INTEGRANTES:
CAHUASQU JIMENA
GARCA ALEXANDRA
SALAZAR GABRIELA
VITERI DAVID
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
1. TITULO
3. ANTECEDENTES Y JUSTIFICACIN
BUENAS
PRCTICAS DE MANUFACTURA
(BPM)
JUSTIFICACIN
4. OBJETIVOS
4.1 OBJETIVO
GENERAL:
4.2 OBJETIVOS
ESPECFICOS:
5. MARCO TERICO
5.1 QUESO
6. MARCO METODOLGICO
12
13
6.2.1 MUESTREO
13
13
13
PUNTOS DE MUESTREO
13
RECEPCIN
13
DE MATERIA PRIMA
PASTEURIZACIN
13
PRODUCTO
13
FINAL
13
6.3.1.2 PROCEDIMIENTO
14
15
15
7. CRONOGRAMA
16
8. FACTIBILIDAD
17
9. BIBLIOGRAFA
18
10. ANEXOS
19
19
19
PLANES DE MUESTREO
20
21
MTODO
E.COLI
MTODO
SALMONELLA
MTODO
POR EL MTODO
PETRIFILM
DE
22
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
23
24
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
1. TITULO
ANALISIS DE RIESGO DE CONTAMINACION E
IDENTIFICACION DE PATOGENOS
falta de implementacin de
ya
que
si
partimos
de
instalaciones
inadecuadas
(edificio,
3. ANTECEDENTES Y JUSTIFICACIN
La presencia de patgenos en el queso puede reducirse considerablemente
mediante una adecuada higiene y buenas prcticas de manufactura. Es
reconocido que el sistema Anlisis de Peligro y Puntos Crticos de Control (HACCP,
por hazard analysis and critical control points) puede ser una herramienta eficaz
para aumentar la seguridad de los alimentos.
Buenas prcticas de manufactura (BPM)
Las BPM establecen normas para todos los requisitos bsicos de una planta o
centro de acopio, con el objetivo de que cumplan con las condiciones del personal,
instalaciones, procesos y distribucin. Estas normas incluyen:
a. Higiene personal
Son normas que deben cumplir los trabajadores del centro de acopio o planta de
proceso. Entre ests normas estn: Salud del personal, uso de uniformes o ropas
protectoras, lavado de manos, hbitos de higiene personal
b. Limpieza y desinfeccin
La limpieza y desinfeccin de utensilios, as como las instalaciones, equipo y reas
externas son normas que el trabajador debe conocer y realizar, como por ejemplo:
los trabajadores deben conocer que se debe limpiar, como hacerlo, cuando, que
productos y utensilios deben ser limpiados frecuentemente.
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
c. Normas de fabricacin
Las normas de fabricacin o procedimientos estndar de operacin (PEO), se
utilizan para garantizar que el producto no se deteriore o contamine y que sea
realmente lo que el cliente espera. Esto incluye: Especificaciones de materia
prima, materiales de empaque, etc., procedimientos de fabricacin, controles
(hojas de registro, acciones correctivas) y especificaciones de producto final
d. Equipo e instalaciones
Las normas y procedimientos que establecen los requerimientos que deben
cumplir los equipos y las instalaciones en donde se procesan o acopian alimentos
son: Equipo con diseo sanitario, instalaciones apropiadas (diseo y materiales),
distribucin de planta, facilidades para el personal, manejo apropiado de desechos
y sistemas de drenaje adecuados
e. Control de plagas
Los programas y acciones para eliminar plagas tales como: insectos, roedores y
pjaros, incluyen las siguientes normas: mantenimiento de las instalaciones,
fumigaciones, trampas, cedazos en puertas y ventanas, manejo de desechos, etc
f. Manejo de bodegas
La administracin de bodegas incluye: adecuado manejo de los productos o
materiales de empaque, control de inventarios, limpieza y orden, minimizar daos
y deterioro
JUSTIFICACIN
La micro planta elabora de manera artesanal: queso (fresco, mozarella, maduro),
yogurt natural, crema de leche y mantequilla. Se procesa entre 1500 y 2000 litros
diarios de leche para la produccin de queso fresco debido a que tiene mayor
demanda. El queso fresco se distribuye en la zona urbana de la ciudad de Quito
(aprox. 1.397.698 habitantes). El queso fresco constituye uno de los derivados
lcteos de mayor consumo, sobre todo en la sierra. Teniendo as una amplia gama
de consumidores sin importar factores como: sexo y edad. Sin embargo debemos
recalcar que la poblacin que posee mayor riesgo de sufrir infeccin por la ingesta
de queso fresco son:
Mujeres embarazadas (infeccin con listeria, que causa el aborto) teniendo en
cuenta que en la mayora de provincias el porcentaje de mujeres es un poco mas
de la mitad de la poblacin y de las cuales un 20 % son mayores de 16 aos y
pueden embarazarse.)
La muerte por intoxicacin por S. aureus y E. Coli no es frecuente, pero el
porcentaje de mortalidad varia de 0,03 % en la poblacin general hasta 4.4 % en
las poblaciones mas sensibles por ejemplo nios y ancianos
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
4. OBJETIVOS
4.1 Objetivo general:
Identificar y Realizar un anlisis de riesgo de los puntos de contaminacin
por
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
5. MARCO TERICO
5.1 QUESO
El queso puede ser definido como un producto de la concentracin de los slidos
de la leche, por medio de la coagulacin (FAO, 1983). En general, la produccin de
quesos, involucra dos fases, primero el desarrollo de un pH adecuado y
posteriormente el desarrollo de caractersticas fsicas y organolpticas deseables.
Adems, se pueden distinguir tres principios fundamentales en la produccin de
quesos. El primero, es la concentracin de la leche que ocurre por la formacin
de la cuajada, ya sea por el desarrollo de bacterias productoras de cido o por el
cuajo. En esta etapa el suero es separado de la cuajada por medio de una divisin
mecnica, por desarrollo de cido, agitacin, elevacin de temperatura y
prensado. El segundo principio es la conservacin del queso, lo cual se logra
mediante una buena higiene, pasteurizacin, concentracin, acidificacin, salado,
adicin de nitrato, y enfriamiento. Por ltimo, la maduracin, durante la cual
ocurre una transformacin de los slidos del queso, por lo cual aparecen las
caractersticas del sabor, consistencia y apariencia dependiendo de la variedad
del queso (FAO, 1983).
5.2 Factores que influyen en la calidad microbiolgica del queso
Analizando los factores de calidad microbiolgicos vemos que las fuentes de
contaminacin ms frecuentes son:
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
Higiene en el personal
Manipulacin indebida
Durante el ordeo, el
almacenamiento y el transporte, la leche se puede contaminar con una gran variedad de microorganismos; por eso, la naturaleza de la flora microbiana de la leche
cruda es muy compleja y cambiante de una muestra a otra y segn su grado de
frescura.
Las principales fuentes de contaminacin son:
Manipuladores:
estafilococos
de
la
piel,
grmenes
nasofarngeos
Sealan que a la leche se le debe aplicar un tratamiento trmico de 72C por 15 segundos para
asegurar una completa eliminacin de los microorganismos patgenos. Con la pasteurizacin se
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
logra una reduccin en el nmero de microorganismos en la leche del 92 al 98%. Por otro lado, la
pasteurizacin no destruye las endosporas, pudiendo germinar stas en la maduracin del queso y
producir sustancias dainas, como el cido butrico, que afecta el sabor del queso y gran cantidad
de hidrgeno, que destruyen su textura. Estas esporas slo se destruyen a temperaturas superiores a
80C, que sobrepasan la temperatura de pasteurizacin
Higiene en los equipamientos Una buena limpieza se obtiene cuando no quedan
El control de la presencia de
humano, por ejemplo a partir de la piel, nariz, garganta, cortes, y heridas. Por lo tanto, se transmite
fcilmente a los alimentos mediante la manipulacin y hbitos higinicos deficientes. Para ello se
indica que se deben usar desinfectantes y lavamanos a pedal a la entrada de cada rea, para reducir
el riesgo de contaminacin. Por otro lado, sealan que las personas con lesiones spticas no deben
manipular los alimentos, debido al alto porcentaje de portadores nasales humanos
de S. aureus, por lo cual todos los operarios deben emplear guantes de un solo
uso y mascarillas. Adems, el movimiento del personal en las distintas reas de la
sala de proceso debe ser controlado
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
enzimas
extracelulares,
efectos
no
deseables.
Bacterias de origen fecal son sensibles a los tratamientos trmicos como la pasteurizacin, siendo
sta una medida para reducir su nmero a niveles tales, que sea seguro para la salud. Sin embargo,
la sobrevivencia y crecimiento de Escherichia coli O157: H7 durante la elaboracin de productos
lcteos y su presencia en productos terminados, se puede deber por ejemplo, a una contaminacin
post pasteurizacin.
ACONDICIONAMIENTO DE TEMPERATURA: Consiste en poner la temperatura de la
leche ya pasteurizada a 34C para que haya una mejor accin del cuajo.
10
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
COAGULACIN: Acto seguido, se aade el cuajo (extracto obtenido del cuajar del
estmago de los rumiantes cuajo animal- o a partir de determinadas plantas
cuajo vegetal) Es en este momento cuando la leche pasa a transformarse en
queso puesto que la casena (la ms importante protena de la leche) es
coagulada a unos 30-32 C, englobando la mayor parte de la grasa y otros
componentes.
DESUERADO: Por la vlvula de salida de la tina o con baldes, se elimina parte del
suero, equivalente a 1/3 del volumen inicial de leche. Con esta parte del suero, se
est eliminando parte del cido lctico desarrollado en el proceso y la mayora de
lactosa con el suero. Luego se procede a agitar fuertemente.
MOLDEADO: Se coloca la cuajada mas suero en los moldes, ayudado con baldes o
recipientes cribados, estos moldes son recipientes rgidos con perforaciones por
donde escapar el suero y en su interior retendr la cuajada, formando el queso
fresco. En el interior del molde, se suele colocar un pao (tela) para mejorar el
acabado de la superficie del queso.
11
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
6. MARCO METODOLGICO
6.4.1 ANLISIS DE RIESGO EN EL PROCESO DE ELABORACIN DE QUESO FRESCO
PROCESO
Contaminacin
Exgena
BACTERIA
CONDICIONES DE CRECIMIENTO
Camphylobacter jejuni
Bacillus cereus
RECEPCION
Contaminacin
Endgena
PASTEURIZACION
INOCULACIN Y
COAGULACIN
CORTE DE CUAJADA
MOLDEADO Y
PRENSADO
Clostridium ,
Aeromonas
Salmonella typhi
Listeria M.
Yersinia
E. Coli
S. aureus
Salmonella
Bacillus cereus
Listeria M.
S. aureus
Salmonella spp.
E. coli
Yersinia
Aeromonas
Bacillus cereus
Listeria M
Salmonella
S. aureus
E. Coli
Listeria M
S. aureus
E. Coli
E. Coli
S. aureus
Salmonella spp.
S. aureus
E. coli
Salmonella spp.
CONTAMINACION
Aguas contaminadas
T=60 c
pH= 6.5-6.
tiempo = 15 min
T=30-32
pH= 4.65
tiempo = 25 min
T=20-25
pH= 5.5
tiempo = 3 h
Supervivencia de patgenos
La concentracin de esporas tiene que
mantenerse lo ms baja posible, mediant
la limpieza y desinfeccin conveniente de
los equipos Higiene y desinfeccin
inapropiada en recipientes, manos
contaminadas
Contaminacin por manipuleo.
Contaminacin ambiental.
Contaminacin cruzada de equipos y/o
utensilios
Contaminacin por manipuleo.
Contaminacin ambiental.
Contaminacin cruzada de equipos y/o
utensilios.
Contaminacin proveniente del
medioambiente, agitadores, paletas y/o
utensilios varios contaminados o por el
personal.
E.coli
Manos contaminadas
Salmonella spp.
SALADO
12
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
L. monocytogenes
T=20 C
pH= 4.7-5.5
tiempo = 3-5 h
NaCl= 16-20%
S. Aureus
E.coli ,
S. Aureus.
EMPACADO
Salmonella ,
L.monocytogenes
Se realiz un muestreo aleatorio simple, seleccionando una muestra por cada Punto de Control
del proceso de 1 lote seleccionado aleatoriamente.
Los planes de 3 clases son ms apropiados para anlisis cuantitativos como el
recuento de un grupo microbiano. La aceptabilidad de un lote se hace mediante la
aplicacin de normas. Pongamos el ejemplo de una norma microbiolgica. Los
componentes de este tipo de norma son (ICMSF, 2002):
El mtodo de anlisis
13
Exgeno
Endgeno
Supervivencia
Proliferacin
Destruccin
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
muestreo en tres puntos donde hay mayor riesgo de contaminacin ya sea propia
de la materia prima o cruzada. Se realizara en los siguientes puntos:
PUNTOS DE MUESTREO
Recepcin de materia prima
Pasteurizacin
Producto final
6.3.1.1 IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA
Fecha de muestreo
Lugar de muestreo
Hora de muestreo
Descripcin genrica del producto
Nmero de lote
Condiciones ambientales de la toma de muestra
Parmetros a analizar
Nombre y firma del encargado de muestreo
La etiqueta deber colocarse entre la tapa y el cuerpo del frasco, la caja, en el
nudo o cierre de la bolsa en forma tal que se evite que la muestra sea alterada o
violada.
6.3.1.2 PROCEDIMIENTO
1. Contar con un culler en refrigeracin al cabo de la toma de muestra.
2. Usar guantes estriles para la toma de muestras.
3. Asegurar que los nicos artculos que deben contactar la superficie externa
del guante estril sean las superficies que se deben muestrear, el utensilio
estril para el muestreo.
4. Desinfectar el culler, y todas las superficies de trabajo que se utilizarn, con
toallas de papel desechable humedecidas con solucin de 500 ppm de
Hipoclorito de Sodio (0,05 %) preparada en el momento del muestreo u otro
desinfectante que cumpla los objetivos de desinfeccin establecidos.
5. Las superficies de trabajo deben estar secas antes de colocar sobre ellas los
insumos para el muestreo.
6. Antes de iniciar el procedimiento de muestreo, friegue minuciosamente sus
manos con abundante agua usando jabn germicida. Posteriormente
desinfecte sus manos.
14
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
Leche
Queso fresco
Se puede utilizar una de las tres tcnicas siguientes dependiendo del peso, forma
y tipo de queso: (a) toma de muestra cortando un sector, (b) toma de la muestra
con la ayuda de un sacabocados, o (c) utilcese un queso entero como muestra.
(c) Toma de muestra que constituye un queso entero o una parte sustancial del
mismo. Este mtodo ha de utilizarse para quesos frescos, quesos blandos de
pequeo tamao y para quesos en porciones envasados en cajas pequeas (por
ej. Algunos tipos de queso fundido y quesos blandos).
2. Inmediatamente despus del muestreo, las muestras (cilindros, sectores o
quesos enteros) han de colocarse en un recipiente estril de tamao y forma
adecuados y ste se sella. La unidad de muestra puede cortarse en trozos ms
pequeos para introducirlos en los recipientes, pero nunca deben comprimirse ni
desmenuzarse.
3. Las muestras se enviarn o transportarn rpidamente al laboratorio. Los
anlisis se realizarn tan pronto como sea posible, preferiblemente el mismo da.
Si se demoran bien el envo o bien los anlisis, los recipientes con las muestras
han de colocarse en un frigorfico a una temperatura entre 5 y 8C. Estas
15
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
16
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Anlisis de Riesgo de Patgenos
7. CRONOGRAMA
MUESTRA
MICROORANISMOS
LECHE CRUDA
LECHE
PASTEURIZADA
SALMONELLA
PRODEUCTO
FINAL: QUESO
FRESCO
FASE
Agua de
Peptona
Preenriquecimiento
LUNES 4
Enriquecimiento
MARTES 5
TSB
RV
TT
XLD
BS
HE
TSI
LIA
UREA
Agua de
peptona
LECHE CRUDA
LECHE
PASTEURIZADA
MEDIO
E. COLI
Petrifilm
Aislamiento
TCNICA
(Das)
BAM
MIERCOLES 6
Identificacin
JUEVES 7
Enriquecimiento
LUNES 4
Aislamiento
AOAC
Identificacin
MARTES 5
LECHE CRUDA
Agua de
Peptona
Preenriquecimiento
MIERCOLES 6
JUEVES 7
LUNES 4
LECHE
PASTEURIZADA
Agua de
Peptona
Enriquecimiento
MARTES 5
Baird
Parker
Aislamiento
BHI
Coagulasa
Catalasa
TSB
EB
Identificacin
JUEVES 7
Preenriquecimiento
Enriquecimiento
LUNES 4
MARTES 5
QUESO FRESCO
S. AUREUS
QUESO FRESCO
LECHE CRUDA
LECHE
PASTEURIZADA
QUESO FRESCO
17
L.
MONOCYTOGENES
EB
MMA
OxFord
Aislamiento
Identificacin
AOAC
AOAC
MIERCOLES 6
MIERCOLES 6
JUEVES 7
8. FACTIBILIDAD
Mtodo Oficial de la AOAC, cdigo 987.09.
Este
mtodo
aislamiento
de
(productos
Staphylococcus
Aureus.
Tcnica
de
se
aplica
recuento
Lcteos)
por
para
en
realizar
alimentos
siembra
en
para S.Aureus.
Salmonella.
microorganismo.
SI
CALDO LACTOSADO
TETRATIONATO DE MIULLER
RAPPAPORT
BISMUTO SULFITO
XLD AGAR
HEKTOEN ENTRICO
SI
AGUA DE PEPTONA
PETRIFILM
SI
el
crecimiento
coliformes.
La
de
colonias
composicin
de
del
E.coli
medio
los alimentos
TSB
PALCAM
EB
OXFORD
SI
9. BIBLIOGRAFA
MICROBIOLOGA
DE
LOS
ALIMENTOS,
Fundamentos
ecolgicos
para
(VETA)
la
investigacin
de
brotes
de
toxi-infecciones
E:\Microbiologia\clostridium perfringes.htm
E:\Microbiologia\e.coli.htm
E:\Microbiologia\campylobacter spp.htm
E:\Microbiologia\clostridium botulini.htm
E:\Microbiologia\ETA.htm
E:\Microbiologia\Listeria.htm
E:\Microbiologia\salmonella spp.htm
E:\Microbiologia\stafylococus aureus.htm
http://www.tecnologiadelqueso.com/noticias/20010.php
http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia
%20general/notas_de_microbiologia_de_los_al.htm
http://cvu.rediris.es/pub/bscw.cgi/d311175-1/*/Normicro/ISO
10. ANEXOS
MICROORGANISMOS PATGENOS DEL QUESO AGRUPADOS POR SU NIVEL
DE RIESGO
CRITERIOS MICROBIOLGICOS
TABLA 1.9 Principios para el establecimiento y la Aplicacin de Criterios Microbiolgicos para
los Alimentos del Codex Alimentarius (CAC/GL-21(1997) y con la clasificacin y planes de
muestreo de la International Commission on Microbiological Specification for Foods (ICMSF)
Alimentos implicados
implicados
Escherichia
Coli
Staphylococcus
Staphylococcus
Aureus
Aureus
Salmonella
Campylobacter
Leche no pasterizada
Agua contaminada con heces de
animales
Yersenia
Carne y en leches
Bacillus cereus
En alimentos expuestos a
temperatura ambiente despus de la
coccin
Listeria
Monocytogenes
Clostridium
Aeromonas
Factores de
crecimiento
Anaerobio facultativo
T= 7C-50C t optima=
37C
pH= 6.9-7.4
AW= 0.95-1
Anaerobio facultativo
T= 10-35-47 C
T optima = 40C
P. toxina T= 25-37-40C
pH= 4,5-7-9,4
P toxina pH= 5,5-7-9
Aw= >0,86 0,90 toxina
Aerobiosis
Resistentes al 10 %
Aerobio facultativo
Mesfilo T= 45C
Tolerante al frio (4-5C)
no crecen congelacin
Aw= 0.93
Eh= aerobios
facultativos
Poco resistente a
agentes curado (5.8%)
Aerofilo
Conservado a largo
tiempo a T ambiente
T optima = 37 C
Sensibles a C% salinas
Anaerobio facultativo
T= 28-37 C
Aw= 0,95-0.96 %
pH = 5 -5,5- 7,6
resistentes NaCl 6%
(multiplicacin)
Anaerobio facultativo
Sicrotorfos T= 4-5,5 C
T optima = 28-35C
Aw= 0.92 min
pH= 4,-9.3 pH optimo=
7,4
Anaerobio facultativo
T optima = 30-37 C t
min= 4C pH= 6 resiste
bajo pH
Acido tolerante tolera %
salinas
Crio tolerante
Anaerobio
T = 12-50C
Anaerobio facultativo
T= 28 C t= inclusive
4C
Caracterstica
Anaerobio
facultativo bacteria
endgena y
exgena
Toxinas
termoresistente
30min---- 100C
Medidas de control .
control de la
temperatura
De conservacin
post tratamiento ,
higiene en
manipulacin
Destruidos
tratamiento trmico
27 min ----- 60C
No resistentes al
calor
Especie termolbil
T menores 30C
microaerfilos
Refrigeracin
inadecuada
Calentamiento
activa esporas
En donde se
encuentran
Heces de
animales, hombre
Comensal : de piel
y mucosa
Fosas nasales ,
heridas
Portador.
Manipulador
contaminacin
cruzada
Hombre, animales,
Contaminacin
exgena y
endgena
Habitad de las
esporas
Ambiente: suelo
Intestino hombre y
animal
Ambiente:
refrigeradores
Termo resistentes a
la pasterizacin
(esporas)
Suelo, vegetacin,
leche alterante
Sensible a calor
Aves, hombre,
suelo
Forma esporas
Tierra, suciedad,
heces, piensos
Organismos
acuticos
Agua : tratamiento
del agua , coccin
fuerte , no refrigerar
por mucho tiempo
- Determinar el pH y ajustarlo a
6,80,2
PRE-ENRIQUECIMIENTO
Caldo de lactosa o
TSB
-255 mL de caldo para muestra no
pulverizada
-225 mL de caldo para muestra
pulverizada (15mL agitar y agregar en
porciones: 10, 10, 190 agitar para no
formar grumos
Transferir 1 mL de la mezcla
ENRIQUECIMIENTO
10mL de TT
Incubar:
- Alimentos con alta carga microbiana
242 h a 42C0,2C
- Alimentos con baja carga microbiana
242 h a 35C2C
Agar previamente
preparado y repartido en
cada caja 20 mL
RESULTADO POSITIVO
Mtodo
Aureus
de
ensayo
cuantitativo
para
determinar
Staphylococcus