Anda di halaman 1dari 6

A

Mtodos de Isolamento de Gomas


Naturais: Comparao Atravs da
Goma do Cajueiro
(Anacardium occidentale L)
Judith Feitosa Rodrigues*, Regina Clia M. de Paula, Snia M. O. Costa
Resumo: Dois mtodos de isolamento de gomas foram comparados, o Rinaudo-Milas e o Anderson. A goma do
cajueiro do Nordeste (Anacardium occidentale L.) foi utilizada como substncia-teste. Omtodo Rianudo-Milas foi
efetuado atravs de triturao, dissoluo em H20com ajuste de pH e temperatura ambiente ambiente, filtrao e
precipitao com EtOH. Omtodo Anderson foi desenvolvido atravs de: triturao, dissoluo em H20 fria, filtraes,
dilise e liofilizao. As amostras isoladas foram analisadas em seus teores de umidade, cinzas, protena e acares
presentes. Oteor de cidos glicurnicos na forma cida esalina ea viscosidade intrnseca tambm foram
determinados. Omtodo Rinaudo-Milas foi considerado o melhor devido a maior rapidez do processo, maior rendimento,
menor possibilidade de contaminao emaior homogeneidade do material isolado. Brancura do slido, solubilidade
em H20 e transparncia da soluo foram caractersticas observadas nas gomas isoladas pelos dois mtodos.
Palavras-Chave: Mtodo de isolamento, goma, polissacardeo, cajueiro, Anacardium occidentale L.

INTRODUO
Gomas: Propriedades gerais
Gomas podem ser definidas genericamente como
substncias polimricas que, em solvente ou agente de inchamento apropriado e mesmo a baixas concentraes,
so capazes de formar disperses ou solues altamente
viscosas ou at mesmo gis. Com esta definio, o termo
aplica-se auma vasta variedade de substncias, incluindo
hidrocarbonetos de alto peso molecular, borrachas, protenas, polissacardeos eseus derivados, alm de alguns polmeros sintticos.[1 J.
Industrialmente, no entanto, o termo goma, mais especifico, eest associado apolissacardeos eseus derivados. Osolvente ou agente de inchamento , neste caso, a
gua.

As gomas industriais podem ser classificadas em naturais emodificadas. As naturais podem ser obtidas de exsudatos de rvore, de sementes, de algas ou por fermentao microbiolgica. As modificaes so as derivadas de
polissacarrdeos insolveis, como por exemplo, a celulose. A tabela 1 apresenta exemplos de gomas industriais
classificadas pela fonte.
Gomas so substncias incolores, inodoras, inspidas
eno txicas [1 J. Elas so, essencialmente, no calricas,
exceto oamido e seus derivados. A maioria delas, apesar
de sofrer hidrlise cida e enzimtica, passa pelo trato
gastro-intestinal com pouca ou nenhuma modificao [2J.
A hidrlise cida necessita de uma acidez maior do que a
do suco gstrico e/ou de um tempo de permanncia maior no
estmago. Ahidrlise enzimtica, quando ocorre, em pequena extenso, pois no existem enzimas no trato gastro-intestinal capazes de hidrolisar amaioria dos pol isacardeos [2J. ~

Judith Feitosa Rodrigues*, Regina Clia M. de Paula, Snia M.O. Costa. - DeptO de Qumica e Inorgnica, Universidade Federal do Cear, UFC, Campus do Piei, CP, 12.200, CfP 60.021-000 - Fortaleza-Cear (mandar correspondncia para*).
Polmeros: Cincia e Tecnologia - Jan/Mar-93

31

Mtodos de isolamento

TABELA!

CLASSIFICAO DAS GOMAS


INDUSTRIAIS QUANTO AFONTE [1]
Gomas naturais

Gomas modificadas

Exsudato de Plantas
Goma arbica
Gomacaraia
Goma tragacanto
Goma do cajueiro
Extradas de Algas
gar
Alginato
Carragenana
Extradas de Sementes
Gomaguar
Goma do marmeleiro
Fermentao microbiolgica
Dextrama
Xantana

Carboximetilcelulose
Hidroximetilcelulose
Hidroxietilcelulose
Carboximetilamido
Acetato de amido
Hidroxietilamido
Hidroxipropilamido
Carboximetilguar
Alginato de propileno glicol

Essas propriedades, aliadas a outras mais especficas, conferem s gomas inmeras aplicaes tecnolgicas. As principais indstrias consumidoras de gomas
hidrossolveis so: a de detergentes, a txtil, a de adesivos, a de papel, a de tintas, alm da alimentcia, farmacutica e de cosmticos [3]. Nestas indstrias elas
so usadas como agentes espessantes, gelificantes,
emulsificantes, floculantes, clarificantes, encapsuladores e controladores de caloria. So empregadas,
tambm, como adesivo, inibidor de cristalizao, protetor coloidal, formador de filme, estabilizador de espuma e de suspenso [1].

objetivo do isolamento de uma substncia qualquer


obter um material quimicamente puro e homogneo ecom
um rendimento maior possvel.
Os polissacardeos naturais, gomas p. ex., frequentemente vm misturados com sais inorgnicos e outros materiais de baixo peso molecular e, tambm, com espcies
como protenas, ligninas, cidos nuclecos, que deles precisam ser separados [4,5].
Na busca de pureza mxima do material, muitas vezes
so aplicados tratamentos drsticos que descaracterizam
omaterial original, alterando asua estrutura ou asua massa molecular mdia. Estas alteraes do polissacardeo,
ditas como degradao, ocorrem em presena de cido, de
enzimas e, menos frequentemente, de base, e devem ser
evitadas.Vrios so os mtodos de isolamento efracionamento de polissacardeos. Eles envolvem etapas de separao cromatogrfica, complexao com ons metlicos ou
sais de.amnio quartenrio, precipitao com etanol ou
acetona, liofilizao, entre outras. Detalhes destes mtodos podem ser encontrados nos trabalhos de Aspinal [5] e
Pittet [6].
Oisolamento de goma apresenta os mesmos problemas bsicos do isolamento de polissacardeo, mas com
algumas peculiaridades. Anderson [7] e Rinaudo-Milas
[8] isolam as gomas utilizadas em seus inmeros trabalhos de pesquisa atravs de dois mtodos distintos.
A tabela 2 apresenta as principais distines entre
estes mtodos.
A goma do cajueiro um heteropolissacardeo ramificado contendo como constituintes principais galactose (61%). arabinose (14%). ramnose (7%). glicose
R'

16

gal
I

gal
I

1-

16

R-->3 gal

gal 1-->3 gal


I

1-

1-

ga16.--R
I

gal 6.-- I gal


I

1-

1-

1gal I -->
6

3 gal I -->

1"

1"
I
glu

I
gal

6
3 gal 1 -->

3gal I -->

3.--1 gal 6.--1 gal

1"
1
R

6
3gal I -->

3gal I

-->

1"

gal 3.-- 1 gal

1"

1"

1-

1-

3gal I -->

I
gal

I
gal

3
gal6.--R
I

gal
I

gal

- - -

1-

6
3gal I -->

gal
I

gal 3.-- R

1"

1"

I
gal

I
gal
6

1"
I
glu.a.

Fig. 1. Um possvel fragmento estrutural da goma do cajueiro. R representa D-manose, D-xilose- L-ramnose, L-arabinose ou cadeias de arabinose com ligao 1,2. R' representa D-glicose ou cido D-glicurnico [91.

32

Polmeros: Cincia e Tecnologia - Jan/Mar-93

(8%). cido glicurnico (5%). alm de pequenas quantidades 2% de cada) de manose, xilose e cido metilglicurnico (figura 1[9J. Esta goma (de origem Papuana
e Indiana) foi uma das isoladas por Anderson atravs do
seu mtodo. Ela de fcil obteno, j que o Cear o
maior produtor de cajueiro do Brasil [10L e o conhecimento adquirido no seu isolamento poderia trazer
benefcios para a regio. Estas razes motivaram a escolha da goma do cajueiro como substncia-teste para
a comparao entre os mtodos de Anderson [7J e
Rinaudo-Milas [8J.

TABELA 2
DISTINO ENTRE OS MTODOS DE ISOLAMENTO DE
GOMAS UTILIZADAS POR ANDERSON [7] E RINAUDO-MILAS [8]
Anderson[7]

Rinaudo-Milas[8]

Filtrao

48
IOC
sem ajuste
papel

24
28C
ajustado pl7,O-7,S
vidro sinterizado
e membrana

Separao de compostos de
baixo peso molecular
Recuperao da goma em p

dilise
liofilizao

Secagem

liofilizao

Etapas
tempo(h)
temperatura
pH

Dissoluo
emH20

Precipitao com
etanol
ao ar

PARTE EXPERIMENTAL
A goma bruta foi colhida em setembro de 1988 de exsudatos naturais de cajueiros do tipo comum, com cerca
de 20 anos, produtores de fruto de cor laranja. Os cajueirosso oriundos de plantao experimental da EMBRAPA. situada no municpio de Pacajus-CE. Os ndulos mais
claros e isentos de casca foram selecionados, secos triturados antes de serem submetidos aos mtodos de isolamento.
Omtodo Rinaudo-Milas [8J foi utilizado como sugerido
pelos autores com a diferena apenas na filtrao, que foi
efetuada somente em funil de vidro sinterizado, sem utilizao de membrana (fluxograma 1).
No mtodo Anderson a modificao foi tambm
efetuada na filtrao, prevista para ser feita em papeI. mas realizada em funil de vidro sinterizado (fluxograma 2).
As amostras isoladas foram analisadas no que se refere
a seis teores de unidade, de cinza e de N (protena). presena de alguns monossacardeos e ao % de cidos urnicoso Aviscosidade intrnseca tambm foi determinada.
Oteor de umidade foi obtido por diferena de peso
aps aquecimento a 105C e o teor de cinza aquecimento em mufla a 700C ambos efetuados at peso constante. Oteor de protena foi calculado a partir do resultado
de anlise elementar de N, fazendo-se uso da relao
%Nx 6,25[11 J.
Todas as anlises foram feitas em duplicata.

GOMA BRUTA

t
TRITURAO

GOMA BRUTA
Soluo 4% em H 20
DISSOLUO
[ Meio Neutro
---------,,-,. I Temperatura ambiente

_F_IL_T_RA__A_0---J

t
TRITURAO

[L de vidro
Funil de vidro sinterizado

I [SOlUO
10% em H 0
Agitao por 48h
2

DISSOLUO

T=IOC
PRECIPITAO

FILTRAO

I [Funil de vidro sinterizado

PRECIPITAO

t
)ESCARTADO

[EtOH

L de vidro

t
FILTRADO

l
-

LAVAGEM

24h em H20 destilada

[2x24h em H 0 bidestiJada
- - - - - - I T=15C
DILISE

EtOH/H'O
EtHOAcetona

I[

LIOFILIZAO

SECAGEM

GOMA ISOLADA

t
GOMA ISOLADA

FILTRAO
[
- - - - - -I Funil de vidro sinterizado

[Rendimento 50%

[Rendimento 78%

Fluxograma1: Etapas do processo de isolamento da goma do cajueiro pelo mtodo Rinaudo-Milas.


Polmeros: Cincia e Tecnologia - Jan/Mar-93

Fluxograma 2: Etapas do processo de isolamento da goma do cajueiro pelo mtodo Anderson.


~

33

As titulaes condutomtricas com solues de HCI ou


NaOH foram efetuadas em um condutivmetro 8331 Micronal com eletrodo de platina, de constante 0,63cm-1
uma temperatura de 25,0 O, 1C.
Para anlise cromatogrfica, as amostras foram hidrolisadas com cido trifluroactico (TFA) 4N por 2,5h a 100C
em ampola de vidro selada. Os acares hidrolisados, livres
de excesso de TFA foram dissolvidos em MeOH/H 20
(80/20) e cromatografados em placas de slica gel 60 F254
Merck. Osistema de solvente utilizado foi lcool isoproplico, acetato de etila eH20 (7:2:1) ea revelao foi feita com
orcinol em cido feita orcinol em cido sulfrico. Utilizou-se
para comparao solues padro de galactose, arabinose,
glicose, manose, ramnose exilose, proveniente de Merck.
A viscosidade intrnseca foi determinada em NaCI1 M,
utilizando-se um viscosmetro Ostwald com dimetro de
capilar 0,8mm e com 150s. de tempo de escoamento para
H20 a 25,0+0,1 C.

RESULTADOS EDISCUSSO
Anlise das amostras de goma de cajueiro
Atabela 3 apresenta alguns dados caractersticas das
gomas isoladas pelos mtodos Anderson e Rinaudo-MiTABELA 3
COMPARAO ENTRE AS PROPRIEDADES DE GOMA
DO CAJUEIRO DO NORDESTE ISOLADA PELO
MTODOS RINAUDO-MILAS E ANDERSON

Cor do slido
Aspecto do slido
Aspecto da soluo
Rendimento
Unidade (%)
Cinzas (%)*
Nitrognio (%)*
Protena (%) (Nx6,25)
[l1]NaCIIM (mL/g)
Anlis dos acares
galactose
arabinose
ramnose
xilose
mamose
glicose
cidos glicurnicos (%)
forma salina
forma cida
Total

Mtodo Rinaudo-Milas

Mtodo Anderson

branca
p
lmpida
7S%
16,3 O,S
0,67 0,02
O,IS 0,05
l,l 0,2
S,S

branca
flocos
lmpida
50%
14,2 O,S
0,63 0,07
0,19 0,02
1,02 0,1
7,S

P
P
P
N
N
P

P
P
P
N
N
P

6,3
0,0
6,30,1

5,4
O,S
6,20,1

*corrigida umidade
P =presente
N =no detectado

las. Elas so similares em muitos aspectos. Ambas so

34

brancas, solveis em H20, formam solues lmpidas e


apresentam teores de cinza semelhantes. Os percentuais
de nitrognio so prximose dentro da faixa dterminada
por Marques eXavier[12].
Registra-se uma diminuio no teor de umidade da goma liofilizada (Anderson). o qual muito dependente do
tempo de exposio presso reduzida. Anderson, por
exemplo, obteve % da unidade de goma do cajueiro papuano de 7,9%[7].
As viscosidades intrnsecas so, tambm, diferentes. Oprocesso de recuperao da goma em p baseado na precipitao com etanol (mtodo Rinaudo-Milas)
pode ter ocasionado um fracionamento do material,
tendo sido recolhidas fraes de peso molecular maior.
No entanto, o isolamento, a 1 purificao e a 2 purificao da goma do angico[13] (processos sequenciados,
cada um deles envolvendo precipitao com etanol)
no resultaram em um material de peso molecular
crescente, o que evidencia a no ocorrncia de fracionamento. Caso ele tivesse ocorrido a viscosidade intrnseca da goma 2 purificada seria maior do que a goma 1 purificada que por sua vez seria maior do que a
goma isolada. As viscosidades determinadas foram
equivalentes.
Quanto as constituintes do heteropolissacardeos, verifica-se que os mesmos acares esto presentes nas
duas amostras da goma. Oteor total de cidos glicurnicos, tambm, o mesmo. A variao importante est na
proporo entre aforma salina eaforma cida, que foi determinada a partir das curvas apresentadas nas figuras 2
e 3. No caso da goma obtida pelo mtodo Rinaudo-Milas
todos os grupamentos RCOOH, existentes originalmente
na amostra, se apresentam neutralizados. Nenhuma inflexo observada na curva de titulao condutomtrica
desta goma com NaOH (figura 3). O mesmo no ocorre
com a curva correspondente goma obtida pelo mtodo
Anderson. Nesta goma, 13% dos seus resduos de cido
glicurnico permanecem ainda na forma cida, o que deve corresponder a uma diminuio da densidade de carga
da macromolcula. Menor a densidade de carga, menor a
repulso entre os grupos RCOO-, maior a possibilidade
das cadeias se enrolarem. E, portanto, menor aviscosidade intrnseca.
Comparao entre os mtodos
Alm da comparao entre as caractersticas das
amostras isoladas pelos dois mtodos essencial que se
faa, tambm, uma anlise sobre o desenvolvimento dos
mtodos, levando-se em conta rendimento, tempo gasto,
possveis problemas, etc.
O mtodo Rinaud-Milas foi aquele que proporcionou
um maior rendimento (78%) e que foi executado em um
menor tempo. Apesar destas vantangens, ele pode apresentar alguns problemas. Oprimeiro deles seria aperda de
Polmeros: Cincia e Tecnologia - JanfMar-93

90

GOO

- 500

VI

:i...
~

80

400

Vl

. '~ 300
::>

'" 70

u
Z
.<1:

200

f-

:>
o

100

60

50

600
~

40

500

:l..
~
u

400

0.1

0.2

0.3

0.4

05

0.6

0.7

0.6

.~

VOLUME DE NoOH 0.0102 M

.~ 300

em L I

::>

gu 200
Fig 3: Curva de titulaes condumtricas de amostras de
goma de Anacardium occidentale L. com Na OH:
., goma isolada pelo mtodo Rinaudo-Milas, 0,085 G
L1 goma isolada pelo mtodo Anderson, 0,1039 G.

100

1.0

2.0

3.0

4.0

5.0

6.0

VOLUME D~ Hei 0,0\03 M

Im L

Fig 2: Curva de titulaes condu mtricas de amostras de


goma de Anacardium occidentale L. com HC I :
, goma isolada pelo mtodo Rinaudo-Milas, 0,0884G
L1 goma isolada pelo mtodo Anderson, 0,0903G.

acares lbeis, ramnose, por exemplo, por ser a dissoluo efetuada temperatura ambiente (=28C). A anlise
qualitativa dos acares, revela, no entanto, a presena
de ramnose nas duas amostras de goma, oque indica que
tal perda no foi verificada. Osegundo problema seria o
fracionamento do material devido ao processo de recuperao de slido efetuado atravs de precipitao com etano!. Dados obtidos com a goma do angico[13] refutam tal
possibilidade.
Omtodo Anderson proporcionou um rendimento relativamente baixo (50%), provavelmente causado pela dissoluo parcial da goma bruta ou pela perda do material
durante a dilise. Ono ajuste de PH ea baixa temperatura de dissoluo devem ter contribudo, tambm, para este baixo rendimento. Um outro problema do mtodo a
possibilidade de formao de fungos durante as etapas de
dissoluo e dilise. Quando estas etapas foram feitas
temperatura ambiente observou-se, realmente, a formao de fungos na soluo. Um complicador adicional podePolmeros: Cincia e Tecnologia - JanfMar-93

ria ocorrer caso a filtrao fosse feita em papel, como sugerida pelo autor. Neste caso haveria a possibilidade de
contaminao com material celulsico, profundamente indesejvel em se tratando de isolamento de carboidrato.

CONCLUSO
Levando-se em conta todos os fatores relativos ao desenvolvimento dos processos es caractersticas dos materiais isolados chegou-se aconcluso que o mtodo RinaudMilas omais adequado para isolar gomas, principalmente,
se destinadas a estudo acadmico. A escolha do mtodo
mais adequado para fins industriais teria que levar em conta outros fatores, tais como viabilidade econmica, disponibilidade de equipamentos, etc, no considerados aqui.
Alm das boas caractersticas observadas tanto na goma obtida pelo mtodo Anderson quanto na Rinaud-Milas
(brancura do slido, boa solubilidade em H20, transparncia da soluo) algumas vantanges do mtodo Rinaud-Milas podem ser destacadas. So elas:
a) maior rapidez do processo
b) maior rendimento
c) menor possibilidade de contaminao, quer por fungos que por material celulsico
..

35

d) maior homogeneidade do material no que se refere


ao constituinte cido glicurnico, totalmente transformado para aforma salina.

3 - J. WELLS, "Cellular Microbial Polysaccharides", "Extracell.


microb. polysaccharides", ACS Symp. Series, 45, 299,
1977.

Vale ressaltar, no entanto, que o sucesso no isolamento de gomas pelo mtodo Rinaud-Milas concentra-se na
filtrao e secagem do material. A filtrao, assim como
as primeiras lavagens, no deve ser efetuada at a retirada completa do lquido, pois provocaria penetrao do ma~
terial no funil e agregao entre as prprias partculas do
polissacardeo. Somente na ltima lavagem (com acetona), afiltrao deve ser levada at ofinal.
Apesar do relativo sucesso do material isolado pelo
mtodo Rinaudo-Milas, uma goma mais pura etotalmente transformada em sal de sdio, muitas vezes necessria
para estudos mais refinados, s ser obtida com a execuo de trs etapas (uma de isolamento eduas de purificao) como sugerido pelos autores [8].

4 - J,F. KENNEDY e CA WHITE, "Bioactive Carbohydrates: In


Chemistry, Biochemistry and Biology", Ellis Horvvood
Ltda, Inglaterra, capo 4, 1983.
5 - G.O. ASPINALL, "The Polysaccharides" - vol. 1, Editor
G.O.Aspinall, Academic Press, New York, capo 2,1982.
6 - A.O. PITIET, "Methods in Carbohydrate Chemistry", vol. V,
General Polysaccharides", Editor R.L Whister, Academic Press, seco I, 1965.
7- D.M.WANDERSON, P.C:BELL eJ,R. MILLAR, Phytochemistry
13,2189,1974.
8- aI M. MILAS, "Polieletrlitos", ed. RAM.C. Groote eAAS.
Curvelo, USP, So Carlos, 1991; bl M. Rinaudo, Comunicao Pessoal.

AGRADECIMENTOS

Prof Marguerite Rinaudo (CNRS-Frana) pela demonstrao do mtodo. EPACE, empresa de Pesquisa
Agropecuria do Cear,' atualmente prtencente EMBRAPA, pelo fornecimento da gdmabruta eao CNPq pelo
apoio financeiro.
:' "
.

9 - D.MW. ANDERSON e P.C. BELL, Anal. Chimica Acta, 79,


185,1975.
10 - V.P.M.S. LIMA, "Cultura do Cajueiro no Nordeste do Brasil", 1 ed., Banco do Nordeste do Brasil, Fortaleza,
1988.
11 - 01. MARKS, R.B. BAUM e T. SWAIN, Analytical Biochem.,
147,136,1985.

REFERNCIAS B1BtlOGRFICAS

12 - M.R. MARQUES e J. XAVIER FILHO, Phytochemistry, 30,


1431,1991.

1 - J,N. BE MILLER, Industrial Gums, Encyclopedia of Polymer


Science and Engineering, John Wiley &Sons, 7, 589,1987.

13 - AG. da SILVA, "Goma do Angico (Anadenathera macrocarpa): isolamento, purificao e caracterizao", dissertao de Mestrado, UFC, Fortaleza, 1992.
~

2- R.L WHISTLER, "Industrial Gums-Polysaccharides and their


Derivatives", Editor R.L Whistler, 2 ed., Academic
Press, Londres, capo 1,1973.

36

Recebido em 14 de dezembro de 1992


Aprovado em 10 de maro de 1993

Polmeros: Cincia e Tecnologia - Jan/Mar-93