protenas totales

La sangre est formada por una solucin acuosa que contiene molculas de tamao
variable y diversos tipos de elementos celulares. Los elementos formes de la sangre se
encuentran formando una suspensin en agua denominada plasma. Aunque el plasma es
el medio natural de
Las clulas sanguneas, la mayora de las determinaciones qumicas se hacen en
suero.
Las protenas del plasma pueden clasificarse en dos grupos: las que son sintetizadas por
el hgado (albmina) y las inmunoglobulinas (producidas por las clulas plasmticas
de la mdula sea). El plasma humano tiene una en protenas de 60 a 80 g/L
(frecuentemente se expresa en g/dL; 6 a8 g/dl).
Casi la mitad de esta protena plasmtica es albmina, cuyo rango de concentracin es
35 a 45 g/L. La albmina es una protena de 62.000%D que acta como protena de
reserva, adems de importante transportador (cidos grasos, bilirrubina y frmacos) y
regulador osmtico. Es producida por el hgado. Su concentracin aumenta en casos
de deshidratacin y disminuye en casos de ascitis/edema y dao heptico severo.
La determinacin de la concentracin de protenas en sangre puede ser llevada a cabo
por diferentes mtodos. En esta prctica vamos a utilizar uno de los mtodos que se
utilizan con ms frecuencia: el mtodo de Biuret.
En l la disolucin de protena se mezcla con un reactivo que determina que aparezca o
se intensifique un color (azul) que se cuantifica midiendo la absorbancia a una
determinada longitud de onda frente a un blanco de reactivo.

Marco teorico
Las protenas totales son un conjunto de compuestos orgnicos macromoleculares, de un
peso molecular elevado, que estn formadas por aminocidos que se unen entre si por
enlaces peptdicos. Son introducidas en el organismo a travs de los alimentos, donde se
dividen en aminocidos para formar posteriormente las nuevas protenas a travs del
proceso conocido como sntesis de protenas.
Las protenas totales: Son el resultado de sumar: Alfa 1, Alfa 2, Beta gama globulina y
Albumina. Las protenas fraccionadas, al contrario que las protenas totales y
fraccionadas, son tiles a la hora de determinar estados anormales y enfermedades que
pueden afectar a nuestro organismo.
Protenas totales en suero.
Se miden en suero como parte de casi todos los anlisis de qumica sangunea. Su rango
de referencia es de 6,4 a 8,2 g/dL. Su funcin es mantener la presin osmtica coloidal

del plasma. Esta presin evita las prdidas de lquidos hacia los tejidos. El contenido en
protenas totales del suero depende del estado nutricional, funcionamiento heptico,
funcionamiento renal, errores metablicos y afecciones como mieloma mltiple. La
deshidratacin hace que todas las fracciones de protenas aumente dando lugar a
hiperproteinemia. La deshidratacin puede ser resultado del descenso en el consumo o
aumento de la prdida de lquidos en enfermedades como el mal de Addison, acidosis
diabtica, diarrea grave o deshidratacin por exposicin a altas temperaturas. La
hipoproteinemia se debe a un aumento de las prdidas proteicas o a un bajo consumo de
protenas por inanicin o malabsorcin. Aumento de prdidas: sndrome nefrtico (prdida
de albmina a travs de los tmulos renales daados), hemorragias por traumatismos o
extensas quemaduras.
Para la determinacin de protenas totales se utiliza el mtodo de Biuret; cuyo nombre se
debe al biuret, una molcula formada a partir de dos molculas de urea (H2N-CO-NH-CONH2), que es la ms sencilla que da positiva a esta reaccin. El reactivo de Biuret
contiene CuSO4 en solucin acuosa alcalina (de NaOH o KOH). La reaccin se basa en
la formacin de un compuesto de color violeta, debido a la formacin de un complejo de
coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno
que forma parte de los enlaces peptdicos, presentando un mximo de absorcin a 540
nm. La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de protenas
totales presentes en la muestra.

Albumina
Constituye ms de la mitad de todas las protenas sricas y gran parte de la presin
onctica depende de ella. Transporta sustancias menos solubles como cidos grasos,
bilirrubina, hormonas, calcio, metales, frmacos y vitaminas. Su concentracin de de 3,45,0 g/dL. Sufre una reduccin en procesos como afecciones hepticas, glomerulonefritis o
nefrosis, afectaciones gastrointestinales e inanicin. Tambin existe analbuminemia
hereditaria, aunque se trata de un proceso poco comn. Por su parte, su aumento puede
ser indicativo de deshidratacin
Marco teorico
La albmina es una protena que se encuentra en gran proporcin en el plasma
sanguneo, siendo la principal protena de la sangre, y una de las ms abundantes en el
ser humano. Es sintetizada en el hgado.
La concentracin normal en la sangre humana oscila entre 3,5 y 5,0 gramos por
decilitro, y supone un 54,31 % de la protena plasmtica. El resto de protenas presentes
en el plasma se llaman en conjunto globulinas. La albmina es fundamental para el
mantenimiento de la presin onctica, necesaria para la distribucin correcta de los

lquidos corporales entre el compartimento intravascular y el extravascular, localizado

entre los tejidos. La albmina tienecarga elctrica negativa. La membrana basal
del glomrulo renal, tambin est cargada negativamente, lo que impide la filtracin
glomerular de la albmina a la orina. En el sndrome nefrtico, esta propiedad es menor, y
se pierde gran cantidad de albmina por la orina.
la albmina es sintetizada en el hgado, rgano que adems sintetiza otras protenas
plasmticas como transferrina, ceruloplasmina, haptoglobina, alfa 1 glicoprotena cida,
factores de la coagulacin, algunos factores del complemento, etc. Los niveles de estas
protenas son muy variables, de manera que sus concentraciones en el plasma podran
no reflejar el grado de enfermedad heptica, excepto en la insuficiencia heptica en
estado terminal.
Puede resultar til la medida de la albmina srica como ndice del grado de enfermedad
heptica crnica o del avance de una enfermedad aguda en el curso de varias semanas.
Por otro lado, los niveles de albmina en la sangre no son generalmente un ndice
sensible de la funcin heptica, porque la degradacin de la albmina circulante
disminuye siempre que est deprimido el ndice de sntesis, cualquiera sea el mecanismo
del efecto anterior.
Por lo comn, los niveles de albmina en el suero son bajos en pacientes con enfermedad
crnica del hgado. Los cambios de la velocidad de degradacin permitirn la
concentracin normal de albmina en la sangre a pesar de las alteraciones de la sntesis.
La deficiencia de albmina y otras protenas reflejan nicamente la severidad de la
enfermedad heptica. El hgado normal produce de 12 a 15 gramos de albmina por da y
puede aumentar la produccin en ms de 2 gramos por da cuando hay prdidas mayores
de 3,5 gramos por da (Sndrome Nefrtico) para prevenir la hipoalbuminemia.

Determinacin de protenas totales:

El mtodo utilizado se basa en la reaccin de biuret en el cual los enlaces peptdicos de
las protenas reaccionan con el ion cprico Cu**, en medio alcalino, para da un complejo
color azul violeta con mximo de absorcin a 540 nm. El color formado se mide
colorimtricamente, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de protenas
totales en la muestra.

Colocar:
Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37C
Leer las absorbancias 540 nm en el espectrofotmetro llevado a cero con el
blanco reactivo. El color resultante es estable por lo menos treinta minutos.

Fc =

St. Protenas g/dl

D.O. Standard

Valores de Referencia
Se determine el contenido de protenas totales en sueros de personas sanas, de
ambas sexo, con alimentacin mixta normal y edades entre 17 y 40 aos. Se
obtuvo el siguiente rango:
Protenas totales:

F= 4.9g/dl / 1.275

BM
Blanco
Standar
Muestra

0.911
0.996
1.275
0.3410

6,0 a 8,0 g/dL

= 3.843137255

3843137255*0.3410 = 1.310509804
Resultado de protenas totales: 1.31

El verde de bromocresolftaleina, es un colorante indicador, que a ph3, 8 se

encuentra de color amarillento. La albmina al estar en contacto con el reactivo se
protoniza hacindolo menos cido al medio, lo que causa el cambio de color
indicador.
Procedimiento:

Mezclar e incubar por 30 min a temperatura ambiente. Leer a 620nm.

Calibrar a cero usando el tubo blanco correspondiente.
Calculo:
Factor = [S tan dard]
Abs. St
Albumina (g/dl) = abs. Muestra x Factor

Factor = 2.7g/dl
3.734439834

BM

0.008

Blanco

0.212

Standar

0.723

Muestra

1.021

/ 0.723 =

 3.734439834*1.021=3.812863071
Resultado de albumina: 3.81g/dl

Valores normales: 3.5- 5.0 g/dl

Conclusiones:
Las protenas se necesitan para la mayora de las funciones normales del cuerpo
como el mantenimiento, crecimiento, reproduccin, lactacin y produccin del
pelo.
El dficit de protena en la dieta reduce las reservas en sangre, hgado y
msculos y predisponen a los animales a padecer una variedad de enfermedades
graves o incluso fatales.
Durante el desarrollo de prctica realizada se procedi aplicar los principales
mtodos que se usan en el laboratorio para saber qu cantidades se encuentran
presentes en una solucin determinada.
A travs de la separacin de las protenas por medio de la curva de calibracin se
pudo observar que durante el experimento realizado, se obtuvieron datos
normales.

Cuestionario :
1) diga el fundamento de la determinacin de protenas totales y albuminas ?
Protenas totales :
Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico en medio alcalino,
para dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidad es
proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.
Albumina :
La albmina reacciona especficamente (sin separacin previa) con la forma aninica de
la 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfon ftalena (BCG). El aumento de absorbancia a 625 nm
respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la
muestra.

2) cuales son los principales tipos de protenas plasmticas del ser humano ?

1. Fibringeno: se forma en el hgado y juega . un papel importante en la coagulacin de

la sangre. Debido a su peso molecular elevado, es uno de los factores que condiciona la
viscosidad sangunea.
2. Albmina: de peso molecular bajo, se forma predominantemente en el hgado, pero
tambin, si bien en menor cantidad, en otros tejidos. Es responsable principalmente por la
presin coloido-osmtica del plasma. Otra de sus funciones consiste en el transporte de
sustancias. Al unirse con las hormonas, vitaminas, bilirrubina, medicamentos, etc., las
lleva por la circulacin a sus rganos efectores.
3. Globulinas: son producidas principalmente en el hgado (80%) y en los linfocitos
(20%). Se conocen tres tipos de globulina: alfa, beta y gamma. Las primeras (gluco y
lipoprotenas) son las transportadoras del angiotensingeno, de las vitaminas liposolubles
y del cobre (ceruloplasmina). Las betaglobulinas (lipoprotenas), incluyen, entre otras, la
transferrina y las transportadoras de vitaminas y hormonas. Las gammaglobulinas
(producidas por las plasmazellen, plasmocitos y linfocitos) son, en su mayor parte,
anticuerpos. Son llamadas tambin euglobulinas.

3) Cul es la importancia de protenas plasmticas del ser humano ?

Ayudan al balance de Fludos (Agua y electrolitos)

Regulan el equilibrio cido/base
Respuesta de fase aguda crean Anticuerpos
Construccin y reparacin de tejidos
Ayudan a la Coagulacin

4) Que tipos de protenas constituyen las globulinas?

Principales grupos de globulinas
- globulinas alfa 1 y 2
- globulinas beta
- globulinas epsilon
Globulinas alfa 1
La alfa 1 o antitripsina: Es la encargada de controlar la accin de las enzimas
lisosomales.
La TBG: Se encarga de fijar la hormona tiroidea. Transporta T3 y T4.
La alfa 1 glucoprotena cida: Tambin conocida como orosomucoide, es un
reactivo de fase aguda sintetizado en el hgado como respuesta a la inflamacin y
dao del tejido.

La RBP: Es la hormona fijadora de retinol, la cual transporta vitamina "A".

Normalmente se asocia a la prealbmina.
Globulinas alfa 2
El grupo de las globulinas alfa 2 est compuesto por las siguientes:
La macroglobulina (alfa 2): La funcin primordial de sta es neutralizar las enzimas
proteolticas.
La haptoglobina: Es la encargada de fijar la Hb plasmtica de los eritrocitos, y la
transporta al hgado para que no se excrete por la orina.
La ceruloplasmina: Transporta y fija el 90 por ciento del cobre srico.
La eritropoyetina: Sintetizada en el rin ante una hipoxemia, es la resposable de
la formacin de eritrocitos y plaquetas.
Globulinas beta
La hemopexina: Es la que fija y transporta el grupo hemo de la hemoglobina (Hb)
hacia el hgado.
La transferrina: Transporta hierro del intestino a depsitos de ferritina en diferentes
tejidos, y de all a donde sean necesarios.
Nota: Es un reactivo de fase aguda.
El complejo C3 del complemento: Son protenas sricas que actan en inmunidad
inespecfica, provocando la lisis de distintas bacterias.
Globulinas gamma
Corresponden a las inmunoglobulinas sricas o anticuerpos (IgA, E, G, M).
5)Qu importancia tiene la determinacin de protenas totales y albuminas
para un nutricionista?
Es importante debido a que si los valores salen alterados nos indicara una
enfermedad y tendramos que variar la dieta de esta persona para no complicar
ms su estado de salud.