Amilasa Salival
ndice
Introduccin
Pginas 3-4
Pgina 5
Materiales
Pgina 6
Mtodo experimental
Pginas 7-8
Clculos y Resultados
Pginas 9-10
Discusin
Pginas 12-13
Conclusin
Pgina 14
Cuestionario
Pgina 15
Bibliografa
Pgina 16
Introduccin
Las enzimas son catalizadores especficos importantsimos en la regulacin de la
qumica de las clulas y los organismos. La catlisis es esencial para hacer que
muchas reacciones bioqumicas de importancia crucial se produzcan en
condiciones fisiolgicas a velocidades tiles. Una reaccin que requiere de
muchas horas para completarse no puede ser til, desde el punto de vista
metablico.
La actividad enzimtica tambin puede ser afectada por diversos factores, como
la temperatura, debido a que la enzima presenta una estructura proteica el
aumento de temperatura puede en algunos casos aumentar su velocidad, pero
tambin puede ser desnaturalizada si aumenta mucho, volviendo a su estructura
primaria y perdiendo su funcin biolgica. Existe la temperatura ptima en la
enzima que se presenta cuando est en su mxima actividad. Otro factor
importante es el pH, que es caracterstico en cada enzima donde pueda realizar su
funcin y cualquier cambio puede afectar la velocidad de la reaccin. Existen
tambin sustancias qumicas que pueden aumentar la actividad enzimtica o
disminuirla, constituyendo otro factor principal.
En este prctico se trabaj con la -amilasa, que es una enzima que degrada
almidn y es la principal amilasa encontrada en humanos y otros mamferos.
Aunque se encuentra en muchos tejidos, la amilasa es ms abundante en el jugo
pancretico y saliva.
La amilasa salival tiene la funcin de catalizar la reaccin de hidrlisis de los
enlaces 1-4 del componente -amilasa al digerir el glucgeno y el almidn para
formar azcares simples.
3
Materiales
1 Gradilla
10 tubos de ensayo
2 micropipetas (200 y 1000 l)
3 vasos de precipitado (50 o 100 ml)
Bao de hielo (0C)
Bao termorregulador (90)
Estufa a 37C
Cubetas para espectrofotometra
Espectrofotmetro
Soluciones y Reactivos
Solucin de almidn al 2%
Lugol
Solucin salina fisiolgica
Agua destilada
Saliva humana
Mtodo experimental
6
Tubo
I
II
III
IV
V
Agua destilada
4,500
4,250
3,250
2,000
750
Almidn 2% (l)
0
250
1,250
2,500
3,75o
Concentracin
0,00
0,10
0,50
1,00
1,50
Clculos y Resultados
Tubo
Agua destilada
I ( Blanco )
II
III
IV
V
4500
4250
3250
2000
750
Almidn 2%
(l)
0
250
1,250
2,500
3,750
Concentracin %
Absorbancia 590 nm
0,00
0,10
0,50
1,00
1,50
0
0,017
0,1
0,247
0,457
Experimento 1:
Experimento 2:
2 0,0382 / 3,142 = 0, 62
Discusin
La elevacin de la temperatura incrementa la velocidad de una reaccin catalizada
por enzimas. Al principio la velocidad de reaccin aumenta cuando la temperatura
11
Conclusin
13
Cuestionario
1.
Las enzimas se dividen en grupos, que definen sus funciones con mayor
precisin. Entre las principales clases estn las Hidrolasas que catalizan
rupturas hidrolticas. La amilasa pertenece a la clase de hidrolasas , ya
que tiene la funcin de catalizar la reaccin de hidrlisis de los enlaces 14
del componente amilasa al digerir el glucgeno y el almidn para formar
azcares simples.
2. Es la amilasa una enzima proteica simple o compleja?
Las enzimas se clasifican segn su composicin. Una enzima que posee
solo una protena recibe el nombre de enzima simple. Tambin existen las
enzimas complejas, que estn compuestas de una parte proteica y otra no
proteica , a la que se le llama cofactor , que puede ser un grupo prosttico
o una coenzima. Muchas enzimas utilizan molculas pequeas unidas, que
se denominan coenzimas, para facilitar la catlisis. La amilasa es compleja
pero la actividad enzimtica la transforma en simple.
3. Se afirma en internet que La enzima humana de las amilasas alfas
es una metaloenzima de calcio, totalmente incapaz de funcionar en
ausencia de calcio Es correcta esta afirmacin? Cmo podra
verificarlo?
Las - amilasas son metaloenzimas que tienen al menos un ion
calcio por cada molcula de protena. Este calcio es esencial para su
estabilidad y para el mantenimiento de su actividad enzimtica. El
nmero de calcios ligados a su molcula vara de uno a diez. Todas
ellas son estables en un rango de pH que va de 5,5 a 8,0.
Se podra verificar a travs de un examen de sangre u orina ya que
el incremento de la actividad srica de la -amilasa observada en las
afecciones ms comunes del pncreas, se debe a un escape de la
enzima en el tejido intersticial y tejido peritoneal con mayor absorcin
a travs del sistema linftico y venas.
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