito
http://es.wikipedia.org/wiki/Eosin%C3%B3filo
http://es.wikipedia.org/wiki/Neutrfilo
http://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocito
http://es.wikipedia.org/wiki/Leucocito
http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Blood_smear.jpg

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http://qbhematologia.files.wordpress.com/2011/08/prc3a1ctica-3.pdf