Facultad de Ciencias Naturales y Matemticas

UNIDAD DE BIOLOGA
Biologa Celular y Molecular

INTRODUCCIN
El ser humano, desde sus comienzos, ha construido mltiples instrumentos
que le han permitido acceder donde los sentidos no podan penetrar. De este
modo, el microscopio le abri a la humanidad las puertas de lo infinitamente
pequeo, entre ellos, la clula que se constituye como la unidad morfolgica
y funcional de todo ser vivo.
El microscopio es un instrumento ptico que permite observar seres o
estructuras que no se pueden percibir a simple vista. Existen diversas clases
de microscopios pero su objetivo principal es lograr la observacin de
pequeos detalles de una muestra dada mediante la formacin de imgenes
pticas aumentadas a travs de lentes convergentes.
Para el estudiante de ingeniera biomdica, el microscopio es un instrumento
de uso cotidiano en los laboratorios de diagnstico e investigacin ya que
permite estudiar los cambios celulares que la enfermedad produce; y
contribuye de manera fundamental al diagnstico clnico.
Se realiza el siguiente trabajo, con el fin de comprender los principios bsicos
del funcionamiento del microscopio electrnico puesto que permite alcanzar
mayores ampliaciones que el microscopio de luz debido a que la longitud de
onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones simples. De
igual manera, reconocer las principales tcnicas histolgicas mediante el
anlisis y la observacin de distintas muestras de clulas animales y
vegetales, eucariotas y procariotas.

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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
a. Cules son las principales tcnicas histolgicas?
Una tcnica histolgica es el conjunto de operaciones a que se
somete una materia organizada (tejido biolgico), la mayora de las
tcnicas van encaminadas a preparar el tejido para su observacin
con el microscopio, bien sea ste ptico o electrnico; debido a que la
estructura de los tejidos est basada en la organizacin de los tipos de
clulas que los componen y, salvo contadas ocasiones, las
caractersticas morfolgicas de las clulas slo se pueden observar
con estos aparatos.
Existen procedimientos rpidos y simples para la observacin de
tejidos y clulas vivas que reciben el nombre de vitales. Por ejemplo,
la observacin del flujo sanguneo en capilares del sistema
circulatorio. Otra forma de observar clulas o tejidos vivos es mediante
las tcnicas histolgicas supravitales, en los que las clulas y los
tejidos se mantienen o se hacen crecer fuera del organismo, como es
el caso de los cultivos de clulas y de tejidos.
Las tcnicas histolgicas postvitales son aquellas en las que las
clulas

mueren

durante

el

proceso,

pero

las

caractersticas

morfolgicas y moleculares que posean en estado vivo se conservan

mejor o peor dependiendo del tipo de tcnica.
b. Establezca diferencias y semejanzas entre el microscopio de luz y los
diferentes microscopios electrnicos.
Los diferentes tipos de microscopios permiten varios niveles de
magnificacin y pueden clasificarse de acuerdo a la manera de crear
la imagen de la muestra. Los microscopios de luz y de electrones son
los dos tipos principales de microscopios que utilizan luz y rayos de
electrones, respectivamente.
A partir del siglo XVII, el microscopio de luz ha sido una importante
herramienta cientfica para el estudio de bacterias, evidencias
forenses, y distintos objetos que son demasiado pequeos para la
observacin a travs del ojo humano. En el siglo XX, la ciencia y la

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tecnologa crearon el microscopio electrnico, que brind mayor

efectividad y alcance.
El microscopio de luz recibe este nombre ya que permite el paso de
luz alterada a travs de un sistema de lentes que produce un campo
brillante donde se puede observar objetos pequeos. Siendo objeto de
estudio y observacin de microorganismos como bacterias, hongos,
algas, parsitos, etc
El microscopio electrnico es aquel que utiliza electrones en lugar de
fotones o luz visible para formar imgenes de objetos diminutos. Los
microscopios electrnicos permiten alcanzar mayores ampliaciones
que los microscopios pticos.
c. Definir: Apertura numrica y Nitidez.
En ptica la apertura numrica es un nmero adimensional que
caracteriza el rango de los ngulos para los cuales el sistema acepta
luz. Recprocamente, tambin est relacionada con el ngulo de salida
del sistema.
Sin embargo, la definicin exacta del trmino vara segn el rea de la
ptica puesto que brinda una indicacin de la capacidad de coleccin
de luz y poder de resolucin (a una distancia fija) de un objetivo.
Por otra parte, la nitidez es reconocida como la cualidad de imagen
que se distingue bien, la cual no es confuso.

RESULTADOS
1. Determinar el rea del campo visual
a. En 4X
Calcular cuntos milmetros tiene
observado,

luego

determine

el

corresponde a la mitad del dimetro

el

radio,

dimetro
recuerde

del
que

crculo
ste

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A= r 2
Al observar la tira del papel milimetrado a travs del ocular, se
realiza el respectivo anlisis arrojando los siguientes resultados
Diametro :5 mm Radio r :2,5 mm
A=( 2,5 mm )2

A=

25
19,6349mm 2
4

Realizando la conversin a micrmetros y nanmetros cuadrados

A=19,6349 mm 2 19634900 m 2 1,96 1013 nm
Cuando se utiliza los objetivos 10X y 40X, se observa que la
determinacin se hace difcil porque su ojo no puede discriminar
distancias tan pequeas, lo que hace necesario medir en campo
visual de 10X y 40X, utilizando la relacin existente entre los
objetivos de un microscopio.
b. En 10X
Calcular
cuntos
milmetros

La relacin del campo visual entre dos objetivos se obtiene

dividiendo el aumento del objetivo mayor entre el objetivo de
menor aumento.

tiene el dimetro del crculo observado, luego determine el radio,

recuerde que ste corresponde a la mitad del dimetro.
Diametro :5 mm Radio r :2,5 mm

A= r 2
Al observar la tira del papel milimetrado a travs del ocular, se
realiza el respectivo anlisis arrojando los siguientes resultados

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5 mm 5 mm
=
=2mm
10 X
2,5
4X
Diametro :2 mm Radio r :1 mm

A=( 1 mm )2
A= mm2 3,141592 mm2
Realizando la conversin a micrmetros y nanmetros cuadrados
2

12

A=3,141592 mm 3141592 m 3,14 10 nm

c. En 40X
Calcular cuntos
observado,
corresponde

luego
a

milmetros

tiene

determine

el

la

mitad

el

dimetro

radio,
del

recuerde

del
que

crculo
ste

dimetro.

Diametro :2 mm Radio r :1 mm

A= r 2
Al observar la tira del papel milimetrado a travs del ocular, se
realiza el respectivo anlisis arrojando los siguientes resultados
2 mm 5 mm
=
=1,25 mm
40 X
4
10 X
Diametro :1,25 mm Radio r :0,625 mm
A=( 0,625 mm )2

A=

25
mm2 1,22718463 mm2
64

Realizando la conversin a micrmetros y nanmetros cuadrados

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A=1,22718463 mm2 1227184,63 m 2 1,23 1012 nm

d. En 100X
Calcular cuntos
observado,
corresponde

luego
a

milmetros

tiene

determine

el

la

mitad

el

dimetro

radio,
del

del

recuerde

crculo

que

ste

dimetro.

Diametro :1,25 mm Radio r :0,625 mm

A= r 2
Al observar la tira del papel milimetrado a travs del ocular, se
realiza el respectivo anlisis arrojando los siguientes resultados
1,25 mm 1,25 mm
=
=0,5 mm
100 X
2,5
40 X
Diametro :0,5 mm Radio r :0,25 mm

A=( 0,25 mm )2

A=

1
mm2 0,1963495408mm 2
16

Realizando la conversin a micrmetros y nanmetros cuadrados

A=0,1963495408mm 2 196349,54 m 2 196349540800 nm
2. Imagen obtenida en el microscopio de luz
a. Observando el montaje en el microscopio usando los objetivos de
4X y 10X; analizar la letra H, luego la A, la E y finalmente la F
Al realizar el respectivo montaje, se observan las siguientes
caractersticas
- La letra H mantiene su forma, puesto que es una letra simtrica

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La letra A se encuentra invertida, puesto que se observa

La letra E se encuentra invertida, puesto que se observa

La letra F de igual manera se encuentra invertida.

De esta forma se pudo analizar que se genera una imagen

especular mediante la reflexin de la luz en una superficie
especular, donde los rayos incidentes se reflejan con un ngulo
igual al de incidencia (ambos tomados con respecto a la
perpendicular al plano en ese punto).
3. Observacin de hojas de elodea
La hoja de elodea es un gnero de planta acutica que se caracteriza
por el color verde intenso. Las clulas de las hojas de Elodea son
conocidas

por

su

exhibicin

corrientes citoplasmticas.

vvida

de

la ciclosis,

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Fig1. Histologa hoja de Elodea

(Tomado de: https://www.google.com.co/search?q=histologia+de+hoja+de+elodea)

En la Fig 1, se puede observar la presencia de cloroplastos en mayor

cantidad, y de esta forma se reconocen debido a su notable color
verde.
De igual manera, en el transcurso de la practica se pudo observar el
movimiento giratorio que tenian estos organelos de la clula y se debe
a que facilita el intercambio de sustancias intracelularmente y el
exterior. Este movimiento vara fundamentalmente dependiendo del
estado de la clula o por un agente externo que lo estimula como
podria ser la luz aplicada, relacionando con la distribucin de los
cloroplastos; a este proceso de estimulacin y respuesta se le conoce
como la ciclosis, proceso que es comn en clulas vegetales
eucariotas como la hoja de elodea.
4. Utilizacin del objetivo 100X
Para realizar el anlisis claro acerca del procedimiento, por sugerencia
de las docentes se realizan conocimientos adicionales como los tipos
de leucocitos y las diferentes formas estructurales del msculo.
Los leucocitos o glubulos blancos ayudan a combatir infecciones las
cuales actuan en respuesta inmunolgica. Existen cinco grandes tipos
de estos globulos: basfilos, eosinfilos, linfocitos (clulas T y clulas
B), monocitos, y neutrfilos.

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Fig2. Tipos de leucocitos

(Tomado de: https://www.google.com.co/search?q=tipos+de+leucocitos)

Seguidamente, bajo la elaboracin de montaje y gua de las docentes

se realiz el anlisis de clulas sanguneas como es el caso de
glbulos rojos, leucocitos y plaquetas, sin embargo se pudo concluir
esta es una tcnica postvital puesto que las clulas mueren durante el
proceso, pero las caractersticas morfolgicas y moleculares que
posean en estado vivo se conservan.
Finalmente, se realizo la histologa d el tejido muscular el cual es
responsable del movimiento de los organismos y de sus rganos. Est
formado por unas clulas denominada miocitos o fibras musculares que
tienen la capacidad de contraerse y dar respuesta inmediata a estimulos
generados por el exterior o el interior. Los miocitos o clulas musculares
suelen disponer en paralelo formando haces o lminas. La capacidad
contrctil de estas clulas depende de la asociacin entre microfilamentos y
de las proteinas motoras presentes en su citoesqueleto.

El tejido muscular se divide en tres tipos: esqueleticos, lisos y

cardiaco. Las clulas del msculo esqueltico fue la muestra
observada en el transcurso de la prctica caracterizandose por poseer
clulas muy largas y estriadas, de ah que tambien se le llame
msculo esqueltico estriado. Sin embargo, las celulas del msculo
cardiaco poseen tambien estras, pero se dice que es semiestrado.
El msculo esqueltico estriado se denomina tambien voluntario,
siendo capaz de producir movimientos conscientes, es decir,
conformado por numerosas fibras nerviosas que parten del sistema
nervioso central. A continuacin se puede observar la histologa de las
clulas del tejido muscular esqueltico estriado.

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Fig3. Histologa tejido muscular esqueltico

(Tomado de: http://mmegias.webs.uvigo.es/guiada_a_muscular.php)

INFOGRAFA
-

http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/1-introduccion.php
http://www.uam.es/departamentos/medicina/patologia/Tecnicas.htm
AlbertsB, Brays D, Hopkin K, Jhonson A, Lewis J, Raff M, Roberts K,
Walter P, Lpez G. Introduccin a la Biologa Celular. Editorial mdica
panamericana, 2011.

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Biologa Celular y Molecular

Gartner L, Hiatt J. Histologa. Editorial McGraw Hill. Interamericana,

2002.
http://mmegias.webs.uvigo.es/7-micro-virtual/flash/inicio-flash-

sangre.html
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003643.htm
http://mmegias.webs.uvigo.es/guiada_a_muscular.php
https://es.wikipedia.org/wiki/Tejido_muscular

MANEJO DE MICROSCOPIO PTICO

LAURA MARGARITA BAUTISTA AVELLANEDA

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COLEGIO MAYOR NUESTRA SEORA DEL ROSARIO

ESCUELA COLOMBIANA DE INGENIERA JULIO GARAVITO
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMTICAS
UNIDAD DE BIOLOGA
BOGOT DC.
2015
TTULO
Gua prctica No.1
Manejo de Microscopio ptico
OBJETIVOS
Identificar los componentes del microscopio de luz.
Conocer los principios generales de su funcionamiento o
cuidado.
Determinar el rea del campo visual mediante la relacin
existente entre los objetivos de un microscopio, debido a que la
determinacin del dimetro se hace difcil puesto que el ojo
humano no puede discriminar distancias tan pequeas.
Analizar las caractersticas de la imagen obtenida en el
microscopio de luz, planteando la hiptesis de obtener como
resultado imgenes especulares.
Aplicar las principales tcnicas de histologa como es el caso
de la tcnica vital, supravital y postvital. De esta manera, poder
reconocer las caractersticas y diferencias principales entre las
diferentes tcnicas.

MATERIALES
Portaobjetos
Laminilla o cubreobjetos
Papel milimetrado
Hoja de papel con la palabra CHAPINERO F
Microscopio electrnico
Hoja de elodea
Glbulos rojos, leucocitos y plaquetas
Clulas musculares esquelticas (miocitos)

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Muestra de agua de charco

CONCLUSIONES
1. Los avances tecnolgicos y cientficos han brindado grandes
oportunidades de conocimiento, que le han permitido a los seres
humanos apreciar el mundo que los rodea incluso aquello que no se
puede observar a simple vista como es el caso de organismos
microscpicos.
2. El desarrollo constante de la ciencia ha permitido mejorar la calidad de
vida de los seres humanos, puesto que desde la invencin del
microscopio ptico se ha logrado el diagnstico y tratamiento de los
cambios celulares que las enfermedades producen, y de esta manera
contribuir considerablemente a la posibilidad de una larga duracin de
vida para los seres humanos.
3. Los microscopios pticos poseen lentes convergentes los cuales
tienen la particularidad de producir imgenes reales e invertidas de
menor tamao. Sin embargo, no es el caso de todos los microscopios
puesto que desde un comienzo se plante la idea de un microscopio
simple que utiliza una sola lente para ampliar las imgenes de los
objetos observados, siendo ste el microscopio ms bsico. El
ejemplo ms clsico es la lupa.
4. Las tcnicas histolgicas van encaminadas a la preparacin de tejidos
los cuales sern estudiados y analizados mediante el microscopio.
Diferentes tcnicas de histologa como es el caso de las tcnicas
vitales, supravitales y postvitales han permitido la observacin
detallada de clulas fundamentales y principales para la vida.
5. Mediante la experimentacin con el microscopio ptico se pudo

concluir que este permite alcanzar mayores ampliaciones que el

microscopio de luz, debido a que la longitud de onda de los electrones
es mucho menor que la de los fotones simples.