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Apndice A. Seleccin de un modo de lectura.

Modo de transmisin
Los espectrofotmetros spectronic 20 miden la cantidad relativa de luz transmitida,
produciendo los resultados en transmisin. El modo de transmisin es til para la
calibracin, pruebas de perdida de energa radiante y estudios de filtro. Adems,
concentraciones muy bajas pueden ser medidas con mayor sensibilidad en el
modo de transmisin. Cuando el modo de transmisin es usado, los conjuntos de
reactivo en blanco 100% T, y los resultados para soluciones estndar y las
muestras desconocidas son obtenidas como % de transmitancia.
Una curva estndar puede ser construido sobre papel semi-logaritmico trazando el
por ciento de transmitancia en el eje logartmico versus la concentracin de
soluciones estndar conocido en el eje lineal. La mejor lnea es trazada a travs
de estos puntos. La concentracin de muestras desconocidas puede ser
determinada localizando el valor de la concentracin que corresponde al
porcentaje de la transmitancia de lo desconocido en las curvas estndar.
Modo de absorbancia
Normalmente, el operador quiere resultados en absorbancia por correlacin
directa de concentracin por la ley de Beer: A= abc. Resultados en porcentaje de
transmitancia se pueden convertir o los valores de absorbancia por uso de tablas
de conversin de transmitancia-absorbancia o mediante la frmula A= -log 10 T.
Resultados en absorbancia pueden ser graficados contra la concentracin de
estndares conocidos en papel grafico rectilneo. La mejor lnea es trazada a
travs de estos puntos para construir una curva estndar.
La concentracin de desconocidos pueden ser determinados por la localizacin
en la curva estndar el valor de la concentracin que corresponde a la
absorbancia de la desconocida.
Para eliminar %T a A clculos, cada modelo del instrumento permite la conversin
de valores de transmitancia a absorbancia.
El SPECTRONIC 20 tiene una escala de absorbancia marcada con los valores
correspondientes a % de transmitancia. El operador puede simplemente leer la
escala de absorbancia y utilizar estos valores para construir una curva estndar
como se describe ms arriba.
El ESPECTRONIC 2OD ofrece una precisa conversin electrnica de
transmitancia a absorbancia. Cuando el modo de absorbancia es usado, la
referencia de conjuntos en blanco .000A, y los resultados por estndares y

desconocidos son obtenidos en absorbancia. Resultados en absorbancia pueden


ser relacionados con la concentracin de la ley de Beer, A= abc, si la tiesura y
trayectoria son conocidas, o por construccin de una curva estndar como se
describe ms arriba.
Mediciones de absorbancia son utilizados para estudios de cintica y para
sistemas de reaccin que no obedecen la ley de Beer y por lo tanto tienen
parcelas estndar no-lineal.
Modo de concentracin
El SPECTRONIC 20D proporciona una lectura ms cmoda con el modo de
concentracin, lo que elimina la necesidad de construir una curva estndar. El
instrumento electrnico convierte los resultados en absorbancia a unidades de
concentracin multiplicando el valor de la absorbancia por el inverso de la
pendiente de la curva estndar [1/ab]. Tenga en cuenta que el modo de
concentracin solo puede ser utilizado si la linealidad de la curva estndar se ha
verificado para las condiciones de prueba que utiliza.
Estas condiciones de prueba incluyen onda, rango de concentracin de inters y
procedimiento analtico. Adems, el modo de concentracin puede ser usado
solamente si la curva estndar tiene una pendiente positiva (i.e... absorbancia
incrementa con la concentracin)
Para medir concentracin, primero definir el instrumento en el modo de
absorbancia y defina 0.000A, a continuacin, cambie a modo de concentracin
utilic el conjunto blanco de reactivos 000C. (Un verdadero blanco de reactivo, no
solo reactivo solo debe ser utilizado). Utilizando soluciones estndar conocidas,
introducir el factor 1/ab que convierte absorbancia a concentracin, c= 1/ab x A.
NOTA
No es realmente necesario conocer el factor 1/ab porque este factor es introducido
en el instrumento cuando la concentracin control de ajuste es utilizado para
ajustar la pantalla digital para leer la concentracin del estndar (ver
funcionamiento detallado para situarla instruccin)
Concentracin de factor funcin de comprobacin
Para verificar que las condiciones de funcionamiento no varan entre los lotes de
reactivos o de un da a otro, utilizar la concentracin de factor funcin de
comprobacin de la siguiente manera: despus de que el modo de concentracin
se ha puesto en marcha con soluciones estndar, pulse el selector de MODO
hasta que el factor de control de las luces LED y leer y grabar el factor dado en la

pantalla digital. Cada vez que nuevas soluciones estndar se utilizan para una
misma prueba (como, por ejemplo, de un nuevo lote de reactivo para la
configuracin del instrumento) pulse el selector de MODO hasta que el factor de
control de las luces LED y nota el factor en la pantalla digital.
Un cambio en el factor indica un cambio en la pendiente de la curva estndar
debido a la variacin en las condiciones de funcionamiento. Se recomienda que un
estndar siempre se utilice para establecer el modo de concentracin. El operador
puede elegir, sin embargo, para establecer el espacio en blanco a 000A, a
continuacin, cambie al modo de concentracin.

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