Escherichia Coli y Clostridium

Laboratorio de Microbiologa-91G
Universidad Nacional del Callao
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
TEMA: ESCHERICHIA COLI Y

CLOSTRIDIUM
ING.QUMICA:
Mg. Herrera Snchez Sonia.
INTEGRANTES:
-Gamboa Lpez Annette Gabriela
- Mendoza Vidal Carla Gwendoline
-Otero Len Jersson Jess
-Pinto Quispe Medardo
-Rios Rodrguez Luis Antonio
11261110044
101012E
1326120127
1216120477
1326120047
I.
INTRODUCCIN
Las enfermedades del aparato digestivo humano son causadas por

microorganismos que entran al cuerpo a travs de la boca, ya sea
porque estn contaminados los alimentos mismos, los utensilios o
incluso las manos de quienes los preparan. En el caso de las frutas y
verduras, esta contaminacin es posible inclusive antes de que se
cosechen debido al abono utilizado o a las aguas residuales con las
que se riegan, que pueden llevar residuos de heces fecales humanas o
animales. La deteccin de microorganismos coliformes se usa como un
indicador de la calidad sanitaria del agua, o como indicador general de
las condiciones higinicas del ambiente en un rea de procesamiento
de alimentos, adems de indicar la posibilidad de haber ocurrido una
contaminacin posterior a la etapa de eliminacin de microorganismos
en el alimento. Los coliformes son bacterias entricas, es decir, que
viven en el intestino de animales, que fermentan la lactosa a una
temperatura de 35 C o 37 C, con produccin de cido y gas en un
periodo de 24 a 48 hrs. Escherichia coli (E. coli) es una bacteria que se
encuentra normalmente en el intestino del ser humano y de los
animales de sangre caliente. La mayora de las cepas de E. coli son
inofensivas. Sin embargo algunas de ellas, pueden causar graves
enfermedades a travs de los alimentos (OMS). E. coli es considerado
uno de los tipos de bacteria enteropatgena de mayor preocupacin en
la industria alimenticia, debido a que se le ha catalogado como uno de
los principales agentes causales de epidemias por contaminacin de
alimentos,
provocando
en
el
humano,
severos
gastrointestinales, principalmente en nios y ancianos.
trastornos
II.
OBJETIVOS
Detectar la presencia de escherichia coli y clostridium, en los alimentos
mediante mtodo cualitativo.
Determinar el nmero de Escherichia coli en el agua y Clostridium en el
Atn, por medio de la cuenta en placa.
Determinar si el alimento es apto para el consumo humano segn la

norma 591-2008/ MINSA.
III.
MARCO TERICO
Escherichia Coli
La Escherichia coli, tambin conocida por
la abreviacin de su nombre, E. coli, es
quizs
el
organismo procariota ms
estudiado por el ser humano. Se trata de

una enterobacteria que
se
encuentra
generalmente en los intestinos animales,

y por ende en las aguas negras, pero se
lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo ubicuo. Fue
descrita
por
primera
Escherich, bacterilogo alemn,
vez
quien
en 1885 por Theodore

la
denomin
Bacterium
von
coli.
Posteriormente la taxonoma le adjudic el nombre de Escherichia coli, en

honor a su descubridor.
Esta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto
del proceso digestivo, adems de producir las vitaminas B y K. Es un bacilo
que
reacciona
negativamente
la tincin
de
Gram (gramnegativo),
es anaerobio facultativo, mvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo),

no forma esporas, es capaz defermentar la glucosa y la lactosa y su prueba
de IMVIC es ++--. Es una bacteria utilizada frecuentemente en experimentos de
gentica y biologa molecular.
La Escherichia coli, en su hbitat natural, vive en los intestinos de la mayor
parte
de
los mamferos sanos.
Es
el
principal
organismo anaerobio
facultativo del sistema digestivo. En individuos sanos, es decir, si la bacteria no

adquiere elementos genticos que codifican factores virulentos, la bacteria
acta como un comensal formando parte de la flora intestinal y ayudando as a
la absorcin de nutrientes. En humanos, la Escherichia coli coloniza el tracto
gastrointestinal de un neonato adhirindose a las mucosidades del intestino
grueso en el plazo de 48 horas despus de la primera comida. Tiene un ancho
variable.
Escherichia coli O157:H7

La Escherichia coli O157:H7 es una de las cientos de cepas de la Escherichia
coli. Aunque la mayora de las cepas son inocuas y viven en los intestinos de
los seres humanos y animales saludables, esta cepa produce una
potente toxina y puede ocasionar enfermedades graves como el sndrome
urmico hemoltico.
La Escherichia coli O157:H7 fue reconocida inicialmente como causa de
enfermedad en 1982 durante un brote de diarrea aguda con sangre en Estados
Unidos Se determin que el brote se deba a hamburguesas contaminadas.
Desde entonces, la mayora de las infecciones han provenido de
comer carne de vacuno picada insuficientemente cocinada. El escritor Robin
Cook escribi una novela sobre el tema titulada Toxina.
En 1996, cerca de Seattle se produjo un brote a causa de esta bacteria, que se
encontr en botellas de zumo de manzana de la marca Odwalla Inc.. Muchas
personas, entre ellas bebs y nios, murieron despus de tomar este zumo. La
bacteria entr en las botellas porque las manzanas que se exprimieron
contenan excrementos de venados de la zona y no hubo ningn tipo de
pasteurizacin.
Se diferencia de las otras Escherichia coli en que no fermenta el sorbitol, no
crece a 44 C y no produce -glucoronidasa. La combinacin de letras y
nmeros
en
el
nombre
de
la
bacteria
se
refiere
a
los
marcadores antignicos especficos que se encuentran en su superficie y la
distingue de otros tipos de Escherichia coli:
El antgeno somtico O, proveniente del lipopolisacrido de la pared

celular;
El antgeno flagelar H, compuesto por 75 polisacridos.
El grupo de riesgo comprende prcticamente a todas las personas,

inmunocompetentes o no. Los nios menores de 5 aos de edad con
problemas de alimentacin, as como los ancianos son los ms susceptibles de
sufrir complicaciones graves.
Patogenia
La Escherichia coli puede causar infecciones intestinales y extra intestinales
generalmente graves, tales como infecciones del aparato excretor, vas
urinarias, cistitis, Uretritis, meningitis, peritonitis, mastitis,septicemia y neumon
a Gram-negativa.
Virulencia
La Escherichia coli est dividida por sus propiedades virulentas, pudiendo
causar diarrea en humanos y otros animales. Otras cepas causan
diarreas hemorrgicas por virtud de su agresividad, patogenicidad y toxicidad.
En muchos pases ya hubo casos de muerte por esta bacteria. Generalmente le
pasa a nios entre 1 ao y 8 aos. Causado generalmente por la
contaminacin de alimentos, y posterior mala coccin de los mismos, es decir,
a temperaturas internas y externas menores de 70 C.
Infecciones Urinarias
Son ms comunes en mujeres por la corta longitud de la uretra (25 a 50 mm),
en comparacin con los hombres (unos 15 cm). Entre los ancianos,
las infecciones urinarias tienden a ser de la misma proporcin entre hombres y
mujeres. Debido a que la bacteria invariablemente entra al tracto urinario por
la uretra (una infeccin ascendente), los malos hbitos sanitarios pueden
predisponer a una infeccin, sin embargo, otros factores cobran importancia,
como el embarazo, hipertrofia benigna o maligna de prstata, y en muchos
casos el evento iniciante de la infeccin es desconocido. Aunque las
infecciones ascendentes son las causantes de infecciones del tracto urinario
bajo y cistitis, no es necesariamente esta la causa de infecciones superiores
como la pielonefritis, que puede tener origen hematgeno.
Tratamiento
El uso de antibiticos es poco eficaz y casi no se prescribe. Para la diarrea se
sugiere el consumo de abundante lquido y evitar la deshidratacin. Cuando
una persona presenta diarrea no debe ir a trabajar o asistir a lugares pblicos
para evitar el contagio masivo.
En algunas patologas como la pielonefritis hay que considerar el uso de
alguna cefalosporina endovenosa.
Clasificacin
Micrografa electrnica, de baja temperatura, de un cmulo de bacterias E.
coli ampliado 10.000 veces. Cada cilindro redondeado es un individuo.
Se distinguen seis cepas segn su capacidad patgena, -tambin se les puede
llamar virotipos-: Escherichia coli enteropatognica (ECEP), enterotoxignica
(ECET), enteroinvasiva (ECEI), enterohemorrgica (ECEH), enteroagregativa
(ECEA) y de adherencia difusa (ECAD).
Escherichia coli enteropatognica (ECEP)
Esta cepa causa diarrea en humanos, conejos, perros y caballos, al igual que la
enterotoxignica, pero la etiologa y los mecanismos moleculares de
colonizacin son diferentes. Carece de fimbrias y no produce las toxinas ST y
LT, pero utilizan la protena intimina, una adhesina, para adherirse a las clulas
intestinales. Este virotipo posee una serie de factores de virulencia que son
similares a los que se encuentran en Shigella, como la toxina shiga.1 2 La
adherencia a la mucosa intestinal causa una reordenacin de la actina en la
clula hospedante, que induce una deformacin significativa. Estas bacterias
son moderadamente invasivas: penetran en las clulas hospedadoras
provocando una respuesta inflamatoria. La causa principal de diarrea en los
afectados por esta cepa son seguramente los cambios provocados en la
estructura de las clulas intestinales.
Escherichia coli enterotoxignica (ECET)
Se parece mucho a Vibrio cholerae, se adhiere a la mucosa del intestino

delgado, no la invade, y elabora toxinas que producen diarrea (diarrea del
viajero). No hay cambios histolgicos en las clulas de la mucosa y muy poca
inflamacin. Produce diarrea no sanguinolenta en nios y adultos, sobre todo
en pases en vas de desarrollo, aunque los desarrollados tambin se ven
afectados. Emplea varias toxinas, incluyendo la enterotoxina resistente al
calor y la enterotoxina termolbil.
Escherichia coli enteroinvasiva (ECEI)
Es inmvil, no fermenta la lactosa. Invade el epitelio intestinal causando diarrea

sanguinolenta en nios y adultos. Libera el calcio en grandes cantidades
impidiendo
la
solidificacin
sea,
produciendo
artritis
en
algunos
casos arterioesclerosis. Es una de las E. coli que causa ms dao debido a la

invasin que produce en el epitelio intestinal.
Escherichia coli enterohemorrgica o verotoxignica (ECEH)
La convencin internacional de nomenclatura de patgenos ha recomendado el
uso de STEC (Shiga Toxin Escherichia coli) para este grupo, debido a que
estas bacterias producen una toxina citotxica para clulas Vero de cultivo de
similaridad estructural a la toxina producida por Shigella dysenteriae. Las STEC
producen verotoxinas que actan en el colon. Sus sntomas son: primero colitis
hemorrgica, luegosndrome urmico hemoltico (lo anterior ms afeccin del
rin,
posible
entrada
en
coma
muerte),
por
ltimo, prpura
trombocitopnica trombtica (lo de antes ms afeccin del sistema nervioso

central). Esta cepa no fermenta el sorbitol y posee un fago, donde se
encuentran codificadas las verotoxinas, tambin llamadas "Toxinas Shiga", no
posee una fimbria formadora de mechones, en vez de esto posee una fimbria
polar larga que usa para adherencia.
Escherichia coli enteroagregativa o enteroadherente (ECEA)
Slo encontrada en humanos. Son llamadas enteroagregativas porque tienen

fimbrias con las que aglutinan clulas en los cultivos de tejidos. Se unen a la
mucosa intestinal causando diarrea acuosa sin fiebre. No son invasivas.
Producen hemolisina y
una
enterotoxina
ST
enterotoxignicas. se le asocian dos toxinas:
toxina termoestable enteroagregante (EAST)
toxina codificada por plasmidos (PET)
Escherichia coli de adherencia difusa (ECAD)
similar
la
de
las
Se adhiere a la totalidad de la superficie de las clulas epiteliales y
habitualmente
causa
enfermedad
en
nios
inmunolgicamente
no
desarrollados o malnutridos. No se ha demostrado que pueda causar diarrea

en nios mayores de un ao de edad, ni en adultos y ancianos.
Clostridium
Clostridium es
un
gnero
de bacterias anaerobias, bacilos grampositivas, parsitas y saprfitas algunas
de
que esporulan,1 y
ellas,
son mviles,
intermedio
en
general
por
de flagelos peritricos.
Toman la forma de fsforo, palillo

de tambor o huso de hilar, de ah su
nombre
griego
significa
huso
especies
ms
el Clostridium
"Klostro",
de
que
hilar.2 Las
importante
son
botulinum productor
del botulismo,
el Clostridium
novyi, Clostridium septicum, Clostridium perfringens productor de lagangrena

gaseosa y Clostridium tetani productor del ttanos.
El gnero est definido por cuatro caractersticas:
1. Presencia de endosporas
2. Metabolismo anaerobio estricto
3. Incapacidad para reducir sulfatos a sulfitos
4. Pared celular gram positiva
Habitad
No todas las especies son patgenas, algunas forman parte de la flora
intestinal normal. Las especies de Clostridium estn ampliamente distribuidas
en el ambiente, habitando el tracto gastrointestinal tanto de humanos como
animales. A pesar del inters en relacin de Clostridium por razn de que estos
organismos estn involucrados con diarrea en nios y en la etiologa del cncer
de colon, hay pocos datos disponibles sobre el hbitat intestinal de la bacteria.
Caractersticas
Los Clostridium son organismos que se observan solo, en parejas o a lo
mximo en cadenas cortas. Son mviles por flagelos peritrcos -con la
excepcin
de C.
perfringens.
Algunas
especies
producen cpsula y
forman esporas de aspectos esfricos u ovalados, situados en el centro del

bacilo o en un extremo subterminal y resistentes al calor. A pesar de ser
bacterias anaerobias obligadas, no todos tienen la misma sensibilidad al
oxgeno. C.
tetani,
por
ejemplo,
requiere
total
anaerobiosis
y C.
perfringes tiende a ser menos exigente. Crecen a temperatura de 37 C y a

un pH entre 7 y 7,4, de modo que son fcilmente inactivadas a pH cido o
bsico, como el cido estomacal, el de limpiadores y desinfectantes como
el cloro e incluso el pH de cidos orgnicos encontrados en el zumo de limn,
por ejemplo. Son fermentadoras de azcares, aspecto que resulta de utilidad
en la diferenciacin de las especies.
Poseen antgenos somticos y flagelares que permiten dividirlas en tipos y
subtipos.
Producen exotoxinas de
efecto necrosante, hemolticos y
potencialmente letales. Las toxinas son nombradas con letras, as por ejemplo,
la toxina necrosante es nombrada con la letra C y la enterits en animales es
causada por las toxinas B, D y E.
Patologa
Los Clostridium incluyen bacterias comunes y libres en la naturaleza, as
como patgenos de
importancia.4 Hay
cuatro especies principales
responsables deenfermedades en humanos:
C.
botulinum (de
un organismo productor
la
palabra botulus,
de
salchicha)
una toxina alimenticia
es
causante
de botulismo,5 un desorden neurolgico agudo potencialmente letal.
C. difficile (llamado as por su dificultad a ser aislado y cultivado) puede

sobrepoblar la flora saprfita intestinal durante terapias con antibiticos,
causando colitis seudomembranosa.6
C. perfringens (llamado perfringens, literalmente "que atraviesa" por

estar asociado a una necrosis invasiva) causa un amplio rango de
sntomas,
tambin
desdeintoxicacin
causante
alimentaria hasta gangrena gaseosa.

de
Es
una enterotoxemia,
frecuentemente hemorrgica en carneros (en

especial corderos),novillos, ovejas y cabras.7
C. tetani (de tetani, que significa rigidez) es el organismo causante

de ttano (trismo), caracterizada por una rigidez muscular excesiva.8
C. septicum (su nombre proviene de la palabra septicum, traducido

como "putrefactor") es uno de los agentes etiolgicos de la septicemia y
una elevada mortalidad.2
C. sordellii, nombrado as en honor al bacterilogo Sordelli quien lo aisl

por primera vez. Puede formar parte de la flora genital femenino, ha estado
involucrado en casos de choque txico despus del parto.
Usos Comerciales
C. thermocellum puede generar etanol a partir de ciertos desperdicios,

hacindolo un posible candidato en el uso y produccin de etanol. Al no
tener requerimientos de oxgeno y por ser termoflico, se reducen los
costos de refrigeracin
C. acetobutylicum, conocido tambin como el organismo Weizmann, el

cual fue usado por primera vez por Jaim Weizmann en la produccin
de acetona y biobutanol a partir de almidn en 1916 en la produccin
de plvora y TNT.
C. ljungdahlii, recientemente descubierto en desechos de pollos

comerciales, puede producir etanol a partir de fuentes de un
solocarbono,
incluyendo Syngas,
una mezcla de dixido
de
carbono e hidrgeno que puede ser generada a partir de
la combustin parcial tanto de biomasa y combustible fsil. El uso de
estas bacterias para producir etanol ya es un proyecto en diversas
plantas energticas.9
Debido al peligro que supone el Clostridium botulinum y otros agentes
patgenos, el nico mtodo seguro de envasar la mayora de los alimentos es
bajo condiciones de presin y temperatura altas, normalmente de unos 116121 C.
IV.
MATERIALES, MUESTRA Y REACTIVOS
MATERIALES Y REACTIVOS
AGAR MUELLER HINTON
PROBETA
AGUA POTABLE
SOLUCION SALINA 0.8%
PAPEL DE FONDO
BLANCO
ATUN
GORRO PIPETA
MECHERO
VASO PRECIPITADO
DE BUNSEN
BUCONASAL
GUANTES
PLACAS PETRI
TRIPODE
V.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Preparacin de la muestra
Primero elegimos una muestra donde tengamos E. coli, que en
este caso ser 100ml de agua potable.
Procedemos a preparar 100ml de solucin salina al 8%
Colocamos 90ml de la solucin en una probeta, le agregamos
10ml de la muestra y homogenizamos.
Paralelamente nuestro medio de cultivo (Agar Mueller hinton) lo
calentamos hasta volverlo lquido.
Separamos en una probeta graduada alrededor de 20 ml. Y

dejamos que enfre hasta una temperatura aproximada de (40
60) C no dejar que solidifique.
Sacamos 1 ml de la nueva solucin y la colocamos en la placa
Petri, a esto agregamos los 20ml del agar.
No olvidar que siempre hay que flamear el rea.
Luego rotulamos.
Y colocamos en la incubadora.
INFORME DE ENSAYO
NALISIS
MUESTRA: 100 ml de agua potable
FECHA DE MUESTREO: 16 de Junio del 2015
FECHA DE EJECUCIN:19 de Junio del 2015
: Microbiolgico de Escherichia coli
RESULTADOS DE MICROBIOLGICOS
Ensayo
Escherichiacoli
UFC/100ml
Limite Permisible
0 UFC/100ml
Se corrobora con la norma (RM N591-2008/MINSA)
VI. CONCLUSIONES
Se pudo observar que el agua potable analizada no cumple con

las condiciones establecidas, por lo tanto no es recomendable su
consumo sin antes hervirla.
VII.
RECOMENDACIONES
Desinfectar apropiadamente el rea de trabajo, as como los instrumentos a

usar.
Usar todos los elementos de higiene como cofia, guantes y mascarillas.
Manipular con cuidado el mechero para evitar quemaduras.
Parte Experimental
Primero elegimos una muestra donde probablemente tengamos

Clostridium, que en este caso ser una lata de atn.
La ponemos con el abre fcil hacia abajo encima de una hoja de papel.
Rotulamos y la metemos a la incubadora
INFORME DE ENSAYO
NALISIS
MUESTRA: 1 lata de grated de atn
FECHA DE MUESTREO: 16 de Junio del 2015
FECHA DE EJECUCIN:19 de Junio del 2015
: Microbiolgico de Clostridium
RESULTADOS MICROBIOLGICOS
Ensayo
Clostridium
UFC/100ml
Limite Permisible
Estril
comercialmente
100 UFC/1g
Se corrobora con la norma (RM N591-2008/MINSA)
CONCLUSIONES
Se descarta la existencia de clostridium en nuestra muestra, ya

que al retirarla de la incubadora no presenta deformacin alguna
ni derrames de lquido.
VIII.
BIBLIOGRAFIA
1. Alcoba Leza M, Carro Fernndez JA, Prez Simn MR, et al. Meningitis
por Listeria monocytogenes en el adulto en Espaa. Presentacin de 10
casos y revisin de la literatura. Rev Clin Esp. 2002
2. Ledermann DW. Listeria monocytogenes, de Murray a Seeliger. En: Una
historia personal de las bacterias. Santiago de Chile: Ril Editores; 2007
3. Parrilla F. Estudio de incidencia de la Listeriosis en Espaa. Universidad
Autnoma de Barcelona. Barcelona. 2011
4. R.M 591-2008 MINSA. Muestra.
Pginas web:
www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Listerias_Medicine2010.
pdf
www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/84002/fpv1de1.pdf;jsessionid=1D04
3C21BD6AF267CC9C3F29BE9A32F6.tdx1?sequence=1
www.bvsops.org.uy/pdf/listeria.pdf

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Universidad Nacional del Callao

TEMA: ESCHERICHIA COLI Y

Las enfermedades del aparato digestivo humano son causadas por

gastrointestinales, principalmente en nios y ancianos.

Determinar si el alimento es apto para el consumo humano segn la

estudiado por el ser humano. Se trata de

generalmente en los intestinos animales,

Escherich, bacterilogo alemn,

en 1885 por Theodore

Posteriormente la taxonoma le adjudic el nombre de Escherichia coli, en

es anaerobio facultativo, mvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo),

los mamferos sanos.

facultativo del sistema digestivo. En individuos sanos, es decir, si la bacteria no

Escherichia coli O157:H7

El antgeno somtico O, proveniente del lipopolisacrido de la pared

El grupo de riesgo comprende prcticamente a todas las personas,

Escherichia coli enterotoxignica (ECET)

Se parece mucho a Vibrio cholerae, se adhiere a la mucosa del intestino

Es inmvil, no fermenta la lactosa. Invade el epitelio intestinal causando diarrea

casos arterioesclerosis. Es una de las E. coli que causa ms dao debido a la

trombocitopnica trombtica (lo de antes ms afeccin del sistema nervioso

Escherichia coli enteroagregativa o enteroadherente (ECEA)

Slo encontrada en humanos. Son llamadas enteroagregativas porque tienen

enterotoxignicas. se le asocian dos toxinas:

toxina termoestable enteroagregante (EAST)

toxina codificada por plasmidos (PET)

Escherichia coli de adherencia difusa (ECAD)

desarrollados o malnutridos. No se ha demostrado que pueda causar diarrea

de bacterias anaerobias, bacilos grampositivas, parsitas y saprfitas algunas

Toman la forma de fsforo, palillo

novyi, Clostridium septicum, Clostridium perfringens productor de lagangrena

forman esporas de aspectos esfricos u ovalados, situados en el centro del

perfringes tiende a ser menos exigente. Crecen a temperatura de 37 C y a

efecto necrosante, hemolticos y

cuatro especies principales

responsables deenfermedades en humanos:

una toxina alimenticia

de botulismo,5 un desorden neurolgico agudo potencialmente letal.

C. difficile (llamado as por su dificultad a ser aislado y cultivado) puede

C. perfringens (llamado perfringens, literalmente "que atraviesa" por

alimentaria hasta gangrena gaseosa.

frecuentemente hemorrgica en carneros (en

C. tetani (de tetani, que significa rigidez) es el organismo causante

C. septicum (su nombre proviene de la palabra septicum, traducido

C. sordellii, nombrado as en honor al bacterilogo Sordelli quien lo aisl

C. thermocellum puede generar etanol a partir de ciertos desperdicios,

C. acetobutylicum, conocido tambin como el organismo Weizmann, el

C. ljungdahlii, recientemente descubierto en desechos de pollos

MATERIALES, MUESTRA Y REACTIVOS

AGAR MUELLER HINTON

SOLUCION SALINA 0.8%

Separamos en una probeta graduada alrededor de 20 ml. Y

MUESTRA: 100 ml de agua potable

FECHA DE MUESTREO: 16 de Junio del 2015

FECHA DE EJECUCIN:19 de Junio del 2015

: Microbiolgico de Escherichia coli

Se corrobora con la norma (RM N591-2008/MINSA)

Se pudo observar que el agua potable analizada no cumple con

Desinfectar apropiadamente el rea de trabajo, as como los instrumentos a

Usar todos los elementos de higiene como cofia, guantes y mascarillas.

Manipular con cuidado el mechero para evitar quemaduras.

Primero elegimos una muestra donde probablemente tengamos

Rotulamos y la metemos a la incubadora