ii
iii
iv
DEDICATORI AS
A mi Madre y Hermano
JUAN PABLO
vi
RECONOCIMIENTOS
Si mis emociones fuesen un rbol, quiero agradecer a dos personas por
alimentarlo y mantenerlo vivo: a mi madre, Alicia Aguila y a mi hermano,
Rodrigo Estrada. Agradezco a mis tos y ta, verdaderos escultores de m
ser; a mis amigos y amigas, por embeber el tiempo de un sabor
agradable, y a todas aquellas personas que tienden actuar como energa
para que todo avance. A nuestro profesor gua Dr. Richar Rodrguez, por
brindarnos confianza y direccin; a mi compaera Karlita Vasco por su
valiosa ayuda, y a mi compaero Andrs por su amigable trabajo.
Tambin quiero plasmar un sincero gracias a todas aquellas personas que
estructuran y fundamentan, el Laboratorio de Bacteriologa de la
Universidad Central y el Instituto de Microbiologa de la Universidad San
Francisco de Quito.
Gracias a todos.
JUAN PABLO
vii
NDICE GENERAL
pp.
LISTADO DE TABLAS ........................................................................................... ix
LISTADO DE FIGURAS .......................................................................................... x
LISTADO DE ANEXOS .......................................................................................... xi
RESUMEN .............................................................................................................xii
ABSTRAC ............................................................................................................. xiii
INTRODUCCIN .................................................................................................... 1
CAPTULO I
REVISIN DE LITERATURA.................................................................................. 4
Generalidades (Salmonelosis).......................................................................... 4
Etiologa............................................................................................................ 4
Patogenia ......................................................................................................... 7
Mecanismos de contaminacin de los huevos con Salmonella. ....................... 7
Diagnstico ....................................................................................................... 9
Signos y sntomas .......................................................................................... 12
Tratamiento .................................................................................................... 15
Prevencin...................................................................................................... 15
Epidemiologa ................................................................................................. 16
CAPTULO II ......................................................................................................... 23
MATERIALES Y MTODOS ................................................................................. 23
Localizacin del rea de estudio. ................................................................... 23
Materiales: ...................................................................................................... 24
Mtodos .......................................................................................................... 25
CAPTULO III ........................................................................................................ 34
RESULTADOS...................................................................................................... 34
CAPTULO IV........................................................................................................ 39
DISCUSIN .......................................................................................................... 40
viii
CAPTULO V......................................................................................................... 44
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ........................................................ 44
Conclusin ...................................................................................................... 44
Recomendaciones .......................................................................................... 44
ANEXOS ............................................................................................................... 45
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS...................................................................... 62
BIBLIOGRAFA............................................................................................... 62
NET-GRAFA .................................................................................................. 65
LISTADO DE ABREVIATURAS ............................................................................ 68
GLOSARIO ........................................................................................................... 71
ix
LISTADO DE TABLAS
1. pp.
1. Tabla 1. Test bioqumicos ms utilizados en la diferenciacin de
Salmonella de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae y la
identificacin de Salmonella serotipos Typhi y Paratyphi Aa ............. 12
2. Tabla 2. Estudio de Salmonella en diferentes tipos de carne ............ 19
3. Tabla 3. Enfermedades debidas a Salmonella en la Provincia de
Pichincha en el 2011 y entre enero y mayo de 2012. ........................ 21
4. Tabla 4. Mercados seleccionados para el estudio ............................. 23
5. Tabla 5. Tabla de lectura para la revelacin de resultados del API
20E. ................................................................................................... 31
6. Tabla 6. Resultados de la pruebas bioqumicas preliminares del primer
muestreo............................................................................................ 35
7. Tabla 7. Resultados de la pruebas bioqumicas preliminares del
segundo muestreo ............................................................................. 35
8. Tabla 8. Resultados de las Pruebas Bioqumicas Confirmatorias
(Galera API 20E) .............................................................................. 36
9. Tabla 9. Nmero de expendios de huevos encontrados en los
mercados de Quito, entre febrero y marzo del 2012. ........................ 54
10. Tabla 10. Datos de las encuestas realizadas a los expendedores de
huevos de los mercados seleccionados para el estudio, febrero del
2012. ................................................................................................. 55
11. Tabla 11. Resultados de las siembras en el primer muestreo, en los
medios SSA y XLD. ........................................................................... 60
12. Tabla 12. Resultados de las siembras en el segundo muestreo, en los
medios SSA y XLD. ........................................................................... 61
LISTADO DE FIGURAS
pp.
1. Fig 1. rbol filogentico del clado Salmonella. .............................................. 6
2. Fig 2. Dendograma de Salmonella enterica (Basado en la genmica del
Blast) ............................................................................................................ 6
3. Fig 3. Patognesis de la contaminacin del huevo por Salmonella enteritidis.
..................................................................................................................... 9
4. Fig 4. Alimentos implcitos en brotes de Salmonella en la UE, ao 2008 .... 19
5. Fig 5. Casos y Tasas de Salmonelosis en el Ecuador entre 1990 y 2008 ... 20
6. Fig 6. Distribucin mundial de especies de Salmonella en fuentes humanas y
no humanas. ............................................................................................... 22
7. Fig 7. Esquema del estudio experimental ................................................... 32
8. Fig 8. Flujograma del anlisis microbiolgico .............................................. 32
9. Fig 9. Porcentaje de muestras sospechosas en el primer muestreo
......34
10. Fig 10. Porcentaje de muestras sospechosas en el segundo muestreo
.....34
11. Fig 11. Bacterias provenientes de los huevos colectados en los mercados de
huevos ........................................................................................................ 39
17. Fig 17. Nmero de expendios muestreados. ............................................... 54
18. Fig 18. Tipo de Venta de Huevos en los Expendios .................................... 58
19. Fig 19. Nmero de cubetas de huevos que se venden en los expendios .... 58
20. Fig 20. Granjas de Procedencia de los Huevos .......................................... 59
21. Fig 21. Seleccin de los huevos.................................................................. 59
xi
LISTADO DE ANEXOS
pp.
Anexo A. Norma Tcnica Ecuatoriana NTE INEN 1973:2011. Huevos
Comerciales y Ovoproductos. Requisitos Microbiolgicos. ...................... 46
Anexo B. Medios de Cultivo Utilizados .................................................... 47
Anexo C. Encuestas. .............................................................................. 53
Anexo D. Resultados de las siembras en el primer muestreo, en los
medios SSA y XLD. ................................................................................. 60
Anexo E. Resultados de las siembras en el segundo muestreo, en los
medios SSA y XLD. ................................................................................. 61
xii
RESUMEN
En el Ecuador, la salmonelosis es una enfermedad de notificacin
obligatoria. A nivel mundial es una de las enfermedades transmitidas por
alimentos (ETAs) ms importante, siendo los huevos una de las
principales fuentes de la infeccin. El objetivo principal de este estudio fue
determinar la presencia de Salmonella spp. en huevos frescos de gallina
en los principales mercados de la ciudad de Quito. En total se analizaron
282 huevos agrupados en 94 muestras (cada muestra constituida por tres
huevos). Se realizaron 2 recolecciones (de 47 muestras cada una), con un
lapso de 30 das entre el inicial y el de replicacin. Al cultivo
bacteriolgico, las colonias sugestivas de Salmonella fueron analizadas
por pruebas bioqumicas para su tipificacin. En ninguna de las muestras
se confirm la presencia de Salmonella spp., pero se evidenciaron
bacterias entricas y ambientales que pueden perjudicar la calidad del
huevo e incluso producir problemas en salud pblica como: Pseudomona
spp., Enterobacter cloacae, Pantoea spp., Provindencia rettgeri, Proteus
mirabilis, Aeromona spp. y Burkhordelia cepacia. Sin embargo, este
estudio no descarta la presencia de Salmonella spp. en huevos
comercializados en la ciudad de Quito.
HUEVOS,
MERCADOS,
xiii
ABSTRAC
In Ecuador, salmonellosis is a disease that requires public notification. It is
globally known to be one of the most important foodborne diseases, with
eggs as one of the primary sources of infection. The objective of this study
was to determine the presence of Salmonella spp. in fresh hen eggs in the
principal markets of Quito. A total of 282 eggs were analyzed in 94 pooled
samples (each sample consisting of 3 eggs). There were two samplings
(each one of 47 samples), with a span of 30 days between the initial and
the replication ones. After bacterially cultured, the suggestive colonies of
Salmonella were analyzed using biochemical tests for bacterial
classification. No samples confirmed the presence of Salmonella spp. but
there was confirmed the presence of enteric and environmental bacteria
that can damage egg quality and even cause problems in public health
such as: Pseudomona spp., Enterobacter cloacae, Pantoea spp.,
Provindencia rettgeri, Proteus mirabilis, Aeromona spp. and Burkhordelia
cepacia. However, this research does not rule out the presence of
Salmonella spp. in eggs sold in the city of Quito.
INTRODUCCIN
La salmonelosis humana es una enfermedad zoonsica que genera
cuantiosas prdidas econmicas a nivel mundial por su elevada
morbilidad y mortalidad. En la Unin Europea la salmonelosis ha sido una
de las ETAs ms frecuentes constituyendo el 31% de todos los brotes
(ECDC, 2011). Mientras que en Estados Unidos la Salmonella fue la
segunda causa ms comn de las ETAs con 1.027.561 casos (11%)
siendo la primera causa de hospitalizaciones y muertes (CDC, 2011).
En el Ecuador, las enfermedades transmitidas por agua y alimentos
(ETAs) estn entre las diez primeras enfermedades de notificacin
obligatoria, siendo la salmonelosis una de las ms importantes causas de
brotes (MSP, 2009). En el Ecuador, en el ao 1990 se reportaron 9.908
casos de salmonelosis; en el 2001 esta cifra aument bruscamente a
18.772, periodo desde el cual el nmero ha ido disminuyendo
paulatinamente con 3.286 casos en el 2008 (MSP/EPI 2, 2008).
Los huevos constituyen una fuente de protena de origen animal de menor
precio y comprobado valor nutritivo (Panaftosa, 2005), por lo que forman
parte importante de la dieta alimenticia de la mayora de los ecuatorianos,
cuyo consumo per cpita anual ha aumentado de 121 a 140 huevos por
ecuatoriano en menos de dos aos, con un promedio de 12 huevos al
mes (Conave, 2011).
Del 77% al 82% de los brotes de Salmonella enteritidis se han asociado a
huevos con cscara o alimentos a base de huevos (FAO/OMS, 2005). La
Salmonella enteritidis ha desarrollado una excepcional capacidad para
colonizar el tejido ovrico de las gallinas y estar presente en el contenido
de los huevos con cscara intacta facilitando su transmisin a los seres
humanos (FAO/OMS, 2005).
En nuestro medio, varios alimentos (ovoproductos) son preparados en
1
CAPTULO I
REVISIN DE LITERATURA
A. Generalidades (Salmonelosis)
La salmonelosis es una enfermedad infecciosa del hombre y los animales
causada por microorganismos de dos especies de Salmonella (Salmonella
enterica y Salmonella bongori). En el hombre, los microorganismos del
gnero Salmonella son agentes etiolgicos de infecciones intestinales y
sistmicas, por lo general, como contaminantes secundarios de los
alimentos, de origen animal y ambiental o, frecuentemente, como
consecuencia de la infeccin subclnica en animales de abasto que
provoca la contaminacin de la carne, los huevos y la leche o la
contaminacin secundaria de frutas y verduras que se han fertilizado o
regado con desechos orgnicos. La salmonelosis humana es una de las
enfermedades
zoonsicas
ms
frecuentes
de
mayor
impacto
como
especies
choleraesuis,
individuales (p.
Salmonella
ej.,
Salmonella typhi,
typhimurium
Salmonella
C.
Patogenia
continuacin
se
describe
brevemente
la
patognesis
de
la
las
clulas
inmunes,
especficamente
los
E. Diagnstico
La deteccin de Salmonella se realiza generalmente mediante el cultivo
microbiolgico, pero se han desarrollado diversos mtodos rpidos, que
se basan en las caractersticas inmunolgicas y en la secuencia de bases
de los nucletidos en los cidos nucleicos (Ray, 2010).
1.
necesario
utilizar
medios
de
preenriquecimiento
para
facilitar
el
37C.
En
dichos
medios
Salmonella
forma
colonias
11
Salmonella
typhi
K/A
+ dbil
+
-
Salmonella
paratyphi A
K/Ag
o + dbil
+
-
(+)
+
A
A
-
+
Ag
Ag2 das
Ag
-
F. Signos y sntomas
1. Salmonelosis en humanos:
a) Gastroenteritis. La gastroenteritis es la forma ms frecuente de
salmonelosis. Los sntomas suelen aparecer entre las 6 y 48 horas
siguientes a la ingestin de alimentos o agua contaminada, con una
sintomatologa inicial de nuseas, vmitos y diarrea no sanguinolenta.
12
paratifoidea, se
produce
por S. paratyphi
A,
Salmonella
de
un
color
bronceado
caracterstico,
bazo
riones
Tratamiento
Prevencin
I.
Epidemiologa
intestinales
como:
rotavirus,
norovirus,
patotipos
de
sin
embargo,
tambin
se
estudiaron
cien
bandejas
# de Muestras
Pollo
Cerdo
Vaca/Buey
Ternera
Carne picada de vacuno
Carne picada de pollo
Carne picada de pavo
31439
16573
5871
3783
74758
997
3712
% Positivos
10,7
5,4
2,2
0,4
3,4
15,7
29,2
19
20
Tabla 3. Enfermedades debidas a Salmonella en la Provincia de Pichincha en el 2011 y entre enero y mayo de 2012.
rea
2011
Reportados
Confirmados
Fiebres
Infecciones
Infecciones
Fiebres tifoidea
tifoidea y
debidas a
por
y paratifoidea
paratifoidea
Salmonella
Salmonella
14
2
12
2
_
_
_
_
22
_
18
_
_
_
_
_
6
_
3
_
7
5
6
5
11
3
11
2
1
2
1
_
_
_
_
_
_
_
_
_
1
1
1
1
_
_
_
_
1
1
_
1
1
_
1
_
_
_
_
_
_
_
_
_
3
2
2
2
1
_
1
_
6
2
6
1
9
793
6
26
83
811
68
40
21
2012
Reportados
Fiebres
Infecciones
tifoidea y
por
paratifoidea Salmonella
2
1
_
_
4
_
1
_
_
_
5
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
1
5
5
_
_
_
2
_
4
16
9
Confirmados
Fiebres
Infecciones
tifoidea y
por Salmonella
paratifoidea
2
1
_
_
4
_
_
_
_
_
3
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
_
1
_
_
_
_
_
2
_
4
14
8
22
CAPTULO III
MATERIALES Y MTODOS
A.
Nombre
Zona Centro
(Manuela
Senz)
1
2
3
4
5
6
7
8
Guaman
Las Cuadras
Chiriyacu
La Magdalena
Mayorista
Amrica
Central
San Francisco
Zona la Delicia
Cotocollao
Zona Centro
Zona Norte
(Eugenio
Espejo)
10
11
12
13
14
San Roque
Comit del Pueblo
Iaquito
Santa Clara
Caldern
15
Carapungo
Zona Quitumbe
Zona Sur
(Eloy Alfaro)
Zona Caldern
Direccin
Av. Maldonado
Matilde lvarez y Mariscal
Andrs Prez y Calvas
Cacha y Puruh
Ayapamba y Teniente Ortiz
Buenos Aires y Uruguay
Av. Pichincha y Esmeraldas
Rocafuerte e Imbabura
Av. Diego de Vsquez de
Cepeda
Cumand y Av. 24 de Mayo
Fco. Endara y Rodrguez
Calle Pereira e Iaquito
Versalles y R. Dvalos
9 de agosto y Paredes
Calle G y Neptal Godoy Calle
B-5
2.
Localizacin
de
los
sitios
de
anlisis
de
B.
Materiales:
1. Materiales para la toma de muestras de huevos
Fundas Wirlpack estriles
Guantes de ltex
Marcadores permanentes
Termos
Bolsas de hielo qumico
Hojas de encuesta y de de registro de las muestras
Tableros
Esferos
Cmara fotogrfica
2. Materiales para el estudio microbiolgico
Fundas Wirlpack de 500 ml.
Frascos de vidrio autoclavables de 500 ml.
Frascos autoclavables de 1000 ml
Pipetas estriles de 10 ml
Tubos de ensayo estriles
Cajas petri desechables
Probetas
Hisopos estriles
Palillos largos estriles
Palillos cortos estriles (mondadientes)
Pinzas
Cucharas estriles
Jeringuillas de 5 ml
Mechero
Encendedor elctrico
Balanza electrnica
Incubadora
Refrigerador
Congelador -20C
Destilador de agua
Alcohol potable al 70%
24
C.
Mtodos
1. Tipo de Diseo Experimental: Estudio dirigido a los mercados.
2. Tipo de muestreo: Seleccin aleatoria de los huevos de todos los
expendios.
25
mes despus.
d) Se rotul cada muestra con el cdigo respectivo. La
codificacin se realiz de la siguiente manera: M00-E00-#0
Dnde: M = Mercado (01-15); E = # de expendio (01 - 12); # =
Nmero de muestreo (1 - 2); y 0= Nmero asignado
e) Las muestras se almacenaron dentro de un termo con bolsas
de hielo qumico, a una temperatura aproximada de 4 C.
6. Procesamiento microbiolgico de los huevos
a) Todo el procesamiento microbiolgico se realiz bajo los
siguientes criterios:
(1) Desinfectar todas las superficies con alcohol al 70% antes
de iniciar con el procesamiento.
(2) Trabajar frente a un mechero.
(3) Utilizar mandil, guantes de ltex y mascarilla.
(4) Disponer de un recipiente adecuado para eliminar palillos
e hisopos contaminados.
(5) Disponer de una funda roja para eliminar los desechos
producto del procesamiento microbiolgico.
(6) Utilizar materiales estriles.
(7) Guardar todas las normas de bioseguridad establecidas
en cada uno de los laboratorios.
b) Se trituraron los huevos dentro de la funda Wirlpack hasta tener
una muestra homognea.
c) Se pesaron 25 g de la muestra en un recipiente estril junto al
mechero.
d) Pre-Enriquecimiento: Se colocaron los 25 gramos de la
muestra en 225 ml de Caldo Salmocyst (Anexo B) y se
incubaron por 6 a 8 horas a 37C.
e) Enriquecimiento Selectivo: Se transfirieron 10 ml del caldo
27
distinta,
las
cuales
fueron
procesadas
Oxidasa = negativo
Indol = Negativo
Citrato = Positivo
Urea = Negativo
(b)
(c)
30
Reaccin / Enzimas
Beta-galactosidasa
Arginina deshidrolasa
Lisina descarboxilasa
Ornitina descarboxilasa
Utilizacin del citrato
H2S
Produccin de H2S
URE
TDA
IND
Ureasa
Triptfano desaminasa
Produccin de indol
Produccin de acetona (VogesProskauer)
VP
GEL
Gelatinasa
GLU
MAN
INO
SOR
RHA
SAC
MEL
AMY
ARA
OX
Fermentacin/oxidacin de glucosa
Fermentacin/oxidacin de manitol
Fermentacin/oxidacin de inositol
Fermentacin/oxidacin de sorbitol
Fermentacin/oxidacin de ramnosa
Fermentacin/oxidacin de sacarosa
Fermentacin/oxidacin de melobiosa
Fermentacin/oxidacin de amigdalina
Fermentacin/oxidacin de arabinosa
Citocromo oxidasa
Negativo
Sin color
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Verde turquesa
Sin precipitado
negro
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Positivo
Amarillo
Rojo o naranja
Rojo o naranja
Rojo o naranja
Azul oscuro
Precipitado
negro
Rojo o naranja
Marrn rojo
Anillo rosa rojo
Sin color
Rosa-rojo
Sin difusin de
pigmento
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Azul o verde
Difusin de
pigmento
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
31
Casos Sospechosos a
Salmonella
Tipificacin de especie con
API 20E
Serotipificacin
Anlisis estadsticos y
difusin de los resultados
32
MUESTRA
Triturar los huevos dentro de una
funda wilrpak estril
ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
Transferir 10 ml de Caldo Salmocyst a un tubo estril
Colocar la tableta con el suplemento selectivo, disolver
Incubar 24 h a 37C
AISLAMIENTO
Sembrar por estriacin en los medios: Agar Xilosa-LisinaDesoxicolato (XLD) y Salmonella-Shigella Agar (SSA).
Incubar 24 h a 37C
SUBCULTIVO
Seleccionar las colonias tpicas y sembrar en
Agar Nutritivo
XLD Colonias rojas con centro negro
SSA Colonias blancas con centro negro
33
CAPTULO IV
RESULTADOS
1.
Sospechosas
22%
Sospechosas
24%
No
sospechosas
76%
No
sospechosas
78%
b)
SIM
Urea Citrato
SH2 Indol Movilidad
#
Muestra
Cdigo
#
Aislado
TSI
M01-E01-#1
K/K
1
2
2
9
13
13
20
28
28
30
32
32
33
34
37
37
41
41
44
44
M01-E01-#1
M11-E01-#1
M11-E01-#1
M03-E01-#1
M14-E03-#1
M14-E03-#1
M07-E02-#1
M13-E02-#1
M13-E02-#1
M12-E01-#1
M12-E03-#1
M12-E03-#1
M12-E04-#1
M12-E05-#1
M12-E08-#1
M12-E08-#1
M12-E12-#1
M12-E12-#1
M15-E03-#1
M15-E03-#1
2
1
2
1
1
2
1
1
2
1
1
2
1
1
1
2
1
2
1
2
K/K
K/A
K/A
K/K
K/A
K/A
K/K
K/K
A/A
K/K
K/K
K/K
K/A
K/A+SH2
K/K+SH2
K/K+SH2
K/K
K/K
K/K
K/K
+
+
-
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
3
3
7
10
16
16
19
19
28
26
36
36
41
41
43
44
45
45
Cdigo
M02-E01-#2
M02-E01-#2
M02-E04-#2
M03-E02-#2
M04-E03-#2
M04-E03-#2
M07-E01-#2
M07-E01-#2
M13-E02-#1
M10-E05-#2
M12-E07-#2
M12-E07-#2
M12-E12-#2
M12-E12-#2
M15-E02-#2
M15-E03-#2
M09-E01-#2
M09-E01-#2
# Aislado TSI
1
2
1
1
1
2
1
2
1
1
1
2
1
2
1
1
1
2
A/A
A/A
A/A
A/A
A/A
A/A
A/A
K/K
K/A
K/K
K/K
K/K
K/K
K/K
A/A
K/K
K/K
K/K
35
SIM
UREA Citrato
SH2 Indol Movilidad
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
c) Resultados
de
las
Pruebas
Bioqumicas
Confirmatorias
Mercado
Guaman
Caldern
Central
Iaquito
Iaquito
Carapungo
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Las Cuadras
Las Cuadras
Chiriyacu
Magdalena
Central
San Roque
Iaquito
Iaquito
Carapungo
Carapungo
Cotocollao
Cdigo
M01-E01-#1
M14-E03-#1
M07-E02-#1
M12-E01-#1
M12-E04-#1
M15-E03-#1
M12-E08-#1
M12-E12-#1
M12-E12-#1
M02-E01-#2
M02-E04-#2
M03-E02-#2
M04-E03-#2
M07-E01-#2
M10-E05-#2
M12-E07-#2
M12-E12-#2
M15-E02-#2
M15-E03-#2
M09-E01-#2
Gnero/especie
Pseudomana oryzihabitans
Providencia rettgeri
No fermentadora
Pantoea
Enterobacter cloacae
No fermentadora
Proteus mirabilis
Pseudomona fluorescens/putida
Burkhordelia cepacia
Enterobacter cloacae
Aeromona hydrophila
Enterobacter cloacae
Pantoea sp.
Pseudomona aureginosa
Pseudomona oryzihabitans
Pseudomona oryzihabitans
Pseudomona fluorescens/putida
Aeromona salmonicidas spp.
No fermentadora
Pseudomona oryzihabitans
36
% Probabilidad
Segn API 20E
76,6
99,9
51,2
95,1
99,9
80
100
85
59,3
85
96,2
72
76,6
76,6
54,4
71,7
76,6
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
42%
16%
11%
11%
5%
5%
5%
5%
0%
Lugares
de
Procedencia
de
los
huevos:
De
39
# Expendios
25
21
20
15
12
10
5
b)
c)
# Expendios
25
21
20
15
10
5
10
15
20
Das de almacenamiento
d)
# Expendios
25
20
15
11
10
5
Raspa cuchillo
Trapo seco
0
Trapo hmedo y Trapo hmedo
raspa con cuchillo
Ninguna
38
# Expendios
13
15
13
12
10
10
5
0
Bota a la
basura
Vende
Alimento
Mascotas
Devuelve
Consumo
propio
Regala
f)
# Expendios
35
30
25
20
15
10
5
0
30
11
5
1
8
3
8
1
39
CAPTULO V
DISCUSIN
La investigacin no demostr la presencia de Salmonella spp. en huevos,
pese a que las muestras fueron sometidas a protocolos microbiolgicos
que favorecen el desarrollo selectivo de Salmonella a partir de muestras
de alimentos. En estudios similares realizados en Per, Argentina,
Colombia y Cuba, no se encontraron serotipos del gnero Salmonella
importantes en Salud Pblica, pero se identificaron cepas no tipificables,
especficas de especie (S. gallinarum principalmente) y otras nada
conocidas en brotes de salmonelosis (Salmonella djugu, S. mbandaka y
S. zioria) (Levano et. al, 2001; Franseschi, 1996; Leyva et. al, 1996). Por
otro lado, en Chile y Mxico se ha reportado una presencia muy baja de
Salmonella enteritidis en huevos (1 en 1081 y 1 en 400 huevos,
respectivamente) (Pozo et al, 2000; Mancera et. al, 2005). En estudios
ejecutados en la Unin Europea en huevos individuales y pools se report
la presencia de Salmonella entre el 0 y el 6.1% (Wallace, 2007; Betancort
et. al, 2010, ECDC, 2010).
La presencia de Salmonella en huevos y ovoproductos es muy variable y
podra estar influenciada por el nmero de muestras analizadas,
condiciones
de
transporte,
almacenamiento,
manipulacin
procesamiento.
En el Ecuador, hay escasos estudios de salmonelosis y ninguno ha sido
orientado a la deteccin de Salmonella en huevos (Laboratorio de
Alimentos de la Unidad Municipal de Salud Centro, 2012, Direccin
Provincial de Salud de Pichincha, 2012; MSP, 2012; Vasco, 2012).
Salmonella es una bacteria de difcil cultivo y compite con otros miembros
de la familia Enterobacteriaceae provenientes del medioambiente, heces
fecales y la manipulacin, que dificultan su desarrollo en los medios de
40
43
CAPTULO VI
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
A.
Conclusin
No se evidenci la presencia de Salmonella spp. en huevos
frescos de gallina de 47 expendios encontrados en 15
mercados
de
la
Ciudad
de
Quito.
En los
anlisis
B.
Recomendaciones
Impulsar investigaciones peridicas y vigilancia de las ETAs
de origen animal donde intervengan los mdicos veterinarios
zootecnistas.
Efectuar muestreos directamente en las granjas avcolas
industriales a nivel cama; materiales de recoleccin .y
lugares de almacenamiento del huevo, realizando estudios
comparativos a la presencia de Salmonella en otros
alimentos de origen animal, como carne de aves, cerdo y
bovino. Del mismo modo se recomienda realizar los estudios
en huevos de aves de traspatio.
Debido a la contaminacin con bacterias inespecficas, se
recomienda, en futuros estudios, desinfectar los huevos
externamente antes de realizar anlisis microbiolgicos,
segn lo indica Wallace (2007).
44
ANEXOS
45
46
Crecimiento
Bueno
Bueno
Inhibida
Inhibida
48
5,0 g
2,5
2,5
10,0
8,5
8,5
8,5
1,0
0,025
13,5
0,330 mg
pH 7,2 0,2
*Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.
49
52
Anexo C. Encuestas.
1.
Hoja de Encuesta.
Clave
Preguntas al vendedor
1. Nombre del/la propietario/a: _________________________________
2. Nmero de telfono: _______________________________________
3. Vende sus huevos: Al por mayor Al por menor
4. De dnde proceden los huevos?
_____________________________________________
5. Das de recepcin de huevos: _______________________________
6. Hora de recepcin de huevos: _______________________________
7. Hace qu tiempo trajo los huevos para la venta?
Hoy
Ayer
_____das
8. Cmo almacena los huevos?: _________________________
Temperatura ambiente
Refrigeracin Canasta
Cubeta
Funda
Otros:________
9. Selecciona los huevos antes de la venta:
Si(siga a la pregunta 10)
No(siga a la pregunta 11)
53
14
12
10
8
6
4
2
0
12
5
1
5
2
3
1
54
Tabla 10. Datos de las encuestas realizadas a los expendedores de huevos de los mercados seleccionados para el estudio, febrero del 2012.
Limpieza
Seleccin
Destino
daados y/o
defectuosos
Otros
productos de
venta
Trapo hmedo
Elimina rotos
defectuosos
Bota basura
Ninguno
Avcola El
Abayn
Ninguna
Elimina rotos
defectuosos
Bota basura
Lcteos, frutas,
cereales
Ambato
No Sabe
Trapo hmedo
Ninguna
Devuelve
Lcteos,
gaseosas
Bota basura
Ninguno
Bota basura
Ninguno
Mercado
#
Cdigo
Guaman
M01-E01-#1
700
Ambato
Familia
Sereno
Snchez
M11-E01-#1
Por menor
1000
Baos
M02-E01-#1
Por menor
50
2
3
Comit
del
Pueblo
Las
Cuadras
Nmero
Procedencia
cubetas
Das de
Granja
almacenaje
Mayorista
M05-E01-#1
Por menor
500
Ambato
No Sabe
20
Trapo hmedo
Mayorista
M05-E02-#1
Por menor
800
Ambato
Avcola El Oro
15
Ninguna
Mayorista
M05-E03-#1
Por menor
1200
Ambato
Avcola El Oro
15
Ninguna
Mayorista
M05-E04-#1
600
Puellaro
No Sabe
10
Mayorista
M05-E05-#1
Por menor
200
Ambato,
Latacunga
No Sabe
Chiriyacu
M03-E01-#1
580
Puembo
Avcola El Oro
15
Trapo hmedo
Trapo
hmedo/Raspa
cuchillo
Ninguna
10
Chiriyacu
M03-E02-#1
Por menor
2000
Ambato
Cotal
Raspa cuchillo
11
Caldern
M14-E01-#1
Por menor
40
Guayabamb
a
No Sabe
Ninguna
12
Caldern
M14-E02-#1
Por menor
100
Puellaro
No Sabe
Ninguna
13
Caldern
M14-E03-#1
Por menor
60
Puellaro
No Sabe
15
Ninguna
14
Magdalena
M04-E01-#1
Por menor
30
Ambato
No Sabe
Ninguna
15
Magdalena
M04-E02-#1
200
Ambato
No Sabe
16
Magdalena
M04-E03-#1
Por menor
30
Ambato
No Sabe
55
Elimina rotos
defectuosos
Elimina rotos
defectuosos
Elimina rotos
defectuosos
Ninguna
Elimina rotos
defectuosos
Ninguna
Ninguna
Bota a la basura
y vende
Devuelve
Bota basura
Vende y/o regala
Vende
panaderas
Elimina rotos
defectuosos
Elimina rotos
defectuososTamao
Elimina rotos
defectuosos
Elimina rotos
defectuosos
Trapo seco
Ninguna
Bota y regala
Trapo hmedo
Tamao
Bota a la basura
y vende a
panaderas
Bota basura
Bota basura
Ninguno
Pollo
Gaseosas,
Lteos, snacks
Mariscos
Ninguno
Lcteos, huevos
de codorniz
Caracoles
(ceviche de
churos)
Lcteos
Lcteos,
gaseosas
Lcteos,
gaseosas
Lcteos, miel
Mercado
#
Cdigo
17
Amrica
M06-E01-#1
Por menor
Nmero
Procedencia
cubetas
8
Tumbaco,
Puellaro,
Das de
Granja
almacenaje
Limpieza
Seleccin
Destino
daados y/o
defectuosos
Otros
productos de
venta
No Sabe
15
Trapo hmedo
Ninguna
Devuelve
Vveres
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
Vveres
Ninguna
Ninguna
Vende
Lcteos
Ninguna
Tamao
Lcteos
Guayabamba
18
Amrica
M06-E02-#1
N/R
N/R
N/R
19
Central
M07-E01-#1
Puellaro
20
Central
M07-E02-#1
Por menor
10
Puellaro
Granja Seores
Torres
Granja Seores
Torres
21
San
Francisco
M08-E01-#1
1000
Ambato,
Latacunga,
PRONACA
Huambal,
Santa Teresita,
Velastegu,
Pronaca
Ninguna
Tamao
Vende a
panaderas
Ninguno
22
San
Roque
M10-E01-#1
1000
Ambato
No Sabe
15
Ninguna
Elimina rotos
defectuososTamao
Lcteos
M10-E02-#1
500
Ambato
Granja La
Dolorosa
Ninguna
Tamao
Lcteos,
gaseosas
M10-E03-#1
700
Ambato
Avcola El Oro
Ninguna
Ninguna
Solo huevos
M10-E04-#1
Por menor
200
Ambato
Avcola El Oro
Ninguna
Tamao
Vende
Ninguno
Ninguna
Ninguna
Bota basura
Frutas,
verduras,
lcteos,
vegetales
23
24
25
26
27
28
San
Roque
San
Roque
San
Roque
San
Roque
Santa
Clara
Santa
Clara
M10-E05-#1
Por menor
50
Ambato
Granja
Cecilita
M13-E01-#1
Por menor
Quito
Depsito "El
Vecino"
Trapo hmedo
Tamao y color
Lleva a su casa
Lcteos
M13-E02-#1
Por menor
10
PRONACA
PRONACA
15
Ninguna
Ninguna
Devuelve
Lcteos
Carne, lcteos,
embutidos
29
Santa
Clara
M13-E03-#1
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
30
Iaquito
M12-E01-#1
Por menor
120
Ambato
No Sabe
Ninguna
Ninguna
Cambia
31
32
Iaquito
M12-E02-#1
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
Vveres en
general
Lcteos, pollos
Trapo hmedo y
raspa con cuchillo
Tamao
Devuelve
Lcteos, quesos
Iaquito
M12-E03-#1
Tabla10. (cont.)
350
Ambato
Avcola El Oro
56
Nmero
Procedencia
cubetas
Limpieza
Seleccin
N/R
N/R
N/R
Destino
daados y/o
defectuosos
N/R
Avcola El Oro
Trapo hmedo
Tamao
Cambia
Granja
Trapo hmedo
Tamao
Regala
Otros
productos de
venta
Lcteos, pollos
Polo,
Championes
Pollo, lcteos
Ninguna
Devuelve, regala
Pollo, lcteos
Pollo, lcteos
Pollo, huevos
codorniz
Viveres en
general, lcteos
Pollo
Pollo, lcteos,
huevos de
codorniz
Embutidos,
lcteos
Embutidos,
lcteos
Mercado
#
Cdigo
33
Iaquito
M12-E04-#1
N/R
N/R
N/R
N/R
34
Iaquito
M12-E05-#1
Por menor
30
Ambato
35
Iaquito
M12-E06-#1
Por menor
10
Machachi
Das de
Granja
almacenaje
36
Iaquito
M12-E07-#1
300
Ambato
Avcola El Oro
Trapo hmedo y
raspa con cuchillo
37
Iaquito
M12-E08-#1
Por menor
15
Puellaro
No Sabe
Ninguna
Ninguna
Consumo propio
38
Iaquito
M12-E09-#1
Por menor
30
Puellaro
No Sabe
Ninguna
Ninguna
Regala
39
Iaquito
M12-E10-#1
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
40
Iaquito
M12-E11-#1
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
41
Iaquito
M12-E12-#1
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
42
Carapungo
M15-E01-#1
150
Puellaro
No Sabe
Trapo hmedo
Ninguna
Devuelve y/o
regala
43
Carapungo
M15-E02-#1
200
Ambato,
Latacunga
Avipol
Ninguna
Ninguna
Regala
44
Carapungo
M15-E03-#1
Por menor
15
Caldern,
Puellaro
No Sabe
Trapo hmedo
Tamao
Bota basura-cambia
Frutas, verduras,
lcteos, vegetales
45
Cotocollao
M09-E01-#1
100
Puellaro
No Sabe
15
Ninguna
Ninguna
Vende
panaderas
Embutidos,
lcteos,
manteca, pollo
46
Cotocollao
M09-E02-#1
120
Puellaro
No Sabe
Ninguna
Ninguna
Devuelve
Embutidos,
lcteos, manteca
47
Cotocollao
M09-E03-#1
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
N/R
Embutidos,
lcteos
57
c)
Tipo de venta de huevos: De los 47 mercados, 24 venden los
huevos al por menor, 15 al por menor y mayor y 8 no respondieron.
30
# Expendios
25
24
20
15
15
10
5
0
Por menor
N/R
# Expendios
7
6
5
4
3
3
2
2000
1200
600
580
350
300
2
1
# Cubetas
N/R
1000
800
700
500
200
150
120
100
60
50
40
30
15
10
3% 3% 3%
2%
3%
2%
2% 2%
2%
Avcola El Abayn
Avipol
Depsito "El Vecino"
Familia Sereno Snchez
Granja Cecilita
Granja La Dolorosa
46%
5%
Huambal
Santa Teresita
7%
Velastegu
Granja Seores Torres
PRONACA
20%
Avcola El Oro
No Sabe
20
15
10
5
0
Separa rotos o
defectuosos
Separa rotos o
defectuosos-Tamao
Ninguna
59
Tamao
SSA
M01-E01-#1
Fecha
recoleccin
03/02/2012
Colonias amarillas
Colonias rojas
Sospechosa
No
M11-E01-#1
04/02/2012
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Si
M02-E01-#1
M05-E01-#1
M05-E02-#1
M05-E03-#1
04/02/2012
04/02/2012
04/02/2012
04/02/2012
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Si
Si
Si
Si
Mayorista
M05-E04-#1
04/02/2012
Colonias amarillas
Mayorista
M05-E05-#1
04/02/2012
Colonias negras
Chiriyacu
M03-E01-#1
04/02/2012
Colonias transparentes
10
11
Chiriyacu
Caldern
M03-E02-#1
M14-E01-#1
04/02/2012
05/02/2012
12
Caldern
M14-E02-#1
05/02/2012
13
14
15
16
17
18
Caldern
Magdalena
Magdalena
Magdalena
Amrica
Amrica
M14-E03-#1
M04-E01-#1
M04-E02-#1
M04-E03-#1
M06-E01-#1
M06-E02-#1
05/02/2012
05/02/2012
05/02/2012
05/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Colonias rojas con centro
negro
Colonias rosadas
Colonias transparentes
Colonias transparentes
No creci
No creci
No creci
19
Central
M07-E01-#1
12/02/2012
20
21
22
23
24
25
Central
San Francisco
San Roque
San Roque
San Roque
San Roque
M07-E02-#1
M08-E01-#1
M10-E01-#1
M10-E02-#1
M10-E03-#1
M10-E04-#1
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
26
San Roque
M10-E05-#1
12/02/2012
No creci
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
Santa Clara
Santa Clara
Santa Clara
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
M13-E01-#1
M13-E02-#1
M13-E03-#1
M12-E01-#1
M12-E02-#1
M12-E03-#1
M12-E04-#1
M12-E05-#1
M12-E06-#1
M12-E07-#1
M12-E08-#1
M12-E09-#1
M12-E10-#1
M12-E11-#1
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
12/02/2012
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias rojas
No creci
No creci
No creci
No creci
41
Iaquito
M12-E12-#1
12/02/2012
42
43
44
45
46
47
Carapungo
Carapungo
Carapungo
Cotocollao
Cotocollao
Cotocollao
M15-E01-#1
M15-E02-#1
M15-E03-#1
M09-E01-#1
M09-E02-#1
M09-E03-#1
14/02/2012
14/02/2012
14/02/2012
14/02/2012
14/02/2012
Colonias amarillas
No creci
Colonias rojas pequeas
Colonias rojas pequeas
No creci
No creci
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Colonias transparentes
Colonias blancas con
centro negro
Colonias negras
Colonias blancas
pequeas
Colonias blancas
Colonias blancas
Colonias blancas con
centro negro
Colonias amarillas
Colonias transparentes
Colonias transparentes
No creci
No creci
No creci
Colonias amarillas
grandes
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonia blanca
pequea
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias blancas
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias grandes
blanquecinas
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
Mercado #
Cdigo
3
4
5
6
Guaman
Comit del
Pueblo
Las Cuadras
Mayorista
Mayorista
Mayorista
#
1
2
60
Si
Si
Si
Si
Si
S
S
S
S
No
No
No
Si
No
No
No
No
No
No
Si
No
No
No
No
No
No
No
No
No
Si
No
No
No
No
Si
No
No
S
S
No
No
Mercado #
Guaman
Comit del Pueblo
Las Cuadras
Mayorista
Mayorista
Mayorista
Mayorista
Mayorista
Chiriyacu
Chiriyacu
Caldern
Caldern
Caldern
Magdalena
Magdalena
Magdalena
Amrica
Amrica
Central
Central
San Francisco
San Roque
San Roque
San Roque
San Roque
San Roque
Santa Clara
Santa Clara
Santa Clara
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Cdigo
M01-E01-#2
M11-E01-#2
M02-E01-#2
M02-E01-#2
M02-E02-#2
M02-E03-#2
M02-E04-#2
M02-E05-#2
M03-E01-#2
M03-E02-#2
M14-E01-#2
M14-E02-#2
M14-E03-#2
M04-E01-#2
M04-E02-#2
M04-E03-#2
M06-E01-#2
M06-E02-#2
M07-E01-#2
M07-E02-#2
M08-E01-#2
M10-E01-#2
M10-E02-#2
M10-E03-#2
M10-E04-#2
M10-E05-#2
M13-E01-#2
M13-E02-#2
M13-E03-#2
M12-E01-#2
M12-E02-#2
M12-E03-#2
M12-E04-#2
M12-E05-#2
M12-E06-#2
36
Iaquito
M12-E07-#2
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Iaquito
Carapungo
Carapungo
Carapungo
Cotocollao
Cotocollao
Cotocollao
M12-E08-#2
M12-E09-#2
M12-E10-#2
M12-E11-#2
M12-E12-#2
M15-E01-#2
M15-E02-#2
M15-E03-#2
M09-E01-#2
M09-E02-#2
M09-E03-#2
XLD
Colonias rojas y amarillas
Colonias transparentes
No creci
No creci
Colonias amarillas
No creci
No creci
Colonias rojas
Colonias rojas
No creci
No creci
No creci
Colonias rojas
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias rojas
No creci
No creci
No creci
Colonias rojas
No creci
No creci
Colonias amarillas
No creci
Colonias amarillas
No creci
Colonias rojas
Colonias amarillas
Colonias amarillas
No creci
No creci
Colonias amarillas,
colonias rojas con centro
negro
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias amarillas
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
61
SSA
Colonias amarillas
Colonias transparentes
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias amarillas
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias rojisas
No creci
Colonias rojisas
Colonias amarillas
Colonias blancas
Colonias rojas
Colonias rojas
No creci
No creci
SOSPECHO-SA
Si
Si
No
No
No
No
No
Si
Si
No
No
No
S
No
No
No
No
No
No
Si
No
No
No
Si
No
No
No
No
No
S
S
No
No
No
No
Si
No creci
No creci
No creci
No creci
Colonias rojas
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No creci
No
No
No
No
No
No
No
No
No
No
No
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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del Agro.
AMEVEA. Asociacin de Mdicos Veterinarios Especialistas en Avicultura
del Ecuador.
AMPc. Adenosn Monofosfato Cclico
API 20E. ndice Analtico de Perfil (del ingls, Analytical Profile Index) con
un
conjunto
de
20
pruebas
bioqumicas
para
identificacin
de
del Departamento
de
Enterobacterias.
Aw. Actividad de agua.
BAM US. Manual Analtico Bacteriolgico
1.
Instrumento
del
sistema
68
de
informacin
de
vigilancia
70
GLOSARIO
Aw (Actividad de agua). Relacin entre la presin de vapor de un
alimento en relacin con la presin de vapor del agua pura a la misma
temperatura. Es un parmetro estrechamente ligado a la humedad del
alimento lo que permite determinar su capacidad de conservacin, de
propagacin microbiana, etc.
Bacterifago (Abr. fago). Virus que infecta bacterias. Formas modificadas
de fagos se utilizan como vectores de clonacin (FAO, 2004).
Bioseguridad. conjunto de prcticas de manejo orientadas a prevenir el
contacto de las aves con microorganismos patgenos (CONAVE, 2006).
Brotes. La aparicin de dos o ms casos de la misma enfermedad
asociados en tiempo, lugar y persona (Ibez C, 2007).
Clado. Grupo monofiltico de organismos, es decir, incluye al ancestro
comn ms reciente y a sus descendientes (UNAM, 2011).
Cepa. Grupo de individuos derivados por ascendencia de un nico
individuo dentro de una especie. (FAO, 2004).
Colonia. Grupo de organismos unicelulares que viven en asociacin, a
menudo derivado de una sola clula. (UNAM, 2011)
Codex Alimentarius. Es el Cdigo de los Alimentos. Posee una base
cientfica, la correcta aplicacin de sus normas de produccin,
procesamiento, empaque y traslado, garantiza la inocuidad en los
alimentos (Lanza O, 2003).
Crioconservacin. Conservacin del germoplasma en estado latente
mediante su almacenamiento a muy bajas temperaturas, normalmente
sumergido en nitrgeno lquido. Actualmente se aplica para el almacenaje
de semillas y polen de plantas, microorganismos, esperma animal, y
lneas celulares de cultivo de tejidos. Sinnimos: crioconservacin,
conservacin por congelacin (FAO, 2004).
71
(Dendro=rbol)
que
organiza
los
datos
en
diferencial.
Medio
utilizado
para
diferenciar
tipos
de
74
tales
como
los
especficos
para
determinados
75