Manual de Bioseguridad

MANUAL DE BIOSEGURIDAD E HIGIENE
ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE SALUD PBLICA
ESCUELA DE MEDICINA
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
LB MBH 13 - 002
PAGINA: 01 de 17
Fecha: Marzo
Agosto 2014
MANUAL DE BIOSEGURIDAD
E HIGIENE
MARZO AGOSTO 2014

ESCUELA DE MEDICINA
Elaborado por:
Lic. Marcela Inca
RESPONSABLE LABORATORIO
MICROBIOLOGA
LB MBH 13 - 002
Revisado por:
Dra. Rosa Vlez
Lic. Marcela Inca
RESPONSABLES
LABORATORIO
MICROBIOLOGA
PAGINA: 01 de 17
Fecha: Marzo
Agosto 2014
Aprobado por:
Dr. William Prieto
DIRECTOR
MEDICINA
ESCUELA
Fecha: 17 de marzo de Fecha: 21 de marzo de Fecha:

2014
2014

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Fecha: Marzo
Agosto 2014
INTRODUCCIN
El Laboratorio de Microbiologa es un lugar donde se desarrollan

experimentos planeados y organizados por el docente, con el fin de
reforzar los conocimientos tericos impartidos en el aula, para un grupo
de estudiantes que participan activamente o como observadores en la
elaboracin de los mismos.
El Manual de Bioseguridad, es un documento que establece reglas y
estndares de bioseguridad que permiten el manejo adecuado del
material y las muestras utilizadas con el fin de favorecer la reduccin del
riesgo biolgico por exposicin no intencional con material infeccioso, a
niveles aceptables.
El establecer procedimientos para cada prctica y medidas de seguridad
en el laboratorio, constituye una herramienta indispensable para
proteger la integridad fsica, ante cualquier accidente que pueda ocurrir.
El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar, donde se tendr
siempre presente los posibles peligros asociados al trabajo con materiales
peligrosos e infecciosos.

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Fecha: Marzo
Agosto 2014
Contenido
INTRODUCCIN ............................................................................................................................3
1.
OBJETIVOS ............................................................................................................................5
2.
ALCANCE ..............................................................................................................................5
NORMAS Y SUGERENCIAS PARA TRABAJAR EN EL ........................................................................5

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA .............................................................................................5
Normas a seguir en el laboratorio ............................................................................................5
Sugerencias para el trabajo en el laboratorio...........................................................................7
PUESTO DE TRABAJO ................................................................................................................7
DERRAME DE MATERIAL INFECTADO .......................................................................................8
MANEJO DE OBJETOS CORTOPUNZANTES ...............................................................................8
DESECHOS QUE GENERAN LOS LABORATORIOS .......................................................................9
TIPOS DE DESECHOS .............................................................................................................9
Bibliografa: ................................................................................................................................14

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1. OBJETIVOS
Proporcionar lineamientos de orden general y procedimientos de seguridad en el laboratorio,
a fin de mantener el ambiente de trabajo libre de riesgos para salvaguardar la integridad de
todos los usuarios.
2. ALCANCE
Es de aplicacin general para todo el personal que hace uso del mencionado laboratorio, y el
entorno con el que interactuamos diariamente.
NORMAS Y SUGERENCIAS PARA TRABAJAR EN EL LABORATORIO DE

MICROBIOLOGA
El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar donde no se deben permitir descuidos o
bromas. Para ello se tendrn siempre presente los posibles peligros asociados al trabajo con
materiales bio-peligrosos. Nunca hay excusa para los accidentes en un laboratorio bien
equipado en el cual trabaja personal bien informado.
A continuacin se exponen una serie de normas que deben conocerse y seguirse en el
laboratorio:
Normas a seguir en el laboratorio

El uso de la bata o mandil de laboratorio es indispensable para asistir a la prctica. La
BATA deber emplearse durante toda la estancia en el laboratorio.
Utilizar mascarillas con el fin de proteger a los estudiantes contra riesgos como
salpicaduras de material microbiolgico y/o fluidos corporales.
Zapatos de proteccin, estos deben ser distintos de los que se utilizan para el diario
caminar, su objetivo es evitar el llevar microorganismos patgenos del laboratorio de
microbiologa hacia el lugar de residencia de los estudiantes, y/o alrededores del
laboratorio.
Durante la estancia en el laboratorio el alumno debe ir provisto de gafas de seguridad,
guantes de ltex, guantes quirrgicos. Los GUANTES deben utilizarse obligatoriamente
en la manipulacin de productos de material biolgico.
Mantenga las uas recortadas.
El PELO LARGO se llevar siempre recogido, es preferible la utilizacin de gorras
desechables.
Qutese todos los ACCESORIOS PERSONALES que puedan comprender riesgos de
accidentes mecnicos, qumicos o por fuego, como son anillos, pulseras, collares y
sombreros. La responsabilidad por las consecuencias de no cumplir esta norma dentro
del laboratorio es enteramente del estudiante.
No se debe comer, fumar, ni beber en el laboratorio, as como tampoco se debe dejar
encima de la mesa del laboratorio algn tipo de prenda.

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Mantenga slo el MATERIAL requerido para la sesin, sobre la mesa de trabajo. Los
dems objetos personales o innecesarios deben guardarse o colocarse lejos del rea de
trabajo.
Limpiar y desinfectar la superficie de mesones antes y despus del trabajo del da.
Lave sus manos con agua y jabn antes y despus de cada prctica. Luego asegure de
frotarse las manos con alcohol.
Llevar registro de sus anlisis indicando: Tipo de muestra, procedencia, fecha, tipo de
siembra o mtodo, cultivos empleados y resultados obtenidos.
Identificar las muestras antes de comenzar el anlisis, no desechar hasta obtener el
resultado (contra muestra).
El material a examinar debe tocarse exclusivamente con instrumentos estriles.
En caso de regarse un cultivo sobre la mesa o el piso o cualquier accidente como
cortadura, quemaduras, cada del material infectado en la conjuntiva ocular, ruptura de
una lmina montada al microscopio de aviso inmediato al profesor o monitor. Tome
todas las precauciones posibles para evitar estos accidentes.
Cuando tenga el asa bacteriolgica cargada con algn cultivo de microorganismos no se
desplace de un rea a otra ya que puede crear aerosoles, trabaje solo en su puesto.
Flamee el asa antes y despus de usarla.
Descarte todo el material usado en recipientes destinados para tal fin por ningn motivo
en los desages o lavatorios.
Tenga cuidado con las preparaciones teidas ya que puede salpicar colorantes a mesones
y pisos.
Debe ser prctica comn consultar las etiquetas y libros sobre reactivos en busca de
informacin sobre seguridad.
Como regla general no se debe PIPETEAR nunca con la boca. Se succionarn empleando
pipetas.
No debe llevarse a la BOCA ningn MATERIAL DE LABORATORIO; si algn reactivo es
accidentalmente ingerido, avise de inmediato al Profesor o al Profesional Tcnico del
Laboratorio.
Los FRASCOS de los REACTIVOS deben cerrarse inmediatamente despus de su uso,
durante su utilizacin los tapones deben depositarse siempre boca arriba sobre la mesa.
No deben manipularse jams productos o DISOLVENTES INFLAMABLES en las
proximidades de llamas.
No deben verterse RESIDUOS slidos en los fregaderos, deben emplearse los recipientes
para residuos que se encuentran en el laboratorio.
Los RECIPIENTES utilizados para almacenar disoluciones deben LIMPIARSE previamente,
eliminando cualquier etiqueta anterior y rotulando de nuevo inmediatamente.
El MECHERO debe cerrarse, una vez utilizado, tanto de la llave del propio mechero como
la toma del gas de la mesa.

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Cuando se tengan dudas sobre las PRECAUCIONES DE MANIPULACIN de algn

PRODUCTO debe consultarse al profesor antes de proceder a su uso.
Al final de la prctica dejar el lugar limpio y ordenado.
Sugerencias para el trabajo en el laboratorio
NORMAS DE TRABAJO
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
Cada equipo de trabajo es responsable del material que se le asigne, adems del
equipo especial (por ejemplo centrfugas, balanzas, estufas, autoclave, etc.) en caso de
prdida o dao, deber responder de ello, y llenar la correspondiente ficha. Antes de
empezar con el procedimiento experimental o utilizar algn aparato revisar todo el
material, y su manual de funcionamiento en su caso.
Al finalizar cada sesin de prcticas el material y la mesa de laboratorio deben dejarse
perfectamente limpios y ordenados.
Las disoluciones de reactivos, que no sean patrones ni muestras, se almacenan en
botellas de vidrio o plstico que deben limpiarse y rotularse perfectamente.
Los reactivos liofilizados que se encuentren en la repisa deben devolverse al mismo
inmediatamente despus de su uso.
Las balanzas deben dejarse a cero y perfectamente limpias despus de finalizar la
pesada.
Cerca de las balanzas slo deben permanecer los estudiantes que se encuentren
pesando (uno por balanza).
El material asignado a cada prctica debe permanecer en el lugar asignado a dicha
prctica. No se debe coger material destinado a prcticas distintas a la que se est
realizando. Bajo ningn concepto se sacarn reactivos o material de prcticas fuera del
laboratorio.
Es muy importante la asistencia a la prctica a la hora indicada, ya que las
explicaciones se darn en los primeros minutos.
Antes de comenzar la prctica, lase la gua de laboratorio. Esto le ayudar a entender
mejor y a realizar un ordenado y eficiente trabajo de laboratorio.
Anote todos los resultados y las explicaciones pertinentes.
Cada sesin de laboratorio deber iniciarse con una corta explicacin. No empiece a
trabajar hasta que haya recibido todas las instrucciones.
La buena tcnica de laboratorio depende primordialmente de que se sepa lo que se va
a hacer.
Los instrumentos de laboratorio son muy delicados. Tenga mucho cuidado al
manejarlos. Cualquier pequeo descuido puede ocasionar una prdida irreparable.
El material entregado para la prctica debe ser devuelto antes de abandonar el
laboratorio.
PUESTO DE TRABAJO
o
Conservar siempre limpios los aparatos y el puesto de trabajo. Evitar derrames de

sustancias, colorantes, pero si cayera alguna, recogerla inmediatamente.

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Todas las prcticas debern realizarse con limpieza y, al terminar, toda el rea de
trabajo deber quedar ordenada y limpia.
DERRAME DE MATERIAL INFECTADO

o
o
o
o
Cuando se produzca derrame de material infectado o potencialmente infectado, el

operador deber ponerse guantes y luego cubrir el fluido derramado con papel
absorbente, derramar alrededor de este solucin desinfectante, y finalmente sobre el
papel y dejar actuar por 10 minutos.
Usando papel absorbente seco y limpio levantar el material y arrojarlo al recipiente de
desechos contaminados para su posterior eliminacin. La superficie deber ser
enjuagada con solucin descontaminarte.
No se recomienda el uso de alcohol ya que evapora rpidamente y coagula los
residuos orgnicos superficiales sin penetrar en ellos.
Durante todo el procedimiento de desinfeccin deber usarse guantes y evitar el
contacto con el material derramado y desinfectado.
Los pinchazos, heridas punzantes, lastimaduras y piel contaminada por salpicadura de
materiales infectados debern ser lavados con abundante agua y jabn desinfectante.
Se deber favorecer el sangrado de la herida.
Si un trabajador sufre exposicin parenteral o de las membranas mucosa a sangre o
fluidos corporales, se deber identificar el material y, si es posible determinar la
presencia de virus o anticuerpos. El trabajador deber informar cualquier enfermedad
febril aguda que ocurra dentro de las doce semanas posteriores a la exposicin.
MANEJO DE OBJETOS CORTOPUNZANTES

o
o
o
Manejar el material con extrema precaucin

No dejarlos abandonados en cualquier sitio, comprobar que no hayan sido
depositados en recipientes de desechos comunes o infecciosos.
Tapar las agujas luego de su uso se aplicara la tcnica de una sola mano en caso de no
utilizar pinza, se almacenara en recipientes rgidos de plstico.

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DESECHOS QUE GENERAN LOS LABORATORIOS

Se considera desecho del laboratorio a todo material que es descartado despus de su uso.
TIPOS DE DESECHOS
Varias clasificaciones se han propuesto para diferenciar los residuos que generan los
laboratorios, es necesario establecer un criterio nico para este tipo de desechos que permita
simplificar el manejo de los desechos.
La Organizacin Mundial de la Salud ha propuesto determinados criterios permitiendo una
adecuada clasificacin de los desechos, los cuales establecen que la sangre y los lquidos
corporales de los pacientes son potencialmente infecciosos.
DESECHOS GENERALES O COMUNES

Son desechos comunes generados principalmente por las actividades administrativas y
generales que no corresponden a ninguna categora de desechos peligrosos.
Son similares a los desechos de produccin domstica e implican las mismas prcticas de
higiene en su manejo y transporte, no requieren de un manejo especial. Constituyen el 80%.
Se incluyen en esta categora los papeles, cartones, cajas, plsticos, resto de alimentos
materiales de limpieza de patios y jardines, entre otros, pueden clasificarse en varios tipos de
acuerdo a la utilizacin y destino:
a) Orgnicos.- todo lo que se descompone y procede de las cocinas y residuos alimenticios.
b) Reciclables: son desechos procedentes de oficinas, papeles, contenedores de vidrio o
plsticos para frmacos no peligrosos y alimentos.
c) Restos no utilizables: comprende materiales metlicos, madera, yesos que no hayan sido
contaminados.
DESECHOS PELIGROSOS
Se consideran desechos peligrosos todos los residuos producidos en el laboratorio, que de una
u otra forma afectan la salud de los seres humanos o animales y el medio ambiente, los
desechos peligrosos se clasifican en:
Desechos infeccioso
Desechos especiales

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a. DESECHOS INFECCIOSOS
Son aquellos que potencialmente pueden contener grmenes patgenos y por tanto son
peligrosos para la salud humana, o aquellos que han tenido contacto con sangre o fluidos
orgnicos.
Como por ejemplo cultivos de agentes infecciosos y desechos biolgicos, muestras
almacenadas de agentes infeccioso, medios de cultivo, placas Petri, instrumentos usados para
manipular, mezclar o inocular microorganismos, todo objeto que haya tenido contacto con
sangre, plasma, suero y otros, muestras de esputo, muestra de heces.
b. DESECHOS ESPECIALES
Son generados en los servicios de diagnstico y tratamiento que por sus caractersticas fsicoqumicas son peligrosas as Desechos Qumicos, Desechos Inflamables, Desechos Explosivos.
MANEJO DE LOS DESECHOS.
Se puede definir al manejo de los desechos como el conjunto de actividades que se
desarrollan desde el momento de generacin hasta llegar a la disposicin final.
MANIPULACION Y ELIMINACION DE DESECHOS CONTAMINADOS
1. Todo el equipo reusable (puntas de micro pipetas, cnulas, tubos, etc.) deber ser
ubicado en un recipiente metlico o de plstico resistente a punciones y cortaduras,
que contenga liquido desinfectante y deber estar localizado en el mismo lugar de
generacin del desecho. Despus es preciso desinfectar el material con sustancias
qumicas como el cloro al 70 o 75 % antes de limpiarlo e introducirlo en el autoclave.
2. Todo elemento punzo cortante (agujas, jeringas, palillos, lancetas) deber ser
colocado en un recipiente de material resistente a punciones y cortaduras. Estos
recipientes deben ser preferiblemente amplios de paredes rgidas y semirrgidas, con
tapa asegurada para su posterior descarte y contener en su interior una solucin
desinfectante, y debe estar ubicados lo ms cerca posible del lugar de uso de los
instrumentos.
3. Para la eliminacin de la sangre de los pacientes se debe recolectar en un frasco
adecuado con tapa se debe llenar las tres cuartas partes, colocar cloro al 0.10% dejar
actuar por 30 minutos y desechar en el lavadero con abundante agua.
4. Para la eliminacin de cultivos, cajas Petri, tubos con bacterias, muestras infecciosas se
debe esterilizar en autoclave 15 minutos a 2 at de presin, luego descartar en funda
de desechos infecciosos.
5. Las muestras de orina son eliminados `por el inodoro y los frascos colocados en los
desechos infecciosos.
IDENTIFICACIN DE LOS DESECHOS
Para evitar errores y dudas por parte de los operadores y lograr identificar rpidamente el
contenedor adecuado al cual est destinado un determinado tipo de desecho, se han
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establecido sistemas de identificacin. Los elementos ms utilizados para la unificacin son los
colores y smbolos.
LOS COLORES
El uso de colores es fundamental para diferenciar los envases, contenedores y fundas para
desechos ya que facilita la labor de los operadores en la actividad de clasificacin y separacin,
adems de evitar errores en las fases de transporte, almacenamiento y tratamiento de los
desechos producidos en los laboratorios.
La forma ms simple, econmica y directa es el uso de los colores:
- NEGRO para desechos comunes o generales
- ROJO para desechos infecciosos
Si se emplean contenedores de colores, es suficiente una simple mirada para que el personal
decida fcilmente, con seguridad y sin desperdiciar tiempo, dnde tiene que depositar el tipo
de residuo que desecha. Cuando no se disponga de contenedores decolores, cada contenedor
debe identificarse con su leyenda correspondiente de "DESECHOS COMUNES" y 'DESECHOS
PELIGROSOS" o "DESECHOS INFECCIOSOS".
LOS SMBOLOS
Otro elemento que permite distinguir rpidamente los diferentes contenedores e identificarlos
en cada fase del proceso con base en su contenido, son los smbolos. Estos nos dan una
informacin adicional pues identifican el contenedor apropiado para cada tipo de desecho
con un detalle mayor que los colores, los cuales se limitan a distinguir solamente entre
comunes y peligrosos.
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Desecho Peligroso
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Desechos infecciosos
De laboratorio
RECIPIENTES PARA RESIDUOS CORTOPUNZANTES:

Los recipientes para residuos corto punzantes son desechables y deben tener las siguientes
caractersticas:
* Rgidos, en polipropileno de alta densidad. Que tengan resistencia a ruptura y perforacin
por elementos corto punzante.
* Con tapa ajustable o de rosca, de boca angosta, de tal forma que al cerrarse quede
completamente hermtico.
*Rotulados de acuerdo a la clase de residuo. Livianos y de capacidad no mayor a 2 litros
* Desechables y de paredes gruesas.
EQUIPOS DE SEGURIDAD DE PROTECCIN COLECTIVA
EXTINTORES
El laboratorio debe estar dotado de extintores porttiles, debiendo el personal del laboratorio
conocer su funcionamiento a base de entrenamiento.
Los extintores deben estar sealizados y colocados a una distancia de los puestos de trabajo
que los hagan rpidamente accesibles, no debindose colocar objetos que puedan obstruir
dicho acceso.
Su ubicacin debe ser en un lugar de fcil acceso (cerca de una ruta de salida o escape de
habitacin) sin exponerlos a posibles lesiones. Por norma, se recomienda colocarlos a
una altura de 1.5 m, con respecto al nivel del piso.
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ACTUACIONES EN CASO DE EMERGENCIA. PRIMEROS AUXILIOS

Fuego en el laboratorio:
Si se produce un conato de incendio, las actuaciones iniciales deben orientarse a
intentar controlar y extinguir el fuego rpidamente utilizando el extintor adecuado.
No utilizar nunca agua para apagar el fuego provocado por la inflamacin de un
disolvente. Evacuar el laboratorio, por pequeo que sea el fuego, y mantener la calma.
Fuego en la ropa:
Pedir ayuda inmediatamente. Tirarse al suelo y rodar sobre si mismo para apagar las
llamas. No correr, ni intentar llegar a la ducha de seguridad, salvo si est muy prxima.
No utilizar nunca un extintor sobre una persona.
Quemaduras:
Las pequeas quemaduras, producidas por material caliente, placas, etc. deben tratarse
con agua fra durante 10 o 15 minutos. No quitar la ropa pegada a la piel. No aplicar
cremas ni pomadas grasas. Debe acudir siempre al mdico aunque la superficie afectada
y la profundidad sea pequea. Las quemaduras ms graves requieren atencin mdica
inmediata.
Cortes:
Los cortes producidos por la utilizacin de vidrio, es un riesgo comn en el laboratorio.
Los cortes se deben limpiar, con agua corriente, durante diez minutos como mnimo.
Si son pequeos se deben dejar sangrar, desinfectar y dejar secar al aire o colocar un
apsito estril adecuado.
No intentar extraer cuerpos extraos enclavados.
Si son grandes y no paran de sangrar, solicitar asistencia mdica inmediata.
MANEJO DE EXTINTORES
El fuego es una reaccin qumica que involucra la quema rpida de combustible, que
puede ser cualquier tipo de material slido, lquido o gaseoso.
Para generar fuego se necesitan cuatro elementos: combustible, oxgeno (16% o ms),
calor y reaccin qumica. Al remover cualquiera de estos factores, el fuego no podr
generarse o se extinguir solo si ya est ardiendo.
La eficacia de un extintor en un fuego en particular depende del tamao del incendio y
de la cantidad y tipo de agente que contenga el extintor. Diferentes agentes extinguidores
pueden ser utilizados para apagar diferentes clases de fuegos.
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Los extintores son eficaces para apagar fuegos pequeos, pero deben usarse y seleccionarse
con mucho cuidado. Para seleccionar el extintor apropiado, debemos primero
familiarizarnos con los diferentes tipos de fuegos.
Bibliografa:
Manejo Adecuado de Desechos Infecciosos en Establecimientos de Salud de la Provincia de
Chimborazo.
Manual de Bioseguridad del Laboratorio de Microbiologa, Santiago Estrada, Laboratorio
Clnico, Santa Mara, Congregacin Mariana.
Bioseguridad en Laboratorios de Microbiologa y Biomedicina, C.D.C., H.I.H. 4 edicin.
Manual de Laboratorio de Microbiologa, Universidad del Valle, Janeth Sanabria, 2001.
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