UREA (RATE)

Cat. No./Réf./Ref. No: 275-06 (10 x 6 .5 mL), 275-11 (20 x 20 mL), 275-13 (12 x 50 mL), 275-14 (1 x 2 00 mL)
Urea (Rate) Assay
Store at 2-8°C.
For the quantitative determination of
urea in ser um.
For IN VITRO diagnostic use.
Precautions: Avoid ingestion and
contact with skin and eyes. See
Material Safety Data Sheet.
See page 1
Trousse pour le dosage de l'uree Conjunto de ensayo de urea (Rate)
(cinetique)
Guardar a 2-8°C.
Conserver à 2-8°C
Para la determinación cuantitativa de la
Pour le dosage quantitatif de l'uree urea en suero.
dans le sérum.
Para uso de diagnóstico IN VITRO.
Pour dosages IN VITRO.
Precauciones: Evitar la ingestión y el
Précautions: Eviter l'ingestion et le contacto con la piel y los ojos.
contact avec la peau et les yeux. Voir
la fiche technique santé-sécurité.
Ver página 9
Voir la page 5

Reagents: Urea Reagent: a solution containing (after reconstitution) 0.37 mmol/L NADH, buffer (pH 7.6 at 25°C), 4 mmol/L 2-
oxoglutarate, 2.2 mmol/L adenosine-5!-diphosphate, >1300 U/L glutamate dehydrogenase, >20,000 U/L urease, a stabilizer, and a
preservative. Urea Standard: a solution containing 10 mmol/L (28 mg/dL) urea and a preservative.

ENGLISH
HISTORY

The measurement of urea nitrogen has traditionally been performed by either condensati on with di acetyl monoxi me or by conversion
of urea by urease to ammonia. Fearon (1) first proposed the diacetyl monoxime method in 1939. This colorimetric method has
limitations such as poor specificity and color instability. The use of urease in urea determinations was introduced by Marshall (2)
who measured the liberated ammonia by titration with acid. Ammonia produced by the urease action has also been measured by
Nesslerization techniques (3,4) and by the Berthelot reaction (5). These colorimetric methods lack specificity, require long incubation
periods, and require high temperatures.
Talke and Schubert (6) described the first totally enzymatic procedure for measuring urea. In this procedure, the urease reaction is
coupled to the concurrent amination of 2-oxoglutaric acid and the oxidation of NADH by glutamate dehydrogenase.
PRINCIPLE

Urease
Urea + H2O v 2NH3 + CO2 I

In the Talke and Schubert procedure, urea is first hydrolyzed by urease to give ammonia and carbon dioxide as in Equation I.
GLDH
+ +
NH3 + 2-oxoglutarate + NADH + H v L-glutamate + NAD + H2O II

In the second step of the process, the ammonia produced in the first
+ reaction reacts with 2-oxoglutarate and NADH in the presence
of glutamate de hydrogenase (GLDH) to yie ld glutamat e and NAD . The oxidation of NADH causes a decrease in absorbance at 340
nm which is proportional to the concentration of urea in the sample.
REAGENT PREPARATION
Prepare reagent by adding deionized water according to the volume stated on the vial label. Allow five minutes for reconstitution,
then mix gently.
REAGENT STABILITY AND STORAGE
The reagents included are stable until the expiry date stated on the labels at 2-8°C. The reconstituted reagent is stable for 7 days at
2-8°C and for 8 hours at 18-26°C.
REAGENT DETERIORATION
The reagent solutions should be clear. Turbidity would indicate deterioration. The initial absorbance of the reagent read against
deionized water at 340 nm should be 1.5 or greater to be considered suitable for use.
INSTRUMENTS
Any instrument with temperat ure control of ± 0. 5°C that is capable of read ing absorbance accu rately with a sensitivity of 0.001
absorbance at 340 nm may be used. The band width should be 10 nm or less, stray light 0.5% or less, and the wavelength accuracy
within 2 n m.
SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION

Fresh, clear, unhemolysed serum is the specimen of choice. The serum should be promptly separated from the clot. Fluoride is a
known inhibitor of urease; therefore, anticoagulants containing fluoride should be avoided.
INTERFERING SUBSTANCES
Urease is specific for urea; however, ammonia contamination will seriously affect the results obtained using this system. Analysis
should not be performed in close proximity to a urinalysis laboratory or in a lab using cleaning supplies containing ammonia.
A summary of the influence of drugs on clinical laboratory tests may be found by consulting Young, D.S. (7).
PROCEDURE

Materials Provided
The reagents necessary for the determination of urea are provided. Urea standard is included with catalogue numbers 275-11 and
275-1 3 only.
Materials Required
1. An instrument which meets the requirements stated in the Instruments Section.
2. 1 cm cuvettes or a flow cell capable of t ransmittin g light at 3 40 nm.
3. Test tubes of the appropriate size.
4. Pipettes of the appropriate size.
5. Deionized water.
6. An appropriate timer.
7. An appropriate water bath.
Conditions
Generic Automated
Wavelength . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm 340 nm
Temperature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30°C 37°C
Pathlength . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm
Mode . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Kinetic Kinetic
Reaction Time . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 minutes, 30 seconds 125 seconds
Sample Vol ume . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 :L 3 :L
Reagent Vo lume . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 mL 300 :L
Total Vol ume . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.01 mL 303 :L
Sample to Reagent Ratio . . . . . . . . . . 1/100 1/100
Procedure

1. Adjust the absorb ance reading at 340 n m on the spectropho tometer to 0.000 u sing deionized water as the blank.
2. Bring 1.0 mL reagent to 30°C in a cuvette.
3. Add 10 :L of standard or specimen.
4. Mix well and read the absorbance at 15 second intervals or use a recorder. Follow the reaction for 2.5 minutes.

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CALIBRATION
A urea standard is provided with catalogue number 275-11 and catalogue number 275-13 and is used as directed to calibrate the
procedure. A standard is not provided with catalogue number 275-06 or 275-14, however one should be used as directed to calibrate
the procedure.
QUALITY CONTROL
A normal and abnormal level control serum should be analyzed with each run of samples and the results should fall within plus or
minus two standard deviations of the established value.
CALCULATION AND RESULTS
Results
Urea is expressed as mmol/L (mg/dL BUN).
Calculation
Urea mmol/L (mg/dL BUN) = ) A/min. x concentration of the standard
) A/min. S

) A/min. = change in absorbance per minute of the unknown

) A/min. S = change in absorbance per minute of the standard

Example
Urea mmol/L (mg/dL BUN) = 0.060 x 10 mmol/L
0.100
= 6 mmol/L (16.8 mg/dL)
0.060 = change in absorbance per minute of the unknown
0.100 = change in absorbance per minute of the standard
10 mmol/L (28 mg/dL) = concentration of the standard
Limitations
A sample with a urea level exceeding the linearity limit should be diluted with 0.9% saline and reassayed incorporating the dilution
factor in the calculation of the value.
Severely icteric, hemolytic, or lipemic samples require the use of a sample blank which may be prepared using 10 :L of sample and
1 mL of deionized water.
EXPECTED VALUES (8)
2.9-9.3 mmol/L (8-2 6 mg/dL)
These values are suggested guidelines. It is recommended that each laboratory establish the normal range for the area in which it is
located.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
These performance characteristics were generated in DCL laboratories using automated procedures unless otherwise stated.

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Recovery Study
Urea was added to three pools of human sera to increase the urea concentration to 8.8, 18.5, and 20.4 mmol/L. The recovery of added
urea averaged 101%.
Linear Range
The generic procedure is linear to 30 mmol/L (84 mg/dL). Linearity using automated procedures will depend on the sample/reagent
ratio used.
Precision Studies
Day to day precision was established by assaying two control sera daily for 20 days.

Mean Standard Deviation Coefficient of Variation

Urea mmol/L %
mmol/L
Serum 1 5.4 0.16 3.0
Serum 2 18.4 0.32 1.8

Within run precision was established by assaying two pools of human sera fifty-four times each.

Urea Mean Standard Deviation Coefficient of Variation

mmol/L mmol/L %
Serum 1 5.4 0.15 2.8
Serum 2 18.1 0.43 2.4

Accuracy

A comparison was made between this urea method and another urea method using 89 samples. The correlation coefficient was 0.995.
Linear regression analysis gave the following equation:
This method = 1.01 (r eference method) - 0.45 mmol/L.

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FRANÇAIS
HISTORIQUE
L'évaluation quantitative de l'azote uréique s'effectuait traditionnellement soit par condensation avec le diacétyle monoxime, soit par
conversion de l'urée en ammoniac en présence d'uréase. Fearon (1) fut le premier à proposer d'utiliser le diacétyle monoxime, en
1939. Cette technique colorimétrique est cependant limitée à cause de sa faible spécificité et de l'instabilité du produit coloré obtenu.
C'est Marshall (2) qui a proposé l'emploi de l'uréase dans le dosage de l'urée; il dosait l'ammoniac libéré lors de la réaction par titrage
avec un acide. On pouvait également mesurer l'ammoniac par les techniques de Nessler (3,4) et selon la réaction de Berthelot (5).
Ces méthodes colorimétriques manquent de spécificité, requièrent de longues périodes d'incubation et des températures élevées.
Talke et Schu bert (6 ) ont décrit la première technique complèt ement en zymatique du dosage de l'urée. Dans cette technique, la
réaction en présence d'uréase est couplée à l'amination du 2-cétoglutarate et à l'oxydation du NADH en présence de glutamate
déshydrogénase.
PRINCIPE
Uréase
Urée + H2O v 2NH3 + CO2 I

Dans la procédure de Talke et Schubert, l'urée est d'abord hydrolisée en présence d'uréase pour produire de l'ammoniac et du dioxyde
de carbone tel qu'illustré dans l'équation I.
GLDH
+ +
NH3 + 2-cétoglutarate + NADH + H v L-glutamate + NAD + H2O II

Dans la deuxième étape de la procédure, l'ammoniac produit dans la première réaction réagit
+ avec le 2-cétoglutarate et le NADH en
présence de glutamate déshydrogén ase (GLDH) po ur produ ire du glu tamate et du NAD . L'oxydation du NADH entraîne une
diminution de l'absorption à 340 nm qui est proportionnelle à la concentration d'urée dans l'échantillon.
PRÉPARATION DU RÉACTIF

Préparer le réactif en ajoutant la quantité d'eau déionisée indiquée sur la fiole. Attendre 5 minutes pour la reconstitution, puis
mélanger doucement.
STABILITÉ ET CONSERVATION DU RÉACTIF
Les réactifs sont stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur l'étiquette à 2-8°C. Le réactif reconstitué est stable pendant sept
jours à 2-8°C ou pendant huit heures à 18-26°C.
DÉTÉRIORATION DU RÉACTIF
Le réactif doit être clair. La turbidité serait signe de détérioration. Pour être considéré utilisable, le réactif devrait avoir, à 34 0 nm,
une absorption initiale de 1,5 ou plus par rapport à de l'eau déionisée.
INSTRUMENTS

Tout instrumen t muni d'un contrôle de températu re de ± 0,5°C et pouvant fournir une lecture d'absorption précise à 0,001 unité à 340
nm peut être utilisé. La largeur de la bande ne doit pas dépasser 10 nm et la lumière parasite ne doit pa s excéder 0,5%. La longueur
d'onde doit être précise à 2 nm près.
PRÉLÈVEMENT ET PRÉPARATION DU SPÉCIMEN
Le sérum frais, clair et non hémolysé est le spécimen de choix. Les spécimens devraient être rapidement séparés du caillot. Le
fluorure agit comme inhibiteur de l'uréase; il faut donc éviter d'employer des anticoagulants qui en contiennent.

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SUBSTANCES INTERFÉRENTES
L'uréase est spécifique pour l'urée. Cependant la contamination par l'ammoniac affectera gravement les résultats obtenus par ce
système. Il ne faut pas faire les analyses à proximité d'un laboratoire d'analyse d'urine ou d'un laboratoire où l'on utilise des produits
de nettoyage contenant de l'ammoniaque.
On peut trouver un résumé de l'influence des drogues sur les dosages en laboratoire chez Young, D.S. (7).
PROCÉDURE
Matériaux fournis
Les réactifs nécessaires pour le dosage de l'urée sont inclus. Le standard d’urée n’est inclus qu’avec les numéros de référence 275-11
et 275-13.
Matériaux requis
1. Tout instrument répondant aux exigences énoncées à la section Instruments.
2. Cuvettes d e 1 cm ou cellu les de circu lation pouvant tr ansmettre la lumière à 34 0 nm.
3. Éprouvettes de capacité appropriée.
4. Pipettes de capacité appropriée.
5. Eau déionisée.
6. Une minuterie appropriée.
7. Un bain-marie appropriée.
Paramètres
Générique Analyse automatisée
Longueur d'onde . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm 340 nm
Température . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30°C 37°C
Chemin optique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm
Principe de do sage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Cinétique Cinétique
Durée de la réaction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 minutes 30 secondes 125 secondes
Volume d'échantillon requis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 :L 3 :L
Volume de réactif ajouté . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 mL 300 :L
Volume total . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1,01 mL 303 :L
Rapport volume d'échantillon/volume de réactif . . . . 1/100 1/100
Méthodologie

1. Régler la lecture d'absorption du spectrophotomètre à 0,000 à 340 nm en utilisant de l'eau déionisée comme blanc.
2. Porter 1 mL de réactif à 30°C dans une cuvette.
3. Ajouter 10 :L de standard ou d'échantillon.
4. Bien mélanger. Lire l'absorption à intervalles de 15 secondes ou utiliser un enregistreur. Observer la réaction pendant 2,5
minutes.
ÉTALONNAGE
Un standard d'urée est fourni avec les numéros de référence 275-11 et 275-13, et on doit s'en servir, selon les indications, pour
étalonner la procédure. Il n’y a pas de standard d’urée dans avec les numéros de référence 275-06 et 275-14, mais on devrait en
utiliser un pour étalonner la procédure.
CONTRÔLE DE QUALITÉ
On devrait analyser un sérum contrôle à niveau normal et un autre à niveau anormal pour chaque série d'échantillons. Les résultats
de ces contrôles devraient donner en deçà de deux déviations standard de la valeur déjà établie.
CALCULS ET RÉSULTATS
Résultats
L'urée est exprimée en mmol/L (mg/dL).
Calculs
Urée mmol/L (mg/dL BUN) = ) A/min. x concentration du standard
) A/min. S

) A/min. = changement de l'absorption par minute de l'échantillon

) A/min. S = changement de l'absorption par minute du standard

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Exemple
Urée mmol/L (mg/dL BUN) = 0,060 x 10 mmol/L
0,100
= 6 mmol/L (16,8 mg/dL BUN)
0,060 = changement de l'absorption par minute de l'échantillon
0,100 = changement de l'absorption par minute du standard
10 mmol/L (28 mg/dL BUN) = concentration du standard
Limitations
Un échantillon avec un niveau d'urée dépassant la limite de linéarité doit être dilué avec un salin de 0,9% et dosé de nouveau en tenant
compte du facteur de dilution dans les calculs.
Si l'échantillon à doser est nettement ictérique, hémolytique ou lipémique, on doit utiliser un blanc fait de 10 :L d'échantillon et de
1 mL d'eau déionisée.
VALEURS NORMALES (8)
2,9-9,3 mmol/L (8,0 -26,0 mg/dL)
On doit considérer ces valeurs comme des points de repère. On recommande que chaque laboratoire établisse ses propres valeurs
normales pour la région dans laquelle il est situé.
ÉVALUATION DE LA MÉTHODE
À moins d’indication contraire, ces données ont été obtenues dans les laboratoires de DCL à l'aide de procédures automatisées.
Étude de récupération
On a ajouté de l'urée à trois pools de sérum humain afin de porter la concentration d'urée à 8,8, 18,5, et 20,4 mmol/L. Les
récupérations d'urée ajoutée furent d'en moyenne 101%.
Intervalle de linéarité
La réponse à cette procédure générique est linéaire jusqu'à 30 mmol/L (84 mg/dL). La réponse à la procédure automatisée sera
fonction du rapport échantillon/réactif utilisé.
Études de précision
La reproductibilité de jour en jour de la méthode fut établie en effectuant le dosage de deux séra contrôles tous les jours pendant 20
jours.

Urée Moyenne Standard de déviation Coefficient de variation

mmol/L mmol/L %
Sérum 1 5,4 0,16 3,0
Sérum 2 18,4 0,32 1,8

La reproductibilité du dosage au cours d'une même journée fut établie en effectuant le dosage de deux pools de sérum humain
cinquante-quatre fois.

Urée Moyenne Standard de déviation Coefficient de variation

mmol/L mmol/L %
Sérum 1 5,4 0,15 2,8
Sérum 2 18,1 0,43 2,4

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Exactitude de la Méthode
On a effectué une comparaison entre cette méthode et une autre méthode à l'urée, utilisant 89 échantillons. Le coefficient de
corrélation était de 0,995. L'analyse de régression linéaire a donné l'équation suivante:
Cette méthode = 1,01 (méthode de référence) - 0,45 mmol/L

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ESPAÑOL
ANTECEDENTES
La medición del nitrógeno de urea se ha efectuado tradicionalmente a través de la condensación con monóximo de diacetilo o de la
conversión de la ureasa a amonia para producir urea. Fearon (1) propuso el método de monóximo de diacetilo por primera vez en
1939. Este método colorimétr ico tiene l imitacion es tales como una especificidad deficiente e inestabilidad de coloración. Marshall
(2) introdujo la utilización de la ureasa para la determinación de la urea, midiendo el amoniaco liberado a través de una valoración
con ácido. El amoniaco producido por la acción de la ureasa también se ha medido a través de las técnicas de Nesslerización (3,
4) y por medio de la reacción de Berthelot (5). Estos métodos colorimétricos carecen de especificidad, requieren de períodos de
incubación más largos y de temperaturas altas.
Talke y Schubert (6) describieron el primer procedimiento totalmente enzimático para la medición de la urea. En dicho
procedimiento, la reacción de la ureasa se enlaza a la aminación concurrente del ácido 2-oxoglutárico y a la oxidación del NADH
a través del glutamato de deshidrogenasa.
PRINCIPIO
Ureasa
Urea + H2O v 2NH3 + CO2 I

En el procedimiento de Talke y Schubert, la urea se hidroliza primeramente a través de la ureasa para producir amoniaco y bióxido
de carbono como se señala en la ecuación I.
GLDH
+
NH3 + 2-oxoglutarato + NADH + H v L-glutamato + NAD+ + H2O II

En el segundo paso del procedimiento, el amoniaco que se produce en la primera reacción reacciona con el 2-oxoglutarato y con el
NADH en presencia del glutamato de deshidrogenasa (GLDH) para producir glutamato y NAD+. La oxidación del NADH causa una
disminución en la absorbancia a 340 nm, la cual es proporcional a la concentración de urea en la muestra.
PREPARACION DEL REACTIVO

Para preparar el reactivo, agregue agua desionizada de acuerdo al volumen señalado en la etiqueta del vial. Deje pasar cinco minutos
para su reconstitución y proceda a mezclar suavemente.
ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO
Los reactivos que se incluyen se mantienen estables hasta la fecha de caducidad especificada en las etiquetas mientras se mantengan
almacenados a una temperatura de 2 a 8/C. El reactivo reconstituído se mantiene estable por 7 días a una temperatura de 2 a 8/C y
durante 8 horas a una temperatura de 18 a 26/C.
DETERIORO DEL REACTIVO
Las soluciones de los reactivos deben ser claras. La turbidez indicaría deterioro. La lectura de la absorbancia inicial del reactivo contra
agua desionizada a 340 nm deberá ser de 1.5 o mayor a fin de considerarse conveniente para ser utilizado.
INSTRUMENTOS
Puede usarse cualquier instrumento con control de temperatura de ± 0.5°C que sea capaz de leer la absorbancia con exactitud, con
una sensibilidad de 0.001 de absorbancia a 340 nm. El ancho de la banda deberá ser de 10 nm o menos, la desviación de la luz de
0.5% o meno s y la exactitu d de longi tud de on da dentro de los 2 nm.
COLECCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA
La muestra de elección deberá ser un suero fresco, claro y no hemolizado. El suero deberá separarse rápidamente del coágulo. Se
sabe que el fluoruro es un inhibidor de ureasa, por lo tanto deberán evitarse los anticoagulantes que contengan fluoruro.

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SUBSTANCIAS DE INTERFERENCIA
La ureasa es específica para la urea. Sin embargo, la contaminación amoniaco afectará seriamente los resultados obtenidos al utilizar
este sistema. No deberán efectuarse estas pruebas en un lugar cercano a un laboratorio en donde se lleven a cabo análisis de orina,
o a un laboratorio en el cual se utilicen productos para limpieza que contengan amoniaco.
Se puede encontrar un resumen sobre la influencia de las drogas en pruebas de laboratorio clínicos consultando el Young, D.S. (7).
PROCEDIMIENTO
Materiales Proporcionados
Se incluyen los reactivos necesarios para la determinación de la urea. Se incluye el estándar para la urea solamente con los catálogos
No. 275-11 y 275-13.
Materiales Requeridos
1. Un instrumento que reúna los requisitos mencionados en la sección de instrumentos.
2. Cubetas d e 1 cm o una cel da de flujo que transmita luz a 34 0 nm.
3. Tubos de ensayo del tamaño adecuado.
4. Pipetas del tamaño adecuado.
5. Agua desionizada.
6. Un cronómetro adecuado.
7. Un baño de agua adecuado.
Condiciones
Genéricas Analizador Automático
Longitud de onda . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm 340 nm
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30°C 37°C
Paso de luz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm
Tipo de reacción . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . cinética cinética
Tiempo de reacción . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 minutos, 30 segundos 125 segundos
Volumen de la muestra . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 :L 3 :L
Volumen de reactivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 mL 300 :L
Volumen total . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.01 mL 303 :L
Relación muestra/react ivo . . . . . . . . . . . . . . . . . 1/100 1/100
Procedimiento

1. Ajuste la lectura de la absobancia a 340 nm en el espectrofotómetro a 0.000 utilizando agua desionizada como el blanco de la
muestra.
2. En una cubeta, caliente 1.0 mL del reactivo hasta que llegue a una temperatura de 30°C.
3. Agregue 10 :L del estándar o de la muestra.
4. Mezcle bien y lea la absorbancia a intervalos de 15 segundos o utilice un sistema de registro. Siga observando la reacción por
dos minutos y medio.
CALIBRACION
Se incluye un estándar para urea con los catálogos No. 275-11 y 275-13, el cual deberá utilizarse de acuerdo a las instrucciones dadas
para calibrar el procedimiento. No se incluye un estándar con los catálogos No. 275-06 o 275-14. Sin embargo, deberá utilizarse
un estándar de acuerdo a las instrucciones dadas para calibrar el procedimiento.
CONTROL DE CALIDAD
Se debe analizar un suero control con nivel normal y anormal con cada serie de muestras, y los resultados deberán caer dentro de
desviaciones estándar ± 2 del valor establecido.

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CALCULO Y RESULTADOS
Resultados
La concentración de urea se expresa en mmol/L (mg/dL BUN).
Cálculo
Urea mmol/L (mg/dL BUN) = ) A/min. x concentración del estándar
) A/min. S

) A/min. = cambio por minuto en la absorbancia de la muestra desconocida

) A/min. S = cambio por minuto en la absorbancia del estándar

Ejemplo
Urea mmol/L (mg/dL BUN) = 0.060 x 10 mmol/L
0.100
= 6 mmol/L (16.8 mg/dL)
0.060 = cambio por minuto en la absorbancia de la muestra desconocida
0.100 = cambio por minuto en la absorbancia del estándar
10 mmol/L (28 mg/dL) = concentración del estándar
Limitaciones

Una muestra con un nivel de urea que exceda el límite de linearidad deberá diluirse con una solución salina al 0.9% y deberá
reensayarse incorporando el factor de dilución en el cálculo del resultado.
Muestras severamente ictéricas, hemolíticas o lipémicas requieren que se utilice un blanco de la muestra, el cual puede prepararse
de la siguiente manera: 10 µL de muestra y 1 mL de agua desionizada.
VALORES ESPERADOS (8)
2.9-9.3 mmol/L (8-2 6 mg/dL)
Se sugieren estos valores como referencia. Se recomienda que cada laboratorio establezca el rango normal para el área en que está
localizado.
EVALUACION DEL METODO
Estas interpretaciones del método se obtuvieron en los laboratorios de DCL usando procedimientos automáticos, a menos que se
indique lo contrario.
Estudio de Recuperación
Se añadió urea a tres grupos de muestras de suero humano para incrementar la concentración de urea en 8.8, 18.5 y 20.4 mmol/L.
La recuperación de la urea agregada tuvo un promedio de 101%.
Rango Lineal
El procedimiento genérico da una linearidad de 30 mmol/L (84 mg/dL). Al utilizar procedimientos automáticos, la linearidad
dependerá de la proporción muestra/reactivo utilizada.

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Estudios de Precisión
La precisión diaria se estableció muestreando dos sueros control diariamente durante 20 días

Media Desviación Estandard Coeficiente de Variación

Urea mmol/L mmol/L %
Suero 1 5.4 0.16 3.0
Suero 2 18.4 0.32 1.8

La precisión dentro de la serie se estableció muestreando 2 grupos de suero humano 54 veces cada uno.

Media Desviación Estandard Coeficiente de Variación

Urea mmol/L mmol/L %
Suero 1 5.4 0.15 2.8
Suero 2 18.1 0.43 2.4

Exactitud

Se hizo una comparación entre este método para urea y otro método para urea usando 89 muestras. El coeficiente de correlación fué
de 0.995. El análisis de regresión lineal dió la siguiente ecuación:
Este método = 1.01 (método de referencia) - 0.45 mmol/L
REFERENC ES/REFER ENCES/REFERENCIAS
1. Fearon, W.R., The Carbanido Diacetyl Reaction: A Test for Citrullin, Biochem. J. 33, 902 (1939).
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August 28, 1997

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