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Revista

de Investigacin,
6 (1).
Diciembre
2005.
Revista de Investigacin, ISSN
16576772.
Vol. 6 (1):Vol.
67-73.
Enero
- junio 2006.

Determinacin taxonmica de hemoparsitos y


su prevalencia en bfalos de agua (Bubalus
bubalis) en el Magdalena Medio, Colombia1
GERMN ALONSO PRADA SANMIGUEL, JUAN CAMILO CRESPO
Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de La Salle.

El objetivo fue hacer una determinacin taxonmica y prevalencia de hemoparsitos en bfalos de


agua Bubalus bubalis de la hacienda La Suiza, ubicada en el municipio de Puerto Nare (departamento de
Antioquia), Magdalena medio, Colombia. Se analizaron 600 bfalos de agua para determinar presencia
y prevalencia de hemoparsitos. A cada bfalo se le tom una muestra de sangre y luego se hicieron
frotis sanguneos, los cuales se tieron con colorante Dip Quick. Las lminas con los parsitos coloreados
se observaron y fotografiaron con microscopio de luz con un sistema microfotogrfico Olimpos con
aumentos de 400X a 1000X. La prevalencia de hemoparsitos encontrada en bfalos de agua fue la
siguiente: Anaplasma sp 54,7% (menores de 1 ao de edad), 56,7% (entre 1 y 3 aos de edad) y 52,2%
(mayores de tres aos de edad); Trypanosoma sp 1,5% (menores de 1 ao de edad) y 2% (mayores de tres
aos de edad); Babesia sp solo se encontr en bfalos entre uno y tres aos de edad (0,5%). Se concluye
que el hemoparsito con mayor prevalencia en la Hacienda La Suiza fue Anaplasma sp (54,6%).
Palabras clave: bfalo, Anaplasma sp, Trypanosoma sp, Babesia sp, hemoparsitos.

Taxonmic determination of hemoparasites and its prevalence


in water buffalos (Bubalus bubalis) in middle Magdalena Region,
Colombia
The purpose of this study was to do a taxonomic determination and prevalence of hemoparasites in water
buffalos (Bubalus bubalis) in La Suiza; a Ranch located in Puerto Nare (Antioquia), Middle Magdalena
Region, Colombia. 600 water buffalos were analyzed in order to determine presence and prevalence of
hemoparasites. Each buffalo was taken a blood sample, and then blood smears were done, stained with
Dip Quick colorant. The slides with stained parasites were photographed using a light microscope with
an Olympus micro photographic system, in increments from 400X to 1000X. The hemoparasites
prevalence found in water buffalos was as follows: Anaplasma sp 54.7% (under 1-year-old), 56.7% (between
1 and 3 years old), and 52.2% (over three-year-old); Tripanosoma sp 1.5% (under 1-year-old) y 2% (over
three year old); Babesia sp was only found in buffalos from 1 to 3 years old (0.5%). We concluded that the
hemoparasite with higher prevalence in La Suiza Ranch was Anaplasma sp (54.6%).
Key Words: Buffalo, Anaplasma sp, Trypanosoma sp, Babesia sp, hemoparasites.

1
Esta investigacin fue financiada por la Universidad de La Salle.
Correspondencia: gprada@lasalle.edu.co
Recibido: octubre 11 de 2005.
Aceptado: enero 27 de 2006.

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Determinacin taxonmica de hemoparsitos y su prevalencia en bfalos de agua. Prada GA et al.

INTRODUCCIN
El Bfalo domstico (Bubalus bubalis) es un animal
nativo de la India, Pakistn, y Extremo Oriente,
donde fue domesticado aproximadamente 2500
a. de C. Existen dos Gneros de bfalos: el
Syncerus caffer o bfalo africano que permanece
en estado salvaje el cual nunca ha podido ser
domesticado y el Bubalus bubalis que corresponde
al bfalo asitico del cual se presentan dos
variedades: el bfalo de ro (Bubalus bubalis var.
bubalis) y el bfalo de los pantanos (Bubalus
Bubalis var. kerebau) (Rodrguez 1993). El cruce
entre bfalo y bovino no es posible por
incompatibilidad cromosmica (el bfalo tiene 50
cromosomas y el bovino 60) (Carrazoni 1998).
La poblacin mundial de bfalos se calcula en ms
de 150 millones de cabezas, de los cuales el 95%
se encuentra en Asia. En Latinoamrica su cra se
viene realizando desde hace unos aos en pases
como Argentina, Brasil, Colombia y Venezuela
donde; por ser pases tropicales, la cra ha sido
optima. Segn datos de la Asociacin
Colombiana de Bufalistas, existen 55.000 cabezas
en Colombia, distribuidas principalmente en los
departamentos de Crdoba, Sucre, Antioquia,
Casanare y Bolvar (Barrero y Mutis 2001).
En Colombia, se trabaja principalmente con el
bfalo de rio, animal con una buena aptitud
lechera y utilizado tambin para la produccin
de carne y el trabajo en las fincas (Rodrguez 1993).
El promedio de produccin lechera de una hembra
bufalna es de entre 7 a 8 litros diarios en una
lactancia de 7 meses; la leche presenta un
porcentaje ente el 7 y 8 % de grasa; lo cual la hace
muy apetecida para la fabricacin de quesos,
yogures y mantequillas. En cuanto a la
produccin de carne, los animales alcanzan un
peso aproximado de 410 kg en 20 meses.
Los bfalos son susceptible a un sinnmero de
patgenos bacterianos y virales as como
parasitarios. De igual forma, la susceptibilidad de
estos animales constituye un problema, tambin
lo es el hecho de que esta especie haya podido
introducir patgenos nuevos al campo
colombiano que pudieran estar afectando la
poblacin bovina local. Ante esta situacin, urge
la necesidad de realizar estudios que aclaren
dichas incgnitas.

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Es bien sabido que el clima clido de Colombia es


muy prolfico en cuanto a hemoparsitos que
atacan al ganado bovino, debido a que se
presentan las condiciones de humedad,
temperatura y luminosidad que permiten la
supervivencia de una gran cantidad de
ectoparsitos que afectan a los bovinos y que
sirven de vectores para la transmisin de estas
enfermedades, creando en el campo colombiano
de zonas tropicales y subtropicales reas
endmicas de hemoparsitos. Ya que estos
patgenos pueden compartir como husped la
especie bufalina, se hace necesario determinar que
tipo de hemoparsitos estn atacando a los
bfalos y si estos son los mismos de los bovinos,
o si por el contrario, son patgenos nuevos que
han sido introducidos al pas con esta especie.
Los hemoparsitos reportados tanto en bovinos
como en bufalinos producen las siguientes
parasitosis:
Babesiosis. La Babesiosis es producida por un
protozoario del Gnero Babesia que pertenece al
subgnero Piroplasmea, orden Piroplasmida,
subfamilia Babesioidea y familia Babesiidae (Cordero
del Campillo et al. 1999). Estos microorganismos
son parsitos intraeritrociticos y son causantes
de anemia y hemoglobinuria, afectan a mamferos
domsticos y salvajes y son transmitidos por
garrapatas de la familia Ixodidae, donde se
encuentran las garrapatas del Gnero Boophilus.
Son agentes heteroxenos obligados,
desarrollndose en el hospedador invertebrado
la fase sexual de su ciclo con formacin de
gametogonia y esporogonia y en el hospedador
vertebrado, la fase asexuada del ciclo realizando
divisiones por fisin binaria (Smith 2002). Estos
organismos parasitarios al encontrarse en el
glbulo rojo se nutren por pinocitosis,
hidrolizando la hemoglobina del eritrocito y
metabolizando la glucosa, dando lugar a la
formacin de cido lctico y manosa. La
babesiosis es una enfermedad de distribucin
mundial presentndose en todos los continentes
particularmente en reas tropicales y
subtropicales, entre los 320 Norte y 300 sur; debido
a que all se dan las condiciones para la
sobrevivencia de los vectores (Schimidt 1971). En
los rumiantes existen al menos 6 especies de
babesia que los afectan, siendo la Babesia bovis y
Babesia bigemina las dos principales especies que

Revista de Investigacin, Vol. 6 (1). Enero - junio 2006.

se encuentran en Colombia (Dennet y Hawkey


2003). La enfermedad en el ganado tambin es
conocida con los nombres de piroplasmosis,
fiebre de Texas y tristeza, y se ha demostrado que
afecta animales diferentes a los bovinos tales
como visones americanos, bfalos de agua,
bfalos africanos y ciervos de cola blanca (Smith
2002). La Babesiosis es de gran importancia
sanitaria ya que es una zoonosis y puede ser
transmitida por la garrapata al hombre. Sin
embargo, la casustica real en humanos es
desconocida toda vez que los casos que se
diagnostican generalmente son accidentales
(Martn 1982).
Anaplasmosis. Este organismo es una Rickettsia
clasificada en la familia Anaplasmataceae, en
donde se encuentran los gneros Anaplasma,
Haemobartonella, Eperytrozoon y Aegyptionella, las
cuales se diferencian entre si por su hospedador
(especie a la que afectan), la localizacin en la
superficie de los glbulos rojos y su morfologa.
Existen cuatro tipos de Anaplasma siendo el mas
representativo en Bvidos el Anaplasma marginale
debido en parte a su patogenicidad. Anaplasma
centrale tambin afecta a estos animales pero
posee muy baja accin patgena y su importancia
radica en que cumple un papel inmunizante
frente la accin patgena del Anaplasma marginale
(Biberstein 1994). El Anaplasma marginale, es
endmico y se encuentra en todos los continentes
principalmente en zonas tropicales y
subtropicales del globo, pero tambin se ubica
en zonas templadas, los hospedadores del agente
son los vacunos, algunos rumiantes silvestres y
quizs las ovejas (Otte 1992). El Anaplasma es
transmitido a travs de picaduras de garrapatas,
entre las cuales la de mayor importancia es
Boophilus microplus, adems puede ser trasmitido
por dpteros hematfagos como Tbanos, Stomoxis
y Haematobia; tambin se ha comprobado la
transmisin iatrognica del agente a travs de
agujas, instrumental quirrgico, guantes de
ciruga y otros elementos (Cossio et al. 1997). Una
vez el parsito ingresa al torrente sanguneo los
agentes penetran los eritrocitos por endocitosis
y se multiplican por fisin binaria, los cuerpos
neoformados son liberados de la superficie del
eritrocito y pasan a las clulas contiguas sin que
se produzca lesin celular visible (Lombardero
1990). La enfermedad se caracteriza por anemia
debido a la eliminacin de los eritrocitos

parasitados por los macrfagos ubicados en el


bazo y el hgado (Gaido 1997).
Tripanosomiasis. Los tripanosomas son parsitos
cuya clasificacin taxonmica corresponde al
Philum Protozoa, Subphilum Mastigophora
(locomocin por flagelos) clase Zoomastigophora,
Orden Kinetoplastidae, Familia Trypanonosomatidae,
Gnero Tripanosoma (Cordero del Campillo et al.
1999; Urquhart 2001, Panarella 2002). Estos
microorganismos son causantes de varias
enfermedades en humanos y animales en reas
tropicales y subtropicales de los continentes
africano, asitico y americano. En humanos
ocasionan enfermedades de importancia sanitaria
como la enfermedad del sueo y la enfermedad
de chagas (Tinsley 1999). Existen seis especies de
Trypanosoma que afectan a los rumiantes (Garca
et al. 2001, Gaunt et al. 2003) siendo las de mayor
importancia en Colombia y sur Amrica,
Trypanosoma vivax, Trypanosoma evansi y
Trypanosoma theileri. Algunas de sus caractersticas
morfolgicas incluyen, el poseer un ncleo, un
flagelo y una mitocondria que integra el cuerpo,
poseen un complejo cinetoplstico integrado por
el cido Desoxirribonucleico (DNA)
mitocondrial y el cuerpo basal del flagelo, lo cual
constituye la base de su aparato locomotor
(Biberstein 1994, Cossio 1997, Hendrix 1999). Se
alimentan por pinocitosis y fagocitosis ya que los
miembros de este gnero tienen como hbitat el
torrente circulatorio y diversos tejidos de
animales vertebrados, incluyendo al hombre
(Johnstone 1998, Panarella 2002). Los Tripanosomas
requieren de un vector para transmitirse de un
animal a otro, siendo en Amrica los mas
importantes los Tabanus spp, y las moscas Stomoxys
spp. En frica la mosca Tse-Tse, es el vector ms
importante en la transmisin de estos agentes en
humanos (Tinsley 1999).
Este parsito puede ingresar de dos formas al
husped definitivo, la primera a travez de la piel
ocasionando prurito, lo que obliga a que el
hospedador final se rasque, producindose una
herida de la cual se vale el tripanosoma para
ingresar. Los tripanosomas que efectan este tipo
de contagio y que se desarrollan en la parte
posterior del aparato digestivo del vector, son
clasificados como Stercoraria (Cordero del
Campillo et al. 1999; Urquhart y Col, 2001). La
segunda forma de infeccin se denomina

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Determinacin taxonmica de hemoparsitos y su prevalencia en bfalos de agua. Prada GA et al.

inoculativa y ocurre cuando el parsito es


introducido al hospedador a travs de la probosis
del insecto. Este tipo de tripanosoma es clasificado
como Salivaria debido a que desarrolla parte de
su ciclo en las zonas anteriores de la parte
digestiva del hospedador intermediario (Cordero
del Campillo et al. 1999, Miranpuri 1988, Urquhart
et al. 2001).
Colombia es un pas que presenta condiciones
ideales para el desarrollo de hemoparsitos
debido a que el 80% de su territorio se encuentra
ubicado en reas tropicales y un 10% en reas
subtropicales, lo cual permite la sobrevivencia de
la mayora de vectores trasmisores de estas
enfermedades; esto acompaado por las
condiciones climticas de calor y humedad que
se presentan en estas reas del pas, donde el
promedio de temperatura es de 27C y la
humedad relativa flucta entre 70 y 85%;
adicionalmente la luminosidad factor de
importancia para el desarrollo de los vectores es
de mnimo 11 horas/da con un mximo de 12
horas da (Otte 1992, Wharton 1999).
A nivel nacional se han realizado algunos
estudios en la especie bufalina, los cuales han
tenido como propsito establecer parmetros o
rangos de referencia para constantes fisiolgicas
y la identificacin de parsitos gastrointestinales
y sanguneos (Arbelez et al. 1998; Seplveda et
al. 2000) estos estudios han sido realizados en los
departamentos de Antioquia y Crdoba.
El presente trabajo presenta los resultados de la
determinacin taxonmica y de prevalencia de
hemoparsitos en bfalos de agua de una zona
caliente del Magdalena Medio.

MATERIALES Y MTODOS
El presente estudio fue realizado desde marzo del
ao 2004 hasta agosto del mismo ao, en la
hacienda bufalera La Suiza ubicada en la ribera
oriental del ro Magdalena a la altura de los
municipios de Puerto Nare y Puerto Berro
(Antioquia), corregimiento la Sierra, vereda La
Mina. Son 5.000 hectreas divididas en 16 zonas en
las que pastorean cuatro mil doscientos bfalos
de agua (B. bubalis) Esta hacienda est integrada
por tres fincas a saber: Puerto Alicia, ubicada en
Puerto Berro; as como La Espiga y Corinto en

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Puerto Nare. La media anual de precipitacin


reportada es de 2016 mm/ao, con una mxima de
precipitacin en mayo y una mnima en enero,
clasificndose la zona como selva hmeda tropical,
con una temperatura media de 27C. La humedad
relativa media es de 85%, y su fisiografa
corresponde a un relieve ligeramente ondulado
con pendientes entre 3 y 12%, con pendientes
cortas y una altimetra entre los 125 y 200 msnm
(Instituto de Hidrologa y Metereologa 2004,
Gobernacin de Antioquia 2004).
Se trabaj con un total de 600 animales, distribuidos
en tres grupos de 200 individuos cada uno,
seleccionados de acuerdo a su edad (< 1 ao, 1 a 3
aos y > 3 aos). A los animales muestreados, se
les tom su numero de identificacin y su
temperatura corporal, luego se les recort el pelo
de la punta de la cola, la cual fue luego lavada y
embrocada, para finalmente realizar un pequeo
corte con una hoja de bistur con el fin de obtener
una gota de sangre, que fue colocada en una
lamina portaobjeto, para realizar un frotis
sanguneo en capa fina. Esta muestra fue secada al
aire y luego coloreada mediante la tincin de Dip
Quick. Dicho colorante policromtico contiene un
cido DNA/RNA azul, otro bsico con protenas
eosinoflicas color anaranjado y por ultimo el color
violeta compuesto por sustancias policromticas.
Para la tcnica de tincin se fij el frotis primero
con metanol remojando la lamina por 5 segundos,
posteriormente se remoj la misma en el colorante
anaranjado de nuevo por 5 segundos y por ltimo
en el colorante violeta, por la misma cantidad de
tiempo. As, luego debe lavarse suavemente cada
placa con agua limpia y esperar a que se seque la
muestra.
Los frotis sanguneos ya coloreados fueron
transportados al laboratorio clnico de la Facultad
de Medicina Veterinaria de la Universidad de La
Salle para ser observados con microscopio de luz
y fotografiados con un sistema microfotogrfico
Olympus con aumentos de 400X a 1000X.
El modelo estadstico realizado, fue un estudio
transversal o de prevalencia, analizado con Excel.

RESULTADOS
Determinacin taxonmica. Con la tcnica de
microscopa utilizada, solo se logr determinar

Revista de Investigacin, Vol. 6 (1). Enero - junio 2006.

los hemoparsitos hasta gnero; esta tcnica no


permite diferenciar rasgos morfolgicos de la
especie. Los gneros encontrado en los bfalos
en estudio fueron los siguientes: Analasma,
Trypanosoma y Babesia; estos gneros se presentan
con frecuencia en bovinos del territorio nacional.
Prevalencia. Los bfalos menores de un ao
mostraron una prevalencia de Anaplasma sp 54,7%
con 110 animales positivos (Figura 1), Tripanosoma
sp 1,5% (Figura 3) con 3 animales positivos y no
se encontr Babesia en este grupo de bfalos.
Los bfalos con edad entre 1 a 3 aos, tuvieron
una prevalencia de Anaplasma sp del 56,7% con
114 animales positivos y no se encontr ninguno
positivo para Tripanosoma sp; en este grupo se
encontr una prevalencia del 0,5% para Babesia sp
(Figura 2) con un bfalo positivo.
Los bfalos mayores de 3 aos, tuvieron una
prevalencia de Anaplasma sp del 52,2%, con 105
animales positivos, Tripanosoma sp del 2% con 4
animales positivos; no se encontr bufalos
positivos para Babesia en 200 muestras de sangre
de este grupo de edades.
La prevalencia de Anaplasma en los tres grupos
fue muy similar, donde en comparacin con los
otros hemoparsitos (Babesia y Tripanosoma) tuvo
una notable mayor incidencia en la poblacin de
bfalos.

Figura 1. La flecha esta indicando un Anaplasma


sp encontrado en este estudio en
eritrocitos de bfalo. Tincin con Dip
Quick, microfotografa con aumentos de
1000X.

En los grupos 1 y 3 (bfalos menores de un ao y


animales mayores de 3) no se encontr presencia
de Babesia.

Figura 2. La flecha esta indicando Babesia sp


encontrada en este estudio en
eritrocitos de bfalo. Tincin con Dip
Quick, microfotografa con aumentos de
1000X.
El parsito del gnero Tripanosoma se encontr en
siete bfalos de los tres grupos de edad
analizados. En el grupo 1 se dio una prevalencia
de hemoparasitos de 1,5% con 3 casos positivos.
En el grupo 2 no se observ Tripanosoma en las
muestras de sangre analizadas; en el grupo 3
(bfalos mayores de 3 aos) se encontraron 4
individuos positivos con una prevalencia del 2%.

Figura 3. Las flechas indican Tripanosoma sp


encontrado en este estudio en
eritrocitos de bfalo. Tincin con Dip
Quick, microfotografa con aumentos de
1000X.

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Determinacin taxonmica de hemoparsitos y su prevalencia en bfalos de agua. Prada GA et al.

DISCUSIN
Los 600 bfalos involucrados en esta
investigacin se seleccionaron aleatoriamente de
una poblacin de 4133 individuos (Censo febrero
2004, Hacienda La Suiza). Esta muestra represent
un 99% de margen de confianza.
El colorante Dip Quick present una ventaja sobre
el colorante Giemsa, dada porque adems de que
los parsitos coloreaban muy bien, permiti
observarlos muy bien al microscopio porque en
las lminas no quedaban residuos de colorante,
lo cual permiti observar Anaplasma; el colorante
Giensa no permiti observar Anaplasma porque
quedaban residuos que impedan observar con
nitidez este parsito.
De los hemoparsitos encontrados en bfalos de
la Hacienda la Suiza, el de mayor prevalencia
general fue Anapalasma sp, en los tres grupos por
edades de los bfalos se encontr un porcentaje
mayor al 54% respectivamente. Este resultado
varia de acuerdo con el encontrado por Miranpuri
(1988), donde en un grupo de animales, la
cantidad de afectados por Anaplasma sp fue de
aproximadamente 6,2% pero debe tenerse en
cuenta que dicha investigacin fue realizada en
la India, donde juegan factores climticos
diferentes comparativamente con los del trpico,
es por esta razn que la difusin de hemoparasitos
en Colombia puede ser mayor.
Al parecer los bfalos poseen cierta resistencia al
hemoparsito es por esta razn que la mayora
de animales muestreados no mostraron una
sintomatologa marcada a la enfermedad se
seala con relacin al hemoparsito que una
cantidad de animales positivos al patgeno
estaban aparentemente sanos y eficientes
productivamente, lo cual podra interpretarse
como que al parecer el bfalo, es una especie
potencialmente resistente a estos protozoos
patgenos causantes de grandes prdidas
econmicas en el ganado vacuno (Seplveda et
al. 1984).

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En cuanto a la baja presentacin de Babesia sp


coincide con anteriores estudios en ganado
bufalino (Miranpuri 1988); en un muestreo de mas
de 300 animales en el noroeste de la India, solo se
encontr una prevalencia de Babesia sp del 2,2%.
La presencia de Babesia sp en bfalos no est de
acuerdo con Muralsedharan et al. (1984), quienes
reportaron que la ocurrencia de Babesia bovis est
limitada solo a bovinos.
La prevalencia de Trypanosma sp encontrada en
bfalos de la Hacienda La Suiza (1,16%) es mucho
menor que lo encontrado en Crdoba y
Antioquia por Seplveda et al. (1984) quienes en
74 bfalos encontraron una prevalencia de 16,7%.
La presentacin sintomtica de estas
enfermedades en la Hacienda La Suiza solamente
se ve reflejada en animales jvenes, en donde se
da un cuadro nervioso, con perdida de sensibilidad
superficial en los miembros posteriores o
anteriores y debilidad, con una morbilidad de 2 a
3 animales por mes, parmetro que muestra que
los bufalinos jvenes pueden sufrir cuadros
agudos, siendo en este caso los mas afectados;
caso contrario a lo que se pensaba en cuanto a la
inmunidad pasiva dada por las madres y la
resistencia adquirida por los animales jvenes,
frecuentemente se ha sealado una relacin
inversa entre edad y resistencia a la infeccin por
hemoparsitos en la que los jvenes son menos
susceptibles que los animales mayores (Criado
2003). La mayora de bfalos conviven con estas
enfermedades y no muestran sntomas
patolgicos; por lo que a nivel productivo debe
tener una repercusin grave en produccin de
leche y ganancia de peso. Por consiguiente, es
importante en trabajos futuros, evaluar
parmetros productivos como los anteriormente
mencionados.

Revista de Investigacin, Vol. 6 (1). Enero - junio 2006.

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