Indudablemente, lo que
Addison describe es la formacin del conglomerado de fibrina y plaquetas, a las que llama
molculas, y tal vez fue uno de los primeros investigadores en haber observado
directamente al microscopio el proceso de formacin de un cogulo (Figura 1).
2b
2a
3
4e
4c
4d
Varios de los trabajos pioneros sobre las plaquetas mencionan al francs Alfred
Donn, como el primer autor que report su presencia en la sangre. Durante una sesin
de la Academia de Ciencias de Pars en 1842, Donn report que en la sangre existen tres
tipos de glbulos: los rojos, los blancos y los pequeos glbulos (globulinas); ms tarde
ampli la descripcin en su libro Curso de Microscopa, publicado en 1844, y mencion a
las globulinas como un elemento morfolgicamente diferente; pens que eran
precursores de los glbulos blancos y compar su apariencia integral a la de la leche. En
su descripcin dice: estos glbulos (globulinas) muestran una gran diversidad en la
As se
cells, que son las clulas hematopoyticas ms indiferenciadas, con capacidad de autoreplicarse y diferenciarse hacia lneas celulares mixtas, como la lnea megacarioctica. Los
progenitores megacariocticos de lnea mixta son clulas hematopoyticas con capacidad
de originar elementos de varias lneas celulares, entre ellos, los megacariocitos.
El proceso comienza con la fase mittica, en la que las clulas progenitoras
megacariocticas se multiplican, y prosigue con una fase endomittica en la que se
producen mitosis nuclear y separacin de cromatinas, pero sin divisin celular. Las
sucesivas duplicaciones del ADN originan unas clulas poliploides de gran tamao, los
megacariocitos. Una vez alcanzada la ploida definitiva, en la fase final de la
megacariocitopoyesis, se produce la maduracin del citoplasma megacarioctico, que dar
lugar, mediante el proceso de la trombocitopoyesis, a la formacin y liberacin de
plaquetas (Italiano y col., 2007).
GRNULO
LISOSOMAL
GRNULO
SISTEMA CANALICULAR
CONECTADO A SUPERFICIE
GRNULO
10
11
TR
TR
Figura 8. Estructura cristalogrfica del complejo GP Ib IX V y sus ligandos (Munday y col., 2003)
Panel A: GP Ib IX V; Panel B: Sitio de unin al VWF; Panel C y D: Sitios de unin a TR.
13
14
e- El complejo GP Ia/IIa (21) une Col (Figura 13), mientras que GP Ic/IIa y GP Ic *
/IIa (51, 61) unen laminina y fibronectina, respectivamente. Otra forma del complejo
15
53, est presente sobre la superficie en muy baja concentracin (aproximadamente 100
copias por plaqueta) y une protenas adhesivas tales como fibringeno, fibronectina y VWF
(Coller y col., 1991). (Figura 11)
1.2.2.3. Grnulos
Los grnulos son los ms prominentes y los que se encuentran en mayor nmero,
entre 50 a 80 por plaqueta, aproximadamente. Se forman durante la maduracin temprana
de los megacariocitos y aparecen en la malla trans-Golgi en forma de pequeas vesculas
y de grnulos inmaduros que transitan a travs de cuerpos multivesiculares hasta alcanzar
su tamao y densidad definitiva (Heijnen y col., 1998).
Morfologa: Los grnulos maduros son generalmente redondos u ovoides, su
dimetro es de 200 a 500 nm y estn rodeados por una unidad de membrana. La
ultraestructura es muy caracterstica, la matriz puede dividirse en tres zonas con diferentes
densidades (Harrison y col.,1993). En la zona nucleoide oscura, se observa co-localizacin
de proteoglicanos con protenas plaquetarias especficas tales como la -trombomodulina
y el factor plaquetario cuatro (PF4). En la zona clara, localizada en la periferia y en forma
opuesta a la anterior, contiene una a cinco estructuras tubulares de 20 a 25 nm,
regularmente espaciadas y alineadas (Cramer,1985). En estas estructuras se observa
colocalizado el VWF (Cramer y col.,1986) en su forma multimrica de alto peso molecular
(Wilbourn y col.,1993). Finalmente, una tercera zona intermedia est asociada con la
marcacin para fibringeno, trombospondina, albmina y factores de crecimiento. (Figura
13)
18
L
I
N
19
A
A: En zona lumnica las
flechas marcan grupos
de estructuras tubulares
(corte transversal), de
multmeros de alto peso
molecular del FVW.
B: En zona nucleoide
las flechas sealan
inmunomarcacin de
-trombomodulina
C: En zona
intermedia, las
flechas sealan
inmunomarcin
para fibringeno.
D
D: En membrana
las flechas indican
inmunomarcacin
de gliprotenas
(GPIIbIIIa).
20
Son
organelas
de
almacenaje
de
serotonina,
(un
potente
21
22
1.2.2.5. Lisosomas
Morfologa: Son grnulos pequeos con un dimetro inferior a 300 nm, poseen una
estructura homognea y se encuentran en nmero reducido. La funcin de las enzimas
lisosomales durante la activacin plaquetaria est dada por sus interacciones con la pared
vascular y por la digestin de los componentes de la matriz subendotelial. Dentro de la
plaqueta cumplen una funcin autofgica eliminando fragmentos citoplasmticos. Distintas
GPs, como las protenas lisosomales-asociadas a la membrana (LAMP-1, LAMP-2) y
CD63, estn presentes en la membrana lisosomal y son redistribuidas a la superficie
despus de la activacin plaquetaria producida por estmulos fuertes como la TR.
1.2.2.6. Peroxisomas
Adems de los tres tipos de grnulos descriptos, mediante tcnicas citoqumicas se
han observado actividades de peroxidasa y catalasa, lo que posiblemente indica la
existencia de pequeos grnulos similares a los peroxisomas descriptos en otros tipos
celulares.
1.2.2.7. Citoesqueleto / protenas motoras
El citoplasma est organizado espacialmente por una malla de protenas
estructurales llamada en su conjunto citoesqueleto, que est compuesta principalmente
por tubulina y polmeros de actina (Fox y col., 1993). Cumple una funcin dual, tanto
esttica como dinmica. Las plaquetas no estimuladas circulan en forma discoidea y
cambian a esfricas cuando son activadas, lo que permite asegurar una funcin
hemosttica correcta. El citoesqueleto est formado por dos estructuras: un conjunto de
microtbulos cercano a la membrana y una malla densa de filamentos de actina (White,
1984).
23
24
25
26
27
receptor para fibringeno (Shattil y col.,1987). Otro producto de la hidrlisis catalizada por
la PLC es el inositol-fosfato, que se une al sistema tubular denso y estimula la liberacin
de Ca2+ (Brass y col., 1985). Adems, la fosforilacin del fosfatidil-inositol en la porcin D-3
del anillo de inositol producida por otra quinasa, la fosfatidil inositol 3 quinasa (PI3K) es
importante en la regulacin de la activacin de la integrina IIb 3 (Kucera y col.,1992). El
segundo mecanismo involucra la va de los eicosanoides. Se inicia por la fosfolipasa A2
(PLA2), que libera AA de los fosfolpidos de la membrana plaquetaria (Leslie, 1997), lo que
constituye el paso limitante para la sntesis de prostanoides y leucotrienos.
El incremento intracelular de los niveles de Ca2+ mediado por IP3, est
directamente relacionado con la activacin plaquetaria, dado que muchas de las enzimas
comprometidas en los mecanismos de transduccin de seales, tales como PLA2, PLC y
la quinasa de la cadena liviana de la miosina son dependientes de Ca2+.
En resumen, la funcin plaquetaria involucra un conjunto de etapas, cambio de
forma, secrecin y activacin de sitios de unin a ligandos en la integrina IIb3, todas
relacionadas al proceso de adhesin. El resultado final ser la interaccin plaquetaplaqueta y la formacin del tapn hemosttico formado por los agregados plaquetarios. La
consolidacin del trombo requiere de la accin conjunta de dos receptores plaquetarios
centrales, el GPIIb/IIIa y el GPIb/IX/V y de sus principales ligandos, el fibringeno y el
VWF (Ruggeri y col., 1999; Nurden, 2008). Figura 17.
29
MICRO PARTICULAS
PLAQUETARIA
CELULAS
ENDOTELIALES
CONSOLIDACION
DEL TROMBO
CELULAS
ENDOTELIALES
LEUCOCITOS
PLAQUETA
PLAQUETAS
ADHESION
ACTIVACION
AGREGACION
Contraccin
Miosina IIA+Rho kinasa
FLUJO
EMPAQUETAMIENTO
NURDEN AT, 2008
30