MODIFICADOS GENTICAMENTE
LEGISLACIN DE RMGs
Gestin en general
La gestin de una colonia de ratones puede
definirse como la provisin de todos los
recursos materiales, humanos, y temporales,
necesarios para conseguir unos objetivos
preestablecidos.
Gestin en RMG
recursos materiales:
recursos humanos:
Formacin
Modelo animal
Personal suficiente
Instalacin, equipamiento
Espacio
recursos temporales:
Financiacin
Registros de datos
Tiempo necesario
Redactar PROYECTO
Cual es el objetivo cientfico
Qu RMG espero obtener
Genotipos, edades, sexos, etc.
Qu datos espero obtener
Muestras, experimentos, tcnicas, etc.
Cuales sern los controles
Establecer una cronologa
Recoger informacin
Informacin sobre el gen
Publicaciones
MGI
Mutantes espontaneos
Mutantes inducidos (qumico, radiaciones)
Mutaciones dirigidas (tcnicas de recombinacin)
Mutantes condicionales (Cre-lox, Tet-on, etc.)
Transgnicos
Recoger informacin
Informacin gentica: Apoe nomenclatura
B6.129P2-Apoetm1Unc/J
B6.129P2-Apoetm1(APOE*2)Mae
B6.129P2-Apoetm1(APOE*3)Mae
B6.Cg-Tg (APOE-Cyp7a1)1Rjd/Mmcd
SHL/StmRbrc
Apo E
Recoger informacin
Informacin gentica: fondo gentico
129S6/SvEv-Apoetm4Mae/J
B6.129P2-Apoetm1Unc/J
AKR.129P2(B6)-Apoetm1Unc/J
D2.129P2(B6)-Apoetm1Unc/J
B6.Cg-Apoetm1Unc (D12Mit182-D12Mit2)/Pgn
Recoger informacin
Informacin gentica: fondo gentico
DBA/2J
AKR/J
C57BL/6J
C57BLKS/J
http://phenome.jax.org/
Recoger informacin
Informacin gentica: genotipo
Muestras para genotipado e identificacin.
Edad de genotipado
Tcnicas de genotipado
NO INICIAR LA PRODUCCIN SIN TENER LA TCNICA
TESTAR SIEMPRE LOS FUNDADORES
TESTAR SIEMPRE LOS FONDOS GENETICOS
Recoger informacin
Informacin gentica: genotipo
FELASA guidelines for the production and nomenclature of transgenic rodents
Recoger informacin
Informacin gentica: genotipo
alelo KO
transgn
homocigoto
heterocigoto
hemicigoto
Recoger informacin
Informacin gentica: genotipo
B6.Cg-Tg(GFAP-APOE*3)37Hol Apoetm1Unc/J
B6.Apoe KO
B6.Cg-Tg (APOE-Cyp7a1)1Rjd/Mmcd
B6.Apoe Tg
B6.Tg Apoe KO
(+/+) (-/-)
(+/-) (+/-)
(+/+)
(-/-) (-/-)
(+/-)
(+/+)
B6.129P2-Apoetm1Unc/J
Recoger informacin
Informacin gentica: genotipo
B6.Cg-Tg(GFAP-APOE*3)37Hol Apoetm1Unc/J
B6.Apoe KO
B6.Cg-Tg (APOE-Cyp7a1)1Rjd/Mmcd
B6.Apoe Tg
B6.Tg Apoe KO
(+/+) (-/-)
(+/-) (+/-)
(+/+)
(-/-) (-/-)
(+/-)
(+/+)
B6.129P2-Apoetm1Unc/J
Apo E
Recoger informacin
Informacin gentica: fenotipo
Alteraciones reproductivas
Fertilidad,
Desarrollo,
Prolificidad,
Parto,
Destete,
Cancer
Neurodeg.,
Endocrinas,
Metablicas,
Cardiovascular
Bases de datos
Trazabilidad
Id. en la cubeta
Id. de la muestra
Genotipo
Id. ratn/Marcaje
Base de datos
Datos: reproductivos, cruces, muestras, etc.
Establecer la produccin
Establecer la produccin
6.8
4.8
Sistemas de cruces
Pubertad 6-8 semanas
Sistemas de cruces
Homocigosis (A/A)
Menor coste (genotipos)
Niveles de expresin (transgnicos)
Toda la produccin puede utilizarse
para experimentos
Heterocigosis (A/a)
Se obtienen controles wild type
Se evita la creacin de sub-estirpes
Sistemas de cruces
Mantenimiento del fondo gentico
Stocks no consanguneos
Estirpes Consanguneas
Estirpes hbridas
Establecimiento de congnicos (Speed Congenics)
RMGs-stocks no consanguneos
RMGs-estirpes consanguneas
Ventajas
Desventajas
Isogenicidad
Baja capacidad de reproduccin
Homocigosidad
Caras
Uniformidad genotpica Sensibles a factores ambientales
Estabilidad en el tiempo
129X1/SvJ
A/J
Individualidad
BALB/cByJ
Distribucin internacional
BALB/cJ
C3H/HeJ
Identificables
C57BL/6J
C57BL/6NJ
Sensibilidad
C57BL/10J
RMGs-estirpes hbridas
F1
x
B6
BALB/c
B6CF1
x
B6CF1
F2
B6CF1
B6CF2
RMGs-Congnicos
Elecciones de controles
No consanguneas
Parentales en heterocigosis
Los WT CONTROLES
Hbridos
Primera generacin
Los F1 son CONTROL
Consanguneas
Parentales en ambos
La CEPA es CONTROL
Congnicos
Parentales en ambos
La CEPA es CONTROL
Los WT CONTROLES
Mantenimiento de RMGs
Congelacin de embriones
Congelacin de esperma
Tcnicas de reproduccin asistida
X
Ncleo fundador
Colonia de expansin
A tener en cuenta
A tener en cuenta
RESUMEN
Recabar informacin gentica
Recabar informacin del fenotipo
Identificar los animales (genotipado)
Plantear los cruces dependiendo de las
necesidades y la instalacin
Analizar los animales
Evitar la variabilidad (3Rs)
Bases de datos
http://www.informatics.jax.org/mgihome/no
men/gene.shtml
http://www.informatics.jax.org/mgihome/no
men/index.shtm
Legislacin RMGs
Legislacin RMGs
Legislacion RMGs
Hasta ahora, necesaria la aprobacin del CEEA y
comunicar a la autoridad para hacer un RMG: explicar
objetivos, tcnicas a realizar, n de animales, eliminacin
del dolor, etc. NO ES NECESARIO PARA SU
MANTENIMIENTO.
A partir de ahora, adems, siempre que haya un fenotipo
potencialmente daino, incluso en mutaciones
espontaneas, para el mantenimiento de RMGs ser
necesario autorizacin expresa de la autoridad
competente .
Legislacion OMGs
Objetivo: la proteccin de la salud humana y del medio
ambiente.
Designa a la Administracin General del Estado o Autonomas,
dar la autorizacin para utilizacin confinada o liberacin
controlada.
Incluye la produccin de nuevos OMGs como la multiplicacin
de OMG ya existentes con tcnicas naturales.
El transporte de animales queda expresamente encuadrado en
el concepto de utilizacin confinada de OMGs
Evaluacin de RMGs-Tipo I
OMGs que sea poco probable que el organismo de origen o el
receptor causen enfermedades a seres vivos (humanos, plantas, o
animales)
Aquellos en los que la naturaleza del vector y el material
incorporado no originen en el OMG resultante un fenotipo que
pueda causar enfermedad a seres vivos.
Aquellos en que el OMG resultante sea poco probable que pueda
causar enfermedad en el ser humano animales o plantas en caso de
exposicin accidental en el medio ambiente o efectos nocivos sobre
el medio ambiente
Grado de confinamiento
1
Opcion.
Exigida
Exigida
Exigida
Opcion.
Exigida
Exigida
Exigida
Opcion.
Opcion.
Exigida
Exigida
Opcion.
Exigida
(suelo)
Exigida
Exigida
Opcion.
Opcion.
Opcion.
Opcion.
Opcion.
Opcion.
Exigida
Exigida
Gracias
Jos Manuel Snchez
Ernesto de la Cueva Bueno
Beln Pintado
The Jackson Laboratory