Aula Prtica
Tcnica de preparo de lmina
5. Os diferentes tipos de
incluses celulares (1)
- Observao e identificao atravs de mtodos histoqumicos de
incluses celulares de natureza polissacardica:
Observao de tipos de gros de amido morfologicamente
distintos em tubrculos (Solanum tuberosum) e sementes de
gramneas (Avena sp. e Tritium sp.) e leguminosas (Phaseolus
vulgaris); determinao da natureza destes por reaco com
soluto de Lugol e observao com o microscpio de polarizao;
Observao de esferocristais de inulina na raiz tuberosa
de Dhalia sp.; reaces com o soluto de Lugol.
Figura 1 Aspecto
observado,
a uma
ampliao
de 400x, de
uma
preparao
extempor
nea de
gros de
amido
extrados
do interior
da semente
de Avenasp
.
Legenda: 1.
Gros de
amido
compostos
2. Gros de
amido
corado pelo
Lugol.
Os gros de
amido
de Avena s
p. so
compostos
- formados
por vrias
unidades
simples.
Como se
verificar,
cada
espcie
possui um
tipo
morfolgic
o especfico
de gros de
amido.
Alguns dos
gros de
amido
foram
sujeitos
reaco
com a
soluo
iodoiodetada soluto de
Lugol,
qual
reagiram
positivame
nte, ficando
corados.
Tal deve-se
a que o
Lugol
identifica
exclusivam
ente o
amido.
Figura 2 Aspecto
observado,
a uma
ampliao
de 400x, de
uma
preparao
extempor
nea de
gros de
amido
extrados
do interior
da semente
deTritium s
p.
Legenda: 1.
Gros de
amido
simples
com hilo
central; 2.
Cristas de
cresciment
o; 3.
Camadas
de
cresciment
o; 4. Hilo;
5. Gro de
amido
corado pelo
Os gros de amido de Tritium sp. so simples - formados por
apenas uma unidade - com hilo central. Alguns dos gros foram
sujeitos reaco com soluto de Lugol, qual reagiram
positivamente, ficando corados.
Figura 3 Aspecto
observado, a
uma
ampliao de
400x, de uma
preparao
extempornea
de gros de
amido
extrados do
interior da
semente
de Phaseolus
vulgaris.
Legenda: 1.
Gros de
amido
simples com
hilo central
fendido; 2.
Cristas de
crescimento;
3. Camadas
de
crescimento;
4. Hilo
fendido; 5.
Gro de
amido corado
pelo Lugol.
Os gros de
amido
em Phaseolus
vulgaris so
simples com
hilo central
fendido.
Alguns dos
gros de
amido foram
sujeitos
reaco com
soluto de
Lugol, qual
reagiram
positivamente
, ficando
corados.
Figura 4 Aspecto
observado, a
uma
ampliao de
400x, de uma
preparao
extempornea
de gros de
amido
extrados do
interior do
tubrculo
de Solanum
tuberosum.
Legenda: 1.
Gros de
amido
simples com
hilo
excntrico; 2.
Gros de
amido
semicompost
os; 3. Gros
de amido
compostos; 4.
Cristas de
crescimento;
5. Camadas de
crescimento;
6. Hilo; 7.
Gro de
amido corado
pelo Lugol.
Os gros de
amido
em Solanum
tuberosumpo
dem ser
simples com
hilo
excntrico,
semicompost
os (com vrias
subunidades
sem uma
verdadeira
separao
entre elas) e
compostos.
Alguns dos
gros de
amido forma
sujeitos
reaco com o
soluto de
Lugol, qual
reagiram
positivamente
, ficando
corados.
Figura 5 Aspecto
observado, ao
microscpio de
polarizao e a
uma ampliao
de
aproximadament
e 300x, de uma
preparao
extempornea de
gros de amido
extrados do
interior do
tubrculo
de Solanum
tuberosum.
Legenda:
1. "cruz negra";
2. Cristas de
crescimento;
3. Camadas de
crescimento;
4. Hilo.
Atravs da
utilizao do
microscpio de
polarizao
possvel observar
um fenmeno
ptico designado
como a "cruz
negra"
produzido pelos
gros de amido,
que indica a
natureza
paracristalina
destes. Este
fenmeno devese anisotropia
destes (patente
tambm luz
natural, com as
cristas e zonas
de crescimento
diferenciadas),
ou seja, a uma
diferena na
velocidade de
propagao da
luz polarizada
por parte destas
estruturas.
Figura 6 Aspecto
observado, ao
microscpio
ptico (A) e ao
microscpio de
polarizao (B),
a uma ampliao
de 100x, de
esferocristais de
inulina numa
preparao
extempornea da
raiz tuberosa de
Dhalia sp.
Legenda:
1. Disposio dos
cristais de
inulina;
2. Massa
cristalina de
inulina;
3. Paredes
celulares;
4. Fenmeno
semelhante
"cruz negra".
A inulina uma
substncia
orgnica
semelhante ao
amido, no
possuindo no
entanto as
caractersticas
especficas deste
que permitem
ser corada pelo
Lugol, reagindo
negativamente a
este. solvel na
gua, pelo que a
raiz tuberosa da
planta deve ser
mantida em
lcool (no qual a
inulina no
solvel). Atravs
da utilizao do
microscpio de
polarizao
possvel observar
um fenmeno
ptico
semelhante
"cruz negra"
produzido pelos
gros de amido,
o que indicia a
natureza
paracristalina da
inulina. Alis,
quando
guardada
durante muito
tempo, na raiz
desenvolvem-se
grandes massas
cristalinas de
inulina pouco
distintas, pelo
que se
representa em 1
o aspecto que
teriam os cristais
com
desenvolvimento
mdio.