Volume
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
Biologia Celular I
Biologia Celular I
Volume 2 - Mdulo 3
Apoio:
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
Material Didtico
Departamento de Produo
ELABORAO DE CONTEDO
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
COORDENAO DE DESENVOLVIMENTO
INSTRUCIONAL
EDITORA
PROGRAMAO VISUAL
Tereza Queiroz
COORDENAO EDITORIAL
Jane Castellani
DESENVOLVIMENTO INSTRUCIONAL
E REVISO
REVISO TIPOGRFICA
COORDENAO DE
PRODUO
Dbora Barreiros
Jorge Moura
REVISO TCNICA
COORDENAO DE
ILUSTRAO
Eduardo Bordoni
ILUSTRAO
Equipe CEDERJ
CAPA
Alexandre d`Oliveira
PRODUO GRFICA
Osias Ferraz
Patricia Seabra
Marta Abdala
Copyright 2005, Fundao Cecierj / Consrcio Cederj
Nenhuma parte deste material poder ser reproduzida, transmitida e gravada, por qualquer meio
eletrnico, mecnico, por fotocpia e outros, sem a prvia autorizao, por escrito, da Fundao.
A885b
Attias, Mrcia
Biologia celular 1: v.2. / Mrcia Attias Rio de Janeiro:
Fundao CECIERJ, 2010.
130p.; 19 x 26,5 cm.
ISBN: 85-89200-63-9
1. Biologia celular. 2. Membrana celular. 3. Organelas celulares.
4. Endocitose. I.Silva, Narcisa Cunha e. II. Ttulo.
2010/1
CDD: 571.6
Referncias Bibliogrficas e catalogao na fonte, de acordo com as normas da ABNT.
Governador
Srgio Cabral Filho
Universidades Consorciadas
UENF - UNIVERSIDADE ESTADUAL DO
NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO
Reitor: Almy Junior Cordeiro de Carvalho
Biologia Celular I
SUMRIO
Volume 2 - Mdulo 3
19
Gabarito _______________________________________121
objetivos
13
AULA
Receptores de membrana
e princpios de
sinalizao celular I
8 CEDERJ
possuem receptores para aquele sinal, podemos classificar os tipos de sinalizao como:
a) Parcrina a molcula sinalizadora tem vida curta e os receptores esto nas clulas
prximas (Figura 13.2.a). Nesse caso, a molcula sinalizadora chamada de mediador local.
b) Autcrina a molcula sinalizadora tem vida curta e o receptor est na prpria clula que
emitiu o sinal. Para voc entender melhor, compare a sinalizao autcrina com algumas coisas
que ns fazemos, como colocar um bilhete para ns mesmos a fim de no esquecer de fazer alguma
coisa, ou anotar um compromisso na agenda, ou colocar o despertador para tocar na hora que queremos
acordar. Todos esses exemplos so sinais que colocamos e ns prprios percebemos; somos, assim,
tanto emissores como alvos dos mesmos sinais, que so, portanto, autcrinos (Figura 13.2.b).
c) Dependente de contato a molcula sinalizadora no secretada, ficando exposta na
superfcie da clula sinalizadora, e a clula-alvo precisa fazer contato para que o receptor possa se
ligar (Figura 13.1).
d) Endcrina a molcula sinalizadora tem vida longa, lanada na corrente sangunea
e vai atingir clulas-alvo em locais distantes. Nesse caso, a molcula sinalizadora chamada de
hormnio (Figura 13.2.d).
e) Neuronal um caso
especial de sinalizao entre clulas
que poderia ser classificado como
parcrino ou endcrino. Nessa
situao, a molcula sinalizadora,
chamada neurotransmissor, viaja
grandes distncias, mas no no
sangue ou no meio extracelular
e sim dentro de prolongamentos
celulares dos neurnios, os
axnios, indo atingir a clulaalvo longe do corpo celular do
neurnio que emitiu o sinal,
mas prximo do axnio onde
a molcula sinalizadora foi
secretada (Figura 13.2.c).
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13 MDULO 3
De acordo com a meia vida (veja o boxe) da molcula sinalizadora e de quais clulas
AULA
Tipos de sinalizao
Sa
Hormnios
ng
ue
Vrias clulas-al vo
Vrias clulas-alvo
10 CEDERJ
13 MDULO 3
AULA
Acetilcolina
Contrao
Diminuio
de freqncia
Clula secretria
Secreo
CEDERJ 11
Morte celular
C
B
Sobrevivncia
D
C
B
Proliferao
A
F
C
B
Diferenciao
A
Tipos de receptores
Qual o tipo de receptor mais adequado para receber um determinado sinal? Isso depende
de que tipo de molcula esse sinal for (Figura 13.6):
a) se a molcula sinalizadora for pequena e/ou hidrofbica o suficiente para atravessar a
membrana, o receptor deve ser intracelular;
b) se a molcula sinalizadora no puder atravessar a membrana, o receptor ter de estar
obrigatoriamente na membrana plasmtica, exposto na superfcie celular.
Essas caractersticas de afinidade, isto , permeabilidade entre as molculas sinalizadoras e as
membranas celulares, mais especificamente a bicamada lipdica, j foram abordadas na Aula 8.
Figura 13.6: Os receptores para molculas hidroflicas ficam voltados para o meio extracelular (a) enquanto os
receptores para sinalizadores pequenos e hidrofbicos so intracelulares (b).
12 CEDERJ
13 MDULO 3
AULA
CEDERJ 13
Claro que essa resposta demora muito mais para aparecer do que aquela que depende
apenas da ativao de uma molcula que j estava pronta. Mas tambm permanece mais tempo,
j que o gen ativado produzir uma protena que no ser degradada de imediato. Alguns
dos hormnios mais conhecidos agem assim, como por exemplo os hormnios esterides
(testosterona, estrognio, cortisol e outros) e os tireoidianos.
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13 MDULO 3
AULA
CEDERJ 15
Tamanho documento?
Existem protenas G de vrios tamanhos,
podendo ter apenas uma cadeia protica
(monomricas, como as da superfamlia Ras
que voc vai conhecer na prxima aula),
duas (heterodimricas, como a tubulina que
forma os microtbulos, Aula 23) ou trs
(heterotrimricas, que voc ver na aula
seguinte a essa, funcionando em sinalizao
celular). Das trs subunidades da protena G,
a a que liga e hidrolisa GTP, enquanto a
dupla responsvel pelo ancoramento ao
folheto citoplasmtico da membrana.
As protenas G, ao serem ativadas, podem
Figura 13.9: Quando chega um sinal, a protena G solta
o GDP que estava ligado a ela. Um GTP, abundante no
citoplasma das clulas, logo o substitui, ativando a
protena G, que passa o sinal adiante. Logo aps, a
protena G hidrolisa o GTP e libera o Pi, voltando ao
estado de repouso.
Enzima
inativa
Ligante
(Figura 13.10).
Enzima
ativa
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13 MDULO 3
AULA
RESUMO
Receptores para ligantes hidrofbicos ou muito pequenos esto no citoplasma
ou no ncleo.
Ligantes que entram na clula podem ter vida muito curta e provocar
respostas rpidas, como o xido ntrico, ou ter vida longa e provocar resposta
lenta e duradoura, como os hormnios esterides.
Receptores de ligantes hidroflicos esto na membrana plasmtica. Ligantes
hidroflicos no entram na clula, mas passam a informao para o ambiente
intracelular.
Receptores de ligantes hidroflicos podem ser de trs tipos: canal, associados
protena G ou enzimticos.
Receptores mudam de conformao com a chegada do ligante.
EXERCCIOS
1. Conceitue:
a. Receptor:
b. Ligante:
c. Molcula sinalizadora:
d. Clula-alvo:
2. Compare e diferencie sinalizao parcrina de sinalizao autcrina.
3. Compare e diferencie sinalizao endcrina de sinalizao neuronal.
CEDERJ 17
18 CEDERJ
objetivos
14
AULA
Receptores de
membrana e princpios
de sinalizao celular II
Adenilciclase
Volte Figura 13.10. Note que as protenas ali esquematizadas
parecem estar brincando de telefone sem fio, aquela brincadeira em
que o primeiro da fila diz uma frase para o segundo, que repete para
o terceiro e assim por diante at o ltimo da fila repetir a frase inicial.
Na brincadeira, o engraado a distoro da mensagem inicial; j na
vida celular, a mensagem deve ser encaminhada sem erros para que
o resultado final seja o esperado. A adenilciclase, uma vez ativada
por protena G, hidrolisa ATP de um modo especial, retirando dois
fosfatos de uma vez s (Figura 14.1). O que sobra, o AMP (adenosina
monofosfato), torna-se uma molcula cclica, sendo chamado AMP
cclico (AMPc).
20
CEDERJ
muito baixas no citoplasma das clulas. Assim, quando uma mensagem chega e reconhecida
14 MDULO 3
por um receptor que ativa protena G, que por sua vez ativa adenilciclase, que produz AMPc,
AULA
a elevao sbita da concentrao desse mensageiro prontamente percebida pela clula. Muitas
enzimas citoplasmticas so ativadas por AMPc e reagem a esse pico de concentrao. Para esse
mecanismo funcionar bem, preciso que a concentrao de AMPc baixe to rpido quanto
subiu, assim, a clula poder perceber o prximo sinal. A enzima responsvel por isso a AMPcfosfodiesterase, que faz com que a molcula fique linear (passando a se chamar AMP-5monofosfato),
perdendo a funo. Mas ela no vira lixo, no! Pode mais tarde receber outros fosfatos, voltando
a ser o precioso ATP.
D uma paradinha!
Esse negcio est ficando confuso, no? Tudo aconteceu por causa de um ligante que nem mesmo
entrou na clula! Vamos resumir a seqncia de eventos para que fique mais claro:
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CEDERJ
est dizendo, essa enzima hidrolisa um fosfolipdio. Uma fosfolipase classificada como A, C ou
D de acordo com o local onde ela corta o fosfolipdio. A fosfolipase C corta entre o fosfato e o
glicerol (para lembrar a estrutura do fosfolipdio, veja a Aula 7). No qualquer fosfolipdio que pode
ser clivado pela fosfolipase C. O alvo da fosfolipase C ativada por protena G um fosfolipdio
da face interna da membrana plasmtica, o fosfatidilinositol 4,5 bifosfato, mais conhecido pela
sigla PIP2. A clivagem gera duas molculas: 1) o diacilglicerol, tambm conhecido como DAG,
um glicerol com duas caudas de cido graxo, que permanece na membrana; e 2) o inositol
trifosfato (IP3), que liberado para o citoplasma (Figura 14.3).
23
14 MDULO 3
Outra enzima freqentemente ativada por protena G a fosfolipase C. Como seu nome
AULA
24
CEDERJ
14 MDULO 3
AULA
CEDERJ
25
Protenas-alvo
Receptores enzimticos
Um receptor desse tipo passa a informao recebida por meio de
atividade enzimtica, e para faz-lo tem de ter dois domnios especiais:
o que reconhece o ligante, exposto na superfcie da clula, e o stio
cataltico, voltado para o citoplasma (Figura 14.6). Quando o ligante
reconhecido pela parte exposta do receptor, a mudana conformacional
resultante torna ativo o stio cataltico intracelular. como o ferro de
passar: liga em cima e esquenta embaixo...
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14 MDULO 3
AULA
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27
28
CEDERJ
14 MDULO 3
AULA
Amplificao de sinais
Pensando bem, qual a vantagem de existirem cascatas de sinalizao intracelular? Elas
parecem to complicadas, com tantos componentes, tantas passagens de informao, que devem
ser altamente suscetveis a erro! Mas se esse mecanismo se manteve evolutivamente conservado,
estando presente tanto
em leveduras como no
homem,
deve
haver
CEDERJ
29
Integrao de sinais
Como voc j deve ter imaginado, freqentemente as cascatas de sinalizao iniciadas por
diferentes receptores se cruzam na clula, isto , tm componentes em comum. Dois exemplos
bem simples esto esquematizados na Figura 14.10. preciso que estejam presentes os dois
ligantes, A e B, reconhecidos por seus respectivos receptores, para que a sinalizao possa
prosseguir numa via comum.
30
CEDERJ
14 MDULO 3
AULA
RESUMO
A ativao da protena G ativa por sua vez adenilciclase ou fosfolipase C.
Ambas geram mensageiros secundrios: AMPc, no caso da adenilciclase, e
IP3, que libera estoques intracelulares de clcio, no caso da fosfolipase C.
Ambos, clcio e AMPc, so mensageiros secundrios ou mediadores
intracelulares.
Mensageiros secundrios ou mediadores intracelulares so sempre molculas
muito pequenas e presentes normalmente em baixssima concentrao, sendo
degradados ou recolhidos imediatamente aps o pico de sinalizao.
Receptores enzimticos tm o stio de reconhecimento voltado para o meio
extracelular e o stio cataltico voltado para o citoplasma. Na sua maioria so
tirosina quinases que se fosforilam reciprocamente e depois atraem muitas
outras protenas que passam a informao adiante.
Depois de receber o ligante, receptores disparam uma cascata de sinalizao
celular que amplifica o sinal e acaba por modificar o comportamento celular
(Figura 14.11).
EXERCCIOS
1. Onde esto os receptores de ligantes pequenos e/ou hidrofbicos?
2. E os de ligantes hidroflicos?
3. Quais os tipos de receptores de superfcie?
4. Cite exemplos de cada um desses receptores.
5. O que uma protena quinase?
6. Como age a adenilciclase? E a fosfolipase C?
7. O que so mensageiros secundrios?
8. Como regulada a concentrao citoplasmtica de clcio?
9. O que uma cascata de sinalizao?
10. Qual a vantagem da sinalizao em cascata?
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31
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CEDERJ
objetivos
15
AULA
Introduo s organelas
celulares
34 CEDERJ
15 MDULO 3
bactrias e, em geral, parasitam outras clulas. As bactrias esto presentes em praticamente todos
AULA
CEDERJ 35
Organizar uma clula como arrumar uma mala ou dobrar um pra-quedas: se as peas estiverem
bem dobradas, vai caber muito mais coisas na sua mala. Quanto ao pra-quedas, ele pode ser comparado
a uma clula em que todas as membranas foram unificadas numa s superfcie. Enquanto estiver dobrado,
ser fcil transport-lo; depois de aberto, aquela enorme superfcie de tecido ser bem difcil de levar.
As figuras A e B ocupam o mesmo volume, mas a B possui uma rea de membrana bem
maior. Se fosse esticada ocuparia o volume da figura C.
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dobr-lo e t-lo acomodado numa bolsa ou mochila prpria. Na evoluo celular deu-se o
15 MDULO 3
mesmo. A soluo foi a internalizao da maior parte das membranas celulares, dando origem s
AULA
O que fazer com tanta membrana? No caso do pra-quedas, claro que o mais prtico
CEDERJ 37
Figura 15.4: Esquema de uma clula onde esto coloridos em branco o meio extracelular e em cinza o meio
intracelular.
38 CEDERJ
15 MDULO 3
AULA
Figura 15.5: As clulas do epitlio intestinal possuem todas as organelas tpicas de uma clula eucarionte.
CEDERJ 39
O citoplasma
O citoplasma o maior compartimento celular. Corresponde a uma parte lquida, o
citossol, e s organelas que nele se distribuem. No citossol, ocorrem tanto a sntese quanto
a degradao de protenas. A sntese de protenas, voc j sabe, ocorre nos ribossomas. J a
degradao ocorre nos proteassomas, os quais estudaremos nas prximas aulas. Muitas reaes
metablicas (como a gliclise) tambm ocorrem nesse compartimento.
O retculo endoplasmtico
Quase a metade do total de membranas de uma clula pertence ao retculo endoplasmtico.
O retculo forma uma rede contnua de membranas. Na superfcie da membrana do retculo
voltada para o citoplasma, aderem-se os ribossomos que participam da sntese de protenas. Essas
protenas podem ser secretadas pelas clulas ou destinar-se s diversas organelas, e tanto podem ser
solveis quanto inseridas em membranas. Alm das protenas, tambm os lipdeos so sintetizados
no retculo. As regies do retculo nas quais ocorre a sntese de lipdeos so chamadas de retculo
liso. As regies onde os ribossomos podem se ancorar formam o retculo rugoso.
A protena em formao passa para o interior do retculo endoplasmtico por meio de
protenas translocadoras, caractersticas do transporte atravs de membrana. Esse processo
tambm ser detalhado nas aulas seguintes.
O complexo de Golgi
A maioria das protenas precisa passar do retculo para o complexo de Golgi, onde ser
finalizada. Essa passagem feita por vesculas que brotam das cisternas do retculo e se fundem
ao complexo de Golgi. No complexo de Golgi, resduos de acar so incorporados s cadeias
proticas, dando protena uma identidade que equivale a um endereo. Do Golgi, as protenas
partem em vesculas que se fundem membrana das organelas s quais se destinam. Este o tipo
de transporte que chamamos vesicular.
O endereo de uma protena , na verdade, uma determinada seqncia de aminocidos
chamada seqncia sinal. As protenas caractersticas de cada membrana ou compartimento
celular possuem seqncias sinal especficas que garantem o correto direcionamento das
inmeras protenas sintetizadas pela clula.
40 CEDERJ
15 MDULO 3
AULA
RESUMO
A maior parte das membranas de uma clula eucarionte se encontra
internalizada, formando compartimentos.
O ncleo, o retculo endoplasmtico, o complexo de Golgi, os endossomas
e vesculas de secreo, alm de lisossomas, mitocndrias, peroxissomas e
os plastdeos das clulas vegetais contm, cada um, protenas especficas,
relacionadas s suas funes.
Os diferentes compartimentos se comunicam, trocando molculas e informaes.
As vias de comunicao de trs tipos:
1- atravs de comportas, como os complexos de poro do ncleo;
2- atravs de protenas transportadoras, como as existentes na membrana do
retculo endoplasmtico e das mitocndrias;
3- atravs de vesculas que brotam de um compartimento e se fundem a outro,
o que ocorre entre as cisternas do retculo e do complexo de Golgi e a superfcie celular.
CEDERJ 41
EXERCCIOS
1. Quais os dois mtodos pelos quais acredita-se que tenham se formado as organelas
celulares?
2. Quais so os compartimentos de uma clula eucarionte?
3. A figura abaixo representa as dimenses lineares de uma bactria. A partir dela
calcule a rea e o volume da mesma.
4. Agora considere uma clula de dimenses lineares dez vezes maior (15, 20
e 10 m) e repita os clculos. Qual a relao entre a rea e o volume das duas
clulas?
5. Considerando que a clula da questo 3 uma bactria e a da questo 4 um
eucarionte, como o impacto desse aumento de volume pode ser minimizado?
6. Como entram no ncleo as molculas que para l se destinam?
7. Como feito o transporte de protenas sintetizadas no citoplasma e destinadas
a organelas como mitocndrias ou cloroplastos?
8. Como feito o transporte de protenas do retculo endoplasmtico para o
complexo de Golgi e da para a superfcie celular?
9. Existe diferena entre ribossomas aderidos ao retculo e livres no citoplasma?
10. O que voc entende por seqncia sinal?
42 CEDERJ
objetivos
16
AULA
Retculo endoplasmtico
Pr-requisitos
Bioqumica I: conceito de aminocido,
peptdeo, protena.
Biologia Celular I: estrutura de
membrana, transporte ativo.
Figura 16.1: Uma clula de mamfero cujo retculo endoplasmtico teve seu lmen
totalmente preenchido por um corante fluorescente. Na foto da direita, uma regio
da periferia da clula mostrada em maior ampliao.
Foto: Hugh Pelham
44 CEDERJ
Apenas recordando
Sabemos que todas as protenas celulares so sintetizadas a partir de informaes contidas no DNA. Para
cada protena produzido, a partir do DNA, um filamento de RNA-mensageiro (RNAm), que lido pelos
ribossomos (Figura 16.2). Os ribossomos tambm so formados por RNA, mas do tipo ribossomal (RNAr).
Conforme a fita de RNAm passa pelo ribossomo, aminocidos trazidos por RNAt, ou transportador, so
acoplados uns aos outros, formando a cadeia peptdica. A figura a seguir esquematiza as etapas do que
conhecido como Dogma central da biologia molecular.
Figura 16.2: A informao contida no DNA transmitida ao RNA na transcrio, que por sua vez serve de
molde para a sntese de protenas na traduo.
CEDERJ 45
16 MDULO 3
AULA
46 CEDERJ
16 MDULO 3
AULA
Figura 16.4: Os aminocidos que compem as protenas so adicionados de acordo com a leitura (traduo)
que os ribossomos fazem ao longo de uma fita de RNA mensageiro. A uma mesma fita podem associar-se
muitos ribossomos (polirribossomo ou polissomo) que vo produzindo vrias cpias da mesma protena.
Ao final da leitura, as subunidades ribossomais se separam e se incorporam ao conjunto de subunidades
ribossomais livres no citossol.
Quando a sntese de uma protena que precisa passar pelo retculo se inicia, os primeiros
aminocidos expostos fora do ribossomo constituem uma seqncia sinal. Essa seqncia ento
se liga a uma partcula reconhecedora do sinal ou SRP (do ingls Signal Recognition Particle). A
membrana do retculo, por sua vez, possui um receptor para o conjunto seqncia de sinal (SRP)
(Figura 16.5). A membrana do retculo possui tambm um receptor que forma uma ncora para
adeso do ribossomo. A SRP interrompe a sntese das protenas endereadas ao retculo at
que o ribossomo esteja acoplado sua membrana. A partir do acoplamento, a cadeia protica
continuar sendo sintetizada para dentro do lmen do retculo.
Como voc sabe, uma cadeia protica, mesmo ainda no enovelada, no pode atravessar
diretamente uma bicamada lipdica. Quando o ribossomo vai se acoplar ao retculo, forma-se um
canal hidroflico transmembrana por onde a protena nascente vai passar. Esse canal formado por
protenas transmembrana que se agrupam apenas quando o ribossomo vai se acoplar. Esse canal
hidroflico recebe o nome de translocon. O ribossomo se ajusta no translocon, de modo que nada
mais atravesse o canal alm da cadeia protica e nada vaze do lmen do retculo para o citossol.
O ribossomo permanecer aderido at terminar de sintetizar a seqncia primria de aminocidos
da protena. No final da sntese, a seqncia sinal cortada por uma enzima especfica. Concluindo,
o que define se um ribossomo ficar livre ou aderido ao retculo o tipo de protena (com ou sem
seqncia de sinal) que ele estiver sintetizando naquele momento.
CEDERJ 47
Figura 16.5: Quando uma protena endereada ao retculo comea a ser sintetizada, ela expe uma seqncia
sinal que ser reconhecida pela SRP. A SRP interrompe a sntese da protena at ligar-se a uma protena
receptora na membrana do retculo. Assim, o ribossomo pode ligar-se ao complexo de translocao, por onde
a cadeia polipeptdica penetrar. Ao fim da sntese da cadeia protica, as duas subunidades do ribossomo se
soltam da membrana do retculo e se separam, voltando ao estoque citoplasmtico de ribossomos.
48 CEDERJ
Como uma protena que est sendo sintetizada chega luz do retculo?
Uma das principais caractersticas da seqncia sinal ser rica em aminocidos hidrofbicos, assim como a regio da SRP qual ela se liga. Uma vez que o ribossomo esteja aderido
membrana do retculo (atravs do receptor para SRP), a cadeia polipeptdica em formao se
alinha ao translocon (Figura 16.6). Assim, conforme a protena vai crescendo, vai penetrando
diretamente na luz do retculo. A seqncia sinal hidrofbica, j livre da ligao SRP, mantm
a cadeia protica ancorada parte interna do translocon. Terminada a sntese da protena, a
seqncia sinal cortada enzimaticamente e a protena fica livre no lmen do retculo, a partir
de onde ter incio um processo de acabamento e endereamento ao seu destino final.
Figura 16.6: Mecanismo de translocao de uma protena para o lmen do retculo endoplasmtico.
Para que o esquema fique mais claro, os ribossomos e o RNAm foram omitidos, mas eles esto l!
CEDERJ 49
16 MDULO 3
AULA
Problemas e solues:
Como obrigar a cadeia polipeptdica a passar pelo complexo translocador?
A ligao da SRP seqncia sinal de transferncia leva o ribossomo a se ancorar
na membrana, apontando a cadeia polipeptdica na direo do poro do complexo
translocador. Certamente, isso ajuda a direcionar a cadeia para dentro do retculo, mas
o que obriga a cadeia nascente a passar pelo translocon o seu prprio crescimento:
medida que o peptdio vai sendo sintetizado junto ao ribossomo, a outra extremidade vai
sendo translocada pelo poro.
16 MDULO 3
E as protenas multipasso?
AULA
Figura 16.8: As protenas multipasso alteram seqncia de incio (start) e interrupo (stop) da transferncia
que resultam em muitas passagens pela membrana.
Detalhe importante:
Os processos de sntese e insero de protenas no retculo descritos at agora
resultam em insero da protena pela extremidade NH2 (amino), ficando
a terminao COOH (carboxila) sempre voltada para o citossol. No fique
pensando que todas as protenas so assim. Muitas tm a extremidade COOH
voltada para o exterior e outras possuem as duas extremidades da cadeia
voltadas para o mesmo lado da membrana. Isso acontece quando a seqncia
de transferncia est inserida no meio da cadeia peptdica, deixando de fora
do retculo justo a extremidade NH2. A posio em que as seqncias de incio
e interrupo da transferncia ocupam na cadeia em formao far toda a
diferena (Figura16.9).
Figura 16.9: Formao de uma protena duplo passo. Repare que, neste exemplo, a seqncia de iniciao (sinal
inicial) no est na ponta da protena, fazendo com que as duas extremidades da cadeia (amino e carboxila)
fiquem voltadas para o mesmo lado da membrana, no caso, o citossol. O sinal de interromper a transferncia
a segunda seqncia de ancoragem membrana.
CEDERJ 51
52 CEDERJ
16 MDULO 3
AULA
Figura 16.11: Desequilbrio de rea hipottica das camadas do retculo endoplasmtico liso quando da montagem da membrana (se voc j leu O Pequeno
Prncipe, de Antoine Saint-Exupry, certamente lembrou da cobra que engoliu o
elefante...).
Humor e cincia
Quem acha que os cientistas so pessoas sisudas, que encaram a cincia
como coisa muito sria, com a qual no se brinca, est muito enganado. Um
exemplo de como se pode fazer cincia sria sem perder o senso de humor
a enzima scramblase. Ao ser batizada, seus descobridores compararam sua
atividade do cozinheiro que vira um ovo na chapa para que frite dos dois
lados. So o que chamamos de ovos mexidos, para os pesquisadores de lngua
inglesa: scrambled eggs.
CEDERJ 53
Figura 16.13: Assimetria da bicamada lipdica: a fosfatidilserina (negativa) s existe no lado voltado para o
citossol, e os glicolipdeos (hexgonos), s no lado externo.
54 CEDERJ
16 MDULO 3
externo para o folheto voltado para o citossol. Enquanto as flipases gastam energia para realizar
AULA
Essa assimetria resulta de uma outra classe de enzimas, as flipases. As flipases atuam na
RESUMO
O retculo endoplasmtico uma rede contnua de membranas, ocupando
a maior parte do citoplasma, e tem domnios liso e rugoso.
Dentre as mais importantes funes do retculo endoplasmtico esto a
sntese de protenas de membrana e para secreo, no domnio rugoso; a
biognese da membrana, no domnio liso, e a manuteno da homeostase
de clcio.
Os ribossomos que fazem a sntese de protenas no citoplasma e os que
fazem a sntese associados ao retculo so os mesmos, o que muda so as
caractersticas da cadeia protica que est sendo sintetizada.
Os primeiros aminocidos da cadeia peptdica das protenas que devem
ser sintetizadas para dentro do retculo formam uma seqncia sinal que
reconhecida por um receptor citoplasmtico (SRP) que dirige o ribossomo
para o retculo.
No final da sntese, a seqncia sinal cortada da cadeia protica, que fica
solta no lmen do retculo.
Protenas transmembrana, alm da seqncia de sinal que as dirige ao
retculo, tm uma seqncia hidrofbica de ancoragem que as prende
bicamada lipdica.
As membranas plasmtica e dos compartimentos que se comunicam,
como retculo, complexo de Golgi, endossomos e lisossomos, so montadas
no retculo endoplasmtico liso. Nesse processo, a membrana preexistente
aumenta de extenso porque a elas so acrescentados novos fosfolipdeos,
sintetizados a partir de precur-sores citoplasmticos.
Como os novos fosfolipdeos so todos acrescentados ao lado citoslico da
membrana do retculo liso, metade dos fosfolipdeos translocada para o
outro lado por scramblases.
J na membrana plasmtica, enzimas mais especficas, as flipases, translocam
seletivamente fosfatidilserina e fosfatidiletanolamina para o folheto
citoslico.
Os fosfolipdeos das membranas de mitocndrias e peroxissomos so
transportados um a um, a partir do retculo liso para a organela a que se
destinam.
56 CEDERJ
16 MDULO 3
EXERCCIOS
AULA
CEDERJ 57
objetivos
17
AULA
Complexo de Golgi
Um pouco de Histria
O complexo de Golgi foi descrito pela primeira vez por Camillo Golgi em 1898, graas
a um novo tipo de colorao histolgica para neurnios usando metais pesados que ele
havia criado. No trabalho original, o complexo de Golgi est esquematizado como uma
rede dentro de um terminal nervoso. Camillo Golgi e Ramn-Cajal, dois neuroanatomistas,
ganharam o prmio Nobel em 1906 pela criao desse mtodo de colorao, conhecido como
mtodo de Cajal, que permitiu mostrar que o sistema nervoso central formado por clulas
individualizadas e no por uma rede contnua. A prpria existncia do complexo de Golgi
foi considerada duvidosa at 1954, quando sua organizao foi descrita por microscopia
eletrnica. Alguns detalhes desta organizao so desconhecidos at hoje.
Camillo Golgi, ( esquerda), Ramn-Cajal (no centro) e um dos esquemas originais do aparato reticolare
observado por Golgi ( direita).
60 CEDERJ
por clula. Diferente do retculo endoplasmtico, com sua rede contnua de tbulos, o complexo
de Golgi formado por lamelas (ou cisternas) que no so contnuas (Figura 17.1). No conjunto,
elas se arranjam como uma pilha de pratos ou, comparao ainda melhor, como vrios pes rabes
empilhados. Olhando mais atentamente, h perfuraes nas lamelas, como se os pes tivessem
buracos no alinhados. De cada lado da pilha h uma rede de tbulos. Todas essas informaes
decorrem da observao em microscopia eletrnica de transmisso de muitos cortes da organela
e reconstruo tridimensional a partir desses cortes (relembre a Figura 3.2).
CEDERJ 61
17 MDULO 3
AULA
Organizao morfolgica
(B)
(A)
Figura 17.2: Micrografias de complexo de Golgi em uma clula animal (A) e na Euglena
(B). As lamelas esto empilhadas e podemos ver a rede de tbulos cis e trans.
Fotos: Mrcia Attias
Funes
O complexo de Golgi tem trs funes principais:
a) realizar a glicosilao, isto , adicionar acares a protenas
e lipdeos que foram sintetizados no retculo endoplasmtico, assim
modificando-os;
62 CEDERJ
17 MDULO 3
AULA
sntese de proteoglicanas;
c) distribuir as macromolculas provenientes do retculo endoplasmtico e que percorreram o complexo de Golgi entre trs possveis
destinos:
1. a membrana plasmtica, onde tais molculas se
incorporaro ou sero secretadas;
2. vesculas de secreo que se acumulam no citoplasma
esperando um sinal para exocitarem seu contedo;
3. lisossomos, onde formaro a prpria membrana da
organela ou tero papel na digesto intracelular.
Voc vai saber mais sobre a funo de distribuio de macromolculas nas Aulas 20 e 21, ainda neste mdulo. Nesta aula vamos
nos deter mais na funo de adio de acares.
Glicosilao
Chamamos de glicosilao ao processo de acrescentar monmeros
de acar a protenas e lipdeos, formando glicoprotenas e glicolipdeos,
apesar de os monmeros adicionados no serem apenas glicoses.
CEDERJ 63
Tipo de glicosilao
Retculo endoplasmtico
Complexo de Golgi
(co-traducional)*
(ps-traducional)**
Local de finalizao
TGN
TGN
Asparagina
Serina ou treonina
cido silico
cido silico
Local de incio
* Os acares so adicionados enquanto a cadeia de aminocidos que forma a protena ainda est
sendo montada.
** Os acares so adicionados cadeia de aminocidos j completamente montada.
17 MDULO 3
AULA
Figura 17.4: O DNA serve de molde para sua prpria duplicao, assim como para a sntese do RNA.
Este RNA, por sua vez, servir de molde para a adio ordenada de aminocidos numa cadeia protica.
Voc j viu esse esquema na Aula 16.
Como voc notou, ento, os processos de sntese das macromolculas mais importantes seguem
um molde, com o objetivo de conservar a informao, diminuindo ao mximo a ocorrncia de erros.
J na glicosilao, em que uma cadeia ramificada de pelo menos 14 acares (que costumamos chamar
de rvore de acar, por causa das ramificaes) montada, no existem moldes a seguir! Ser que no
to importante evitar a ocorrncia de erros? Se considerarmos que a poro glicdica de glicoprotenas
e glicolipdeos serve de receptor especfico a muitos ligantes importantes, atua na adeso das clulas e
no reconhecimento celular, certamente temos de admitir que importante que essas rvores de acar
estejam montadas sem erros.
Glicosilao do tipo N
Qual ser o mecanismo que garante que a rvore glicdica seja corretamente montada? Para
comear, se a cada vez que uma asparagina aparecer na cadeia protica nascente no lmen do
retculo endoplasmtico, os 14 acares fossem acrescentados um de cada vez, seria uma correria
de enzimas! Da para a ocorrncia de erro um pulo! O que ocorre que a rvore pr-montada
e fica pendurada, como em um cabide, num fosfolipdeo da membrana do retculo, esperando
a asparagina aparecer (Figura 17.5). A pr-montagem da rvore no retculo endoplasmtico
funciona como uma linha de montagem de fbrica: a enzima que acrescenta o primeiro acar
reconhece o fosfolipdeo, a que coloca o segundo acar reconhece o fosfolipdeo mais o primeiro
acar, a enzima que coloca o terceiro s reconhece como substrato o conjunto fosfolipdeo mais
o primeiro e o segundo acares e assim por diante. Dizendo de uma maneira mais elegante, o
mecanismo de copiar um molde usado na replicao, na transcrio e na traduo, nesse caso,
substitudo pelo mecanismo da glicosilao, em que cada enzima s reconhece como substrato
o produto da enzima anterior.
CEDERJ 65
66 CEDERJ
17 MDULO 3
AULA
CEDERJ 67
68 CEDERJ
17 MDULO 3
continuar percorrendo a lamela trans e atingir a rede trans, onde o ltimo acar da rvore
AULA
Na lamela trans, mais acares sero acrescentados, e a a rvore glicdica vai finalmente
ser adicionado: o cido silico (ou cido N-acetil-neuramnico, conhecido pela sigla do ingls
NANA). O cido silico tem enorme importncia porque, alm de ser um monmero polar, como
os outros acares, ele tem carga negativa. Assim, ao terminar em cido silico, uma glicoprotena passa a ser uma molcula negativa em pH fisiolgico, independente da sua poro protica.
Na Figura 17.10, temos um panorama passo a passo da glicosilao do tipo N.
Figura 17.10: Funcionamento geral da glicosilao do tipo de N. Depois de a rvore pr-montada ser transferida
para o aminocido asparagina, ainda no retculo, trs acares so cortados (passo 1). J no complexo de
Golgi, na rede cis e lamela cis, mais acares so retirados (passo 2). Na lamela medial, mais cortes e o primeiro
acrscimo (passos 3 e 4). Pouco antes de sair do Golgi, so adicionados o penltimo (lamela trans) e depois o
ltimo (na rede trans) acares (passo 5).
Figura 17.11:
Conformao bsica de
uma proteoglicana.
70 CEDERJ
Figura 17.12: Na micrografia A, o complexo de Golgi no est submetido a nenhum tratamento especial.
Na micrografia B, foi feita impregnao com metal pesado (a colorao de Golgi e Cajal), no caso, o smio, que
se acumula preferencialmente na rede e lamela cis. Nas micrografias C e D, ensaios de citoqumica mostraram o
produto final de enzimas de glicosilao na lamela trans (C) e na rede trans (D). Fotos de Daniel Friend.
CEDERJ 71
17 MDULO 3
No foi nada fcil! Depois de saber quais enzimas eram responsveis por cada etapa
AULA
CONCLUSO
Como chamamos a ateno no comeo desta aula, o mecanismo
de sntese de polmeros de acar difere do mecanismo de montagem de
outros polmeros porque no usa o sistema de cpia. No entanto, a chance
de haver erro na montagem minimizada por outro mecanismo, o da
linha de montagem, em que cada enzima usa como substrato o produto
da enzima anterior. Ao deixar o retculo endoplasmtico e chegar ao
complexo de Golgi, alm da linha de montagem, a chance de haver erro
ainda mais diminuda pelo fato de as diferentes enzimas que montam
a rvore glicdica estarem em diferentes lamelas do Golgi, que no se
comunicam entre si. Assim, ao final de cada etapa, a glicoprotena em
construo muda de compartimento. fcil perceber que se as lamelas do
Golgi fossem embaralhadas, ou se as vesculas que transportam o material
de lamela em lamela se perdessem e fundissem com a lamela errada,
a glicoprotena simplesmente no ficaria pronta. muito importante,
portanto, que a organizao do complexo de Golgi seja mantida.
O nico perodo em que o complexo de Golgi no est organizado como
lamelas empilhadas o da diviso celular. Mas, logo aps a citocinese,
a organela se reorganiza e volta a funcionar perfeitamente, produzindo
glicoprotenas em perfeito estado.
Explicar por que as vesculas transportadoras no se fundem com
o compartimento errado um pouco mais difcil, mas na Aula 21 vamos
examinar essa questo com cuidado.
Depois de prontas, as molculas que percorrem o complexo de
Golgi sero distribudas para seu destino final. Essa distribuio ocorre
na rede trans e pode ter a ajuda de receptores ou de outros recursos que
tambm sero vistos na Aula 21. As funes do complexo de Golgi esto
resumidas na Figura 17.13.
72 CEDERJ
17 MDULO 3
AULA
CEDERJ 73
RESUMO
O complexo de Golgi uma organela localizada nas proximidades do envoltrio
nuclear e formada por um sistema de cisternas ordenadas em pilha.
Protenas sintetizadas no retculo endoplasmtico so transportadas em
vesculas para o complexo de Golgi. Essas vesculas se fundem s cisternas da
face cis do Golgi.
No complexo de Golgi, as protenas vindas do retculo so modificadas
(glicosiladas ou sulfatadas) e despachadas para a membrana plasmtica,
lisossomas ou vesculas de secreo.
As protenas so transportadas de uma cisterna do Golgi para outra cisterna
adjacente sempre atravs de vesculas que brotam em uma cisterna e se fundem
seguinte.
Em cada cisterna do complexo de Golgi, as protenas so modificadas
pela adio ou supresso de molculas de acar da sua cadeia primria de
aminocidos. Esse processo se chama glicosilao.
A glicosilao pode ser de dois tipos: N e O.
A glicosilao do tipo N tem incio ainda no retculo endoplasmtico e os
acares se ligam ao aminocido asparagina na cadeia polipeptdica.
A glicosilao do tipo O tem incio no Golgi e os acares se ligam a um
aminocido serina ou treonina.
Cada cisterna do Golgi tem um conjunto diferente de enzimas que participam
da glicosilao.
As cadeias de acar das glicoprotenas ficam sempre expostas para o meio
extracelular e so as principais molculas no reconhecimento entre clulas.
74 CEDERJ
AULA
17 MDULO 3
EXERCCIOS
microscopia eletrnica?
2. O que se entende por face cis e trans do complexo de Golgi?
3. Por que as lamelas do complexo de Golgi precisam ser arrumadinhas?
4. Liste as principais funes do complexo de Golgi, explicando sucintamente o
que so.
5. Diferencie a glicosilao do tipo N da do tipo O.
CEDERJ 75
objetivos
18
AULA
Controle de qualidade da
sntese protica
78 CEDERJ
Figura 18.1: O modo de ao da chaperona hsp70: ela impede que a cadeia protica
enovele erradamente.
CEDERJ 79
18 MDULO 3
AULA
Auto-radiografia uma tcnica em que se separam protenas por eletroforese e depois, para distinguir
quais das protenas esto marcadas radioativamente, coloca-se o gel em contato com um filme de raios X. S as
protenas marcadas impressionam o filme. O caso citado no texto chamado incorporao metablica:
fornecemos para a clula um precursor radioativo da molcula que queremos detectar. Se queremos
detectar protenas sintetizadas num dado perodo, fornecemos um aminocido marcado, como a
metionina, que tem o tomo de enxofre radioativo (35S).
18 MDULO 3
AULA
Para voc ter uma idia do tamanho, um proteassoma pouco menor que um ribossomo; seu tamanho
tambm medido em s (svedbergs, unidade de sedimentao: expressa a velocidade com que uma
macromolcula vai para o pellet em uma ultracentrifugao em condies padronizadas). As subunidades
do ribossomo tm 40s a menor e 60s a maior, enquanto a poro mediana do proteassoma, que contm as
enzimas, mede 26s, e as pores de reconhecimento, 19s cada uma.
CEDERJ 81
Figura 18.4: Proteassomas vistos por contrastao negativa no microscpio eletrnico (A). Em B, a imagem de um proteassoma
trabalhada em computador, mostrando que cada proteassoma possui uma regio mediana, que o stio de degradao
onde esto as proteases com o stio ativo voltado para dentro e, em cada extremidade, um stio de reconhecimento. Em C,
um desenho esquemtico de um proteassoma onde se v o seu interior.
Fonte: Molecular Biology of the Cell, 3- ed.
82 CEDERJ
18 MDULO 3
AULA
84 CEDERJ
18 MDULO 3
AULA
Figura 18.7: Uma protena globular (A), quando mal enovelada, pode assumir uma
conformao planar (B) que expe folhas -pregueadas. Muitas protenas com essa
configurao formam um agregado conhecido como -amilide (C), altamente
resistente a proteases e muito prejudicial aos tecidos.
CEDERJ 85
Agregados de protenas mal enoveladas tambm esto presentes na doena humana de Creutzfeld-Jacob
e na encefalopatia espongiforme bovina, conhecidas como mal da vaca louca. Nesse caso, a presena da
protena mal enovelada pode induzir a modificao da protena correta, que est presente na superfcie
de clulas nervosas de indivduos normais, e cuja funo ainda no conhecida (Figura 18.8). A protena
defeituosa resistente degradao por proteases e pode ser adquirida quando um indvduo ingere o
tecido que contm a protena defeituosa de outro indivduo, mesmo de outra espcie. Assim, a protena
defeituosa foi considerada infecciosa, j que sozinha era capaz de transmitir uma doena, e ficou
conhecida como prion (encurtamento de protein only).
Figura 18.8: Se uma protena normal (A) se associar a uma protena igual a ela, mas mal enovelada (B), ser
formado um heterodmero (C). A protena defeituosa vai induzir a modificao da protena normal, formando
um homodmero (D). Quando novas protenas normais forem produzidas (E) elas se associaro s defeituosas,
formando um agregado (F), que crescer medida que novas protenas se associarem.
RESUMO
Tanto as protenas sintetizadas no citoplasma quanto no retculo esto sujeitas a
ter defeitos em sua conformao. Os mecanismos de deteco e reparo desses defeitos
esto esquematizados a seguir. As protenas cujos defeitos no podem ser reparados
so marcadas e encaminhadas para destruio nos proteassomas.
1) Protena em processo de sntese no citoplasma
Protena correta
Protena defeituosa
Chaperonas (tipo hsp 70) + ATP
Protena correta
Protena defeituosa
Chaperonas (tipo hsp 60) + ATP
Protena correta
Protena defeituosa
Ubiquitinas
Proteassomas
86 CEDERJ
18 MDULO 3
Protena defeituosa
Chaperonas (tipo hsp 70) + ATP
Protena correta
Protena defeituosa
Protena correta
Glicosilao
AULA
Glicosilao
Glicosilao
-2 glicoses
Chaperona (tipo calnexina)
-3 glicoses
Complexo de Golgi
Protena defeituosa
Protena correta
+1 glicose
Chaperona (tipo calnexina)
Protena defeituosa
Retrotranslocon
Protena correta
Complexo de Golgi
Citoplasma
Glicosidase
Ubiquitinas
Proteassomas
EXERCCIOS
1. Que tipo de erro pode ocorrer durante a sntese de uma protena?
2. O que so chaperonas? Por que tambm so chamadas protenas de choque
trmico?
3. Diferencie as chaperonas hsp70 das hsp60.
4. O que so proteassomas?
5. Como so encaminhadas para destruio nos proteassomas as protenas
malformadas?
6. O que so placas amilides?
CEDERJ 87
objetivos
por receptor;
19
AULA
Endocitose
90 CEDERJ
19 MDULO 3
AULA
CEDERJ 91
92 CEDERJ
19 MDULO 3
AULA
CEDERJ 93
94 CEDERJ
19 MDULO 3
AULA
CEDERJ 95
96 CEDERJ
19 MDULO 3
AULA
Figura 19.6: Um fagcito profissional pode reconhecer e fagocitar uma bactria tanto
ligando-se a acares especficos da parece celular (a) quanto ligando-se a anticorpos
secretados que se ligaram superfcie bacteriana (b).
Fagocitose especfica
O fagossomo assim formado bastante justo ao redor da bactria
ou protozorio que est sendo fagocitado, porque medida que os complexos receptores (no fagcito) e seus ligantes (na bactria ou protozorio)
vo se formando, os pseudpodos vo progredindo ao redor do invasor
(Figura 19.7), lembrando o fechamento de um zper. Por isso, a fagocitose
especfica tambm dita fagocitose do tipo zper.
Macropinocitose
Bactria
Pseudpodo
Membrana
plasmtica
Clula fagoctica
1m
CEDERJ 97
98 CEDERJ
19 MDULO 3
AULA
Resumo
Molculas
ou partculas
muito
membrana
como
bactrias.
Nesste caso,
ela grandes
feita porpara
clulasatravessar
do sistemaaimune
chamadas
genericamente de fagcitos profissionais.
processo
se chama endocitose.
da parede bacteriana, como
organismo invasor.
invasores, como bactrias. Nesste caso, ela feita por clulas do sistema imune
Endocitose
(Pinocitose)
do organismo invasor.
(macropinocitose)
Fagocitose
No-imunolgica
(mediada por outros receptores)
No-especfica (macropinocitose)
100 CEDERJ
19 MDULO 3
AULA
EXERCCIOS
1. Que tipos de partcula:
a. Atravessam a bicamada lipdica?
b. Passam por complexos proticos na membrana?
c. So englobados por endocitose?
2. Quais os objetivos da endocitose?
3. Que tipos de clula endocitam?
4. Como podemos distinguir pinocitose de fagocitose?
5. Na endocitose mediada por receptor, que tipos de molcula atuam como ligante
na clula-alvo?
6. O que macropinocitose? Qual sua utilidade para a clula?
CEDERJ 101
objetivos
20
AULA
Compartimentos endocticos
Na ltima aula voc aprendeu que a clula usa a endocitose para captar do meio
extracelular molculas que no atravessam a membrana. A atividade endoctica
sempre envolve a formao de uma vescula que contm o fluido extracelular
e as molculas nele dispersas. Se a endocitose for especfica, isto , mediada
por um receptor, o ligante ser endocitado com muito mais eficincia. bom
relembrar que aqui os termos ligante e receptor tm o mesmo significado que
na Aula 13, com a diferena de que a associao dos dois provoca a endocitose
de ambos e no uma cascata de sinalizao.
104 CEDERJ
CEDERJ 105
20 MDULO 3
AULA
Figura 20.3
106 CEDERJ
20 MDULO 3
AULA
Figura 20.4: Depois que a invaginao revestida por clatrina se aprofunda, a dinamina
estrangula o seu pescoo, destacando-a da membrana. Por ao de enzimas, assim que
a vescula se destaca o revestimento desmanchado, e seus componentes ficam dispersos
no citossol.
CEDERJ 107
Um pouco de histria
O mecanismo de endocitose mediada por receptor com participao do
revestimento de clatrina foi descoberto e estudado ainda na dcada de
1970 por dois mdicos, Michael S.Brown e Joseph L. Goldstein, que por isso
ganharam o Nobel de Medicina em 1985. Eles estudavam uma doena hereditria, a hipercolesterolemia familiar aguda. As pessoas afetadas pela doena
tinham grande acmulo de colesterol nos vasos sanguneos, formando placas
de ateroma que obstruem os vasos, causando enfartos e isquemias muito
precoces, antes dos dois anos de idade. Outros pacientes pareciam ter uma
forma mais branda da doena, j que viviam at a idade adulta, mas ainda
assim morriam jovens. Os pesquisadores descobriram que os doentes mais
graves no conseguiam retirar o colesterol do sangue porque no possuam
o receptor para o transportador sanguneo de colesterol, a lipoprotena de
baixa densidade ou LDL (Figura 20.5).
108 CEDERJ
20 MDULO 3
AULA
sua poro extracelular, mas no conseguia interagir com o revestimento de clatrina porque no tinha a poro citoplasmtica (Figura 20.6). Assim, a eficincia
da endocitose era muito menor do que com receptores normais (Figura 20.7).
CEDERJ 109
Figura 20.8: Desenho esquemtico da via endoctica mediada por receptor. Os complexos receptor-ligante se
agrupam e, com auxlio do revestimento de clatrina, so endocitados com grande eficincia, passando aos compartimentos que formam a via endoctica. O ncleo (N), o retculo endoplasmtico (RE) e o complexo de Golgi
tambm esto representados, apesar de no fazerem parte da via. (Desenho original de Isabel Porto Carreiro.)
20 MDULO 3
clulas tambm so captadas por endocitose mediada por receptor. Uma das mais estudadas
a endocitose da molcula que transporta ferro na corrente sangunea, a transferrina.
A transferrina ligada a ferro chamada holotransferrina e reconhecida por um receptor
presente na maioria das clulas eucariticas. A endocitose se d pelo mecanismo, que voc j
conhece, de formao de vesculas revestidas por clatrina. Depois do revestimento desfeito,
as vesculas se fundem com o endossoma inicial e, no pH 6,5 desse compartimento, a holotransferrina libera os tomos de ferro, que so ativamente bombeados para o citoplasma,
tornando-se apotransferrina (transferrina sem ferro). Diferentemente do que ocorre com o
LDL, o receptor tem afinidade por apotransferrina (no por holotransferrina!) em pH cido.
Ainda acoplados, receptor e apotransferrina seguem de volta para a membrana plasmtica.
Ao atingirem a superfcie celular, reencontram o pH do meio extracelular, de 7,2-7,4. Nesse
pH, o receptor no tem afinidade por apotransferrina e o complexo se desfaz. A apotransferrina vai ligar outros tomos de ferro e o receptor livre vai poder ligar holotransferrina, com
quem tem grande afinidade no pH do meio extracelular. Sem dvida nenhuma, bastante
econmico devolver a transferrina ao meio extracelular para que a mesma molcula possa
transportar muitos tomos de ferro, entrando e saindo da clula vrias vezes. Por causa
desse trnsito intracelular peculiar, o complexo receptor-transferrina tem sido considerado
marcador de endossoma inicial em clulas de mamfero (Figura 20.9).
Figura 20.9: Os receptores ligam holotransferrina na superfcie da clula (1) e so agrupados (2)
em vesculas revestidas por clatrina (2-4). Depois que a vescula se destaca (5), o revestimento
despolimeriza (6) e a vescula se funde com o endossoma inicial (Ei). Por causa do pH 6,5 desse
compartimento, o ferro se solta da transferrina (7) e bombeado para o citoplasma. A apotransferrina e o receptor voltam para a superfcie (8-9), onde se soltam. Note que, nesse mecanismo de
captao de ferro em clulas de mamfero, nem a transferrina, nem o ferro atingem o endossoma
tardio (Et) e muito menos o lisossoma (L). (Desenho original de Flavia Moreira Leite.)
CEDERJ 111
AULA
O endossoma tardio
Os ligantes, agora j desligados dos receptores, sairo do endossoma
inicial em vesculas carreadoras pequenas e cidas, que s se fundem
com o prximo compartimento da via endoctica, o endossoma tardio
(Figura 20.8). A bomba de prtons tambm est presente na membrana
desse compartimento e faz com que o pH interno do endossoma tardio
seja ainda mais baixo que o do endossoma inicial, cerca de 6,0. Alm
de receber as vesculas do endossoma inicial que trazem o material
endocitado, o endossoma tardio tambm recebe as enzimas lisossomais
que chegam do complexo de Golgi em vesculas transportadoras.
Voc deve lembrar que as enzimas lisossomais so sintetizadas
no retculo endoplasmtico e so glicosiladas ao passar pelo Golgi,
possuindo a rvore glicdica completa at cido silico, no? Lembra
tambm que a maioria das glicoprotenas produzidas ao longo da via
secretria (retculo endoplasmtico complexo de Golgi) segue em
vesculas para a membrana plasmtica e o meio extracelular. Como ser
que as enzimas lisossomais so desviadas desse caminho? A resposta est
numa pequena diferena entre a rvore glicdica dessas enzimas e a das
outras glicoprotenas: pelo menos algumas das manoses acrescentadas
s enzimas lisossomais so fosfatadas, isto , ficam diferentes das
manoses comuns porque recebem um grupamento fosfato ligado ao
carbono 6, sendo por isso chamadas manoses-6P (l-se manose seis
fosfato). Enquanto percorrem o complexo de Golgi, so reconhecidas
por um receptor voltado para o lmen que reconhece especificamente
as glicoprotenas que tm manose-6P. A partir desse reconhecimento,
a enzima lisossomal vai continuar a ser glicosilada normalmente, mas
sempre ligada ao receptor. Chegando rede trans do Golgi, os complexos
receptor-manose-6P so reunidos em uma pequena regio (com ajuda
de clatrina!), de onde brotar uma vescula que levar as enzimas ao
endossoma tardio (Figura 20.10).
No endossoma tardio, o pH 6,0, cido o suficiente para que
os complexos receptor-enzima se desacoplem. Assim, a enzima vai ter o
fosfato retirado da manose, enquanto os receptores, agora desocupados,
vo voltar ao complexo de Golgi em uma vescula. Chegando ao complexo
de Golgi, esses receptores pescaro outras enzimas lisossomais para levar
ao endossoma tardio.
112 CEDERJ
20 MDULO 3
AULA
O lisossoma
Tanto as enzimas como as molculas endocitadas sero finalmente
levadas por vesculas ao ltimo compartimento da via endoctica, o
lisossoma. Os lisossomos so compartimentos de pequeno volume e
numerosos, sendo mais freqentemente encontrados na regio perinuclear.
So bastante cidos, tambm por ao da ATPase vacuolar, apresentando
pH interno entre 4,5 e 5,0. Nesse pH, as enzimas lisossomais tornam-se
ativadas, porque suas pores pro foram retiradas, e passam a funcionar
a pleno vapor.
Que enzimas existem no lisossoma? Confira na Figura 20.11.
114 CEDERJ
20 MDULO 3
AULA
CEDERJ 115
Doenas lisossomais
Quando alguma enzima lisossomal no funciona, seu substrato no digerido se acumula. Isso acontece em muitas doenas. Entre as mais conhecidas esto a doena de
Hurler, cujos portadores no digerem glicosaminoglicanas. Os portadores da doena
de Tay-Sachs acumulam um tipo de glicolipdio, os gangliosdeos, enquanto os portadores da doena de Gaucher acumulam outro tipo, os cerebrosdeos. A Sndrome de
Niemann-Pick engloba vrias lipidoses e seus portadores no digerem colesterol ou
esfingomielina. A forma mais grave de doena lisossomal a doena da clula I (o I
se deve ao acmulo de corpos de incluso). Os portadores dessa doena tm apenas
um gene defeituoso (felizmente recessivo!), acarretando a ausncia da enzima que
fosforila a manose no carbono 6. Assim, as enzimas lisossomais no so reconhecidas pelo receptor de manose-6P no Golgi e no so dirigidas via endoctica, e sim
secretadas. Por isso, os portadores da doena da clula I so diagnosticados pela
presena de vrias enzimas lisossomais na corrente sangunea.
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20 MDULO 3
AULA
Protena
Enzimas
Glicdio
Membrana
Figura 20.12: A rvore glicdica das glicoprotenas da membrana lisossomal impedem que as enzimas lisossomais ataquem
a membrana da prpria organela.
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20 MDULO 3
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AULA
RESUMO
EXERCCIOS
1. Qual a principal vantagem da endocitose mediada por receptor em relao
endocitose de fase fluida?
2. Como os complexos receptor-ligantes so reunidos em uma rea da membrana?
3. Como a molcula de clatrina? Como o polmero formado por ela?
4. Como a vescula revestida por clatrina se solta da membrana plasmtica?
5. O que um endossoma inicial?
6. O que acontece nesse compartimento?
7. O que torna o endossoma cido?
8. O que o endossoma tardio?
9. De onde vm as enzimas lisossomais? Como so endereadas aos compartimentos
endocticos?
10. Por que as enzimas lisossomais no digerem as protenas do prprio lisossoma?
11. O que so doenas de armazenamento?
12. O que autofagia? Como se forma o vacolo autofgico?
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Gabarito
Biologia Celular I
Aula 13
1.
a) Receptor: protena presente na membrana ou no citoplasma de uma clula
que capaz de reconhecer um ligante especificamente, disparando um evento
celular.
b) Ligante: molcula secretada ou exposta na membrana de uma clula, que
reconhecida por um receptor, ligando-se a ele.
c) Molcula sinalizadora: corresponde ao ligante.
d) Clula-alvo: a clula que possui o receptor para um determinado ligante.
2. Na parcrina, o sinalizador tem vida curta e se dissemina apenas entre as
clulas mais prximas. J a sinalizao autcrina aquela em que a prpria
clula que secreta o sinalizador afetada por ele.
3. Na sinalizao endcrina, a molcula sinalizadora dura bastante e atinge
clulas muito distantes do local onde produzida. A sinalizao neuronal um tipo
de sinalizao parcrina, mas como os neurnios possuem longos prolongamentos
os axnios a molcula sinalizadora pode atingir clulas muito distantes do
corpo celular onde ele produzido.
4. Todas esto corretas.
5. Deve ser uma molcula pequena e hidrofbica para que possa atravessar a
bicamada lipdica.
6. Porque, uma vez dentro da clula-alvo, os hormnios formam um complexo com
uma protena citoplasmtica e so transportados para o ncleo, onde terminam
por ativar um ou mais genes. At que os efeitos da(s) protena(s) codificada(s) por
aquele gene sejam aparentes, leva algum tempo.
7.
a) abrindo um canal inico;
b) ligando-se a um receptor extracelular que ativa uma protena G intracelular;
c) ligando-se a um receptor enzimtico.
8. A acetilcolina, secretada por neurnios motores, e o receptor de acetilcolina,
presente nas membranas das clulas musculares esquelticas.
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Aula 14
1. Dentro da clula, isto , no citossol.
2. Sempre na superfcie da membrana voltada para o meio extracelular.
3. Canais ativados por ligante e os que estimulam a protena G.
4. O receptor de acetilcolina um canal ativado por ligante. A protena G
pode ativar a adenilciclase hidrolisando ATP a AMPc, que ativa muitas enzimas
citoplasmticas.
5. uma protena que fosforila (= adiciona um fosfato) a uma molcula.
6. A adenilciclase hidrolisa ATP a AMPc, que por sua vez ativa uma enzima como
a PKA, uma quinase que fosforila outras protenas.
Ao ser ativada pela protena G, a fosfolipase C cliva o PIP2 em IP3 e DAG. O IP3
libera clcio armazenado no retculo endoplasmtico. J o DAG recruta o PKC no
citossol. O PKC se tornar ativo ao combinar-se com o clcio liberado pela IP3.
7. So molculas, como o clcio, que disparam efeitos celulares. Embora eles
no sejam as molculas sinalizadoras, sua presena conseqncia da cascata
de reaes disparada por estas. O clcio, ou outro mensageiro secundrio, tanto
pode ser a ltima molcula a sinalizar uma atividade celular, no citoesqueleto, por
exemplo, quanto ser um mero intermedirio numa cascata que prossegue ainda
por vrios degraus (molculas).
8. mantida baixa pelo bombeamento ativo para a luz do retculo endoplasmtico
ou para o meio extracelular. Tambm pode ser trocado, sem gasto adicional de
energia, por sdio, num esquema de antiporte.
9. uma seqncia em que a partir de um primeiro reconhecimento entre um ligante
e seu receptor, molculas passam a ser ativadas em srie, com um efeito domin.
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Aula 15
1. Pela invaginao de membranas a partir da superfcie e pelo englobamento
(endocitose) de outros organismos primitivos.
2. Meio intracelular, ou citossol, espao intranuclear e os compartimentos internos
limitados pelas membranas do retculo endoplasmtico, complexo de Golgi,
mitocndrias, plastdeos, peroxissomos, lisossomas e vesculas de endocitose e
de secreo.
3.
2 m
1,5m
1m
rea: 2 + 2 + 3 + 3 + 1,5 + 1,5 = 13 m2
Volume: 1,5 x 2 x 1 = 3 m3
4. rea: 2 (15 x 20) + 2 (12 x 10) + 2 (10 x 10) = 1040 m2
Volume: 15 x 20 x 10 = 3000 m3
relao rea2 / rea1 = 1040/ 13= 80
relao Volume2 / Volume1 = 3000 / 3 = 1000
O volume da segunda clula mil vezes maior do que o da primeira!
5. Se a superfcie se dobrar, formando vilosidades ou invaginaes.
6. Entram j na sua forma final, enovelada, atravs de comportas, os chamados
complexos do poro.
7. Essas protenas possuem seqncias de endereamento e passam por complexos
translocadores existentes na membrana dessas organelas.
8. Por vesculas que brotam de um lugar para o seguinte.
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9. No, de acordo com a protena que est sendo sintetizada eles permanecem
livres ou se aderem ao retculo.
10. uma seqncia de aminocidos que informa o destino de uma protena que
comea a ser sintetizada.
Aula 16
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Aula 17
1. O complexo de Golgi est sempre localizado na regio perinuclear da clula.
Ele pode ser visto em microscopia de fluorescncia localizando-se molculas que
s esto presentes ali ou pela impregnao pela prata, mtodo desenvolvido por
Cajal e Golgi, quando pela primeira vez esta organela foi descrita. Em microscopia
eletrnica, o complexo de Golgi tem um aspecto tpico de cisternas empilhadas
s quais se fundem ou brotam vesculas.
2. As protenas que so sintetizadas no retculo endoplasmtico so transferidas
para o Golgi em vesculas que brotam do retculo e se fundem face cis, ou de
entrada, do Golgi. Depois de passar atravs das lamelas mediais, as protenas saem
em vesculas que brotam na face trans ou de sada do Golgi.
3. Porque os acares precisam ser acrescentados e cortados na ordem certa, caso
contrrio a protena no ser corretamente endereada.
4. a) Glicosilao de protenas consiste em acrescentar rvores glicdicas a
determinados aminocidos da cadeia protica.
b) Participar da sntese de proteoglicanas, adicionando grupamentos sulfato
a protenas.
c) distribuir as macromolculas provenientes do retculo endoplasmtico entre
a membrana plasmtica, onde tais molculas se incorporaro ou sero secretadas;
ou vesculas de secreo que se acumulam no citoplasma esperando um sinal para
exocitarem seu contedo; ou lisossomos.
5. Tipo N- comea no retculo. Os acares se ligam sempre ao aminocido
asparagina. Tipo O- comea no Golgi. Os acares se ligam a um aminocido
treonina ou serina.
Aula 18
1. Erro na correta seqncia de aminocidos e no dobramento da protena, expondo
stios hidrofbicos e tambm impedindo a correta glicosilao da mesma.
2. So protenas que, com gasto de ATP, se ligam a cadeias proticas em formao,
ajudando no seu correto enovelamento. Porque quando a clula sofre um choque
trmico aumenta a sntese de protenas com defeito e, conseqentemente, tambm
aumenta a quantidade citoplasmtica de chaperonas que tentam consertar essas
protenas.
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Aula 19
1.
a) Molculas pequenas e hidrofbicas, como O2, CO2, NO.
b) Acares, ons e outras molculas pequenas e hidroflicas.
c) Macromolculas (protenas, polissacardeos) ou microorganismos (bactrias,
fungos etc.).
2. Nutrio e defesa do organismo.
3. Principalmente protozorios e clulas do sistema imune, mas quase todos os
tipos celulares podem, a princpio, fagocitar.
4. Na pinocitose so englobadas pequenas pores de fluido extracelular, formando
vesculas menores que 150 nm. Na fagocitose so internalizadas partculas maiores
e o vacolo endoctico mede 250 nm ou mais.
5. Molculas de superfcie, como acares ou anticorpos aderidos superfcie da
clula-alvo.
6. So vacolos que englobam grande quantidade de fluido extracelular pela
projeo de um pseudpodeo para a face dorsal da clula. Alm de aquisio de
nutrientes, clulas do sistema imune fazem um patrulhamento por amostragem,
detectando possveis molculas estranhas.
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Aula 20
1. Em ambas, a vescula endoctica possui o mesmo tamanho, mas na endocitose
mediada por receptor h muito mais partculas endocitadas em cada vescula. Em
outras palavras, a eficincia maior, pois as partculas so concentradas na rea
de membrana que dar origem vescula endoctica.
2. Sob o lado citoplasmtico da membrana organiza-se uma rede de molculas de
clatrina. Essas molculas de clatrina se ligam a protenas adaptadoras, as adaptinas,
que por sua vez se ligam aos complexos receptor-ligante.
3. A molcula de clatrina se parece com uma estrela de 3 pernas e o polmero forma
hexgonos e pentgonos, se fechando numa esfera, como uma bola de futebol.
4. Ela estrangulada pela protena dinamina.
5. O endossoma inicial formado pela fuso de vrias vesculas endocticas, j
sem o revestimento de clatrina, com um compartimento com pH levemente cido
(6,5).
6. Os ligantes se desligam de seus receptores. Estes ltimos se destacaro e
formaro vesculas de reciclagem, voltando membrana, onde podero capturar
mais ligantes. Os ligantes prosseguiro para outro compartimento.
7. A presena de uma protena transmembrana que importa prtons do citoplasma
para esse compartimento por transporte ativo.
8. um compartimento um pouco mais cido que o endossoma inicial (pH 6,0)
para onde so conduzidos os ligantes do endossoma inicial e que recebe enzimas
lisossomais recm-sintetizadas.
9. Elas so sintetizadas no retculo e no Golgi, como todas as protenas de secreo,
e contm um sinal caracterstico: a manose 6-fosfato.
10. Porque a membrana interna dos lisossomas muito glicosilada, e os lisossomas
no possuem a enzima que digere o ltimo acar da rvore glicdica, o cido silico,
impedindo, assim, as outras enzimas de alcanar a membrana do lisossoma.
11. Quando uma mutao faz com que enzimas lisossomais sejam defeituosas
(podem no funcionar, podem no ter seqncia de endereamento correta), os
substratos que elas deveriam digerir acabam se acumulando no citoplasma ou no
meio extracelular.
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I SBN 85 - 89200 - 63 - 9
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