Biorreactor

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Biorreactor a escala de laboratorio conteniendo clulas animales.

Un biorreactor es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biolgicamente
activo. En algunos casos, un biorreactor es un recipiente en el que se lleva a cabo un
proceso qumico que involucra organismos o sustancias bioqumicamente activas
derivadas de dichos organismos. Este proceso puede ser aerbico o anaerbico. Estos
biorreactores son comnmente cilndricos, variando en tamao desde algunos mililitros
hasta metros cbicos y son usualmente fabricados en acero inoxidable.
Un biorreactor puede ser tambin un dispositivo o sistema empleado para hacer crecer
clulas o tejidos en operaciones de cultivo celular. Estos dispositivos se encuentran en
desarrollo para su uso en ingeniera de tejidos.
En trminos generales, un biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales
propicias (pH, temperatura, concentracin de oxgeno, etctera) al organismo o
sustancia qumica que se cultiva. En funcin de los flujos de entrada y salida, la
operacin de un biorreactor puede ser de tres modos distintos:
1. Lote (batch)
2. Lote alimentado (fed-batch)
3. Continuo o quimiostato

Contenido
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1 Diseo de biorreactores
o 1.1 Introduccin
o 1.2 Cultivos y fermentaciones
o 1.3 Clasificacin de los biorreactores

1.3.1 Clasificacin operativa

1.3.2 Clasificacin biolgica

1.3.3 Clasificacin biolgica-operativa

o 1.4 Biorreactores y tipos de cultivo

1.4.1 Clulas y microorganismos anaerbicos

1.4.2 Clulas y microorganismos facultativos

1.4.3 Clulas y microorganismos aerbicos

1.4.4 Cultivos microbianos anaerbicos - fermentador bacterial

(CO2)

1.4.5 Cultivos microbianos facultativos fermentador bacterial

1.4.6 Cultivos microbianos aerbicos fermentador bacterial

(O2)

1.4.7 Cultivos celulares aerbicos y facultativos fermentador

mictico (CO2)

1.4.8 Cultivos Celulares aerbicos estrictos Fermentador con

aireacin (O2)

1.4.9 Clulas vegetales en suspensin biorreactor de

levantamiento por aire (O2) en rgimen turbulento (Re3000)

1.4.10 Protoplastos vegetales - biorreactor de levantamiento por

aire (O2) en rgimen laminar (Re2300)

1.4.11 Clulas animales biorreactor de lecho fluidizado (O2)

1.4.12 Clulas Inmovilizadas biorreactor de Fibra Hueca (O2)

1.4.13 Clulas empaquetadas - biorreactor de Lecho Empacado

(O2)

1.4.14 Cultivos enzimticos Reactores de Lecho Cataltico

o 1.5 Modo de Operacin y Sistemas de Cultivo

o 1.6 Balances y ecuaciones

1.6.1 Balance general

1.6.2 Balance general biomasa

1.6.3 Balance General por componente

1.6.4 Nomenclatura

1.6.5 Balance General por componente para cada modo de

operacin

1.6.6 Balances individuales

1.6.7 Nomenclatura

1.6.8 Subndices

2 Diseo de un Quimioestato: Cultivo continuo

o 2.1 Modelo Cintico de Monod para el Cultivo Continuo
o 2.2 Ecuacin de Diseo de un Reactor de Mezcla Perfecta

3 Diseo de un Biorreactor Semicontinuo

o 3.1 Balances y Ecuaciones
o 3.2 Casos
o 3.3 Ecuacin de Diseo de un biorreactor Semicontinuo Ideal

4 Diseo de un biorreactor discontinuo

o 4.1 Balances y ecuaciones

o 4.2 Casos
o 4.3 Ecuacin de Diseo de un Biorreactor Discontinuo Ideal

5 Diseo de un Biorreactor con Aireacin

o 5.1 Estructura de un Reactor Continuo de Tanque Agitado Con Lnea de
Aireacin
o 5.2 Estructura de un biorreactor de Levantamiento por Aire
o 5.3 Transferencia de 02 y Balance de Oxgeno
o 5.4 Sistema de Aireacin

6 Diseo de un Fermentador Semicontinuo

o 6.1 Sistema de Control de Espuma

7 Sistema de Control de pH
o 7.1 Sistema de Control de Temperatura

7.1.1 Clasificacin de los microorganismos de acuerdo a sus

temperaturas

8 Diseo de un Biorreactor de Tanque Agitado

9 Anlisis de Fenmenos de Transporte

o 9.1 Sistemas de Intercambio Trmico
o 9.2 Clculo de Resistencias Trmicas

9.2.1 Resistencia trmica en la conduccin

o 9.3 Intercambiadores de Calor

10 Referencias

[editar] Diseo de biorreactores

El diseo de biorreactores es una tarea de ingeniera bastante compleja. Los

microorganismos o clulas son capaces de realizar su funcin deseada con gran
eficiencia bajo condiciones ptimas. Las condiciones ambientales de un biorreactor
tales como flujo de gases (por ejemplo, oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono, etc.),
temperatura, pH, oxgeno disuelto y velocidad de agitacin o circulacin, deben ser
cuidadosamente monitoreadas y controladas.
La mayora de los fabricantes industriales de biorreactores usan recipientes, sensores,
controladores y un sistema de control interconectados para su funcionamiento en el
sistema de biorreaccin (ver PLC).
La misma propagacin celular (fenmeno conocido en ingls como Fouling) puede
afectar la esterilidad y eficiencia del biorreactor, especialmente en los intercambiadores
de calor. Para evitar esto, el biorreactor debe ser fcilmente limpiable y con acabados lo
ms sanitario posible (de ah sus formas redondeadas).
Se requiere de un intercambiador de calor para mantener el bioproceso a temperatura
constante. La fermentacin biolgica es una fuente importante de calor, por lo que en la
mayor parte de los casos, los biorreactores requieren de agua de enfriamiento. Pueden
ser refrigerados con una chaqueta externa o, para recipientes sumamente grandes, con
serpentines internos.
En un proceso aerobio, la transferencia ptima de oxgeno es tal vez la tarea ms difcil
de lograr. El oxgeno se disuelve poco en agua (y an menos en caldos fermentados) y
es relativamente escaso en el aire (20,8 %). La transferencia de oxgeno usualmente se
facilita por la agitacin que se requiere tambin para mezclar los nutrientes y mantener
la fermentacin homognea. Sin embargo, existen lmites para la velocidad de agitacin,
debidos tanto al alto consumo de energa (que es proporcional al cubo de la velocidad
del motor) como al dao ocasionado a los organismos debido a un esfuerzo de corte
excesivo.
Los biorreactores industriales usualmente emplean bacterias u otros organismos simples
que pueden resistir la fuerza de agitacin. Tambin son fciles de mantener ya que
requieren slo soluciones simples de nutrientes y pueden crecer a grandes velocidades.
En los biorreactores utilizados para crecer clulas o tejidos, el diseo es
significativamente distinto al de los biorreactores industriales. Muchas clulas y tejidos,
especialmente de mamfero, requieren una superficie u otro soporte estructural para
poder crecer y los ambientes agitados son comnmente dainos para estos tipos de
clulas y tejidos. Los organismos superiores tambin requieren medios de cultivo ms
complejos.

[editar] Introduccin
El diseo en bioingeniera no es solo la aplicacin de conceptos bsicos y tericos que
conlleven a lograr un prototipo; para la realizacin ntegra de un modelo, otra gran
parte, trata de la adaptacin creativa y de la utilizacin del ingenio propio para lograr el
objetivo de conjuntar el ambiente biolgico de un cultivo vivo con el ambiente artificial
de un dispositivo controlado; este es el resultado denominado biorreactor o reactor
biolgico. Un biorreactor es por tanto un dispositivo biotecnolgico que debe proveer

internamente un ambiente controlado que garantice y maximice la produccin y el

crecimiento de un cultivo vivo; esa es la parte biolgica. Externamente el biorreactor es
la frontera que protege ese cultivo del ambiente externo: contaminado y no controlado.
El biorreactor debe por tanto suministrar los controles necesarios para que la operacin
o proceso (bioproceso) se lleve a cabo con economa, alto rendimiento (productividad) y
en el menor tiempo posible; esa es la parte tecnolgica.

[editar] Cultivos y fermentaciones

Lo primero que hay que entender en el diseo de reactores biolgicos es que contrario a
los qumicos, su cintica no esta determinada exclusivamente por la velocidad de
reaccin y las variables que la determinan. Aunque se puede describir de manera similar
a la qumica, la cintica biolgica tambin depende de caractersticas intrnsecas del
organismo o cultivo tales como crecimiento y tasa de divisin celular, as como del tipo
de operacin que se lleve a cabo. Por eso, lo primero que se define en el diseo de un
biorreactor es el propsito de utilizacin; es decir, qu tipo de cultivo se va a utilizar, el
modo de operar y/o el proceso de cultivo. El conjunto biorreactor-sistema de cultivo
debe cumplir con los siguientes objetivos:
1. Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de cultivo.
2. Mantener constante y homognea la temperatura.
3. Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
4. Prevenir la sedimentacin y la floculacin.
5. Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el cultivo.
6. Mantener el cultivo puro.
7. Mantener un ambiente asptico.
8. Maximizar el rendimiento y la produccin.
9. Minimizar el gasto y los costos de produccin.
10. Reducir al mximo el tiempo.
Una fermentacin es un proceso biolgico o bioproceso que consiste en la
descomposicin de la materia orgnica por microorganismos fermentadores (bacterias y
hongos).
Un cultivo tambin es un bioproceso; pero generalmente se asocia a organismos o
microorganismos superiores (en orden jerrquico) a las bacterias; los cultivos son casi
todos del Reino Eucariota.

[editar] Clasificacin de los biorreactores

[editar] Clasificacin operativa

Tanto biorreactores como fermentadores se clasifican primeramente de acuerdo al modo

de operacin: discontinuo, semicontinuo, continuo.
Esta es una clasificacin operativa y se aplica a cualquier reactor, sea qumico o
biolgico (biorreactor). En los reactores biolgicos el modo de operacin define el
sistema de cultivo que es el mismo y delimita la clasificacin procesal-productiva del
bioproceso (cultivo). Al operar un biorreactor en una determinada categora
(discontinuo, semicontinuo, continuo), automticamente queda determinado el modo de
cultivo del sistema y se definen los parmetros y las caractersticas operativas y de
diseo que intervienen en el proceso productivo del sistema.
[editar] Clasificacin biolgica
Los sistemas biolgicos deben interaccionar con el ambiente externo para poder crecer y
desarrollarse; es por eso que los biorreactores se clasifican biolgicamente de acuerdo al
metabolismo procesal del sistema de cultivo: anaerbico, facultativo, aerbico.
Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones estn basados en el metabolismo
celular del cultivo. El metabolismo define los parmetros y caractersticas operativasbiolgicas de diseo y de operacin del biorreactor. Estas caractersticas son las que
intervienen en la parte biolgica del sistema y tienen que ver con el crecimiento,
productividad y rendimiento del cultivo; por lo que, definen la clasificacin biolgicaprocesal del sistema de cultivo.
[editar] Clasificacin biolgica-operativa
Ambas clasificaciones; la biolgica y la operativa, son procesalmente interdependientes
y en su conjunto afectan el diseo final del biorreactor.
Al conjuntarse ambas clasificaciones, se conjuntan tambin la funcin operativa y la
biolgica para establecer entre ambas un propsito de utilizacin, el modo de cultivo y
el bioproceso. Siendo el propsito de utilizacin, el destino de cultivo del biorreactor;
para qu tipo de cultivo va a ser utilizado el biorreactor; el modo de cultivo es sinnimo
de sistema de cultivo y el bioproceso es en s, todo el proceso.

[editar] Biorreactores y tipos de cultivo

Los sistemas biolgicos que determinan el metabolismo celular de cultivo y el modo
procesal-biolgico del sistema son:
[editar] Clulas y microorganismos anaerbicos
Bacterias en su gran mayora, son microorganismos de metabolismo degradativo
(catablico); generalmente unicelulares, estos microorganismos son autnomos y
nutricionalmente independientes (auttrofos); sus clulas (cuerpos) no respiran (no
utilizan la gluclisis para la respiracin celular), en cambio, utilizan vas alternas, donde
una molcula orgnica, producida durante el proceso metablico (catabolismo), es
utilizada como aceptor de electrones, en un proceso bioqumico conocido como
respiracin oxidativa; esta molcula es reducida a producto orgnico en un proceso
comnmente denominado fermentacin.

[editar] Clulas y microorganismos facultativos

Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre ambientes: aerbico
(presencia de oxgeno) y anaerbico (ausencia de oxgeno); son microorganismos de
metabolismo mixto por lo que, pueden tanto degradar (catabolismo) como construir
(anabolismo) materia orgnica, a partir de diferentes sustratos (materia prima), tanto
orgnicos como inorgnicos. Pese a su versatilidad, sus mayores representantes son
microorganismos que presentan relaciones parsitas o simbiontes tales como: hongos y
levaduras, por lo que no son muy extensos.
[editar] Clulas y microorganismos aerbicos
Pertenecen en su mayora al Reino Eucariota pero tambin los hay procariota son
microorganismos y clulas que respiran (utilizan la gluclisis como forma de
respiracin celular); por lo que su metabolismo es constructivo (anablico) y deben
obtener sus nutrientes de diferentes fuentes. Sus principales grupos estn representados
por: bacterias y microorganismos aerbicos, plantas y animales; cuyas clulas se puedan
cultivar en suspensiones celulares o bien, en diferentes arreglos artificiales o
modificadas.
A continuacin algunos de los posibles sistemas de cultivo que se pueden realizar y el
tipo de biorreactor asociado a cada uno:
[editar] Cultivos microbianos anaerbicos - fermentador bacterial (CO2)
Los microorganismos de metabolismo anaerbico son los ms simples de todos, tan solo
necesitan de un medio de cultivo adecuado, agitacin vigorosa y cierta cantidad de CO2
(dixido de carbono) disuelto (COD) para crecer y multiplicarse.
[editar] Cultivos microbianos facultativos fermentador bacterial
Los microorganismos facultativos toleran la presencia de oxgeno en bajas
concentraciones y adems de un sustrato adecuado, slo requieren agitacin moderada y
un medio de cultivo para crecer y desarrollarse.
[editar] Cultivos microbianos aerbicos fermentador bacterial (O2)
Los microorganismos aerbicos necesariamente requieren la presencia de oxgeno (aire)
disuelto (OD) para sobrevivir; adems, agitacin moderada y un medio de cultivo rico
en nutrientes para poder crecer y desarrollarse.
[editar] Cultivos celulares aerbicos y facultativos fermentador mictico (CO2)
Los cultivos celulares se diferencian de los bacteriales (microbios) en que no son
microorganismos procariota, son eucariota. Son microorganismos aerbicos o
facultativos pertenecientes al Reino Fungi (hongos y levaduras), generalmente llamados
micticos, requieren de la presencia de CO2 disuelto en el medio como sustrato
limitante de la velocidad de reaccin y generan estructuras reproductivas muy
particulares.

[editar] Cultivos Celulares aerbicos estrictos Fermentador con aireacin (O2)

El cultivo de microorganismos celulares (no bacteriales) aerbicos estrictos requiere la
presencia de oxgeno disuelto en el medio de cultivo para el metabolismo celular; as
como una adecuada agitacin.
[editar] Clulas vegetales en suspensin biorreactor de levantamiento por aire
(O2) en rgimen turbulento (Re3000)
Las clulas vegetales pueden ser cultivadas en suspensiones celulares: pequeos
agregados celulares que se suspenden en el medio de cultivo mediante agitacin. Dado
que las clulas vegetales respiran, el diseo del biorreactor debe incorporar una lnea de
aireacin (aire) para suministrar oxgeno disuelto (OD) al medio de cultivo. El diseo
debe contar con agitacin vigorosa, pues los agregados celulares vegetales tienden a
agruparse (clusters) y de alcanzar gran tamao y peso, precipitaran. Por eso, la
operacin de este tipo de biorreactores debe ser en rgimen turbulento (Re3000). Los
biorreactores para clulas vegetales en suspensin generalmente son diseados con un
mecanismo de levantamiento por aire air lift que combina una agitacin vigorosa
(turbulenta) con una adecuada aireacin (oxgeno disuelto) del medio de cultivo.
[editar] Protoplastos vegetales - biorreactor de levantamiento por aire (O2) en
rgimen laminar (Re2300)
Los protoplastos son clulas vegetales desprovistas de su pared celular, esto se logra
utilizando enzimas proteolticas (proteasas y lipasas) que degradan la pared celular.
Actualmente, el cultivo de protoplastos no es muy comn, pero de realizarse, requiere
de una cama de aire (burbujas muy finas) que opere en rgimen laminar (Re2300),
para evitar que los esfuerzos cortantes (esquileo) e hidrodinmicos (agitacin)
generados en el medio de cultivo daen (lisis celular) las clulas en suspensin (tamao
de Kolmogorov de los Eddies). Tambin es indispensable que el medio de cultivo
contenga las proteasas y lipasas necesarias para evitar la regeneracin de la pared
celular.
[editar] Clulas animales biorreactor de lecho fluidizado (O2)
Los cultivos de clulas animales requieren de proximidad mutua y de un soporte slido
(anclaje) para interactuar (comunicacin clula-clula) y poder metabolizar (producir);
esto por cuanto, las clulas animales, por lo general, no son independientes y deben
estar unidas a un sistema (p.ej; heptico) para funcionar adecuadamente. Para
suministrar esa proximidad y el soporte necesario, los diseos de biorreactores para
clulas animales deben aumentar la densidad celular (concentrar) de las clulas en
cultivo. Una forma de hacerlo es incorporar un lecho fluidizado formado por cantidad
de microesferas acarreadoras hechas de material cermico poroso inerte que, por su
tamao (micromtrico) forman una interfase con el medio de cultivo (fluido) que
permite la transferencia de masa (nutrientes y OD), energa (calor) y momentun
(agitacin) entre el medio de cultivo y las clulas en cultivo; lo que es llamado lecho
fluidizado. Los cultivos celulares animales, por la delicada naturaleza de las membranas
plasmticas requieren adems de oxgeno disuelto (OD) en el medio de cultivo (tamao
de Kolmogorov de los Eddies) y de un rgimen de agitacin laminar (Re2300).

[editar] Clulas Inmovilizadas biorreactor de Fibra Hueca (O2)

La inmovilizacin celular es otra forma de lograr proximidad celular y aumentar la
densidad celular y la concentracin de metabolitos dentro de las clulas. La
inmovilizacin es un mtodo mucho ms eficiente y logra rendimientos muy superiores
a los del lecho fluidizado. Pero, los fenmenos de transferencia (masa, momentun y
energa) se ven muy limitados por la inmovilidad. Esto es especialmente crtico en
cultivos de clulas de mamfero por cuanto ya clula no recibe la nutricin adecuada.
Los reactores de fibra hueca son los dispositivos ms utilizados para inmovilizar y
concentrar cultivos celulares animales. Su diseo consiste en una batera de fibras hueca
y porosa en su interior, colocadas en paralelo. Las clulas se concentran y aumenta la
densidad celular, en los intersticios de las fibras huecas. El medio de cultivo fluye en
contrasentido desde el exterior del reactor o a travs de una carcasa como si fuera un
intercambiador de calor de doble tubo. Para solventar el problema de la escasa
transferencia de masa (nutrientes y OD) dentro de la fibra hueca, un diseo novedoso es
el tambor rotativo en el cual, el tambor externo rota sobre la batera de fibras huecas,
generando una circulacin constante de masa y de momentun, aumentando las tazas de
transferencia.
[editar] Clulas empaquetadas - biorreactor de Lecho Empacado (O2)
El empaquetamiento celular es una forma menos drstica de inmovilizacin; pues sta
es parcial. Tambin tiene el objetivo de aumentar la concentracin y la densidad celular;
pero al no estar enclaustradas las clulas, la transferencia de masa es mayor, aunque
siempre limitada. Un lecho empacado es una matriz de soporte slido que retiene las
clulas, bien por geometra (dentro de los intersticios o espacios huecos de la matriz),
bien por afinidad (paso o adherencia selectiva). Un biorreactor con este propsito debe
contener un lecho de soporte slido, sumergido en el medio de cultivo. La oxigenacin
generalmente se realiza en el exterior del lecho, a travs del medio de cultivo.
[editar] Cultivos enzimticos Reactores de Lecho Cataltico
Los cultivos enzimticos se comportan en algunos aspectos como cultivos celulares y en
otros como reactivos qumicos. Debido a que un sustrato enzimtico es un cataltico de
una reaccin biolgica, la cintica de estos reactores puede simularse como la qumica,
pero sin olvidar que el compuesto es biolgico. Los sustratos enzimticos deben estar
anclados a un lecho semislido o a uno semifluido - segn sea el caso - dependiendo de
la naturaleza enzimtica del sustrato; que por la naturaleza de la enzima se conocen
como lechos catalticos. Muchas veces el medio de cultivo, adems de la enzima,
requiere, para un sustrato determinado, su respectivo precursor metablico llamado
cofactor, ms algn componente especial que agilice el proceso metablico.

[editar] Modo de Operacin y Sistemas de Cultivo

El modo de operacin de un sistema de cultivo, es sinnimo del modo de operar del
biorreactor o fermentador. ste no solo influye en el diseo propio del reactor, tambin,
en el modelo cintico de crecimiento del cultivo y en el proceso de produccin. Existen
tres modos de cultivo aunados a tres modos bsicos de operacin:

Discontinuo(batch): por lotes o tandas, sin alimentacin (F); se coloca dentro

del biorreactor la carga total de cada proceso (tanda o lote) de cultivo o
fermentacin y se dejar que se lleve a cabo el proceso productivo o la
fermentacin por el tiempo que sea necesario; el cul se denomina tiempo de
retencin.

Semicontinuo (fed-batch): por lotes alimentados, con alimentacin de entrada

(F1); se alimenta una lnea de entrada o alimentacin (F1) para que el sistema de
cultivo tenga un producto (biomasa) con mximo de crecimiento (exponencial) y
aumente la productividad.

Continuo (continuos): por quimioestato, se alimenta una lnea de entrada F1 o

alimentacin y se drena una lnea de salida F2 o lavado; de manera que los flujos
o caudales de ambas lneas sean iguales y la produccin sea contnua.

[editar] Balances y ecuaciones

La parte terica del diseo consiste en modelar; es decir, poner en ecuaciones el
proceso biolgico (bioproceso) que se lleva a cabo, para que, a partir de esas
ecuaciones, dimensionar (dar dimensiones) y simular el comportamiento terico de un
modelo prototipo. Si la teora corresponde a la prctica, el comportamiento del modelo
se acercar a la realidad; est en la habilidad del diseador, que esto sea lo ms cercano
posible. Antes de modelar en ecuaciones un diseo es necesario saber que tamao
va a tener el modelo, de cuanto se dispone y cuanto vamos a requerir para realizar
un proyecto de ese tamao. Eso es, hacer un balance para igualar todas las variables o
parmetros de las ecuaciones y llevar la contabilidad de nuestro proyecto.
[editar] Balance general
El primer balance que debe realizarse en cualquier sistema es el Balance General o
Global; en el se toma en consideracin nicamente el sistema como una caja negra
el ambiente externo y los flujos que entran (F1) y salen (F2) e interaccionan con el
ambiente externo. De esta forma el primer balance es:
[editar] Balance general biomasa
Velocidad de Acumulacin = Velocidad de Entrada Velocidad de Salida + Velocidad
de Formacin Velocidad de Consumo
[editar] Balance General por componente
Una vez dado el balance general de biomasa, debe tomarse en cuenta que, en un sistema
de cultivo, existen muchos componentes: sustratos, productos, compuestos metablicos
que conforman el caldo de cultivo (medio interno); incluso la biomasa, se considera un
componente en s misma. A partir del balance general, debe establecerse un balance
general para cada componente i del cultivo o la biomasa.
De acuerdo al enunciado del balance general: la velocidad de acumulacin del
componente i es el flujo de entrada (F1) por la concentracin inicial del componente i

[velocidad de entrada] menos el flujo de salida (F2) por la concentracin del

componente i (Ci) [velocidad de salida]; ms la velocidad de formacin del componente
i [formacin] menos la velocidad de consumo del componente i [consumo]:
Ec.1
Respecto a las velocidades de formacin y consumo:
Si se trata de un componente metablico, responden a la acumulacin (formacin) del
componente dentro de la clula y al consumo del metabolito por parte de la clula
(consumo).
Si se trata de biomasa, formacin corresponde a la generacin de biomasa y el consumo
al consumo de biomasa durante el bioproceso; esto es, a la produccin metablica en el
primer caso y a la produccin o productividad en el segundo.
[editar] Nomenclatura

V = volumen del cultivo (m)

F1 = caudal de alimentacin (m/s)

F2 = caudal de salida (m/s)

= concentracin del componente i en la alimentacin (kg/m)

Ci = concentracin del componente i en el lavado (kg/m)

= velocidad de formacin del componente i (kg/ms)

= velocidad de consumo del componente i (kg/ms).

[editar] Balance General por componente para cada modo de operacin

La ecuacin de balance general por componente Ec. 1, por ser general, se define para
una operacin contnua. La condicin fundamental de toda operacin contnua es:
En una operacin contnua el flujo de entrada (F1) debe ser igual al flujo de salida (F2):
F1 = F2
Esta condicin se conoce como flujo en estado estacionario (FEE). Para modelar el
comportamiento de la biomasa del cultivo en el estado estacionario (EE) adems de la
condicin de flujo (FEE) debe haber equilibrio en la densidad o concentracin de sta.
Esto se conoce como quimioestsis o equilibrio quimioesttico y es por eso que a los
sistemas de cultivo continuo se les llama quimioestatos. Est condicin est dada por la
ecuacin: dV/dt = F1 F2 Ec. 2. Bajo la condicin de FEE y suponiendo que la
densidad del cultivo y de la alimentacin son iguales (Ec.2, quimioestsis) la Ec.1 se

reduce a: dCi/dt = F (Ci1 Ci) + V (rfi rci) Ec. 3. La ec.3 que se conoce como
ecuacin de balance para una operacin contnua en estado estacionario.
De no existir el estado estacionario (EE) se produciran dentro del biorreactor dos
condiciones de flujo indeseables:
Si F1 > F2 se produce el rebalse o desborde del biorreactor, condicin que se da cuando
el flujo de entrada sobrepasa la capacidad del reactor.
Si F2 > F1 se produce el lavado o drenado de producto o biomasa, condicin que se da
cuando el flujo de salida sobrepasa la capacidad del reactor.
Cuando el modo de operacin es semicontinuo (fed-batch) el caudal de salida F2 es nulo
(F2 = 0) por lo que, el volumen V aumentar con el tiempo en funcin del caudal de
entrada: dV/dt = F Ec.4. Y en el balance de materia se anula el trmino F2Ci
resultando: d(VCi/dt) = FCio + V (rfi - rci) Ec.5.
Observe que el volumen que permanece dentro del operador diferencial es porque vara
con el tiempo (Ec.4), en tanto que el otro no lo hace (Ec.3). Esa es la razn por la que
una operacin semicontnua tiene duracin limitada en el tiempo (el volumen no puede
incrementarse ms all del volumen de trabajo o volumen til del biorreactor). El
tiempo que dura una operacin semicontnua se conoce como tiempo de residencia (tr) y
es el tiempo que dura el cultivo o bioproceso en un sistema semicontinuo.
Cuando el modo de operacin es discontinuo (batch) ambos caudales son nulos (F1 =
F2 = 0) por lo que, el volumen es constante y se anulan los trminos F1 Cio, F2 Ci en la
Ec.1.Eso da como resultado: dCi/dt = rfi rci Ec.6.
La duracin de un cultivo discontinuo (batch) es tambin, limitada en el tiempo, pero se
diferencia de la del cultivo semicontinuo (fed-batch) en que depende nicamente de las
condiciones iniciales del cultivo; esto por cuanto, no existe alimentacin (F1). Una vez
cargado el biorreactor e inoculado el medio de cultivo, la concentracin de la biomasa
aumenta gracias a los nutrientes, pero una vez que el sustrato que limita el crecimiento
se haya agotado, el crecimiento ya no es posible y finaliza el cultivo. Por este motivo, el
tiempo que dura el cultivo dentro de un biorreactor con un modo de operacin
discontinuo se llama tiempo de cultivo (tc).
[editar] Balances individuales
Los principales balances por componente en su forma individual son:

Balance de Biomasa: d (VX) / dt = FiXi + VrgX FoXo VrcX

rgX = X (velocidad de crecimiento celular)

rcX = kdX (velocidad de muerte celular)

Balance de Sustrato: d (VS) / dt = FiSi FoSo VrcS

rcS = qSX / YX/S = X / YG + m X + qPX / YP

Balance de producto: d (VP) / dt = FiPi FoPo VrgP

rgP = qP X

Balance de Oxgeno: d (VCL) / dt = FiCLi FoCLo VrcO2 + VNiO2

Balance de Anhdrido Carbnico: d(VCCO2) / dt = FiCCO2i FoCCO2o +

VrgCO2 VNoCO2

[editar] Nomenclatura

V: Volumen del lquido en el biorreactor, L

t: Tiempo, h

y: Concentracin del componente y en el lquido dentro del biorreactor, g/L

X: Concentracin de biomasa en el lquido dentro del biorreactor, g/L

S: Concentracin de sustrato en el lquido dentro del biorreactor, g/L

P: Concentracin de producto en el lquido dentro del biorreactor, g/L

CL: Concentracin de oxgeno en el lquido dentro del biorreactor, g/L

C*: Concentracin de oxgeno en el lquido en equilibrio con el gas, g/L

CCO2: Concentracin de CO2 en el lquido dentro del biorreactor, g/L

F: Velocidad de flujo de lquido, L/h

Ni: Velocidad de transferencia de un componente del gas al lquido, g/Lh

No: Velocidad de transferencia de un componente del lquido al gas, g/Lh

rg: Velocidad de generacin, formacin o produccin, g/Lh

rc: Velocidad de consumo o utilizacin, g/Lh

: Velocidad especfica de crecimiento celular, h-1

qS: Velocidad especfica de consumo de sustrato, g/gh

qP: Velocidad especfica de formacin de producto, g/gh

m: Velocidad especfica de consumo de sustrato para mantenimiento celular,

g/gh

Kd: Velocidad especfica de muerte o declinacin celular, h-1

YP: Coeficiente (estequiomtrico) de rendimiento de producto basado en el

consumo de sustrato consumido para formacin de producto, g/g

YP/S: Coeficiente de rendimiento de producto basado en el consumo total de

sustrato, g/g

YG: Coeficiente de rendimiento de biomasa basado en el consumo de sustrato

para crecimiento, g/g

YX/S: Coeficiente de rendimiento de biomasa basado en el consumo total de

sustrato, g/g

kLa: Coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno, h-1

[editar] Subndices

i = Ingreso

o = Salida

S = Sustrato

P = Producto

O2 = Oxgeno

CO2 = Anhdrido carbnico

[editar] Diseo de un Quimioestato: Cultivo continuo

Un quimioestto un sistema de cultivo en continuo; su operacin esquemtica es como
la que muestra la figura. Una operacin en continuo exige una serie de consideraciones
para modelar su comportamiento:
Mezcla perfecta (sin gradientes de concentracin y con agitacin turbulenta);
Flujo de entrada y salida iguales (F1 = F2 = F);
Volumen de operacin constante (volumen de lquido dentro del biorreactor: dV/dt = 0);
Parmetros constantes de transferencia (temperatura, pH, velocidad de transferencia de
oxgeno, etc.)

La operacin industrial de un quimioestto se ilustra en la figura.

Para iniciar un cultivo continuo; el biorreactor o el fermentado debe cargarse
previamente con el inculo del cultivo y luego de que este crece lo suficiente, alimentar
el sistema con medio fresco a un caudal F1 y lavar el producto por un rebalse a un
caudal F2, de modo que, el volumen se mantenga constante, el tiempo que dure el
bioproceso o la fermentacin. El caudal de salida F contiene clulas vivas (X), medio de
cultivo con algn sustrato (S) parcialmente agotado (So) y posiblemente algn producto
(P). Al alimentar con medio fresco (So) el caudal de entrada (F1), la biomasa (Xo) y el
producto (Po) sern iguales a cero para las condiciones de entrada; por lo que, slo se
deber considerar la concentracin de sustrato limitante del crecimiento (So) en la
alimentacin.
Balances y Ecuaciones en el Estado Estacionario
Teniendo en cuenta estas consideraciones, los balances de materia para X, S y P en el
estado estacionario (E.E) sern:
Balance de Biomasa: VdX/dt = -FX + Vrx = (F/V)X + X = 0; rX = mX; E.E dX/dt
= 0. Por definicin D = velocidad de dilucin = F/V = D
Balance de Sustrato: VdS/dt = F (So S) Vrs; rs = X / YX/S; E.E dS/dt = 0. Por
definicin: SEE = KsD / m D XEE = YX/S (S0 S)
Donde: D = velocidad de dilucin; SEE = concentracin del sustrato limitante de la
velocidad en estado estacionario; XEE = concentracin de biomasa en estado
estacionario.
Balance de Producto: VdP/dt = -FP + Vrp = PEE = qPX / D; rP = qPX; E.E dP/dt = 0
Donde: PEE = concentracin del producto en el estado estacionario.
Nota: cuando el sustrato limitante de la velocidad de crecimiento (S) es tambin la
fuente de carbono: X = DYX/S (So SEE) / (D + msYX/S)
[editar] Modelo Cintico de Monod para el Cultivo Continuo
El modelo de crecimiento que se aplica en los sistemas de cultivo continuo es el modelo
cintico de Monod: D = mS / (KS + S) S = KSD / (m D) X = YX/S [S0 KSD /
(m D)]
Velocidad Crtica de Dilucin: existe un valor de dilucin por encima del cual es X =
0; es decir, se produce lavado o arrastre de la biomasa por encima del valor de equilibrio
que permite el estado estacionario y F2 > F1.
Este factor se conoce como dilucin crtica (Dc); Dc = mSo / Ks + So
En condiciones normales de operacin contnua S0 >> KS DC = m por lo que, un
quimioestto debe trabajar a una fraccin de m. En trminos de crecimiento de la

biomasa esto significa que el quimioestto impone una condicin selectiva al

crecimiento del cultivo o el microorganismo.
Formacin de producto: PEE = rp/D = qPXEE/D
Determinacin de Parmetros de Crecimiento: un cultivo continuo es sumamente til
para determinar parmetros de crecimiento.
1/D = 1/m + Ks/m * 1/SEE
Se grafica 1/D en funcin de 1/S los puntos se ajustan a una recta cuya interseccin con
el eje 1/D es el valor de 1/m y cuya pendiente es Ks /m.
D (So SEE) / XEE = D / YX/S + ms
La grfica de D (So-S) / X en funcin de D permite estimar 1/Y'x/s y s cuando el
sustrato limitante de la velocidad de crecimiento es la fuente de carbono.
[editar] Ecuacin de Diseo de un Reactor de Mezcla Perfecta
La ecuacin de diseo nos da el tiempo de residencia (t) del cultivo dentro del
biorreactor.
Para poder utilizar la ecuacin de diseo hay que modificar la definicin de componente
X y sustituirlo por conversin X del componente i.
Por definicin: Xi = Nio Ni / Nio Donde: N = moles del componente i. Despejando:
Ni = Nio (1 - Xi) dNi/dt = -Nio dXi/dt = riV Con lo que, la ecuacin de balance de
biomasa para el estado estacionario se transforma en: -FXi + riV = VdXi/dt = 0
Reordenado: V/F = Xi / -ri = t = ecuacin de diseo de un reactor de mezcla
perfecta. Donde: t = tiempo de residencia del cultivo dentro del biorreactor; Xi = Xi2
Xi1 = dXi
Otro trmino comnmente utilizado en el diseo de reactores es el tiempo espacial ()
el cual define el tiempo necesario para procesar o fermentar en el biorreactor, un
volumen de alimentacin, medido en condiciones de entrada (presin y temperatura),
igual al volumen de operacin del biorreactor (el que define el estado estacionario). El
tiempo espacial se obtiene dividiendo el volumen de reactor (V) entre el caudal
volumtrico de entrada al biorreactor (Q): = V/Q
Observe que al igual que t las unidades de son s-1.

[editar] Diseo de un Biorreactor Semicontinuo

Un cultivo semicontinuo posee una lnea de entrada o alimentacin (F1). Para iniciar un
cultivo alimentado (fed-batch) son validas las mismas consideraciones que se hicieron
para el cultivo continuo; pero, se inicia la alimentacin del cultivo cuando el sustrato
limitante de la velocidad se ha agotado; esto permite controlar la velocidad de

crecimiento, regulando la velocidad de alimentacin (caudal); finalmente se debe

alimentar el cultivo con medio fresco.
[editar] Balances y Ecuaciones
Los balances de materia respectivos para X, S y P son:

Balance de Biomasa: d (VX)/dt = Vrx = VX

Balance de Sustrato: d (VS)/dt = FSo Vrs

Balance de Producto: d (VP)/dt = Vrp

Nota: en estos casos el volumen V permanece dentro del operador diferencial; esto se
debe a que vara con el tiempo.
[editar] Casos
Si en la ecuacin de balance de sustrato la velocidad rs se reemplaza por rx / Yx/s se
tiene: d (VS)/dt = FSo 1/Yx/s. d (XV)/dt
Para controlar la velocidad de crecimiento (rx) mediante el caudal de alimentacin (F)
el sustrato (S) debe ser cero en todo momento: S = 0 y por lo tanto: d (SV)/dt = 0. Esta
condicin equivale a que el sustrato sea consumido en su totalidad conforme ingresa al
biorreactor; es por eso que se aplica la condicin de alimentacin fresca. Bajo estas
condiciones, la ecuacin de balance de biomasa se transforma en: d (VX)/dt = FSoYx/s
y por integracin: XV = XeVe + FSoYx/st Donde: Xe y Ve representan la concentracin
de biomasa y el volumen de cultivo al iniciar la alimentacin.
La variacin del volumen con el tiempo es: V = Ve + Ft
El criterio para disear una alimentacin adecuada se obtiene por la ecuacin: FSo =
VeXe / Yx/s la ecuacin es vlida para cualquier rango de , hasta m.
Como criterio adicional, sobre todo en procesos de fermentacin se suele seleccionar un
valor de So tan alto como sea posible y lo contrario con F (uno relativamente pequeo);
a fin de evitar el lavado del cultivo por dilucin excesiva. No obstante esto ocasionara
que la duracin del cultivo (tiempo de fermentacin) se prolongarse excesivamente.
Para buscar el equilibrio se dise empricamente una solucin de compromiso: = 1 /
VX. d (VX)/dt = Yx/sFSo / XeVe + Yx/sFSot

[editar] Ecuacin de Diseo de un biorreactor Semicontinuo Ideal

Un sistema de cultivo semicontinuo es un sistema transciende; es decir, hay un flujo
temporal o transitorio que alimenta o drena (lava) el sistema. El balance general de
masa que se aplica a un volumen de control (diferencial de volumen) para un
componente i en un sistema de flujo semicontinuo es:
Entra - Sale - Desaparece = Acumula Fi - (Fi+dFi) - (-rxi) dV = 0

Operando se obtiene: - dFi = (-rxi) dV Por definicin la conversin del componete i en

reactores en flujo (semicontinuo) es: Xi = Fio Fi / Fio por lo que, sustituyendo en la
ecuacin de balance: FiodXi = -rxidV Integrando la expresin anterior: dV/Fio =
dXi/-rxi donde los lmites de integracin son: 0, V para el volumen y Xio, Xif para la
conversin. Resolviendo la integral obtenemos: V/Fio = dXi/-rxi = t la ecuacin de
diseo para un biorreactor de flujo (semicontinuo). La ecuacin es vlida tanto si existe
o no variacin de caudal (flujo) del sistema. Cuando se requiere una expresin en
funcin de la concentracin, podemos utilizar la siguiente ecuacin: Fio = CioQi donde
Cio es la concentracin del componente i en las condiciones de entrada y Qi es el caudal
volumtrico del componente i. Sustituyendo: V/Fio = V/QiCio = /Cio donde es el
tiempo espacial del biorreactor. En forma integral: = Cio dXi/-rxi Para sistemas de
densidad constante: = - dCi/-rxi
Nota: al comparar la ecuacin de diseo de un biorreactor semicontinuo ideal con la que
se obtiene para uno discontinuo ideal, se observa que la diferencia est la expresin que
toma el tiempo: t o t. En un biorreactor discontinuo, t representa el tiempo de cultivo tc
y es igual a la duracin del bioproceso o la fermentacin; lo que equivale a decir, el
tiempo necesario para que el sustrato limitante de la velocidad se agote. En un
biorreactor semicontinuo (de flujo) el tiempo t corresponde al equivalente para que la
conversin de salida alcance su mximo valor posible; es decir, para que la generacin
de biomasa o bien, del componente metablico X, alcancen su mximo de crecimiento
(m) para un mismo componente i. Es por eso que en un biorreactor de flujo el tiempo t
se llama tambin tiempo de residencia tr; ya que, es el tiempo que el cultivo reside
dentro del biorreactor; el cual es diferente (mayor) del tiempo de cultivo tc, puesto que
an despus de agotado el sustrato limitante de la velocidad, el cultivo (clulas o
microorganismos) tiene la capacidad metablica de seguir sintetizando metabolitos X o
generar ms biomasa (crecer); es por eso que le incorporan los adjetivos limitante de la
velocidad al sustrato S.

[editar] Diseo de un biorreactor discontinuo

Una sistema de cultivo discontinuo no posee alimentacin (F1) o lavado (F2); se carga
el contenido del biorreactor (tanda o lote) con el medio de cultivo y luego se inocula con
el cultivo (clulas o microorganismos) y se deja crecer hasta obtener el producto
(biomasa o metabolito).
[editar] Balances y ecuaciones
Dado que F1 = F2 = 0, las ecuaciones de balance son:

Balance de Biomasa: d (X)/dt = rx = X

Balance de Sustrato: d (S)/dt = rs = X / Yx/s

Balance de Producto: d (P)/dt = rp

[editar] Casos

Generacin de Biomasa: cuando la operacin discontnua tiene como objetivo la

generacin de biomasa (clulas o microorganismos); se parte del supuesto de que no se
forma producto y que la relacin -S puede ser representada por la ecuacin de
Monod, con lo que las ecuaciones de balance de biomasa y balance de sustrato limitante
de la velocidad quedan:

Balance de biomasa: d (X)/dt = m (XS / Ks + S)

Balance de sustrato: d (S)/dt = -m / Yx/s (XS / Ks + S)

El sistema de ecuaciones posee solucin analtica, pero en sta, no aparece X en forma

explcita, por lo que, resulta de poca utilidad. Afortunadamente, es posible analizar
casos particulares, haciendo algunas suposiciones. En el caso de tomar en cuenta
nicamente la fase exponencial del crecimiento, cumple que: S Ks y las ecuaciones se
reducen a las originales, salvo que es substituida por m:

Balance de biomasa: d (X)/dt = mX

Balance de sustrato: d (S)/dt = mX / Yx/s

Dado que bajo tales condiciones el crecimiento ocurre al mximo valor de posible,
integrando la ecuacin de balance de biomasa con las condiciones: t = 0, X = Xo se
obtiene una expresin para la concentracin de biomasa en funcin del tiempo: X = Xo
emt o bien: lnX = lnXo + mt
La ecuacin establece que para S Ks, el crecimiento es exponencial y permite calcular
el valor de m graficando el valor del logaritmo de X (ln X) en funcin del tiempo (t).
En forma similar, la concentracin de sustrato limitante de la velocidad en funcin del
tiempo es: S = So [(Xo / Yx/s) (emt - 1)]
Conforme el sustrato se agota, S disminuye y la condicin de S se hace comparable a Ks
con lo que dX/dt comienza a disminuir (fase de desaceleracin), hasta hacerse
finalmente nula (S = 0); en este punto, se alcanza la mxima concentracin de biomasa
y finaliza el cultivo, pues se ha alcanzado la fase estacionaria.
La concentracin final de biomasa (Xf) se puede calcular si se conoce Yx/s:
Yx/s = - (Xf Xo) / (Sf So) Dado que Sf = 0, Xf = Xo + Yx/sSo Lo usual es utilizar
estas ecuaciones para calcular Yx/s.
En la figura se ilustran las distintas fases de crecimiento descriptas, que surgen de la
ecuacin de Monod. Note que antes de la fase exponencial existe una fase de retardo
durante la cual, la concentracin de biomasa no se modifica substancialmente pero,
ocurren cambios en la composicin macromolecular y en el "estado fisiolgico" de las
clulas del cultivo. Si por algn motivo debe tomarse en cuenta esta fase, se debe
aplicar una correccin a la ecuacin la concentracin de biomasa en funcin del tiempo:
lnX = lnXo + m (t tr) donde tr es el tiempo de retardo; es decir, la modificacin
consiste en restarle al tiempo real, el tiempo transcurrido hasta que comienza el
crecimiento exponencial. Normalmente, la fase de retardo no es deseable, tanto por la

prdida econmica como por el tiempo desperdiciado; para minimizarla se hace crecer
el inculo aparte, en un medio de cultivo igual al que se va a emplear en el bioproceso
(cultivo o fermentacin) y luego se procede a transferirlo cuando las clulas ya se
encuentran en la fase exponencial. La ltima fase es la decaimiento o muerte y consiste
en la disminucin de la concentracin celular de la biomasa por lisis o muerte celular.

[editar] Ecuacin de Diseo de un Biorreactor Discontinuo Ideal

Un sistema de cultivo discontinuo es un sistema discreto en cuanto al movimiento de
biomasa, ya no hay flujos. Como condiciones de idealizacin en un biorreactor
discontinuo ideal se supone que el cultivo y su medio estn perfectamente agitados y
que los parmetros de velocidad (r) son constantes en todo el volumen del sistema
(volumen de control); es decir, que la mezcla es perfecta. La otra consideracin es que
se trabaja con velocidades y componentes individuales (i), por lo que se utiliza la
definicin de conversin del componente i (Xi), en vez de biomasa; es decir, se trabaja
el componente metablico, no la clula.
La ecuacin de balance del componente i es: d (Xi)/dt = rxi = Xi
Teniendo en cuenta la definicin de conversin y diferenciando Ni respecto al tiempo:
dNi/dt = -NiodXi/dt
Sustituyendo en la ecuacin de balance: -NiodXi/dt = rxiV
Separando en variables e integrando: (Nio/-rxiV) dXi = dt donde los lmites de
integracin son: Xio (conversin de entrada) y Xf (conversin final) para la conversin
y to = 0 (tiempo inicial) y tf (tiempo total de reaccin) para el tiempo de reaccin.
Integrando obtenemos: t = Nio dXi/-rxiV la ecuacin general de diseo para un
biorreactor discontinuo ideal.

[editar] Diseo de un Biorreactor con Aireacin

Un biorreactor con aireacin es por definicin un reactor continuo donde la entrada F1
es una lnea de alimentacin de aire estril (O2); la salida F2 es una lnea de lavado de
aire estril y el sustrato limitante de la velocidad de crecimiento es el oxgeno disuelto
(OD).
Existen dos tipos o diseos bsicos de biorreactores con aireacin; ambos, de uso muy
difundido: el primero es tanque agitado con lnea de aireacin y el segundo es el de
levantamiento por aire o "air lift". De este ltimo existe tambin, una variante que se
utiliza para cultivos aerbicos muy resistentes a esfuerzos cortantes e hidrodinmicos y
es la cama de burbujas o bubble bed.

[editar] Estructura de un Reactor Continuo de Tanque Agitado Con

Lnea de Aireacin
Un CSTR con lnea de aireacin es utilizado, por lo general, como dispositivo
fermentador para clulas y cultivos aerbicos; su esquema se representa en la figura. En

l, la aireacin se da en rgimen laminar o de transicin (Re3000) por cuanto estas

fermentaciones son destinadas a cultivos de clulas y microorganismos aerbicos
sensibles a esfuerzos cortantes e hidrodinmicos altos. La agitacin extra requerida
se realiza mecnicamente, por medio de: un eje transmisor de potencia provisto de
aletas o turbinas de agitacin y accionado por un motor de corriente alterna con control
de potencia y velocidad.
Adems de esto, es indispensable que el sello mecnico del eje del motor sea hermtico
y esterilizadle; que las lneas de entrada y salida de aire sean estriles y que la difusin
del aire dentro del biorreactor sea controlada en presin, flujo y concentracin. Para
completar el esquema de diseo: el aire se inyecta por la parte inferior del tanque y es
difundido a travs de toda la mezcla por una corona con pequeos orificios espaciados
regularmente o una boquilla de difusin. La cama de aire debe ser un chorro de
finas burbujas de aire de pequeo dimetro, que salen de cada orificio de la corona o el
difusor (boquilla) y y al ser "golpeadas" por las paletas de la turbina o el agitador, se
distribuyen por todo el volumen, generndose miles de pequeas burbujas de aire que,
difunden el 02 disuelto hacia el seno del lquido. El sistema de agitacin se completa
con cuatro o seis deflectores o baffles que rompen el movimiento circular que
imprimen las paletas de la turbina o el agitador al lquido y generan mayor turbulencia y
mejor mezclado; pero sin daar el tejido o la pared celular de las clulas y
microorganismos (tamao de Kolmogorov de los Eddies). Finalmente, el tanque debe
poseer un intercambiador de calor formado por una camisa por la que circule agua, para
poder controlar la temperatura del cultivo y evitar que este muera o sufra un estrs
trmico.

[editar] Estructura de un biorreactor de Levantamiento por Aire

Cuando el volumen es muy grande (mayor que 1000 l) o se requiere de un mayor
volumen de aireacin, el sistema CSTR, ya no es eficiente y se requiere del
levantamiento por aire. Debido a que, a mayor volumen de cultivo, tambin es mayor la
cantidad de calor generado; se hace necesario, aumentar el rea de transferencia de calor
y la eficiencia de refrigeracin; por lo que, el intercambiador de calor de camisa debe
ser reemplazado por uno de serpentn en contra flujo o con circulacin adyacente a la
pared interior del tanque. Ver esquema representado en la figura.
Al igual que en el diseo de tanque agitado, el aire que ingresa al biorreactor debe ser
estril; esto se consigue, hacindolo pasar por un filtro microporo de dimetro de poro
inferior a los 0,45 micrones (0,2 m 0,1 m) que impida el paso de microorganismos
contaminantes. En los biorreactores de levantamiento por aire o "air lift" la cama de aire
tambin funciona como medio de agitacin; de modo que, se genere una circulacin
fluida de lquido con aire (burbujas) que asciende el compartimiento interno y luego
desciende por el compartimiento externo, favoreciendo el mezclado perfecto.

[editar] Transferencia de 02 y Balance de Oxgeno

La velocidad de transferencia de 02 (r02) desde el seno de la fase gaseosa (burbujas)
hasta la fase lquida (medio lquido) est determinada por la siguiente ecuacin: rO2 =
Kla (C*- C) donde KLa es el coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno; C la
concentracin de 02 disuelto en el seno del lquido y C* la concentracin de O2 disuelto
en equilibrio con la presin parcial de oxgeno de la fase gaseosa. El KLa y por lo tanto

el grado de transferencia de oxgeno desde el seno del lquido hasta las clulas o
microorganismos en cultivo, dependen del diseo del biorreactor y de las condiciones
de operacin del sistema de cultivo: caudal de aire, volumen del lquido, rgimen de
agitacin, rea de transferencia y viscosidad del cultivo. En general, disminuyen el KLa:
la viscosidad y el volumen del lquido y aumentan el KLa: el rea de transferencia, la
agitacin y la presencia de dispositivos que aumenten una, la otra, o ambas.
La ecuacin de balance de oxgeno en el estado estacionario es: d(VCO2) / dt = F (C
C*) VrO2 + VNiO2 donde Ni es la velocidad de transferencia de un componente del
gas (oxgeno) al lquido (medio). Dado que el oxgeno es el sustrato limitante de la
velocidad de crecimiento, cuando el cultivo se encuentra en crecimiento, el flujo de
entrada oxgeno (FiO2) ser mayor al flujo de salida de oxgeno (FfO2) debido al
consumo de oxgeno disuelto en el lquido por parte de las clulas o microorganismos
en crecimiento y/o divisin celular.
En este caso, la ecuacin de balance de oxgeno para clulas o microorganismos en
crecimiento es: d(VCO2) = FiO2C FfO2C* VrO2 + VNiO2 es decir, debe utilizarse
la ecuacin general.

[editar] Sistema de Aireacin

El sistema de aireacin externamente comprende las lneas de entrada Fi y salida de aire
Ff e internamente debe optimizar la transferencia de gases nutrientes (aire) hacia el
medio lquido. Un sistema de aireacin consta de cuatro partes mecnicas: fuente de
aire; tubera y filtros de entrada; boquilla y difusor de aire; tubera y filtros de salida. Y
tres partes de control: control de flujo aire; control de presin de aire; control de
difusin de oxgeno disuelto.
Fuente de Aire: dado que el sistema de aireacin, en su conjunto, depende de la
correcta eleccin del dispositivo que suministrar la fuente de aire, se siguieren dos
opciones:
1. Compresor de Aire: su principal caracterstica es que opera con: alta presin y
bajo caudal de aire; por eso, cuando operan, es de manera continua o, cuando se
requiere capacidad, debe haber un tanque de almacenamiento a alta presin
como parte del sistema. Una segunda e importante caracterstica es que produce
un alto nivel de ruido 80dB y una tercera es que, si el compresor es de tipo
pistn debe lubricarse con aceite, por lo que, sta caracterstica se incluye en el
diseo como: autolubricado (oiless) o no lubricado (oil lubricated). Existen dos
tipos de diseo constructivo para compresores de aire:
a) El compresor de diafragma: esta diseado para un trabajo de operacin contnua; su
presin operacin es moderada 60 psia y como su nombre lo indica, utiliza un
diafragma o fuelle para impulsar y comprimir el aire. El compresor de diafragma resulta
adecuado para oxigenar volmenes medianos de cultivos o microorganismos aerbicos.
b) El compresor de pistn: es ms utilizado comercialmente, no obstante, para cultivos
celulares sensibles (clulas de membrana plasmtica), no es recomendable, por cuanto,
su presin de operacin es muy alta (80 psia o ms) para estos cultivos y puede causar

dao celular severo o la lisis de las clulas; y porque, el pistn debe lubricarse con
aceite y esto ocasiona que se filtre en pequeas cantidades a la corriente de aire.
1. Soplador Regenerativo: se caracteriza por funcionar como si fuera una bomba
centrfuga de succin y desplazamiento de aire por lo que, opera con presin
negativa (vaco) en la succin y presin positiva (compresin) en el
desplazamiento. Aunque su rango de accin es pequeo: 20H2O a 40H2O
en cuanto a las presiones de operacin, su capacidad de desplazamiento de aire
es muy alta 30 cfm - 50 cfm o 1000 L/min - 1500 L/min por lo que, puede
movilizar grandes volmenes de aire.
Tubera - Lnea de Aire: esta debe ser de acero inoxidable.
Filtros de las Lneas de Aire: para sistemas pequeos de dimetros de tubera estndar,
se utilizan filtros en lnea con la tubera; estos son de membrana microporo que filtran el
99,99% de los contaminantes. Para sistemas mayores (industriales) debe disearse un
mtodo de esterilizar in situ la lnea de aire; generalmente se hace calentando
fuertemente la lnea de aire y luego enfriarla. Las membranas microporo que filtran el
aire tienen un punto de burbuja que es la presin de agua mxima que pueden soportan
antes de romperse (recuerde que el sistema tiene un medio lquido) y un flujo mximo el
cual es el mximo caudal que puede soportar la membrana antes de su ruptura.
Sistema de Difusin de Oxgeno Disuelto: debe optimizar al mximo la transferencia
de oxgeno disuelto al medio lquido. El sistema consta de dos partes mecnicas:
boquilla y difusor de aire; una parte de medicin: sensor de oxgeno disuelto y una de
control: controlador de oxgeno disuelto.
Difusor de Aire: los cultivos aerbicos requieren que la corriente de aire estril que se
difunda en la forma de miles de pequeas burbujas, desde el difusor de aire, hacia el
volumen del lquido; esta accin se realiza mediante un plato o domo cilndrico de acero
inoxidable finamente perforado. Alternativamente y si el sistema es pequeo o mediano
en escala, se puede utilizar un difusor de material cermico poroso el cual, tiene la
ventaja de que, provee una cama ms fina de burbujas (de menor dimetro) y mayor
rea de transferencia (volumen de burbujas).
Control y Regulacin del Flujo de Aire: recuerde que las membranas que filtran el
aire tienen un punto de burbuja y un flujo mximo por encima del cual, se rompen; por
eso, se debe regular el flujo de aire y controlar la presin en la lnea de aire. La forma
ms econmica de hacerlo es manualmente, con un manmetro para presin. Existe
tambin la versin digital, ms costosa, pero que, controla de forma automtica el flujo
de aire y la presin, segn se escoja.
Control y Medicin del Oxgeno Disuelto (OD): adems de regular el flujo y la
presin del aire en la lnea o tubera, se debe controlar el valor y la concentracin del
oxgeno disuelto (OD) dentro del medio lquido; variable que puede medirse en dos
formas (parmetros):
a) Oxgeno Disuelto (OD): es la concentracin de oxgeno disuelto requerido para la
reduccin qumica de un equivalente en iones sulfito (de sodio) a la cantidad de materia
orgnica presente en el medio lquido que se debe oxidar.

b) Demanda Bioqumica Oxgeno (DBO): es la taza de oxidacin biolgica o demanda

bioqumica de oxgeno disuelto requerida por el microorganismo o clula en cultivo
para oxidar la materia orgnica presente en el medio lquido.
La tasa especfica de consumo de oxgeno de un cultivo est determinada por la
velocidad de transferencia de oxgeno (r02) y el KLa que la correlaciona; recuerde que:
rO2 = Kla (C*- C). Se debe conocer la r02 para poder determinar el KLa; el valor de
r02 se consigue en la literatura; la concentracin de oxgeno disuelto en el lquido (C) es
equivalente al valor de OD, e instrumentalmente, se llama: razn de toma de oxigeno
(OUR) por sus siglas en ingls; el equivalente a C* (concentracin de oxgeno disuelto
en el lquido en equilibrio con el gas) es la demanda bioqumica de oxgeno (DBO) que,
instrumentalmente se llama: razn especfica de toma de oxigeno: SOUR (specific
oxygen uptake rate). Ambas razones pueden medirse regularse con un controlador
OUR/SOUR de uso comercial.
Una probeta o electrodo OD es un sensor que mide la concentracin de oxgeno
disuelto en el medio lquido. Similarmente, una probeta o electrodo BOD mide la
concentracin de oxgeno disuelto en el medio lquido en equilibrio con el gas. ) En
ambos casos, el material de su construccin debe ser acero inoxidable y su
especificacin es por la longitud de inmersin (H) y dimetro (D) de la probeta.
Nota: todas la imgenes de los instrumentos y equipos fueron tomadas del Catlogo en
Internet de: Cole Parmer.

[editar] Diseo de un Fermentador Semicontinuo

Los cultivos anaerbicos y facultativos estn constituidos por clulas y
microorganismos cuyo metabolismo ante la ausencia de oxgeno, utiliza vas
metablicas alternas para la oxidacin de los compuestos que le sirven de nutrientes. En
estas clulas y microorganismos, la respiracin celular se sustituye por una ruta
oxidativa alterna llamada fermentacin en la que, el piruvato no produce CO2 como
producto final de desecho; por el contrario, se consume CO2 y esta es incorporado, junto
al piruvato, en la fermentacin, cuyo producto final de desecho, le da nombre; por
ejemplo: en la fermentacin alcohlica el piruvato se oxida a acetaldehdo y al final de
la cadena oxidativa se produce etanol como producto final de desecho.
Un fermentador es un dispositivo de tipo tanque agitado en el que se realiza una
fermentacin controlada. Los fermentadores suelen operar en modo semicontinuo; por
cuanto, debe alimentarse una lnea de sustrato limitante de la velocidad de crecimiento
(S) para mantener el crecimiento celular o microbial durante la fermentacin.
El catabolismo celular de las fermentaciones adems del producto final, produce gran
cantidad de subproductos de desecho y metabolitos secundarios que son excretados al
medio de cultivo, por las clulas en cultivo, y esto genera gran cantidad de espuma en el
caldo de fermentacin. Las espumas modifican la acidez del medio de cultivo ya que,
cambian el pH del medio de cultivo y por tanto, debe regularse y controlarse la acidez
del medio adecuadamente. Adicionalmente, la turbidez y la cantidad de espuma, deben
mantenerse en niveles adecuados para evitar prdidas y el mal funcionamiento del
biorreactor. Finalmente, la mayora de los procesos fermentativos generan gran cantidad

de calor debido a la naturaleza exergnica del catabolismo celular de estos

microorganismos, por lo que, la temperatura tambin debe ser controlada.
En la mayora de los cultivos anaerbicos el dixido de carbono (CO2) es el sustrato
limitante de la velocidad de crecimiento por lo que, la cintica del sistema de cultivo
debe modificarse incorporando la ecuacin de balance de consumo de CO2:
d(VCCO2)/dt = FiCCO2i FoCCO2o + VrgCO2 VNoCO2 Donde: CCO2 =
concentracin de CO2 en el lquido; rg = velocidad de generacin; No = velocidad de
transferencia de un componente del lquido al gas; i = ingreso; o = salida.
Control y Medicin del CO2 Disuelto (COD): la curva de generacin de CO2 se debe
determinar experimentalmente para determinar la velocidad de consumo de sustrato
limitante de la velocidad (rgCO2) del cultivo; para eso, es necesario mantener el
crecimiento mximo del cultivo.
En la prctica la curva de consumo de CO2 se determina basndola en la concentracin
de dixido de carbono disuelto (COD) en el medio de cultivo; esta puede ser medida y
controlada con un dispositivo comercial diseado para ese propsito, un controlador
COD y la sonda o probeta COD respectiva.
El suministro de CO2 se obtiene con un cilindro de CO2 recargable.
La regulacin del flujo de CO2 se realiza manualmente con un regulador manual de
flujo o manmetro; se debe hacer de forma que, se mantenga la concentracin mxima
de de dixido de carbono disuelto, medida en el controlador COD, para que, la
velocidad especfica de consumo de sustrato para mantenimiento (m) se mantenga en
todo momento.
El control de flujo de CO2 se realiza utilizando una vlvula solenoide electrnica que
el controlador COD dirige al recibir la seal de la probeta COD y en base a su valor,
comanda la apertura o clausura de una vlvula solenoide, mediante una seal de paso
(abrir o cerrar) que regula el flujo de CO2 proveniente del tanque de CO2 comprimido.
Las vlvulas solenoides son servo mecanismos elctricamente controlados y se escogen
de acuerdo al material, al nmero de vas, al calibre y la presin y si permanecen
abiertas o cerradas, entre otros.
La difusin del CO2 en el medio lquido se realiza utilizando una boquilla de difusin
o un difusor de gases de material cermico poroso.

[editar] Sistema de Control de Espuma

La presencia de oxigeno en el ambiente interno del biorreactor ocasiona que los
productos de desecho del catabolismo celular de los microorganismos facultativos, sean
oxidados, por lo que, las espumas se tornan densas y jabonosas ocasionando serios
problemas funcionales y contaminado el cultivo.
Un sistema de control de espuma (ver diagrama) consta de dos subsistemas sistemas
que funcionan en conjunto:
1. Subsistema Antiespuma formado por:

Controlador de antiespuma: comanda la bomba peristltica que dispensa el

antiespumante y recibe la seal de medicin del sensor de espuma

Probeta o sensor antiespuma: es el sensor que mide el nivel de espuma en el

medio de cultivo; se especifica de acuerdo al tamao del frasco dispensador de
antiespumante

Frasco dispensador de antiespumante: debe contar con su propio sistema de

filtracin y equiparacin de presin (externa e interna)

1. Subsistema de Bombeo Peristltico: formado por:

Mangueras flexibles;

Bomba peristltica;

Frasco dispensador;

El frasco dispensador es factor comn en ambos subsistemas.

La bomba peristltica maja la manguera flexible e impulsa el flujo del fluido
antiespumante dentro del biorreactor.
La manguera flexible se escoge segn el material, el tipo de bomba y la longitud; se
recomienda una de silicn curado o Tygon y para un sistema de bombeo L/S (bomba
sencilla de velocidad fija o variable).
Nota: la manguera flexible se conecta al sistema (biorreactor) mediante un tubo de
adicin de reactivo. Este debe ser de acero inoxidable y su dimetro (puerto) debe ser
el dimetro interno de la manguera flexible.

[editar] Sistema de Control de pH

El sistema controla el pH del medio de cultivo; que es generada por los productos de
desecho y el metabolismo propio del cultivo celular o microorganismos. Un sistema de
control de acidez consta de:
Dos subsistemas mecnicos servo controlados
1. Sistema Dispensador de cido: que consta de:

Dispensador asptico de cido (HCl);

Filtro microporo en lnea;

Manguera flexible resistente al cido;

Bomba peristltica;

1. Sistema Dispensador de lcali: que consta de:

Dispensador asptico de lcali (NaOH);

Filtro microporo en lnea;

Manguera flexible resistente al lcali;

Bomba peristltica;

Nota: recuerde que las mangueras flexibles se deben conectar al sistema (biorreactor)
mediante un tubo de adicin de reactivo para cada una de ellas.
Un sistema de control formado por:

Controlador de pH: ordena y regula la accin del motor que controla a las
bombas peristlticas que suministran el cido y el lcali.

Un sistema de medicin: formado por:

Sensor de pH: sonda o probeta electroqumica que mide la acidez y dice al

controlador de pH, la situacin del medio.

pH ptimo: toda clula y microorganismo poseen un rango de acidez (pH)

dentro del cual, es posible su crecimiento con normalidad; dentro de ese rango,
existe un pH ptimo en el cual el crecimiento es mximo y muy bien definido.

Al crecer los microorganismos en ambientes naturales, su rango de pH se acerca a los

valores del hbitat en que se desarrolla; el rango normal de acidez en que pueden
sobrevivir la mayora de los microorganismos es 2,0 pH 10,0.
La mayora de los hbitats tienen valores de pH de 5,9 por lo que, los microorganismos
que viven en esos hbitats tienen un pH ptimo equivalente (5,9).
Algunos rangos de pH ptimo son: para levaduras entre 3,5 y 5,5; para bacterias entre
6,0 y 7,5; para mohos, segn la cepa, se extiende entre 3 y 7; para clulas en cultivo
entre 6,0 y 7,5.
La forma exacta de la curva de acidez es muy variada y depende del metabolismo
propio de cada microorganismo o clula por lo que, no se ha formulado un modelo
general y simple para representarla.

[editar] Sistema de Control de Temperatura

Mantiene estable y dentro de un rango ptimo requerido por el cultivo para su mximo
crecimiento, la temperatura interna del sistema.
Un sistema de control de temperatura consta de:

Dos sistemas de intercambio trmico:

Intercambiador de Calor: dispositivo de intercambio trmico que genera calor

o absorbe el calor excedente. El intercambiador de calor de caso y tubos es el
ms usado y se define por su rea de transferencia de calor; a mayor rea de
transferencia de calor, mayor capacidad de absorber calor.

Serpentn: medio fsico por el cual el calor es absorbido o transmitido al fluido.

El tubo del serpentn debe ser de acero inoxidable 304 o 316 (preferiblemente) y
se recomienda que sea delgado para una mejor transferencia de calor.

Un sistema de control:

Controlador de Temperatura: sistema que ordena y regula la accin del motor

que controla las servo vlvulas que regulan el flujo de lquido fro o caliente.

Un sistema de medicin:

Sensor de temperatura: sonda (termocopla) que mide la temperatura.

Un servo control:

Servo Controlador de Temperatura: controla la temperatura a la que debe

abrir o cerrar la vlvula solenoide.

Un sistema regulador de paso de flujo:

Vlvula Solenoide: servo mecanismo actuador que regula el flujo (paso) de

lquido por la tubera o lnea de paso (abre o cierra el flujo del lquido)

Un sistema de conduccin de fluido:

Tuberas de Conduccin de Agua: el agua es fluido trmico por excelencia

para la transferencia de calor por conduccin a travs de las paredes metlicas de
la tubera. stas deben ser de acero inoxidable.

Nota: las tuberas deben anclarse al cuerpo del biorreactor mediante un puerto de
entrada que es soporte hermtico que la sujeta a la superficie plana.
Temperatura ptima: la temperatura es otro factor ambiental que influye y que afecta
el crecimiento del cultivo microbiano y celular; poniendo el juego, la propia
supervivencia de la clula o microorganismo. La temperatura afecta a las clulas y
microorganismos cultivados de dos formas distintas:
1. Conforme aumenta la temperatura, aumenta tambin la velocidad de las
reacciones enzimticas y el crecimiento se hace ms rpido;
2. Por encima de un mximo temperatura, se produce la desnaturalizacin de las
protenas celulares y la descomposicin de los componentes celulares esenciales

para mantener la vida, causando la muerte de las clulas o microorganismos en

cultivo.
En este punto analizaremos nicamente el primer tem; ms adelante veremos el
segundo.
Para cada clula y microorganismo existe una temperatura mnima por debajo de la
cual, no hay crecimiento; es decir se inhibe el crecimiento celular.
Y una temperatura mxima por encima de la cul, la clula o microorganismo muere.
Entre ese rango de temperaturas existe una temperatura ptima para la cual, el
crecimiento es el ms rpido posible.
Estas tres temperaturas son caractersticas de cada clula y microorganismo y
pueden variar ligeramente con la composicin del medio de cultivo.
[editar] Clasificacin de los microorganismos de acuerdo a sus temperaturas
Tipo de microorganismo
Psicrfilo
Psicrtrofo
Mesfilo
Termfilo

Temp. Mnima (C)

-5 +5
-5 +5
5 - 15
40 - 45

Temp. ptima (C)

12 - 15
25 - 30
30 - 45
55 - 75

Temp. Mxima (C)

15 - 20
30 - 35
35 - 47
60 - 90

Determinacin de la Temperatura ptima de Crecimiento: se realiza desde el punto

de vista cintico, aplicando la Ley de Arrhenius para el crecimiento y la muerte de
clulas o microorganismos: dln (k)/dt = Ea/RT2; dln (k) = -(Ea/R)*d(1/T) mxmx
(para el crecimiento), k = Donde: k = (para la muerte), T = temperatura absoluta, R =
constante general de los gases ideales, Ea = energa de activacin del proceso: EC para
el crecimiento, Em para la muerte; EC = 8 12.000 cal/g-mol K (crecimiento), Em = 50
100.000 cal/g-mol K (muerte). La realizacin de la curva de crecimiento EC en
conjunto a la curva de muerte Em representada por su logaritmo ln (k) versus el inverso
del tiempo 1/T conduce a la determinacin grfica de la temperatura ptima.

[editar] Diseo de un Biorreactor de Tanque Agitado

Componentes de Diseo de un Biorreactor de Tanque Agitado
Para lograr el cumplimiento de objetivos descritos, un biorreactor de tipo tanque agitado
o CSTR (ver figura), debe contar con los siguientes componentes bsicos en su diseo:
figura

Cuerpo del Biorreactor: recipiente o contenedor que alberga al cultivo o

microorganismo. El contenedor es la frontera fsica entre el ambiente externo
contaminado y el ambiente interno controlado. Un tanque contenedor o cuerpo
del biorreactor se debe construir en acero inoxidable austentico, por sus
caractersticas qumicas y fsicas superiores; usualmente se prefiere los aceros de
las series 316.

Dimensionamiento del Cuerpo del Biorreactor: el primer paso en el diseo de

cualquier biorreactor es dimensionar el tamao del tanque o del cuerpo del
biorreactor; la prctica comn es, hacerlo a travs de variables adimensionales:
variables que representan una razn entre dos parmetros con las mismas
dimensiones. De esta forma, es posible escalar; es decir cambiar de dimensin o
tamao, el biorreactor y adaptarlo a otra escala de proceso. Las principales
relaciones adimensionales que se utilizan en tanques agitados son: la razn de la
altura de trabajo (H) al dimetro del tanque (Dt): 3 H/Dt 1 en reactores
tubulares (largos) esta relacin es de 4 - 6; la razn del dimetro del tanque (Dt)
al dimetro de las hojas o aspas (Da): Da/dt cuando el rgimen de
agitacin es laminar y las revoluciones del motor menores a 150 rpm, la relacin
aumenta ; la razn entre el dimetro de la hoja (Da) y el dimetro del espacio
libre o hueco entre el rotor y el cuerpo de la hoja (Dd): 2 Da/Dd 1 en
turbinas axiales y hojas planas esta relacin aumenta de 2 4; la razn entre el
ancho de la hoja o aspa (L) y el espesor o grosor de esta (W): 4 L/W 1 en
turbinas axiales y hojas planas esta relacin se invierte L/W 1/16. En la
figura aparece como gap (G) es el espacio libre que se deja cuando se
utilizan baffles o dispositivos amortiguadores de la turbulencia; normalmente el
valor de G es: 1/12 1/16 del valor de J donde J es el ancho del baffle o
amortiguador; J por su parte se disea de acuerdo al dimetro del tanque (Dt)
pero valor de diseo es el mismo que el del espacio libre: 1/12Dt J 1/16Dt.
(Hs), no aparece en la figura, es la altura de techo o espacio libre que se deja
entre la superficie libre del lquido (H) y el techo o tapa del biorreactor, para
facilitar la operacin del sistema; el valor mnimo de la luz (Hs) es 10% de la
altura total del tanque (Ht) y el valor mximo es 50% Ht que representa el valor
mnimo de volumen de operacin . Finalmente, C es la altura de piso del
agitador altura desde el fondo del tanque hasta el punto ms bajo de las aspas u
hojas; C se dispone en base a la altura de la columna de fluido (H),
normalmente: C/H .

Sistema de Agitacin: tiene la funcin de generar la potencia necesaria para

producir una mezcla perfecta para el sistema de cultivo y producir un rgimen de
agitacin adecuado que, maximice la difusin de gases en el lquido y minimice
la produccin de esfuerzos cortantes y la presin hidrodinmica local y global,
para optimizar los fenmenos de transferencia de momentum, calor y masa.

Un sistema de agitacin consta de cuatro partes mecnicas:

Motor Impulsor: suministra la potencia al eje de potencia; debe ser de corriente alterna
(a.c), preferiblemente de induccin y su potencia debe calcularse para manejar el doble
(200%) de la potencia terica requerida para agitar el fluido y el cultivo a Re3000.
Motor de Induccin (A.C): dado que un biorreactor debe operar de forma continua
durante todo el proceso de cultivo; se requiere un motor capaz de resistir largos periodos
de operacin continua y trabajo duro; por eso, el motor debe ser de induccin de
corriente alterna (a.c) y debe ser acorazado, preferiblemente en acero inoxidable.
Eje trasmisor de la potencia: es una barra cilndrica de acero inoxidable 316L y por lo
general se disea en dimetros estndar: , , etctera para mayor facilidad de ajuste
a los estndares de motores a.c. Su longitud depende de la profundidad del contenedor
(tanque).

Acople del Eje Transmisor: ajusta y fija al motor, el eje transmisor de potencia.
Existen dos tipos de acople:
Acople-adaptador de tipo taladro: el puerto de entrada se acopla al eje del motor por
fijacin directa. El puerto de salida es un dispositivo que se adapta a varios dimetros de
broca y sujeta o abraza firmemente el eje transmisor de potencia por presin y abrasin;
similar al que utilizan los taladros mecnicos.
Acople-ajustador de tipo tornillo-rosca: el puerto de entrada se enrosca o se fija
firmemente al eje del motor. El puerto de salida es un dispositivo que abraza el eje
transmisor de potencia por un mecanismo de tornillo-rosca.
En ambos casos, el dimetro del puerto de entrada del acople que es la unin de ste con
el eje del motor debe ser de dimetro interno igual al dimetro externo del eje del motor
y el dimetro del puerto de salida que es dispositivo sujetador del eje transmisor de
potencia debe ser el mismo que el dimetro externo del respectivo eje.
Puerto de Entrada del Biorreactor: se denomina puerto a la superficie fsica sobre el
cual se instala un dispositivo de entrada o salida al biorreactor, un anclaje o un aparato
mecnico o de medicin; el puerto es el medio por el cual, se ajusta o fija, tal
dispositivo o artefacto a la pared o superficie del tanque o del biorreactor. Como se
observa en la fotografa, el puerto de entrada es la tapa o cara superior del tanque
biorreactor y en donde se anclan o sujetan todos los dispositivos y perifricos que se
requieren para su operacin. Cada dispositivo de anclaje o sujetador tambin un puerto
menor cuyo dimetro externo es la superficie externa total y cuyo dimetro interno es el
dimetro externo del dispositivo que sujeta. Algunos puertos tienen dos dimetros
internos, cuando el dispositivo que sujetan tiene dimetro externo y dimetro interno;
por ejemplo, los sensores o probetas medidores y el sello mecnico del eje del agitador.
Sello Mecnico: su funcin es triple: evitar la contaminacin, mantener hermtico el
sistema, servir de amortiguador de friccin. El sello mecnico tambin debe permitir la
esterilizacin in situ del biorreactor, mediante una lnea de vapor sobrecalentado. Un
sello mecnico, generalmente se disea en una de dos configuraciones:
Cartucho rgido: que permite el rodamiento del eje de potencia a travs de soporte de
cuerpo rgido que sella y asla el paso de cualquier materia al interior del depsito.
Cartucho flexible: que permite el rodamiento del eje de potencia a travs de un soporte
fijo al exterior pero flexible en el interior y que tambin sella y asla el paso de
contaminantes al interior del depsito.
En ambos caso el sello mecnico se especifica de acuerdo al dimetro eterno del eje
transmisor de potencia; el cual es el dimetro interno del puerto del sello mecnico.
Dentro de lo posible se recomienda el uso de sellos flexibles ya que amortiguan mejor
las vibraciones mecnicas del eje transmisor de potencia; la desventaja es que esa
flexibilidad obliga a cambiarlos ms frecuente, pues el desgaste es mayor.
Eje Transmisor de Potencia: transmite la potencia del motor al impulsor, a travs de,
las hojas de agitacin. Existen ejes en los cuales ya vienen incorporadas hojas o aspas

de agitacin, se disean para operar en uno de dos sistemas de flujo, segn sea, la
orientacin espacial de las hojas o aletas:
Flujo axial: suministran mayor efectividad de mezclado (distribucin) y reducen la
potencia de mezclado requerida, al distribuir mejor la mezcla; sus hojas u aspas son
planas.
Flujo radial: generan mayor potencia de mezclado (turbulencia) y pueden causar dao
celular; sus hojas o aspas son del tipo hlice.
Impulsores: son los dispositivos que impulsan el fluido y el movimiento, mediante
hojas o aspas unidas al eje transmisor de potencia; pueden ser del tipo mecnico
(agitador) o hidrulico (turbina).
Agitadores: es un impulsor formado por hojas o aspas de agitacin conectadas al eje
transmisor de potencia; pueden tener una distribucin de flujo axial o radial.
Los propulsores de flujo radial pueden tener gran variedad de formas y diseos; dentro
de stos, las hlices son las que ms se utilizan.
Hlices: existen en tres diseos bsicos que dependen de la orientacin espacial:
(a) Plano XY,
(b) Plano ZX,
(c) Plano ZY.
Cada orientacin (plano) describe una superficie curva que es determinada por dos (2)
de tres (3) ngulos de diseo:
(a) Plano XY, determina el ngulo de inclinacin (), este vara 15 45;
(b) Plano ZX, determina el ngulo de torsin (), este vara 16 32;
(c) Plano ZY, determina el ngulo de tensin (), este vara 15 45.
Como se observa en la figura:
(a) Hlices de superficie curva en el Plano XY estn determinadas por los ngulos ,
;
(b) Hlices de superficie curva en el Plano ZX estn determinadas por los ngulos ,
;
(c) Hlices de superficie curva en el Plano ZY estn determinadas por los ngulos , .
Por su gran potencia y la turbulencia que generan, las hlices no se recomiendan para
cultivos de clulas sensibles; solo deben utilizarse para cultivos bacteriales o micticos
y a bajas velocidades de rotacin.

Turbinas: es un impulsor de flujo axial el cual opera como una centrfuga que
distribuye el flujo de lquido a travs de hojas planas, a todo el volumen de fluido.
El impulso axial ha demostrado ser la forma ms eficiente de diseo para reducir
esfuerzos cortantes e hidrodinmicos y disminuir la turbulencia y la potencia requerida
para homogenizar el mezclado; objetivo que se persigue en una mezcla perfecta. Por eso
se recomienda impulsores de flujo axial para cultivar clulas sensibles o de membrana
plasmtica. Dentro de stas, la turbina Rushton (b) es el impulsor de flujo axial ms
recomendado y ms eficiente para generar una mezcla perfecta de alto perfil
hidrodinmico, bajo en esfuerzos cortantes y alto en distribucin.
Y una de control:
Control de Velocidad del Motor: los motores de induccin de corriente alterna (a.c)
tienen velocidades nominales de rotacin de 1800rpm o 3600rpm. Estas velocidades son
muy altas para los sistemas biolgicos causando la destruccin de las clulas y
microorganismos en cultivo. La velocidad de rotacin del motor debe entonces
reducirse a un mximo de 600rpm (revoluciones por minuto) para que no cause dao
celular. Usualmente se acopla a la salida de eje del rotor una caja de reduccin de 1/3 o
1/6 para bajar la velocidad de rotacin a 600rpm. Adicionalmente se coloca un control
de velocidad que puede ser analgico o digital al motor para un control ms fino y
preciso de la velocidad de rotacin.
Agitacin y Mezclado
Relaciones de Potencia y Mezclado: conforme el dimetro de la hoja o aspa (Dd)
aumenta, tambin lo hace, la potencia (Pt) requerida para realizar el trabajo de
mezclado; la potencia de mezclado (Pm) es mayor porque el torque () se acrecienta,
recuerde que el torque es la relacin entre la fuerza (F) y el brazo de palanca (r) y que,
el brazo de palanca es el dimetro del aspa u hoja cuyo momentum (mv) aumenta al
aumentar la velocidad de rotacin (). As entonces, cuando Dd es muy grande, debe
disminuirse para reducir Pt; pero esto ocasiona que Pm tambin se contraiga; as
como la turbulencia excesiva. Caso contrario ocurre cuando Dd es muy pequeo, debe
aumentarse para mejorar Pm y extender la turbulencia, ya que, en estos casos, es
localizada (se acumula alrededor de las aspas y hojas). Este fenmeno local que se
conoce como potencia fluida (Pf) provoca que el volumen de lquido que es afectado
por la turbulencia local (Rex) no sea suficiente para oxigenar los tejidos y clulas en
cultivo pues el Kla disminuye. Para que la Pf se transmita a todo el volumen de
operacin del fluido, es necesario que, se alcance el estado estacionario (EE) en dicha
operacin, y esto toma mucho tiempo lo que implica, un alto costo. La mejor forma de
combinar positivamente estos efectos hidrodinmicos que se contraponen; es decir:
bajar Pm y aumentar Pf es optimizar Dd. A esto se le conoce como potencia ptima de
mezclado (Pe) y se logra de dos maneras:

Colocar varias hojas o paletas (2-3) en dimetros (Dd) descendentes y

distribuidas a alturas equidistantes a lo largo de la altura de la columna de fluido
(H);

Colocar varias hojas o paletas (2-3) de igual dimetro (Dd) a alturas

equidistantes a lo largo de la altura de la columna de fluido (H).

La primera alternativa minimiza la potencia de mezclado requerida y maximiza la

potencia fluida al aprovechar mejor el gradiente de mezcla. La segunda aumenta la
potencia de mezclado y la potencia fluida pero tambin, la potencia requerida y
desaprovecha el gradiente de mezcla y difusin.
Utilizacin de Bafles: son una mejora muy utilizada ya que pueden instalarse
fcilmente en los sistemas de agitacin, disminuyen (deflectan) la turbulencia
ocasionada por las hojas o aspas del impulsor, rompen (disgregan) los cmulos celulares
y micelios que se forman en los respectivos cultivos y mejoran la eficiencia de
mezclado. La relacin ptima del dimetro del bafle (Db o J) al dimetro de tanque (Dt)
es: Db/Dt = 1/101/12. El nmero indicado de bafles es 4 para sistemas moderadamente
agitados y 6 para sistemas turbulentos.

[editar] Anlisis de Fenmenos de Transporte

[editar] Sistemas de Intercambio Trmico
La transferencia de calor es un proceso el que se intercambia energa en forma de calor
entre distintos cuerpos o entre diferentes partes de un mismo cuerpo que estn a distinta
temperatura. El calor se transfiere por una combinacin de dos o ms de estos tres
procesos: conveccin, conduccin o radiacin. Uno de los mecanismos trmicos
(proceso) suele predominar sobre los otros dos, tambin es posible que los tres procesos
se den simultneamente. La conduccin es el proceso dominante en los
intercambiadores de calor de casco y tubos y en el tubo serpentn. Aunque el mecanismo
exacto de la conduccin no se comprende, se sabe que se debe al movimiento (energa
cintica) de los electrones libres que se mueven por la red cristalina del slido y
transportan energa cuando existe una diferencia (gradiente) de temperatura.
Ley de Fourier: J = KT/x Donde J = densidad de corriente de energa (J/ms); K =
conductividad trmica (constante caracterstica del material).
La velocidad de conduccin de calor (J) a travs de un cuerpo slido (medida por
unidad de seccin transversal) es proporcional directamente al negativo del gradiente de
temperatura que existe en dicho cuerpo.
Tabla de Conductividades Trmicas y Propiedades de Metales1
Metal

Densidad

Calor especfico

Conductividad trmica

Aluminio

2700

880

209,3

8,8110-5

Acero

7800

460

45

1,2510-5

Cobre

8900

390

389,6

11,2210-5

Latn

8500

380

85,5

2,6510-5

Plata

10500

230

418,7

17,3410-5

Plomo

11300

130

34,6

2,3510-5

Las unidades de las magnitudes estn expresadas en el Sistema Internacional de

Unidades de Medida.

[editar] Clculo de Resistencias Trmicas

Para calcular la resistencia trmica es necesario transformar las ecuaciones que modelan
los distintos mecanismos de transferencia de calor para que presenten la siguiente
forma: (Ta - Tb) / Q-punto = expresin matemtica = Rth
La expresin de la resistencia trmica Rth es diferente en cada sistema y depende del
mecanismo de transferencia.
[editar] Resistencia trmica en la conduccin
En estos casos se debe distinguir entre las diferentes geometras que se presentan en
cada elemento resistivo; las configuraciones geomtricas ms usuales: pared plana,
pared cilndrica y pared esfrica.

Cilindro;

Circuito elctrico anlogo para cilindro;

Paredes conectadas en serie;

Circuito elctrico anlogo para paredes compuestas conectadas en serie;

Paredes compuestas conectadas en paralelo;

Circuito elctrico anlogo para una pared compuesta conectada en paralelo.

[editar] Intercambiadores de Calor

Un intercambiador de calor es un dispositivo diseado para transferir calor por un
mecanismo mixto de conveccin entre la pelcula de un lquido procesado (medio
cultivo) y la pared de un slido metlico, seguido de la conduccin del calor transferido
al rea transversal del slido metlico (tubo o placa) y nuevamente la transmisin de
calor por conveccin desde la pared del slido metlico a otro fluido procesado (agua).
Como se observa en las figuras existen diversas formas de disear un intercambiador de
calor.
Arriba: un serpentn es un tubo metlico que se encarga del intercambio trmico; el
lquido refrigerante recoge (absorbe) o transmite el calor.
Abajo: una camisa o chaqueta es un dispositivo cerrado de intercambio trmico; en
tanto que, un regenerador de calor es un dispositivo abierto.
En todos los casos el mecanismo mixto de intercambio trmico es la conveccin que
conduce el calor entre slidos metlicos estticos y superficies fluidas mviles.

Intercambiadores de Tubos:

Doble Tubo: es el tipo ms sencillo de intercambiador de calor; est formado por

dos tubos metlicos concntricos (paralelos) de dimetros diferentes; el fluido
que se debe calentar o enfriar entra y fluye por el tubo de menor dimetro; el
fluido trmico que ejecuta la accin, fluye por el espacio anular entre los dos
tubos; ste espacio es el rea de transferencia de calor.

Como se observa en la figura existen dos configuraciones para la direccin del flujo
fluido:
a) Flujo paralelo: los dos fluidos entran por el mismo extremo y fluyen en el mismo
sentido.
b) Contraflujo: los fluidos entran por los extremos opuestos y tambin fluyen en
sentidos opuestos.
En un intercambiador de calor en flujo paralelo la temperatura de salida del fluido fro
nunca puede ser superior a la temperatura de salida del fluido caliente.
En un intercambiador de calor en contraflujo la temperatura de salida del fluido fro
puede ser superior a la temperatura de salida del fluido caliente.
El caso lmite ocurre cuando la temperatura de salida del fluido fro es igual a la
temperatura de entrada del fluido caliente. La temperatura de salida del fluido fro nunca
puede ser superior a la temperatura de entrada del fluido caliente.

Compactos: son intercambiadores de calor multitubulares y estn diseados para

alcanzar una gran rea superficial de transferencia de calor por unidad de
volumen. La razn entre el rea superficial de transferencia de calor y su
volumen se denomina densidad de rea (b). Un intercambiador con b > 700
m2/m3 se clasifica como compacto.

Como se observa en la figura en los intercambiadores de calor compactos los dos

fluidos fluyen en direcciones ortogonales entre s (90) esta configuracin de flujo
recibe el nombre de flujo cruzado y se clasifica en funcin del mezclado:
a) Flujo cruzado mezclado: uno de los fluidos fluye libremente en direccin ortogonal al
otro sin restricciones;
b) Flujo cruzado no mezclado: se disponen las placas para guiar el flujo de uno de los
fluidos en direccin ortogonal al otro sin que se mezclen.

Casco y Tubos: es el tipo ms comn de intercambiador para aplicaciones

industriales; estn formados por gran cantidad de tubos metlicos contenidos
dentro en un casco o carcasa metlica. Los tubos se disponen con sus ejes
paralelos al eje del casco; la transferencia de calor tiene lugar, a medida que el
fluido que se desea calentar o enfriar, se mueve (fluye) por el interior de los
tubos metlicos; mientras que, el fluido trmico se fluye por fuera de stos,
dentro del rea de transferencia encerrada por el casco.

Como se observa en la figura los intercambiadores de casco y tubos se clasifican segn:

a) Nmero de pasos por el casco;
b) Nmero de pasos por los tubos.