RESUMEN

Objetivo: Explorar la biosntesis de las nanopartculas de plata

sintetizadas por microalgas marinas. Mtodos: microalga marina fue
recogido Central Marine Fisheries Research Institute (CMFRI, tuticorin) y
cultivadas en el laboratorio. Se observaron sntesis de nanopartculas de
plata en normal y microondas irradiadas microalgas y se criban contra
patgenos humanos para la presencia de antimicrobianos. Resultados:
La presencia de nanopartculas de plata se confirm por espectroscopa
UV-visible a 420 nm por la presencia del pico de plasmn. Otra
confirmacin se realiz mediante microscopio electrnico de barrido
(SEM). Conclusiones: Estos resultados no slo proporcionan una base
para futuras investigaciones, pero son tiles para el desarrollo de
frmacos en el presente y el futuro.
. Introduction
La nanotecnologa ofrece la posibilidad de disear las propiedades de los
materiales mediante el control de su tamao, y esto ha impulsado la
investigacin hacia una multitud de usos potenciales para los
nanomateriales. Nanopartculas metlicas presentan inusual ptica,
trmica, qumica y propiedades fsicas. La reduccin de la dimensin de
los materiales "se ha pronunciado efectos sobre las propiedades fsicas
que pueden ser significativamente diferente del material a granel
correspondiente. Algunas de las propiedades fsicas mostradas por los
nanomateriales se deben a tomo de gran superficie, la energa de
superficie grande, confinamiento espacial, y las imperfecciones
reducidas [1]. Hoy en da, los cientficos tratan de lograr una amplia
gama de posibles aplicaciones de procesos de fabricacin respetuosos
nanotecnologa habilitado y ambientalmente que reducen los residuos,
en ltima instancia conduce a la fabricacin molecular precisin atmica
con cero residuos. El uso de nanomateriales como catalizadores para
una mayor eficiencia en los procesos de fabricacin actuales,
minimizando o eliminando el uso de materiales txicos, el uso de
nanomateriales y nanodispositivos para reducir la contaminacin (por
ejemplo, filtros de agua y aire) y el uso de nanomateriales para la
produccin alternativa de energa ms eficiente (por ejemplo, clulas
solares y de combustible) son algunos ejemplos de la aplicacin de
nanoparticulas.
Por desgracia, hay otra cara de estos beneficios. Como los cientficos
experimentar con el desarrollo de nuevos mtodos qumicos o fsicos

para producir nanomateriales, tambin se agudiza la preocupacin por

un impacto negativo en el medio ambiente. Algunos de los
procedimientos qumicos implicados en la sntesis de los nanomateriales
utilizan disolventes txicos, podra generar potencialmente subproductos
peligrosos, ya menudo implican alto consumo de energa, y no
mencionar el tema no resuelto de la toxicidad potencial de ciertos
nanomateriales. Esto est llevando a una creciente conciencia de la
necesidad de desarrollar procedimientos de limpieza, no txicos y
respetuosos del medio ambiente para la sntesis y ensamblaje de
nanopartculas. Un gran inters ha sido creado por el trmino
"nanotecnologa verde" con la demanda floreciente de los procesos de
sntesis de nanopartculas "verdes" [2]. El campo de la sntesis de
nanopartculas ha desarrollado recientemente nuevas rutas. Mtodos
biosintticos que emplean, ya sea microorganismos biolgicos o
extractos de plantas han surgido como una alternativa simple y viable a
procedimientos de sntesis qumica y mtodos fsicos [3]. Aunque se
sabe que los microorganismos tales como bacterias, levaduras y hongos
ahora juegan un papel importante en la recuperacin de metales txicos
a travs de la reduccin de los iones metlicos, se consider interesante
como nanofactories muy recientemente.

Se ha sabido durante mucho tiempo que en la naturaleza una variedad

de nanomateriales son sintetizados por procesos biolgicos. Por ejemplo,
las bacterias sintetizan magneto tctica de magnetita o greigite
nanocrystallites intracelulares, los otros ejemplos son diatomas, que
sintetizan materiales silceos y bacterias S-capa que producen y eso y
calcio.
capas
de
carbonato.
Estos
resultados
mostraron
que
los
microorganismos de hecho podran ser utilizados para la sntesis de
nanopartculas. Aqu, un nuevo enfoque de sntesis combinatoria que es
rpido, sencillo y "verde" para la sntesis de nanoestructuras metlicas
de metales nobles, como la plata (Ag), mediante el uso de una
combinacin de cultivo de algas y microondas (MW) de irradiacin en
agua en ausencia de un agente tensioactivo o una plantilla blanda se
describen. Estas obras ayudarn a fomentar la investigacin mediante el
cual productos de mayor valor aadido se pueden obtener de las algas
Chaetoceros calcitrans (C. calcitrans), Chlorella salina (C. Salina),
Isochrysis galbana (I. galbana) y Tetraselmis gracilis (T. gracilis) .

2. Materiales y mtodos

2.1. Culturas microalgas marinas

Las especies de algas C. calcitrans, C. salina, I. galbana y

T. gracilis se obtuvieron de Centrales reas de Pesca y el Instituto de

Investigacin (CMFRI) Tuticorin. La accin se mantuvo en los medios
Walne 's. El crecimiento de cada alga se estudi mediante la medicin
de sus valores de absorbancia a sus respectivas max. Se observ la
fase exponencial de clulas de algas durante los primeros 15 das.

2.2. Sntesis de nanopartculas de plata [1]

La sntesis de nanopartculas de plata a partir de microalgas marinas se

llevaron a cabo por dos mtodos a saber normales microalgas marinas y
microondas irradian microalgas marinas. Para ello, se recogieron los
cultivos de algas a partir de mediados de la fase exponencial de su
crecimiento y adems las experimentos se llevaron a cabo en seis
mtodos. Para todos los mtodos se realizaron experimentos de control
para comprobar el papel de las algas en la produccin de nanopartculas
de plata.

2.2.1. Sntesis de nanopartculas de plata por microalgas marinas

normales

Haba tres mtodos utilizados para la sntesis de nanopartculas de plata

por microalgas marinas normal. En el primer mtodo las algas se cultiv
a lo largo con una solucin de AgNO3 1 mM y despus se mantuvo en
una incubadora agitador durante dos semanas. En el segundo mtodo,
los cultivos de algas se adquirieron en la mitad de la fase exponencial y

se sometieron a centrifugacin a 000 rpm durante 5 minutos 5.

Soluciones de nitrato de plata se aadieron tanto a pellet y
sobrenadante. En el tercer mtodo, las clulas se sometieron a
ultrasonidos y luego se centrifuga. Una vez ms se aadi una solucin
1 mM de AgNO3 y se mantiene en la coctelera durante dos semanas.

2.2.2. Sntesis de nanopartculas de plata por microondas irradiada

microalgas marinas

En este mtodo, el cultivo de algas se recogieron a partir de mediados

de la fase exponencial de su crecimiento y se someti a irradiacin de
microondas de 5 segundos y 15 segundos apagado durante 5 veces.
Otros experimentos se realizaron como se describe anteriormente.

2.3. Prueba de sensibilidad antimicrobianos

Los antimicrobianos prueba de sensibilidad se realiza para detectar si las

nanopartculas de plata tiene cualquier carcter antagonista contra
patgenos como Escherichia coli (E. coli), Klebsiella sp,

Proteus sp y Pseudomonas sp mediante el uso de Muller Hinton agar y se

incubaron a 37 durante 24 horas.

3. Resultados

Se observ que la fase estacionaria de clulas de algas despus de 15

das de su crecimiento y luego comenzaron a disminuir (Figura 1).
UV-Vis espectros registrados para la presencia de una solucin acuosa de
AgNO3.

3.1. Sntesis de nanopartculas de plata

La aparicin de color negro pardusco en solucin sugiri la formacin de
nanopartculas de plata con el pico de resonancia de plasmn a 420 nm.
Por lo tanto, era evidente que los metabolitos excretados por la cultura
expuesta a la plata podran reducir los iones de plata, lo que indica
claramente que la reduccin de los iones se producen a travs de
transporte de electrones o a travs de agentes liberados en la solucin
por cultivo de algas reductor. Estas reacciones se produjeron slo en la
luz y las nanopartculas no se produjeron en la oscuridad. En las otras
manos, la reduccin de iones de plata no ocurri en la ausencia de
clulas de algas. La resonancia de plasmn observada a 420 nm para las
nanopartculas de plata producidos por normal y microondas irradiada
microalgas marinas se muestra en la Figura 2. El cambio de color en el
cultivo de algas debido a las nanopartculas de plata producidos es
mediante microscopio de barrido de electrones.
3.2. Prueba de sensibilidad a los antimicrobianos
Los patgenos humanos sps Klebsiella, Proteus vulgaricus, Pseudomonas
aerujinosa se verificaron con las algas normal encontrar la presencia de
actividad antimicrobiana. Las nanopartculas de plata producidas por C.
calcitrans mostraron inhibicin contra sps Klebsiella, Proteus vulgaris (P.
Vulgaris), Pseudomonas aeruginosa (P. Aeruginosa) y contra E. coli. La
nanopartcula de plata producida a partir de C. salina, I. galbana y T.
gracilis tambin mostr mejor zona de inhibicin contra
Sps Klebsiella, P. vulgaricus, P. aeruginosa y
Figura 4. actividad
antimicrobiana de nanopartculas de plata producidos a partir de
microalgas contra patgenos
4. Discusin
La sntesis de nanopartculas est en la luz de la cal en la
nanotecnologa moderna. El desarrollo de inspiracin biolgica procesos
experimentales para la sntesis de nanopartculas se est convirtiendo
en una importante rama de la nanotecnologa. En el presente estudio se
aislaron y se seleccionaron para la sntesis de nanopartculas de plata 4
cepas de microalgas. Tras la adicin de iones de Ag + en el cultivo libre
de clulas en la oscuridad, las muestras cambian de color desde casi
incoloro a marrn oscuro con intensidad creciente durante el perodo de
incubacin. Se mostr ningn cambio en el color del filtrado de clulas

cuando se incubaron en las mismas condiciones. La aparicin de un

color marrn amarillento en la solucin era una indicacin clara de la
formacin de nanopartculas de plata en la mezcla de reaccin. Un pico
de absorcin caracterstico de plasmn de superficie a 420 nm se
observ a las 24 horas que alcanzaron la intensidad mxima despus de
72 horas. Las bandas de plasmones son anchas con una cola de
absorcin en las longitudes de onda ms largas, que podran ser, en
principio, debido a la distribucin del tamao de las partculas [4]. La
estabilidad de las nanopartculas de plata sintetizados se estudi
mediante la medicin de su intensidad a 420 nm durante un perodo de
un mes a temperatura ambiente. No se observ ningn cambio
significativo en la intensidad que demostr su estabilidad durante un
perodo de un mes, mientras que el pico a 234 nm tal vez debido a la
absorcin por enlace amida. Esto indica secrecin de algunos
componentes de la protena en el medio por la biomasa fngica que
juega un papel importante en la reduccin de los iones metlicos en
forma de nanopartculas. Por consiguiente, las protenas pueden.
tambin se unen a las nanopartculas y mejorar la estabilidad. La plata
metlica es relativamente no reactivo, sin embargo, cuando

expuestos a ambientes acuosos se libera un poco de plata inica (Ag +).

Ciertas sales (por ejemplo, nitrato de plata) son fcilmente solubles en
agua y han sido explotados como agentes antispticos para muchas
dcadas [5]. Las nanopartculas de plata se ha demostrado que exhiben
propiedades antimicrobianas contra bacterias [6] con una estrecha unin
de las nanopartculas a s mismos con la clula microbiana y la actividad
ser dependiente tamao [7]. El tamao y la estructura de las
nanopartculas se caracteriz adicionalmente mediante anlisis por SEM.
Los superficiales depositado nanopartculas de plata se ven claramente
en la alta ampliacin en la micrografa.
La sntesis biolgico rpido de nanopartculas de plata por microalgas
marinas proporciona una ruta sencilla y eficiente para la sntesis de
nanopartculas con propiedades pticas sintonizables dirigidas por
tamao de partcula. Investigacin sobre el efecto antibacteriano de
nanomtricas solucin coloidal de plata contra patgenos humanos
revela una alta eficacia de nanopartculas de plata como un agente
antimicrobiano fuerte que puede ser til en las industrias de alimentos,
industrias de cosmticos y de productos farmacuticos.

Las perspectivas de futuro de esta investigacin sera la de aumentar la

escala de la produccin biosinttica de nanopartculas de plata que
utilizan estas algas y para demostrar su eficacia contra un amplio
espectro de la poblacin microbiana. Investigaciones adicionales podran
implicar la explotacin de la potencia de micro algas para sintetizar
nanopartculas de oro.

Declaracin de conflicto de inters

Declaramos que no tenemos ningn conflicto de intereses