REA DE SUSTENTABILIDAD PARA EL DESARROLLO

PROGRAMA ACADMICO DE QUMICA

ESPECIALIDAD TECNOLOGIA AMBIENTAL
GRUPO
QU-301
MATERIA
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
TITULO
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS
DE LA MATRIZ AMBIENTAL: ___SUELO______
ASESORA
Dra. ROSA RICO MATA
DATOS DE IDENTIFICACIN DE LOS ANALISTAS
Fecha de inicio del anlisis: 1 de julio de 2015
Fecha de trmino: 13 de julio de 2015
Nombre
Cargo
Cruz Romo Diana Laura
Responsable
Gonzlez Snchez Carla Valeria
Administrador
Gaona Aboytes Mara Alejandra
Laboratorista 1
Mireles Villasana Alejandra
Laboratorista 2
Prez Gmez Cynthia Sarai
Laboratorista 3

GENERACIN: 2014-2016

DATOS DEL SITIO EN ESTUDIO

1.- Breve descripcin del estatus ambiental del sitio de estudio:
Es una presa en la cual desembocan todo tipo de desechos industriales y
domsticos, y su destino final es para el riego de alfalfa y lechuga, estas aguas estn
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fuertemente contaminadas qumica y bacteriolgicamente, al no sufrir ningn tratamiento

de remediacin en el lugar hay diversos tipos de plantas as como diferentes zonas de
cultivos a los alrededores de la presa, en la zona estn presentes diferentes tipos de suelo
y a pesar de que haya suelo frtil es regado con agua contaminada.
Nombre

Presa Blanca

SITIO DE
MUESTRE
O

Ubicacin
/coordenadas
GPS
Ubicada al
sureste del
municipio de
Len en el
estado de
Guanajuato.
Coordenadas:
21 5'10.97"N
10142'35.19"O

Imagen de mapa satelital

2. Evidencia fotogrfica del sitio

Fecha: 11/10/2015
Hora: 10:32 am

Fecha: 11/06/2015
Hora: 10:34 am

DATOS DE LAS MUESTRAS A ANALIZAR

1. Identificacin
Fecha y hora de toma de
Fecha y hora de siembra:
muestra: 11/06/15 a las 12:02
01/07/15 a las 10:36 am
pm
Punto de Muestreo (ubicacin /coordenadas
Tiempo de exposicin (aplica solo para muestra
GPS):
de aire)
21 5 40.97 N 121 42 39.98 O
Nombre del/ los analistas que tomaron la
Nombre del/ los analistas que sembr la
muestra:
muestra:
Diana Erndira Uribe Jurez
Diana Erndira Uribe Jurez
Matriz ambiental: Suelo

2.Parmetros Fisicoqumicos
Color: caf oscuro

Temperatura (oC) ambiental: 23.4C

6.5

Olor: a humedad

Describir condiciones climatolgicas:

Temperatura de 24C, soleado

3. Evidencia fotogrfica del sitio de toma de muestra

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pH:

AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
1. Justificacin del proceso para la identificacin bacteriana
La identificacin bacteriana se realiz mediante pruebas bioqumicas debido que
estas son un conjunto de reacciones que determinan la actividad de una va metablica
de la bacteria a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la
bacteria al crecer transforma o no, tambin si existe o no fermentacin. Para ello es
necesario partir de un cultivo puro obtenido en el aislamiento, resembrado una colonia
bien aislada. Entonces esto permite estudiar las caractersticas generales de la bacteria,
su metabolismo, etc., lo que nos permitir conocer los beneficios o perjuicios que aporta
al ambiente, lo que dar pauta a tomar decisiones o precauciones , por ejemplo saber la
bacteria es capaz para utilizarse en un tipo de biorremediacin.
2. Dos medios de siembra (Nombre y Composicin)
(1) Agar EMB (agar eosina azul de
metileno)
Frmula* por litro de agua destilada
Digerido pancretico de
gelatina..10.0 g
Lactosa..5.0 g
Sacarosa..5.0 g
Fosfato dipotsico..2.0 g
Agar..13.5 g
Eosina..0,4 g
Azul de metileno..0.065 g

(2) Mac Conkey

Frmula* por litro de agua destilada
Gelatina digerida por enzimas
pancreticas17 g
Casena digerida por enzimas
pancreticas1.5 g
Tejido animal digerido por enzimas
peptdicas..1.5 g
Lactosa10 g
Sales biliares..1.5 g
Cloruro de sodio..5 g
Rojo neutro..0.03 g
Violeta cristal..0.001 g

Morfologa Colonial (Medio 1)

Descripcin

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

En este medio se pueden observar

colonias verdosas con brillo metlico y
centro negro azulado, rosas prpura,
incoloras, puntiformes, de forma circular o
sin forma especfica ya que se forman
agrupamientos, con contorno redondeado,
elevacin convexa, mucosas, con aspecto
semihumedo, pequeas o grandes, con
superficie lisa.

En este medio pueden crecer

colonias color rosa a rojo, incoloras a color
rosa o incoloras con en centro anaranjado
a mbar , puntiformes, de forma circular o
irregulares, de superficie convexa, planas
convexas
o
papilada
con
borde
redondeado u ondulado, colonias mucoides
, inhibicin de agrupamiento dinmico
alrededor de colonias aisladas.

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Imagen

Imagen

3. Dos Medios selectivos de resiembra (Nombre y Composicin)

(1) Agar EMB (agar eosina azul de
metileno)
Frmula* por litro de agua destilada
Digerido pancretico de gelatina..10,0
g
Lactosa..5,0 g
Sacarosa..5,0 g
Fosfato dipotsico ..2,0 g
Agar 13,5.. g
Eosina..0,4 g
Azul de metileno 0,065..g

(2) Agar bilis rojo violeta

Frmula* por litro de agua
destilada
Extracto de levadura........3,0 g
Peptona......7,0 g
Lactosa.........10,0 g
Cloruro de sodio.........5,0 g
Rojo neutro.......0,03 g
Cristal violeta......0,002 g
Agar.......15,0 g

Morfologa Colonial (Medio 1)

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Descripcin

En este medio se pueden observar

colonias verdosas con brillo metlico y
centro negro azulado, rosas prpura,
incoloras, puntiformes, de forma circular o
sin forma especfica ya que se forman
agrupamientos, con contorno redondeado,
elevacin convexa, mucosas, con aspecto
semihumedo, pequeas o grandes, con
superficie lisa.

En este medio pueden crecer colonias

incoloras, rosadas, rojas con halo de
precipitacin rojizo, su elevacin puede
ser convexa o plana-convexa, puntiformes,
de formar circular, borde redondeado u
ondulado,
superficie lisa, con aspecto
hmedo o semihumedo, de consistencia
blanda
con
elevacin
convexa
o
planoconvexa.

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Imagen

Imagen

4. Procedimiento de Aislamiento
(describir detalladamente la cantidad de materiales y los pasos a seguir)
Materiales/Reactivos/Medios de cultivo/ Equipo a utilizar
2 Cajas Petri
1 Asa de nicromo
1 Mechero Bunsen
1 Matraz Erlenmeyer
1 Charola de pesado
1 Esptula
Algodn
Autoclave
Agar EMB (Eosina y Azul de Metileno)
Agar MacConkey
Preparacin de medios de cultivo
Agar EMB
Pesar 2.88 g del medio y suspender el polvo en 80 mL de agua destilada. Reposar 5
minutos; mezclar, calentando a ebullicin durante 1 o 2 minutos hasta su disolucin.
Esterilizar en autoclave a no ms de 121C durante 15 minutos. Enfriar a 45C y distribuir
a las dos placas de Petri agitando suavemente el medio.
Agar MacConkey
Suspender 4 g del medio y suspender el polvo en 80 mL de agua destilada. Reposar 5
minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta
disolver. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 minutos. Enfriar y distribuir a las dos
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placas de Petri agitando suavemente el medio.

Pasos para el aislamiento del microorganismos (siembra, seleccin de la colonia
y resiembra):
Siembra
1. Flamear el asa bacteriolgica con ayuda de un mechero bunsen hasta que est
al rojo vivo (para eliminar cualquier microorganismo) y dejarla enfriar.
2. Tomar la muestra de suelo con el asa estril, abrir la caja de Petri con un ngulo
de 45 (mantenerla siempre cerca del mechero para evitar contaminacin) y
sembrarla en forma de estra (pasar el asa a travs de la superficie de la caja
con agar EMB, con movimientos en forma de s de tras hacia adelante) y
rastreando la siembra en la caja Petri. Como se muestra a continuacin. (Figura
1)

Figura 1. Forma de estriar para el

aislamiento.

3. Rotular la caja Petri y meter a incubar en la posicin en la que se encuentra a

37C por 24 horas.

Resiembra
1. Flamear el asa bacteriolgica en el mechero Bunsen, hasta que el asa quede de
color rojo (para eliminar cualquier microorganismo).
2. Dejar enfriar por pocos segundos y levantar la caja de Petri en un ngulo de
45.
3. Tomar la azada de la colonia seleccionada ms separada de la siembra en agar
EMB (cerca del rea estril del mechero) y hacer una serie de estras (Figura 2)
sobre la superficie de la placa que contiene agar EMB flamear el asa cada vez
que se vaya a realizar un estriado. Si es necesario estar girando la placa para
realizar las estras.
4. Rotular la caja de Petri e
incubarlas a 37 C por 24
horas

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Figura 2. Tcnica para el aislamiento por

estra.

5. Esquema del Perfil bioqumico (metablico )

para la identificacin del microorganismo seleccionado

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Gramm -

Gramm +

Movilidad
- +
Movilidad

Bacteria a identificar

RESULTADOS DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN

1. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO DE LA MUESTRA (SIEMBRA)
Citrato

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TSI

Rojo de metilo +
H2S +

2. MORFOLOGA COLONIAL OBSERVADA

Tipo de colonia 1: Descripcin

FOTO 1

Colonias color rosa claro, elevadas,

crecimiento por agrupamientos, de borde
ondulado o entero, superficie rugosa, con
aspecto hmedo y consistencia blanda.
Presencia de burbujeo de gas.

Tipo de colonia 2: Descripcin

FOTO 2

Colonias un poco ms aisladas, incoloras con

una reflexin de luz mate, de forma circular y
elevacin convexa, aspecto semihumedo,
borde entero u ondulado.

Tipo de colonia 3: Descripcin

FOTO 3

Colonias de color caf oscuro a simple vista,

puntiformes, con elevacin convexa,
superficie lisa y con borde entero u ondulado.

Colonia seleccionada para su identificacin

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Catalasa +

3. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO PURO ( RESIEMBRA)

FOTO 1: Colonia que se resembr Agar EMB
FOTO 2: Cultivo puro Agar bilis rojo
(agar eosina azul de metileno)
violeta

4. MORFOLOGIA COLONIAL OBSERVADA

FOTO 1
Descripcin

Colonias pequeas de color rosa

aunque a simple vista se ven de un
color caf oscuro, de forma circular,
su elevacin es convexa y tiene un
borde redondeado su aspecto es casi
seco, superficie lisa.
FOTO 2

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5. EVIDENCIA FOTOGRFICA DEL RESULTADO DEL PERFIL BIOQUMICO

Nombre de
la prueba

Medio de
cultivo
utilizado

Resultado
obtenido
(positivo/negativo
)

1.- Tincin
de Gram

N/A

Negativo

Evidencia fotogrfica

Fundamento de la prueba
Se utiliza para poder diferenciarse la morfologa celular bacteriana que radica en la
diferente estructura de la pared celular de ambos grupos: las bacterias Gram+ tienen
una gruesa capa de peptidoglicano en su pared, mientras que las bacterias Gram- tienen
una capa de peptidoglicano ms fina y una capa lipopolisacardica externa.
Tras la tincin con el primer colorante (Cristal violeta) se efecta un lavado con etanol
que arrastrar al colorante slo en las Gram (-), mientras que las Gram (+) y se tien de
color purpura. Las clulas Gram (-) se teirn despus con un colorante de contraste
(safranina) para que puedan observarse.
Considerndose gram positiva a las que se visualizan de color moradas y gram negativas
a las que se visualizan de color rosa o rojo.

2.Movilidad

Medio SIM

Negativo

Control
(sin
muestr

Muestr

Fundamento de la prueba
Las bacterias tienen movilidad por medio de sus flagelos, que se encuentran
principalmente entre los bacilos; sin embargo algunas formas de cocos son inmviles.
Las bacterias mviles pueden contener un solo flagelo o muchos; adems su localizacin
vara con su especie bacteriana y las condiciones de cultivo. A veces, las bacterias con
movilidad producen variantes no mviles que parecen ser estables y raramente se
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revierten en formas mviles. Los organismos no mviles carecen de flagelos, en el caso

del medio SIM (medio semislido) los microorganismos mviles pueden apreciarse por la
turbidez que producen alrededor de la puncin de siembra.

3.- Catalasa

N/A

Control
(sin

Negativo

Muestr

Fundamento de la prueba
La enzima catalasa descompone el perxido de hidrgeno (H 2O2) en agua y oxgeno bajo
la frmula 2 H2O2----2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto
txico del H2O2, que es un producto final del metabolismo aerobio de los azcares.
Permite diferenciar: A) gneros: Streptococcus (-) de Micrococcus (+) y/o Staphylococcus
(+); Bacillus (+) de Clostridium (-) y Corynebacterium (+) de Erysipelothrix (-), siendo
excepciones
en
este
ltimo
caso,
Corynebacteriumpyogenes
(-)
y
Corynebacteriumhaemolyticum
(-).
B)
especies:
Moraxellabovis
(variable)
y
Moraxellakingii (-) de otras especies de Moraxella (+).
Catala
sa

H2O2 +e- +H+

H2O2
H2O + OH

4.- Produccin de
citrato de permeasa

H2O+OH+

Agar
citrato

No hubo
crecimien
to
Contr
ol (sin
muest
ra)

Muest
ra

Blan
co

Fundamento de la prueba
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar
citrato como nica fuente de carbono, usan sales de amonio como nica fuente de
nitrgeno,
con
la
consiguiente
produccin
de
alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato
permeasa, a travs del ciclo del cido tricarboxlico. El desdoblamiento del citrato da
progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este ltimo, en presencia de un medio alcalino,
da origen a cidos orgnicos que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen
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carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo

de la produccin de citrato permeasa.
PRUEBA DEL CITRATO

Enzima

Citrato de sodio

Productos metablicos alcalinos ( carbonatos y bicarbonatos) TpH

Azul de bromotimol
Azul de bromotimol
(verde)
(azul)

pH 6.9

5.- Produccin de cido

sulfhdrico

Medio
SIM

pH 7.6

No hubo
crecimient
o

Control (sin muestra)

Muestra

Fundamento de la prueba
Algunos microorganismos tienen enzimas que desprenden el tomo de azufre de
aminocidos trptfano, el cual es luego reducido con hidrgeno (de los substratos), para
formar cido sulfhdrico las enzimas responsables de esta actividad son la cistena,
desulfhidrasa y la tiosulfato reductasa, en este proceso los microorganismos cumplen
con la actividad que puede catalogarse como fermentacin proteica. La actividad de las
bacterias sobre aminocidos que contienen azufre, frecuentemente produce liberacin
de sulfhdrico, lo cual se demuestra empleando sales de metales pesados como el hierro.
El sulfhdrico reacciona con tales metales dando una coloracin oscura al medio de
cultivo.
Para detectar la capacidad de producir sulfhdrico, utilizamos tambin el medio de Kliger,
el medio contiene tiosulfato de sodio como sustrato necesario para la produccin de
sulfhdrico, citrato de hierro y amonio como fuente de iones de Fe +3 que se combinan con
el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro que se observa como un precipitado en
el medio de color negro que es la produccin de cido sulfhdrico.

Bacteria en medio+ Na2 S2 O3 H 2 S gas

H 2 S+iones ferricos Fes( pp negroinsoluble)

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6.- Fermentacin de
lactosa

Agar TSI

No hubo
crecimien
to

Control (sin muestra)

Muestra

Fundamento de la prueba
Tambin conocida coma fermentacin heterolctica se denomina as porque su producto
final no es exclusivamente cido lctico.
El proceso tiene un rendimiento menor al de la fermentacin homolctica como se
desprende de la produccin de solo un mol de ATP por mol de glucosa fermentada.
La obtencin de piruvato en bacterias se logra mediante el catabolismo de la glucosa por
la ruta e las pentosas.
Su reaccin es:
Glucosa + ADP +Pi
Ac. Lctico + etanol + CO 2

+ ATP
Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidificara el medio en su superficie
volvindolo de color amarillo, mientras que si no lo es, la superficie del medio continuara
de color rojo.

7.- Fermentacin de
glucosa

Agar TSI

No hubo
crecimien
to Control sin muestra

Muestra

Fundamento de la prueba
Es una ruta metablica anaerbica que ocurre en el citosol de la clula, en la cual se
oxida parcialmente la glucosa para obtener energa y donde el producto de desecho es el
cido lctico.
En este tipo de fermentacin, la molcula de glucosa (de 6 tomos de carbono) se
degradan y forma dos molculas de cido lctico (de 3 tomos, cada una) como nico
producto final.
Su ecuacin global es:
Glucosa + 2ADPA + 2Pi
2 lactato + 2ATP + 2 H 2O
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Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificara el medio haciendo virar a

amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras que si no es fermentadora de
glucosa, el medio permanecer de color rojo.

8.- Fermentacin de
sacarosa

Agar TSI

No hubo
crecimien
Control sin muestra
to
Muestra

Fundamento de la prueba
Es una prueba usada para la fermentacin de sacarosa por parte de la bacteria
sumndole produccin de gas.
Superficie acida/profundidad acida (pico amarillo/ fondo amarillo) fermenta sacarosa, si
la superficie es alcalina/ profundidad alcalina (pico rojo/fondo rojo) no fermenta sacarosa.
La presencia de burbujas o ruptura del medio de cultivo produce gas (CO 2).
Sacarosa (C12H22O11)+H2O

9.- Rojo de metilo,

Fermentacin Acidomixta

Caldo RMVP

Glucosa(C6H12O6)+ Fructosa(C6H12O6)

Negativo

Muestra

Control (sin muestra)

Fundamento de la prueba
Determinar la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los
productos terminales cidos de la fermentacin de la glucosa y vencer la capacidad
amortiguadora del sistema. Las bacterias que utilizan la glucosa por la va cido mixta
generan como productos finales cido actico, cido frmico, cido succnico y cido
lctico, los cuales provoca un fuerte descenso en el pH del medio, La prueba Rojo de
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metilo es cuantitativa para la produccin de cido y requiere que los microorganismos

produzcan cidos fuertes a partir de la glucosa, de forma que el medio del pH descienda
a menos de 4.4. Esta distincin puede hacerse a travs del indicador Rojo de metilo que
presenta color amarillo por encima de un pH de 5.1 y solo presenta color rojo cuando el
pH desciende a 4.4.

10.- Indol

Medio SIM

No huboControl (sin muestra)

crecimien
to
Muestra

Fundamento de la prueba
La prueba del indol se genera mediante la desaminacin reductiva del triptfano y esta
reaccin es llevada a cabo por algunas bacterias que poseen las enzimas denominadas
en su conjunto triptofanasas. Para detectar la produccin de indol se utiliza el medio
Caldo triptfano y la lectura de la prueba se realiza con el reactivo de Kovacs (alcohol
isoamilo, p-dimetilaminobenzaldehdo y cido clorhdrico concentrado) con el que el
indol producido reacciona generando una coloracin rosa intensa.
Trp

Triptofanas
a Indol+Ac. Pirvico +NH3

IDENTIFICACIN DEL MICROORGANISMO AMBIENTAL

EN LA MATRIZ DE ESTUDIO: __SUELO__
1.- Nombre cientfico del o los microorganismo identificado de acuerdo a los
resultados
del perfil bioqumico planteado ( gnero y especie)
Los resultados de las pruebas bioqumicas realizadas a nuestro microorganismo
aislado corresponde al perfil bioqumico de la bacteria Klebsiella pneumoniae. Sin
embargo no es definitivo ya que en algunas pruebas bioqumicas como la fermentacin
de lactosa, glucosa y lactosa, en medio TSI, no se obtuvo crecimiento por lo que se puede
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concluir un resultado conciso de esta prueba. En base a los resultados favorables que
obtuvimos podemos decir que el microorganismo identificado es:
Klebsiella pneumoniae

2. Taxonoma del o los microorganismo identificados

Dominio: bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase :Gammaproteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Gnero: Klebsiella
Especie: K. pneumoniae
3. Caractersticas generales
Klebsiella es una bacteria gram-negativa, una bacteria en forma de varilla y no mviles
de familia Enterobacteriaceae. Es un anaerobio facultativo, y tiene una caracterstica de
ser tanto aerbica como anaerbica, dependiendo de la situacin, la asimilacin y la
fermentacin de la lactosa se puede observar en el agar MacConkey donde las colonias
son de color rosado y en el medio Kliger o TSI donde son cido/cido, es decir
fermentador de la lactosa ms produccin de gas; y en la fermentacin acetnica
o prueba de Voges Proskauer son positivos. Por ltimo, sus condiciones ptimas de cultivo
son en agar nutritivo a 37 C, pH de 7.0, presin osmtica de 1 atm, esta bacteria se
encuentra de forma natural en el suelo, el agua y las verduras (las coles, lechuga,
vegetales de hojas verdes, etc.). Es la especie de mayor relevancia clnica, desempean
un importante papel como causa de las enfermedades infecciosas oportunistas . El
gnero fue llamado as en honor a Edwin Klebs, un microbilogo alemn de finales del
siglo XIX. El bacilo ahora conocido como Klebsiella pneumoniae tambin fue descrito
por Karl Friedlnder, y durante muchos aos se conoci como el bacilo de Friedlnder.
4. Ciclo(s) biogeoqumicos en el(los) que intervienen
Ciclo biogeoqumico del nitrgeno.

5. La funcin que juegan en la transformacin de la materia orgnica a travs

de los ciclos biogeoqumicos
El papel que juegan las bacterias es en la fijacin del nitrgeno molecular a amoniaco.
Esta incorporacin de nitrgeno a la biosfera ocurre gracias a la existencia en las
bacterias fijadoras de la enzima nitrogenasa, capaz de realizar en las condiciones
ambientales normales, una reaccin qumica que requiere ms de 800 de temperatura y
bastantes atmsferas de presin.
Este proceso microbiano es llevado a cabo por organismos procariticos en vida libre o en
simbiosis, esto ltimo si ocurre en asociacin mutualista con las plantas. Hay una gran
representacin de especies microbianas portadoras de esta caracterstica pertenecientes
a muy diferentes grupos de bacterias.

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Se trata de un proceso altamente consumidor de energa. El triple enlace que une los dos
tomos de nitrgeno es duro de romper. El trabajo es llevado a cabo por la enzima
nitrogenasa con el consumo de 16 molculas de ATP por N 2 reducido, segn la ecuacin:
N2 + 16ATP + 8e- + 8H+ = 2NH3 + 8H2 + 16ADP + 16Pi
La fijacin de nitrgeno es un proceso altamente consumidor de energa. La reduccin y
la provisin de los electrones necesarios requieren el consumo de bastantes molculas de
ATP, hasta 24 por N2, por lo que la eficiencia del proceso es bastante baja, como se
manifiesta en el caso de los fijadores libres.
La reduccin del nitrgeno molecular a amoniaco es catalizada por un complejo
enzimtico conocido como nitrogenasa y el nitrgeno molecular es el principal depsito
de nitrgeno para los organismos vivos.
La fijacin biolgica del nitrgeno, es llevada a cabo por bacterias capaces de tomar
nitrgeno y combinarlo por medio de enzimas. Algunas de estas bacterias viven libres en
el suelo, y otras forman simbiosis con algunos tipos de plantas.
Estos microorganismos aerbicos protegen la nitrogenasa mediante: la remocin de
oxgeno por el proceso de respiracin; ej. En Azotobacter y Klebsiella, se observan
cadenas de transporte abreviadas que rinden menos ATP por molcula de sustrato
oxidado, generndose un aumento en el consumo de oxgeno por molcula de sustrato
oxidado; o mediante asociacin sinergstica con bacterias heterotrficas aerobias, como
es el caso de la relacin entre Anabaena y Pseudomonas aeruginosa.

6. Conclusin parcial sobre las interacciones bacterianas en la matriz

estudiada y la importancia de la microbiologa en el rea ambiental
Al realizar esta prctica fue posible adquirir conocimientos tales como: preparacin
de material y medios de cultivo, toma de muestra, diferentes tcnicas de siembra y
resiembra y tambin fue posible la realizacin de diferentes pruebas bioqumicas como
catalasa, indol, movilidad, fermentacin de lactosa, glucosa y sacarosa, entre otras, las
cueles sirvieron para conocer algunas bacterias que se encuentran en el medio ambiente
ya que las pruebas bioqumicas son un conjunto de reacciones que nos permiten
determinar la actividad metablica de la bacteria a partir de un sustrato (presente el
medio de cultivo) y que la bacteria al crecer puede transformarlo o no, entonces esos
cambios que produce la bacteria nos permite determinar si la prueba es positiva o
negativa, para ello es necesario partir de un cultivo puro previamente obtenido del
aislamiento.
Tambin entendimos la importancia que tiene la buena ejecucin de las pruebas
bioqumicas ya que para ello es necesario realizar todo con pleno consentimiento y con
los cuidados, precauciones y factores necesarios. As como la importancia que tienen
para identificar microorganismos debido al su metabolismo que muestran es los
resultados de cada prueba.
La aplicacin de la microbiologa ambiental nos ayud identificar microorganismos
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existentes en las matrices ambientales (especficamente suelo), a comprender la

importancia, intervencin y funcin que tienen los microorganismos identificados en
diversos mbitos por ejemplo en los ciclos biogeoqumicos, en la transformacin de los
componentes orgnicos e inorgnicos, incluyendo los contaminantes, etc. Adems los
daos y beneficios que pueden causar las bacterias al ambiente, y como a partir de ello
se pueden elegir diferentes tipos de microorganismos de acuerdo a su metabolismo para
realizar o aplicar procesos de biorremediacin o algn otro proceso con la finalidad de
mejorar la situacin ambiental.
Con la prctica reafirmamos nuestros conocimientos obtenidos en clase referente a
los microorganismos presentes en el suelo y a preciar de forma real sus caractersticas
como sus tipos de respiracin, fermentacin, etc.
Por lo tanto podemos concluir que en el suelo existen relaciones entre una gran
variedad de microorganismos, siendo los microorganismos los componentes ms
importantes del suelo, ya que constituyen la parte viva de este y son los responsables de
la dinmica de transformacin y desarrollo.

Pudimos darnos cuenta que la capacidad de multiplicacin les permite crear

poblaciones muy grandes en un tiempo muy corto, colonizando rpidamente los sustratos
a degradar, como pudimos observar en cada prueba bioqumica realizada en el
laboratorio microbiolgico.
Entendimos que la interaccin bacteriana puede generar que los grupos bacterianos
que actan primero sobre los sustratos disponibles sean dominantes hasta que termina
su accin y luego dan oportunidad a que otros grupos crezcan en el residuo del
metabolismo de los primeros.

M I C R O B I O LO G A A M B I E N TA L U T L
ASESORA:

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