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FACULTAD DE CIENCIAS FARMACUTICAS Y

BIOQUMICA

BIOQUMICA II
TEMA:

DETERMINACIN DE COLESTEROL TOTAL

ALUMNOS:
Silva Villacrez, Jhuliana
Quispe Gutirrez, Herbyn
Gonzales Daz, Neila
Apaza Condori Jenny

DOCENTE:

Q.F. CALDERON GOMEZ, JAVIER JACK.

CICLO: VII 2B

2015

INTRODUCCIN
La cuantificacin de colesterol y triglicridos en suero es un procedimiento
analtico bsico en el diagnstico y seguimiento de enfermedades metablicas,
primarias o secundarias. Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de
padecer enfermedades cardiovasculares. en especial aquel unido a las LDL
(colesterol malo). El colesterol de las HDL (colesterol bueno), puesto que
representa aquella fraccin de colesterol que se transporta al hgado para su
metabolizacin y excrecin por va biliar, no se asocia con riesgo de
enfermedad

Determinacin de colesterol total


Para la determinacin de colesterol total se utilizan reactivos Bialex colesterol
estandarizados comerciales que incluyen las enzimas y sustratos necesarios
para la cuantificacin de todas las formas de colesterol presentes en el suero
(Kit comercial de LinearChemicals).

1.-Esteres de colesterol + H2O

Col. Esterasa

Colesterol + Ac. Grasos

2.-Colesterol + H2O + O2

Col. Oxidasa

Colestenona + H2O2

3.-H2O2 + 4-Aminoantipirina + 3.5-Dicloorofenol POD

Quinona coloreado + 4H20

1. Una colesterol estearasa (CHE) hidroliza los steres de colesterol a colesterol


mas cidos grasos libre.
2. A continuacin una colesterol oxidasa (CHOD) oxida todo el colesterol a
colestenona y perxido de hidrgeno.
3. El perxido de hidrgeno es sustrato de una peroxidasa (POD) que junto con
4-amino fenazona (4-AP) da lugar a la formacin de una quinona roja. La
quinona formada es proporcional a la concentracin de colesterol en la
muestra.

MATERIALES:

Suero de sangre.
Reactivo de trabajo.
Estndar de colesterol

Reactivo de Trabajo.
sanguineo

Estndar de colesterol

suero

BL

MP

MP

PROCEDIMIENTO:

Procedimiento
Muestra

0.02mL

ST-200mg/dL

0.02mL

Rvo. De Trabajo

2mL

2mL

2mL

BAO MARIA 38 C X 10 min y se lee a 505nm

MUESTRAS
MARIA x 10m

BAO

Resultados

CONCLUSION:

Segn el mtodo cualitativo (por diferencia de color entre la muestra y


la muestra problema) utilizado para determinar el colesterol total, de
acuerdo a los parmetros normales de colesterol en nuestro organismo,
obtuvimos como resultado un color rosa ms intenso en la muestra del
paciente que en la muestra estndar,

indicando un nivel superior de

200 mg/dL correspondiente a nuestro paciente.


RECOMENDACIONES

Al extraer la muestra del paciente tiene que obtenerse 5mL, de sangre


para que de esta manera tengamos el suero necesario para la prctica.

Al utilizar los tubos para la centrifugacin de la muestra se debe escoger


tubos medianamente gruesos y resistentes para evitar rompimientos.

La hemolizacion de la sangre puede causar resultados equivocados

El paciente antes de esta prueba no debe ingerir alimentos.

OBSERVACIONES
La paciente dos horas antes de la toma de muestra consumi alimentos.
Los resultados obtenidos no son exactos, ya que es cualitativo (Por diferencia
de color) ya que el equipo del espectrofotmetro no est disponible.