ISSN: 1519-4442
ppgpediatria@ulbra.br
Universidade Luterana do Brasil
Brasil
Miranda da Rosa, Francinne; Corra Brusco, Larissa; Corra Peres, Paulo Edelvar
Anlise in vitro da eficcia do bicarbonato de sdio e da nistatina na inibio de Candida albicans
Stomatos, vol. 12, nm. 23, julho-dezembro, 2006, pp. 17-21
Universidade Luterana do Brasil
Ro Grande do Sul, Brasil
ABSTRACT
The oral cavity lodges a great variety of microorganisms, being that the buccal balance microbiota
and host can be modified, favoring the pathogenicity on the part of the microorganisms. It is patients
______
Francinne Miranda da Rosa aluna do Curso de Mestrado em Odontopediatria da Universidade Luterana do Brasil
Larissa Corra Brusco aluna do Curso de Mestrado em Odontopediatria da Universidade Luterana do Brasil
Paulo Edelvar Corra Peres professor Doutor do Departamento de Microbiologia e Parasitologia da Faculdade de
Odontologia da Universidade Federal de Santa Maria/RS
______
Endereo para correspondncia: Francinne Miranda da Rosa
Rua Orfanotrfio, 920 Bloco 52 Ap. 110 Terespolis POA/RS. CEP 90840-440. Fones: (51) 8413.3191. E-mail:
franmiranda@terra.com.br
n.23
jul./dez. 2006
p.17-21 17
immunedejectedes for HIV and cancer that in the last decades we could perceive the manifestations of oral
candidiasis. The work aimed at the verification of the antifungal action of the Nistatina, sodium
bicarbonate solution 30% and dentifrice with sodium bicarbonate, through the technique of diffusion in
Agar with posterior reading of the inhibition halo, evidencing which is more effectiveness of sodium
bicarbonate and the Nistatina how much to the inhibition of the growth of Candida albicans. The
dentifrice contend bicarbonate produced discrete inhibition. Thus, in was evidenced that sodium bicarbonate
presents, in vitro, a similar effectiveness to the Nistatina, uniting reduced cost and clinical effectiveness.
Key words: oral candidiasis, candida albicans, sodium bicarbonate.
INTRODUO
A cavidade oral aloja uma grande variedade
de microrganismos que so repetidamente introduzidos e removidos deste sistema, sendo que somente se estabelecem os que possuem capacidade
de aderncia s superfcies da cavidade ou que,
de alguma maneira, fiquem retidos. A compatibilidade de coexistncia dessa populao microbiana
com a sade individual decorre do desenvolvimento, desde o nascimento, atravs de mecanismos
imunolgicos, de um processo de adaptao e
readaptao contnuas, graas ao que se estabelece um vnculo biolgico entre o organismo e os
microrganismos que ele costuma abrigar (FONSECA, 1989).
Segundo Burnett et al. (1978), o equilbrio
da microbiota bucal pode ser alterado, facilitando
o desenvolvimento de ao patognica por parte
de microrganismos que a integram. Dentre esses
microrganismos destaca-se a Candida albicans,
em porcentagem que varia entre 30 a 60%, que
passa a exercer sua ao parasitria quando a
virulncia supera a resistncia do hospedeiro.
Calcula-se que em aproximadamente 60%
ou mais dos indivduos sadios possa isolar-se Cndida. Todavia no est claro por que algumas
pessoas podem ser portadoras e outras no, porm fatores nutricionais e interaes com flora
bacteriana podem ser importantes (NEVES, 1995).
importante enfatizar que a microbiota oral
de indivduos imunocompetentes diferente da
microbiota oral de pacientes imunodeprimidos (como
os HIV positivos e submetidos terapia do cncer).
Estes ltimos apresentam um aumento substancial
de leveduras de vrias espcies, inclusive de
Candida albicans, e leses com uma maior gravidade e resistncia ao tratamento convencional
(COLEMAN, NELSON, 1993), atualmente feito
por meio de agentes antimicticos tpicos e secun-
18
dariamente, sistmicos. de competncia do cirurgio-dentista diagnosticar e atuar frente a essa molstia, tratando e orientando esses pacientes.
Diante dessas informaes, confirma-se a importncia da realizao desse trabalho, que visou a
verificao da ao antifngica do bicarbonato de
sdio diludo na proporo de oito partes de gua
para uma de bicarbonato, em relao Nistatina e
dentifrcio contendo bicarbonato, atravs da tcnica
de difuso em Agar com posterior leitura do halo de
inibio preconizados por Piddock (1991) e Phillips
(1991), constatando qual desses agentes mais efetivo e assim, servir como auxlio ao tratamento da
candidase oral em pacientes com cncer e HIV positivos (BURNETT et al., 1978).
METODOLOGIA
Para a realizao desse trabalho, foi utilizada como microrganismo a cepa de Cndida 464L
do departamento da Microbiologia da UFSM e,
como meios de cultura, Mueller Hinton Agar
(MHA), Agar Sabourad e Caldo Sabourad.
As leveduras da Candida albicans foram
reativadas a partir das suas culturas originais, sendo
que para isso houve a necessidade de coloc-las em
5 ml de caldo Sabourad e posteriormente foram levadas estufa a 37C, esperando que houvesse crescimento fngico at correspondente a turgidez 0,5
na Escala McFarand.
A suspenso de Cndida foi cultivada pela tcnica de semeadura em profundidade Pour-Plate:
- 1 ml da suspenso das cepas foi inoculado
em trs ml de Agar Saboraud em um tubo de ensaio.
- aps homogenizao do meio, as leveduras
foram imediatamente distribudas em placas de petri
(100 X 20 mm) contendo uma camada base de
MHA, colocada com quatro horas de antecedncia.
Atravs dessa tcnica, duas placas de petri fo-
Stomatos
ram preparadas, com o objetivo de comparar os resultados e assim obter uma maior exatido.
Em cada uma das placas houve a distribuio de quatro cilindros de metal (6mm de dimetro interno e 10mm de altura) sobre a superfcie
de Agar semeado, j totalmente solidificado, verificando que os mesmos no tinham atingido a base
da placa. Esses cilindros foram dispostos nas posies de 12 horas, 3, 6, e 9 horas.
O cilindro colocado na posio 12 horas
correspondeu ao grupo controle negativo e permaneceu vazio.
O cilindro colocado na posio de 3 horas
correspondeu ao grupo teste, sendo preenchido
pela soluo de bicarbonato de sdio a 0,12%.
A posio de 6 horas correspondeu a um grupo controle positivo e foi preenchido por soluo
de dentifrcio com bicarbonato de sdio da marca
Sorriso (3ml de gua destilada para 1g do dentifrcio).
Por fim, o cilindro colocado na posio de 9
horas correspondeu a um segundo grupo controle
positivo, padro ouro, sendo que o mesmo foi pre-
RESULTADOS
A Tabela 1 demonstra que o grupo placebo no
apresentou halo de inibio no decorrer do tempo.
O grupo em que se utilizou dentifrcio contendo bicarbonato de sdio apresentou pequenos halos
de inibio nas primeiras 48 horas, sendo que aps
72 horas j havia perdido seu poder inibitrio.
Com relao ao grupo em que se utilizou
nistatina, obteve-se halos inibitrios variando de
5,5mm a 1mm aps 72 horas, o que demonstra que
a nistatina possui efetividade limitada ao tempo.
Os melhores resultados foram obtidos com o uso
da soluo de bicarbonato de sdio, o qual no teve
seu desempenho alterado com o decorrer do tempo.
TEMPO
Placebo
24h
48h
72h
0
0
0
Soluo de
Bicarbonato de Sdio
8mm
9mm
8mm
Bicarbon.
9
8
7
6
5
Nistatina
Dentifrcio
24h
48h
72h
2
1
0
Placebo
Placebo
DiSCUSSO
Aproximadamente 50% da populao possui
a Candida albicans como parte da flora normal da
boca, mas havendo alteraes no meio bucal, esta
Stomatos
Dentifrcio Contendo
Bicarbonato de Sdio
2mm
3mm
0
Nistatina
5,5mm
4,5mm
1mm
pode proliferar e causar infeco. A doena considerada a mais universal das infeces oportunistas.
Sua ocorrncia aumentou consideravelmente depois
do uso abusivo de antibiticos, que destroem a flora
bacteriana normalmente inibidora, e do emprego de
drogas imunossupressoras, particularmente dos
corticides e das drogas citotxicas (SHAEFER et
al., 1987).
A suscetibilidade dos pacientes acometidos pelo
HIV s infeces oportunistas depende do grau de
imunossupresso determinada pelo vrus. A combinao de drogas, incluindo agentes microbianos e
antiinflamatrios que so utilizadas no tratamento
por esses pacientes, podem desencadear a produo de vrias espcies de levedura, inclusive a
Candida albicans. As leses por Cndida apresentam uma maior gravidade e uma resistncia ao
tratamento convencional. (COLEMAN, NELASON,
1993). Segundo Cawson et al. (1997), a candidase
19
oral caracteriza e afeta mais de um tero dos pacientes com infeco por HIV. As aftas podero ser o
primeiro sinal e seu comparecimento em adultos,
aparentemente saudveis, que no estejam sob tratamento imunossupressor sugerem fortemente uma
infeco por HIV, a se desenvolver num perodo de
3 anos.
Estudo realizado em 154 pacientes HIV positivos, com ou sem Candidase oral no Hospital Bocage,
na cidade de Dijon (Frana), por um perodo de dois
meses, relatou que, entre os pacientes que apresentavam candidase oral, 83% possuam a Cndida do
tipo albicans (CHAVANET et al., 1994). Freitas et al.
(2002) tambm ressalta que nos doentes HIV a colonizao da Candida albicans aumenta proporcionalmente gravidade da doena, sendo essa representante de cerca de 80% dos isolados recolhidos da cavidade oral daqueles indivduos.
Tambm em pacientes submetidos terapia
do cncer que a Candida albicans se manifesta. Ser
a restaurao da funo imunolgica que poder
levar a um melhor prognstico do caso e evitar infeces por certos microrganismos, tal como a Cndida (SAMARANAYAKE et al., 1998). Os fatores que
afetam a colonizao e taxas de crescimento so as
alteraes na flora bacteriana oral competitiva,
xerostomia e imunossupresso, sobretudo com
neutropenia (YAGIELA et al., 1998). A manifestao pseudomembranosa, sapinho, tambm
muito comum nesses pacientes, afetando 50% dos
leucmicos e 70% dos que possuem tumores slidos
e so tratados por quimio ou radioterapia (SONIS,
1985).
Para diagnosticar a real presena de
candidase, utilizam-se recursos laboratoriais, tais
como: exames microscpicos de reaes de tecido adequadamente coradas (hematoxilina e eosina,
corante de Gridley), exames microscpicos de espcimes, como pus, escarro ou raspado de leses
suspeitas, clarificados pelo hidrxido de potssio e
corados pelo Gram, alm da cultura direta
(BURNETT et al., 1978).
A cultura, identificao e quantificao dos
organismos podem ser feitas com vrios meios,
incluindo o de Sabouraud, o gar-sangue, o garfub. A identificao imunofluorescente pode ser
necessria nas formas da doena nas quais no se
evidenciam colnias clinicamente, em especial na
forma atrfica crnica (SONIS, 1985).
Ao ser observada em material colhido de uma
20
Stomatos
CONCLUSES
REFERNCIAS
BURNETT, G. W. et al. Microbiologia oral e doenas infecciosas. 4.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1978.
CAWSON, R. A. et al. Atlas colorido de enfermidades da boca.
2.ed. So Paulo: Artes Mdicas, 1997.
CHAVANET, P. et al. Cross-sectional study of the suscetibility
of candida isolates to antifungal drugs and in vitro-in vivo
correlation in HIV-infected patients. Rev AIDS, v.8, n.7,
Stomatos
p.945-950, 1994.
COLEMAN, G. C.; NELSON, J. F. Princpios de diagnstico
bucal. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1996.
FONSECA, J.B. Candidase: aspectos de interesse odontolgico.
So Paulo: Editora da USP, 1980.
FREITAS, G. et al. AIDS. Disponvel em http//
www.aidscongress.net//. Acesso em: julho de 2006.
NEVES, M. I. R. Candidase oral x AIDS. Disponvel em:
http://www.siteodontologico.com.br. Acesso em: julho de
2006.
SAMARANAYAKE, L. P. et al. The relative pathogenicity of
Candida krusei and C. albicans in rat oral mucosa. J Med
Microbiol, v.47, n.12, p.1047-1057, 1998.
SAMARANAYAKE, L. P.; ELLEPOLA, A. N. The effect of limited
exposure to antimycotics on the relative cell-surface
hydrophobicity and the adhesion of oral Candida albicans
to bucal epithelial cells. J Amer Dent Assoc, v.49, n.1,
p.15-20, 1994.
SHAEFER, W. G. et al. Tratado de Patologia Bucal. 4.ed. Rio
de Janeiro: Guanabara Koogan, 1987.
SONIS, S. T. Medicina oral. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan,
1985.
YAGIELA, J. A. et al. Farmacologia e teraputica para dentistas.
4.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1998.
21