Latar Belakang Selain merupakan sumber gizi bagi manusia, bahan makanan juga
merupakan sumber makanan bagi mikroorganisme. Pertumbuhan mikroorganisme
dalam bahan pangan dapat menyebabkan perubahan yang menguntungkan seperti perbaikan bahan pangan secara gizi, daya cerna, ataupun daya simpannya. Selain itu, pertumbuhan mikroorganisme dalam bahan pangan juga dapat mengakibatkan perubahan fisik atau kimia yang tidak diinginkan, sehingga bahan pangan tersebut tidak layak dikonsumsi. Kejadian ini biasanya terjadi pada pembusukan bahan pangan. Bahan pangan disebut busuk atau rusak jika sifat-sifatnya telah berubah sehingga tidak dapat diterima lagi sebagai makanan. Daging dan ikan sering ditumbuhi oleh mikroba yang tergolong mikroba psikrofilik, yaitu yang memiliki suhu optimum pertumbuhan 5-15oC, dengan suhu minimum 0oC dan suhu maksimum 20oC. Daging dan ikan yang dijual di pasar tanpa diberi perlakuan sering terkontaminasi oleh mikroba mesofillik. Oleh karena itu, untuk menghitung jumlah mikroba pada daging dan ikan digunakan suhu 20oC. Hal ini dengan tujuan mikroba psikrofilik dan mesofilik dapat tumbuh dengan baik. Pengambilan sampel biasanya dilakukan dengan metode oles dan jumlah mikroba dinyatakandalam jumlah koloni per cm2. Pertumbuhan mikroba dipengaruhi oleh berbagai faktor eksternal yaitu lingkungan, di antaranya adalah suhu, pH, aktivitas air, adanya oksigen, dan tersedianya zat makanan atau nutrien. Oleh karena itu, kecepatan pertumbuhan mikroba akan berubah dengan berubahnya berbagai faktor lingkungan tersebut. B. Tujuan Tujuan dari praktikum ini adalah mempelajari mutu mikrobiologi daging dan hasil perikanan dengan cara pengambilan contohnya serta untuk menguji mutu mikrobiologi daging dan hasil perikanan.
BAB II
METODOLOGI 2.1. Alat dan Bahan Alat yang digunakan dalam praktikum kali ini yaitu mikroskop, inkubator suhu 20-22oC, bunsen, jarum ose, gelas objek, pinset, pisau, pipet 1 ml steril, batang pengoles steril,cawan petri steril, beker glass, korek api, dan tissue/lap. Bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu ikan segar, hati ayam, larutan pengencer steril 8 ml dan 9 ml, media VRBA, dan media PCA. 2.2. Diagram Alir Sampel (hati ayam) ditimbang sebanyak 10 gram dengan kondisi aseptik (dekat dengan api).
Setelah ditimbang dimasukkan ke dalam plastic steril kemudian dicampur
dengan larfis sebanyak 100 ml dan dihancurkan hingga merata.
Kemudian setelah dihancurkan, sampel dimasukkan ke dalam botol dan
ditutup menggunakan alumunium foil. Sampel yang berada dalam botol merupakan pengenceran tingkat 10-1.
Kemudian dari pengenceran 10-1 diencerkan kembali, dipipet 1ml dan
diencerkan ke dalam 9 ml akuades menjadi pengenceran 10-2 lalu diencerkan kembali dipipet 1 ml dan dimasukkan ke dalam 9 ml akuades menjadi 10-3 kemudian dipipet lagi 1 ml ke dalam 9 ml akuades menjadi pengenceran 10-4.
Setelah pengenceran sampel selesai maka dilakukan pemupukan pada
media VRBA (overlay) secara duplo dengan aseptis atau dekat dengan api.
Kemudian diinkubasi selama 2 hari pada suhu 20-22oC
Jumlah koloni yang tumbuh pada media VRBA dihitung.
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN 3.1. Hasil Tabel 1. Hasil Pemupukan pada media VRBA dengan sampel hati ayam Tingkat
Jumlah Koloni
Gambar
Pengenceran 10-1
a. Cawan 1 :
a.
TBUD b. Cawan 2 : TBUD
10-2
a. Cawan 1 :
b.
a.
155 b. Cawan 2 : 141 b.
10-3
a. Cawan 1 : 28 b. Cawan 2 : 39
a.
b.
10-4
a. Cawan 1 : 8 b. Cawan 2 : 6
a.
b.
3.2. Pembahasan Hati merupakan organ utama tubuh bagian dalam hewan. Senyawa beracun lebih banyak ditemui pada hati, dibandingkan dengan bagian tubuh lain. Sebab, hati merupakan tempat untuk menetralkan racun di dalam sistem pencernaan tubuh. Bila ingin mengonsumsi hati, sebaiknya dicuci berulang kali hingga bersih dan direbus sampai matang, baru diolah. Ini penting untuk mengurangi kemungkinan bahaya. Hati ayam yang masih bagus atau belum mengalami kerusakan memiliki ciri-ciri berwarna merah agak kecokelatan, lembut, dan mudah hancur. Pada praktikum ini dilakukan uji mikrobiologi pada
sampel kerang, daging ayam, hati ayam, dan ikan. Metode yang digunakan yaitu metode swab, celup dan ekstraksi. Namun, dalam laporan ini hanya membahas sampel
hati
ayam.
Sampel-sampel
tersebut diencerkan
sampai
tingkat
pengenceran 10-4, dan dilakukan pemupukan pada media VRBA dan PCA pada tingkat pengenceran 10-1, 10-2, 10-3, dan 10-4 masing-masing duplo. Kemudian dilakukan perhitungan cawan. Penghitungan jumlah sel dapat dilakukan dengan beberapa cara, di antaranya metode hitungan cawan (Total Plate Count), hitungan mikroskopis langsung (Direct Count) dan penghitung Coulter. Cara lain penentuan jumlah sel adalah dengan menyaring sampel dengan saringan membran kemudian daringan tersebut diinkubasi pada permukaan media yang sesuai. Koloni-koloni yang terbentuk berasal dari satu sel tunggal yang dapat hidup. Penentuan massa sel dapat dilakukan dengan beberapa metode. Cara yang paling umum adalah dengan menggunakan nilai kekeruhan suspensi sel. Cara lain dengan mengukur berat kering sel atau filamen sampel dalam suatu volume tertentu. Penentuan dengan cara ini dilakukan dengan lebih dahulu mengendapkan sampel diikuti dengan pencucian, pengeringan dan penimbangan berat (Anonima, 2011). Prinsip dari metode hitungan cawan adalah menumbuhkan sel mikroba yang masih hidup pada media agar, sehingga sel mikroba tersebut akan berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dengan mata tanpa menggunakan mikroskop (Fardiaz, 1993). Metode hitungan cawan dapat dibedakan atas dua cara yaitu metode tuang dan metode permukaan. Pada prinsipnya dalam metode tuang, sejumlah sampel dari pengenceran yang dikehendaki dimasukkan ke dalam cawan petri, kemudian ditambah agar cair steril yang sudah didinginkan (47-50C) dan digoyangkan supaya sampelnya menyebar secara merata. Sedangkan pada pemupukan dengan metode permukaan, terlebih dahulu dibuat agar cawan kemudian sampel yang telah diencerkan dipipet pada permukaan agar tersebut. Kemudian diratakan dengan batang gelas melengkung yang steril. Perhitungan jumlah koloni akan lebih mudah dan cepat jika pengenceran dilakukan secara desimal. Semakin tinggi jumlah mikroba yang
terdapat di dalam sampel, semakin tinggi pengenceran yang harus dilakukan
(Fardiaz, 1992). Pada praktikum uji mikrobiologi hati ayam digunakan metode ekstraksi atau hancurkan. Sampel-sampel tersebut diencerkan sampai tingkat pengenceran 10-4, dan dilakukan pemupukan pada media VRBA pengenceran 10 -1,10-2, 10-3 dan 10-4 masing-masing duplo. Dalam praktikum ini media yang digunakan adalah media VRBA karena VRBA dapat digunakan untuk perhitungan kelompok bakteri Enterobactericeae. Agar VRBA mengandung violet kristal yang bersifat basa, sedangkan sel mikroba bersifat asam. Bila kondisi terlalu basa maka sel akan mati. Dengan VRBA dapat dihitung jumlah bakteri E.coli. Setelah diinkubasi pada suhu 20-22oC selama 2 hari maka dilakukan pengamatan. Pada media VRBA pengenceran 10-1 koloni yang dihasilkan lebih dari 250 sehingga data yang dilaporkan adalah TBUD. Pada pengenceran 10-2 terdapat 155 dan 141 koloni, pengenceran 10-3 sebanyak 28 dan 39, serta pengenceran 10-4 sebanyak 8 dan 6 koloni. Pengenceran sangat penting karena apabila sampel kita terlalu encer, maka koloni yang terbentuk hanya sedikit saja bahkan menghasilkan TFTC (Too Few To Count), serta apabila sampel kita terlalu pekat, jumlah koloni yang dihasilkan bisa menjadi sangat banyak bahkan sampai tidak bisa dihitung atau menghasilkan TBUD. Prinsip perhitungan koloni bakteri adalah semakin tinggi tingkat pengenceran semakin rendah jumlah koloni bakteri. Dengan kata lain tingkat pengenceran berbanding terbalik dengan jumlah koloni bakteri. Berdasarkan hasil pengamatan dari perhitungan koloni bakteri diperoleh hasil yang menunjukkan bahwa pengenceran berfungsi untuk mengurangi jumlah koloni dalam suatu media, karena jumlah koloni pada pengenceran 10 -2 lebih banyak dibanding pengenceran 10-3. Hal ini sesuai dengan literatur bahwa perhitungan jumlah koloni akan lebih mudah dan cepat jika pengenceran dilakukan secara decimal. Semakin tinggi jumlah mikroba yang terdapat di dalam sample, semakin tinggi pengenceran yang harus dilakukan (Fardiaz, 1992).
BAB IV
KESIMPULAN DAN SARAN
4.1. Kesimpulan
4.2. Saran
DAFTAR PUSTAKA Fardiaz, S.1992. Mikrobiologi Pangan I. Jakarta (ID) : Gramedia Pustaka Utama Hartanto, AK. 2012. Laporan-Uji-Mikro-Daging-Ikan. [diunduh pada 2015 Okt 1] Tersedia pada : https://id.scribd.com/doc/138437754/Laporan-
Uji-
Mikro-Daging-Ikan Anonim. 2008. Media pertumbuhan mikroorganisme. [diunduh pada 2015 Okt 6] Tersedia pada http://dunia-mikro.blogspot.co.id/2008/08/mediapertumbuhan-mikroorganisme.html
Dokumen Serupa dengan Uji Mikrobiologi Daging Dan Ikan
![Laporan orlep 10 Uji Skalar [Uji skor dan uji peringkat]](https://imgv2-2-f.scribdassets.com/img/document/93378276/149x198/6f753dbbc9/1542672976?v=1)
