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Gustavo Bednarski ATM 2019/2

AULA VII
Micologia
O cheiro caracterstico de chuva , na verdade, um cheiro de fungos. As hifas dos fungos
forram todo o solo. Quando a chuva cai, ela espalha todos esses microrganismos no ar.
Os fungos so multicelulares.
Os principais gneros de fungos que compe a microbiota humana so os Saccaromyces e os
Candida (que um ascomiceto).
Quando dentro do organismo, os fungos se reproduzem apenas assexuadamente. Tm a
caracterstica de se reproduzirem mais lentamente que bactrias.
OBS.: os fungos tm a capacidade de produzir toxinas contra bactrias que esto competindo
com eles por algum ambiente. Muitos antibiticos provm de origem fngica.
O crescimento dos fungos feito principalmente pela formao de hifas. As hifas de fungos
diferentes se encontram para que ocorra reproduo (plasmogamia e gametogamia).
Caractersticas gerais dos fungos

Eucariontes;
Produzem esporos;
Possuem parede celular;
No fotossintticos;
Nutrio absortiva;
Se reproduzem tanto assexuadamente quanto sexuadamente;
O glicognio usado como reserva energtica.

A parede celular fngica formada de quitina.


Para combater um fungo necessita-se de uma terapia muito restrita, em virtude da
semelhana metablica entre fungos e organismo humano (eucarionte x eucarionte).
A reproduo assexuada dada pelos esporos. A reproduo sexuada dada pelo encontro
de hifas.
Fungo hialino: transparente.
Fungo demceo: escuro (com melanina na composio).
Hialo-hifomicoses: infeco por fungos hialinos.
Feo-hifomicoses: infeces por fungos demceos ou feides (parede celular com melanina).
Classificao
Zigomicetos: suas hifas no so septadas (cenocticas). Normalmente no causa infeces,
apenas em pacientes imunocomprometidos. Quando h alguma infeco por zigomiceto, o
prognstico pssimo.
OBS.: apesar de dizer-se que os fungos zigomicetos no possuem septos, isso no verdade.
Esses fungos possuem septos! Usa-se essa nomenclatura apenas para fins de diagnstico
clnico.

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Ascomicetos e Basidiomicetos: ambos so ditos fungos com hifas septadas.
Deuteromicetos: so fungos imperfeitos. Ainda no se sabe qual a sua forma de reproduo.
Hifas septadas so geralmente de fungos infecciosos.
Os fungos se reproduzem em direo trpica na direo dos nutrientes!
Os septos so porosos. Quando h uma leso de hifas, o septo se oclui impedindo que todo o
fungo morra.
Considerando um fungo, a parte central desse microrganismo a que tem a menor atividade
enzimtica (poro mais envelhecida), enquanto que a periferia concentra a maior atividade
de enzimas (poro mais jovem).
Para crescer, o fungo vai degradando e refazendo a parede celular nas extremidades das hifas.
Micotoxinas
Os organismos que produzem toxinas so:

Aspergillus (aflatoxinas);
Penicillinum;
Fusarium;
Alternaria;
Claviceps.

No fgado, as toxinas formam um epxido (ter cclico) e se ligam irreversivelmente guanina


do DNA, causando mutao. Tambm podem se ligar glutationa.
OBS.: aflatoxina o principal agente externo para cncer heptico.

AULA IX
Virulncia dos fungos

Distrbios na regulao do sistema imune;


Inibio da produo de citocinas;
Diminuio de atividade fungicida de macrfagos;
Dimorfismo;
Capacidade de aderncia e invaso de clulas;
Produo de cpsulas fngicas (geralmente de carboidratos) que impedem o
reconhecimento do sistema imune;
Parede fngica com presena de melanina.

OBS.: toda vez que um fungo que contm melanina fagocitado, no fagolisossomo, ele
captura O2 para o seu metabolismo.
Micoses leveduriformes
Causadas por fungos dimrficos. O dimorfismo dependente de temperatura.
As morfologias fngicas so: leveduriforme e filamentosa.

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Forma leveduriforme ou parasitria: encontrada nos tecidos.
Forma filamentosa ou infectante: est presente no ambiente, solo e vegetao.
Existem entre os septos das hifas vrias clulas.
A funo da produo de pseudo-hifas a de invaso quando h infeco tecidual. Durante o
crescimento de pseudo-hifas, o fungo libera em sua poro apical proteases, hialuronidases,
etc. A formao de pseudo-hifas a partir de broto ou gmulas ocorre por conta do tropismo.
Candida spp.
O Candida albicans (ascomiceto) a principal espcie presente em nossa microbiota.
patolgico em condies oportunistas. Possui a enzima aspartil protease secretora (SAP), que
contribui para diversos fatores de virulncia, dentre eles: adeso e invaso do tecido epitelial e
evaso do sistema imunolgico.

A anfotericina um frmaco com grande afinidade a ergosterol e baixa afinidade ao


colesterol. Em geral, atua como fungiosttico (inibe o crescimento de fungos, mas no os
mata); embora, em concentraes prximas aos limites superiores de tolerncia possa ser
fungicida (mata o fungo). acumulado nos rins e pode levar falncia renal.

Cryptococcus spp.
um fungo encapsulado. Um basidiomiceto. encontrado principalmente em solo com fezes
de pombos.
Cryptococcus neoformans

Encapsulado;
Possui a enzima fenol oxidase (lacase);
Fosfolipases.

o agente causador da Criptococose, uma doena do aparelho respiratrio.

AULA X
Micoses superficiais
Causadas pelo contato direto com o agente. So as seguintes:

Ptiriase versicolor;
Tinha negra;
Piedra negra;
Piedra branca.

OBS.: o Se utilizado para eliminar micoses superficiais.

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Ptiriase versicolor
O agente causador o Malassezia furfur (Pityrosporum ovale), um fungo componente da
microbiota do couro cabeludo. Assintomtica esteticamente.
O Malassezia furfur bastante vido por lipdios. Em virtude disso, pessoas que tm
propenso a produzir lipdios metabolicamente possuem maior risco de desenvolver a
patologia. Indivduos de pele seca raramente desenvolvem Malassezia como micose
superficial.
Esse fungo age impedindo a ao da enzima lacase no h formao de melanina!
aconselhvel o uso de xampus base de sulfeto de selnio para eliminar Malassezia furfur
do couro cabeludo.
Tinha negra
causada por Exophiala werneckii.
Provoca o aparecimento de manchas marrons, principalmente nas regies palmares e
plantares. necessrio diferenci-lo de melanoma, em virtude da semelhana aparente!!
Piedra branca
Causada por Trichosporon beigelii. caracterizada pela presena de ndulos claros, pouco
aderentes ao pelo, localizados principalmente nos pelos escrotais e pubianos, raramente nos
pelos da barba, bigode, axila e cabelos.
O Trichosporon beigelii tem avidez por queratina. A infeco que se desenvolve do tipo
ectotrix (ao redor do pelo).
Piedra negra
Seu agente causador o Piedraia hortae. H formao de ndulos de cor escura, muito duros,
aderentes aos pelos e localizam-se somente nos cabelos. A infeco do tipo endotrix (no
interior do pelo).
Onicomicoses
Se desenvolvem provocando os seguintes tipos de injria:

Descolamento da borda livre: a unha descola do seu leito, geralmente iniciando pelos
cantos e fica oca. Pode haver acmulo de material sob a unha. a forma mais
frequente.
Espessamento: as unhas aumentam de espessura, ficando endurecidas e grossas.
Paronqua (unheiro): o contorno ungueal fica inflamado, dolorido, inchado,
avermelhado e, por consequncia, altera a formao da unha, que cresce ondulada e
com alteraes da superfcie.

Dermatofitoses
Os dermatfitos tm a capacidade de transformar o material querotinoflico em material
nutritivo, utilizando-o tambm para a sua implantao no hospedeiro. Todos tm afinidade
por queratina. Pertencem predominantemente aos gneros: Trichophyton, Microsporum e
Epidermophyton

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Dermatomicoses
Tinha cruris, Tinha pedis e Tinha corporis.
Micoses subcutneas
Os agentes de micoses subcutneas vivem em estado saproftico no solo, nos vegetais e nos
animais de vida livre, sendo parasitas acidentais do homem, que se infecta por ocasies de
traumatismo na pele, com material contaminado. A contaminao provocada sempre por
perfuraes da pele. A principal a lobomicose.
Lobomicose
Provoca leses que simulam queloides (verrugas). O agente causador o Lacazia loboi.
Convm ressaltar a grande incidncia da doena no pavilho auricular, devido ao hbito de
alguns indivduos, de transportar apetrechos e cargas sobre os ombros, facilitando com isso o
traumatismo da regio. Tambm relaciona-se o uso de brincos e outros adornos perfurantes
nas orelhas.
Infeces sistmicas
Sempre so adquiridas via area. As mais importantes so a histoplasmose e a
paracoccidioidomicose.
Histoplasmose
Pode ser confundida com a sintomatologia da tuberculose. Seu agente o Histoplasma
capsulatum.
Paracoccidioidomicose
provocado por Paracoccidioides brasiliensis. Desenvolve infeco pulmonar e pode se
alastrar para causar uma infeco sistmica.

AULA XI
Vrus
Para diagnosticar uma virose necessrio esperar que o paciente comece a resposta
imunolgica contra o antgeno. Ou pode-se fazer uma cultura de clulas (+ caro).
OBS.: resfriado e gripe so viroses diferentes causadas por agentes distintos.
Caractersticas

Contm cidos nucleicos (DNA ou RNA);


Possui envoltrio proteico;
So parasitos intracelulares obrigatrios.

OBS.: os vrus da hepatite possuem os dois cidos nucleicos.


Classificao
Vrus bacterianos (bacterifagos).
Vrus de plantas.

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Vrus de animais (dermatrpicos, neurotrpicos, viscerotrpicos e pneumotrpicos).
Os vrus precisam reconhecer molculas especficas para aderirem e serem internalizados.
Reconhecem receptores.
O vrion a partcula viral completa composta por material gentico e capsdeo (formado por
capsmeros, o envoltrio nuclear). J o pr-vrus apenas o material gentico viral anexado
ao material gentico do hospedeiro.
Nucleocapsdeo a estrutura formada pelo capsdeo e pelo cido nucleico.
Capsdeo:

Protege o cido nucleico da digesto enzimtica;


Contm stios para ataque da clula hospedeira;
Contm protenas que auxiliam na digesto da membrana citoplasmtica do
hospedeiro.

Os vrus podem ser envelopados e no envelopados. O envelope uma membrana com


glicoprotenas (espculas). a membrana citoplasmtica viral.
As espculas no vrus envelopado esto no envelope. J as espculas dos vrus no envelopados
esto no capsdeo.
Vantagens x desvantagens dos vrus envelopados:
VANTAGENS:

Camuflagem do sistema imunolgico;


Auxlio ao infectar novas clulas.

DESVANTAGENS:

Facilmente danificveis pelas adversidades ambientais.


o de temperatura;
o Congelamento e descongelamento;
o pH 6 ou 8;
o Solventes lipdicos e com cloro;
o Perxido de hidrognio;
o Fenol.

OBS.: a capacidade de produzir toxinas pela bactria da difteria (Corinebacterium difteridae)


explicada pelo fato de que em algum momento essa bactria foi infectada por um vrus que
deu essa capacidade.
Vrus de DNA:

Condiloma;
Hepatite B;
Herpes;
Mononucleose infecciosa;
Varicela (catapora).

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Vrus de RNA:

AIDS;
Caxumba;
Dengue;
Febre amarela;
Hepatites A, C e D;
Poliomielite;
Raiva;
Resfriado comum;
Rubola;
Sarampo.

OBS.: o interferon minimiza os receptores de reconhecimento de vrus. Minimiza a expresso


de vrus. H crescimento exacerbado das clulas somticas do hospedeiro sobre ao do
interferon, pois no possvel que a clula possa ser sensibilizada pelas clulas vizinhas.
Sistema de classificao de Baltimore
Todos os vrus necessitam produzir um RNAm +. Para sintetiz-lo, tambm preciso produzir
uma RNAm - para servir como molde.

I)
II)
III)
IV)
V)
VI)

As duas fitas do DNA se dissociam em DNA + e DNA -. O DNA - vai dar origem ao
RNAm +.
DNA + se junta a outra fica de DNA -. Acontece o passo I.
Forma-se diretamente RNAm +, a partir da fita de RNA -.
RNA + origina RNA -, que origina RNAm +.
RNA - d origem diretamente RNAm +.
RNA + forma DNA -, que vira DNA +/- para depois ocorrer o passo I.

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Ciclo lisognico o DNA viral se insere ao DNA do hospedeiro. No h lise. A clula continua a
se reproduzir.
Ciclo ltico produo de novos vrus a partir do DNA do hospedeiro e do viral. Acontece lise
da clula.
Vrus da imunodeficincia humana (HIV)
um vrus envelopado e de RNA fita dupla +.
Esse vrus em especial contm: transcriptase reversa, integrase e proteases.
Ataca as seguintes clulas do sistema imune: linfcitos T helper, macrfagos e clulas
dendrticas.
As clulas do hospedeiro apresentam co-receptores que do estabilidade entre a ligao vrusclula, os CCR5 e CXCR4. Os vrus, por sua vez, apresentam receptores (glicoprotenas) que so
a gp120 e gp41. Unidos, esses ltimos receptores formam o complexo gp161.
OBS.: sem os co-receptores o vrus no consegue se ligar s clulas do hospedeiro.
Inibidores da fuso dos retrovrus

Maraviroc (Pfizer) inibidor do co-receptor CCR5.


Enfuvertide (Fuzeon).

Mecanismo de ao
O RNA viral entra na clula do hospedeiro. A transcriptase reversa, ento, faz a transcrio de
um DNA viral a partir do RNA do vrus. Esse DNA viral segue para o ncleo onde se liga ao DNA
do hospedeiro sob o auxlio da enzima integrase. A partir desse momento, o DNA viral comea
a produzir RNAm para a produo de novos vrus. Quando o nucleocapsdeo produzido j est
pronto h expulso do vrus juntamente com parte da membrana citoplasmtica do
hospedeiro. Nessa membrana se expressaro as espculas (vrus encapsulado).
No caso dos vrus no encapsulados h apenas exocitose do material viral produzido.
OBS.: quando o vrus est ntegro (vrion) ele menos ativo. Quando est desmontado (prvrus) mais ativo.
Inibidores da transcriptase reversa nucleosdeo (NRTI) substituem os cidos nucleicos na
fita de RNAm viral.
Inibidores da transcriptase reversa no nucleosdeo (NNRTI) se ligam transcriptase
reversa e evitam a formao do DNA viral.
Estado virnico o momento em que o vrus est na forma de vrion, est inativo.
Burst time o tempo contado a partir da entrada do vrus na clula do hospedeiro at que o
primeiro vrus seja produzido.

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AULAS PRTICAS
Urina
Urina com turbidez um indicativo de presena de protenas.
As infeces urinrias podem ser causadas por bactrias, fungos e vrus!
70% das infeces urinrias so causadas por E. coli (BGN).
A uretra tem microbiota. Todo o sistema anterior uretra estril.
Infeces urinrias
Via ascendente contaminao atravs da regio perianal.
Via hematognica atravs de infeces sistmicas.
At 103 UFC/mL diz-se que h contaminao. Acima de 105 UFC/mL diagnostica-se infeco.
Urocultura
Para realiz-la necessrio coletar a primeira urina da manh. A coleta deve ser feita em jato
mdio.
So utilizados dois meios de cultura: gar nutriente e gar MacConkey.
O gar nutriente um meio de cultura no seletivo.
O gar MacConkey um meio de cultura seletivo. Possui sais biliares (que eliminam bactrias
gram +), NaCl e cristal violeta.
OBS.: os CGN geralmente so exigentes, necessitam de sangue para crescer.
BGN + GLI+ ENTEROBACTRIA
OBS.: GLI+ = fermentador de glicose.
BGN
No fermentador

Enterobactria

p.ex.: pseudomonas, acinetobacter.


LAC+
p.ex.: E. coli

LACp.ex.: Salmonella

No MacConkey
pH apresenta cor vermelha.
pH apresenta cor ocre, nude.

Conceito de espcie em microbiologia: indivduos com a mesma composio bioqumica.


Diferena gentica em relao presena de enzimas.

Gustavo Bednarski ATM 2019/2


Os carboidratos so os nutrientes mais biodisponveis, at mais que as protenas. Os
monossacardeos so os mais biodisponveis dentro dos carboidratos.
Enterobactria: BGN, consome glicose (fermentador).
Toda bactria metaboliza protenas!
Tripe Sugar Iron gar (TSI)
Esse meio contm em 1000 mL:

20g de peptonas;
1g de glicose;
10g de lactose;
10g de sacarose;
0,2g de citrato de ferro amoniacal;
5g de NaCl;
0,3g de tiossulfeto de sdio;
0,029 de vermelho de fenol (indicador de pH!);
135g de gar.

Vermelho de fenol
pH apresenta cor amarela;
pH apresenta cor vermelha;
pHn apresenta cor laranja;
Cistenase e cistinase so enzimas utilizadas para a produo de cistina a partir de
aminocidos cistena. A cistina nada mais do que duas cistenas ligadas atravs de ponte de
sulfeto. Na reao ocorre a liberao de H2S.
CISTENA + CISTENA CISTINA + H2S
O H2S formado direcionado para outra reao...
Algumas bactrias possuem a capacidade de utilizar o nion tiossulfeto como um aceptor de
eltrons, reduzindo-o sulfeto ferroso.
H2S + Fe2+ [FeS]
H2
O H2 utilizado proveniente do metabolismo de carboidratos. O sulfeto ferroso ([FeS])
formado apresenta-se como um precipitado enegrecido no TSI.

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Amostra A/A (cido/cido)

Neste caso tanto a base quanto o pice apresentaram cor amarela. Isso indica que houve
fermentao de glicose e utilizao da lactose (pH). A E. coli um exemplo de bactria A/A,
uma vez que GLI+ e LAC+.
Amostra K/A (bsico/cido)

Nessa amostra, a bactria utilizou a glicose (dando a colorao amarela na base) e as peptonas
(causando a cor vermelha no pice). O pH, em geral, apresenta-se bsico na base. A Salmonella
um exemplo de bactria do tipo K/A, em virtude de que GLI+, LAC- e SAC-.
OBS.: se utilizar-se uma bactria semeada no MacConkey em nude (LAC-) e seme-la em TSI, a
amostra pode ficar tanto A/A quanto K/A. Isso ocorre, pois no MacConkey no se testa se a
bactria SAC+ ou SAC-. Se ela for SAC+ fica A/A, se for SAC- fica K/A.
Amostra K/K (bsico/bsico)

Aqui, toda a amostra apresenta-se na cor vermelha. indicativo de que a bactria utilizou
apenas as peptonas. Um exemplo de bactria K/K so as pseudomonas.
OBS.: se houver uma amostra totalmente ENEGRECIDA sabe-se que a bactria uma
enterobactria (GLI+, LAC-), SAC+ e cistenase/cistinase+.
Sulfeto Indol Motilidade (SIM)
Fenilalanina
Triptofano
Tirosina

piruvato + NH3

+ dimetilaminobenzaldeido (reagente de cor)

[INDOL]

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O anel benznico fica no meio aps os aminocidos terem sido utilizados.
OBS.: o [indol] um complexo de cor vermelha!
Citrato
O meio de cultura composto apenas por citrato. Ao utilizar esse composto, a bactria deixa o
meio pH bsico.

Ao no utilizar o citrato o meio permanece verde. Quando utilizado o meio fica azul.
Lisina
LISINA
PIRUVATO + NH2 + CO2
lisina descarboxilase
pH apresenta a cor amarela.
pH apresenta a cor roxa.

Da amostra I para a amostra II a bactria fermentou glicose que havia disponvel no meio,
provocando um pH . Na passagem da amostra II para a III, a bactria iniciou a utilizao de
lisina, fazendo com que o pH se elevasse.