BIOQUMICA BSICA SECCIN 02 UNIVERSIDAD VERACRUZANA LOPEZ

CARRASCO OSVALDO NAN

PRCTICA 9: Determinacin de proteinas totales

UNIDAD DE COMPETENCIA:
Determinar los valores normales y anormales de protenas totales en una
muestra sangunea extrada en el laboratorio.
FUNDAMENTO:
Las protenas del suero reaccionan con el reactivo de Biuret formando una
coloracin violeta, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de las
mismas en la muestra.
MARCO TERICO:
Al conjunto de protenas del plasma se les denomina Protenas.Totales (PT) y
tiene una concentracin aproximada de 7 g/ 100 ml.
La disminucin de las PT, que es casi siempre un reflejo de reduccin de la
fraccin albmina, se observa en varios trastornos. Por lo general, las globulinas y,
con mayor frecuencia la fraccin de globulina alfa, aumentan al mismo tiempo, lo
que resulta en una concentracin de PT dentro de lmites normales. Cuando la
concentracin de PT baja de 5.3 g/ 100 ml., se considera un nivel crtico, y casi de
modo invariable se produce edema. En muchos estados patolgicos no
relacionados la hipoproteinemia aparece con lentitud e insidia. Puede ser
secundaria a ingestin inadecuada de protena-incluyendo la falta de uno o de
todos los aminocidos esenciales- o a una absorcin deficiente, secundaria a una
sntesis inadecuada de protena dentro del cuerpo ( como en la disfuncin
heptica o en trastornos genticos ), o secundaria a una prdida elevada de
protena por disfuncin renal o por estados patolgicos que aumentan la cantidad
de protenas de peso molecular bajo en la circulacin, que pueden filtrarse y
perderse ( hemlisis intravascular ). La prdida tambin tiene lugar debido a un
catabolismo exagerado de protena ( desgaste caquctico en neoplasias
malignas ), aumento de la concentracin de enzimas catablicas o en enteropatas
gastrointestinales.

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Por lo general, la
hiperproteinemia
se
presenta secundaria a la
prdida
patolgica de
lquido o una reduccin
importante en la ingestin
de agua. La cantidad
absoluta de protenas
sricas no cambia, pero
hay un aumento en la
concentracin, resultante
de la prdida del solvente
agua. Una
elevacin
absoluta
de
la
concentracin srica de
protenas se observa en el mieloma mltiple.
MATERIAL:
Espectrofotmetro o analizador para
lecturas a 505 nm
Cubetas de 1,0 cm de paso de luz
Tubos de ensayo
Micropipetas / Pipetas
Equipamiento habitual de laboratorio
Suero
Reactivos para protenas
PROCEDIMIENTO:
1.-Condiciones de ensayo.
Longitud de onda505 nm (490-550)
Cubeta1 cm paso de luz
Temperatura...37C / 15-25C
2.-Ajustar el espectofotmetro a 0 frente a agua destilada.
3.- Pipetiar en una cubeta:
Blanco Patrn Muestra
Agua destilada

0.1 ml

_____

_____

Muestra (suero)

_____

0.1ml

_____

Patrn de protenas

_____

_____

0.1 ml

Reactivo de Biuret

5 ml

5.0 ml

5.0 ml

4.- Mezclar e incubar 10 min a 37 C 30 min a temperatura ambiente (15-25 C).

5.- Leer la absorbancia (A) del patrn y la muetra, frente al blanco de reactivo. El
color es estable como minimo 30 min.

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CLCULOS:
(A) Muestra * 7 (conc. patrn) =
(A) Patrn
VALORES DE REFERENCIAS (Varan con el mtodo empleado)
Protenas Totales : 6.6 a 8.3 g/ 100 ml.
RESULTADOS DE LA MUESTRA
0.651 A 7 = 5.5169
8.3 gr.
0.826
BAJO.

VALORES NORMALES DE PROTENAS 6.6RESULTADO DE LA MUESTRA: UN POCO

ACTIVIDADES:
1.- MENCIONE CUANDO AUMENTAN LAS CONCENTRACIONES SRICAS DE
PROTENAS TOTALES.
Deshidratacin
Los primeros signos clnicos de la deshidratacin se aprecian cuando el peso
corporal sufre una reduccin del 5 al 8 %. Las causas de la disminucin del
volumen de agua corporal pueden ser: una reduccin importante de la toma de
lquido o la prdida de lquido de origen renal o extrarrenal. Debido a esto, la
naturaleza e intensidad de la sintomatologa varan con el tipo y el modo de la
disminucin hdrica. La deshidratacin produce hemoconcentracin provocando
aumento de albmina y globulinas, manteniendo el cociente proteico normal.
Hiperglobulinemia
Aumento de la cantidad de las globulinas contenidas en el plasma sanguneo; bien
de todas las variedades de globulinas, siendo hiperactivas todas las familias
celulares (o clonos) secretoras: hiperglobulinemia (o disglobulinemia) policlonal; o
bien solamente de una variedad: la monoclonal resultante de la actividad excesiva
de un solo clono. Las globulinas se dividen en Alfa-Globulinas y BetaGammaglobulinas. El grupo de las Alfa-Globulinas, representan un grupo diverso
de protenas plasmticas entre las que se encuentran las Protenas de Fase
Aguda (PFA). Las PFA son protenas cuya sntesis se aumenta marcada y
rpidamente como respuesta a fenmenos de inflamacin y/o daos tisulares. La
mayora de PFA son Glicoproteinas y casi todas estn producidas por el
parnquima heptico. Hay elevaciones significativas en esta regin en procesos
como: Sndrome nefrtico, administracin de Glucocorticoides, y algunas
enfermedades hepticas. En general, el aumento de Globulinas, se produce en un
cierto nmero de afecciones orgnicas, en las cuales las Beta-Gammaglobulinas
suelen aumentar juntas (Beta y Gamma) entre las hiperglobulinemias estn:

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Gammapatas
Las gammapatas son trastornos que se caracterizan por la presencia de una
concentracin muy elevada de gammaglobulinas en la sangre.

Gammapatia
Policlonal:
Refleja
la
existencia
de
una
hipergammaglobulinemia difusa, en la que estn aumentados todos los
tipos de inmunoglobulinas, como en: enfermedades inflamatorias crnicas,
enfermedades hepticas (cirrosis), enfermedades autoinmunes (lupus
eritematoso sistmico (LES)), infecciones parasitarias (Kala-Azar) y
enfermedades malignas.
Gammapatia monoclonal: Se caracterizan por la proliferacin de una clona
de clulas plasmticas, que producen una protena homognea
(componente M o paraprotena), como en: mieloma mltiple,
Macroglobulinemia de Waldenstrm, gammapatas monoclonales de
significado indeterminado y amiloidosis primaria.

2.- MENCIONE CUANDO DISMINUYEN LAS CONCENTRACIONES SRICAS

DE PROTENAS TOTALES.
La hipoproteinemia, es decir, la disminucin de la cantidad de las protenas
plasmticas se observa, como la consecuencia de patologas que provocan
prdida de protenas, por ejemplo hemorragias severas, nefropatas o
enteropatas. Tambin se observa hipoproteinemia por disminucin en la sntesis
de las protenas plasmticas, como en el caso de las algunas hepatopatas, donde
se observa disminucin en la concentracin de albminas o en la neoplasia
linfoide donde las que se encuentran disminuidas son las globulinas.
Hemorragias
La prdida de sangre es una de las consecuencias ms comunes en los pacientes
traumatizados. Sin embargo, signos clnicos graves como hipotensin y shock slo
aparecern si la prdida de sangre supera el 35 % del volumen total normal. El
shock hipovolmico se caracteriza por una incapacidad del sistema cardiovascular
de aportar oxgeno y glucosa en la cantidad, oportunidad y calidad adecuada para
los requerimientos tisulares especficos. En el shock hipovolmico se muestran
signos clnicos variados, como el aumento de la temperatura, pulso dbil y rpido,
mucosas secas y plidas, fro en las extremidades, ojos hundidos y reduccin en
la produccin de orina.
Enfermedades que producen hipoproteinemia
Nefropatas con proteinuria crnica
La alteracin crnica de la funcin del rin produce aumento de la prdida de
protenas, con una disminucin tanto de las albminas como de las globulinas.
La aparicin del sndrome nefrtico como resultado de los trastornos crnicos de
la funcin renal se caracteriza por la aparicin de protenas en la orina
(proteinuria). La causa de la prdida de protenas plasmticas a travs de la orina

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es debida al incremento de la permeabilidad de la membrana glomerular. El

glomrulo es la parte del rin que se encarga de realizar el filtrado de la sangre
para la posterior eliminacin del material de desecho a travs de la orina. S la
membrana que rodea a esta porcin del rin se encuentra daada, grandes
molculas como por ejemplo las protenas plasmticas, podrn encontrarse en la
orina. La alteracin de la membrana glomerular obedece a causas diversas:
estados inflamatorios como la glomerulonefritis crnica o a estados degenerativos
como la amiloidosis, en la que se produce el depsito de material proteico anormal
en las paredes del glomrulo con consecuentes daos en la membrana.
Enteropatas con prdida proteica
La diarrea es la manifestacin clnica ms corriente de enfermedad intestinal. Se
define como el aumento anormal de la frecuencia, fluidez o volumen de las heces.
La diarrea puede ser el nico signo clnico en pacientes con enteropata o el signo
saliente que acompaa a otras anormalidades como anorexia, prdida de peso,
vmito
y
dolor
abdominal.
Las causas generales de diarrea aguda y crnica pueden ser muy variadas; la
dieta, inflamacin gastrointestinal por causas parasitarias o infecciosas,
consecuencia de patologas pancreticas, hepticas, renales o el resultado de
procesos sistmicos, alteracin general del organismo por drogas,
hipoadrenocorticismo
o
hipertiroidismo.
Cuando la diarrea es parte de un proceso agudo en general se autolimita y no
requiere indicacin adicional ms que el manejo correcto de la dieta del animal y el
tratamiento sintomtico de apoyo. Sin embargo, si la patologa contina y nos
encontramos con un proceso crnico puede producirse un aumento de la
permeabilidad intestinal. Aquellos procesos que induzcan ulceracin, inflamacin o
infiltracin celular en la mucosa intestinal producirn que las grandes
macromolculas como la albmina, las globulinas y los eritrocitos puedan
escaparse hacia la materia fecal. El incremento de la permeabilidad puede
observarse en la materia fecal, ya que se caracteriza por la presencia de melena y
hematoquecia, es decir, presencia de sangre en la materia fecal, y signos clnicos
generales consecuencia de la enteropata perdedora de protenas como ser la
prdida de peso.
Enfermedades hepticas
Aquellas hepatopatas con presencia de tejido heptico con atrofia o fibrosis
producen disminucin de la concentracin de protenas plasmticas, en especial
hipoalbuminemia ya que se afecta (disminuye) la sntesis de albmina. Las
alteraciones de la funcionalidad heptica pueden darse con curso agudo o crnico.
La insuficiencia heptica aguda ocurre cuando se produce dao masivo del
hgado, cuando se compromete al menos el 70 % de la masa heptica funcional.
La necrosis del tejido heptico produce alteracin de una o ms funciones
hepticas, por ejemplo el metabolismo de hidratos de carbono, grasas y protenas
o la sntesis de protenas plasmticas y factores de coagulacin. Muchos pueden
ser los factores causales de la alteracin aguda de la funcionalidad heptica; la
presencia de sustancias biolgicas o qumicas como las aflatoxinas y los metales
pesados, infecciones, adenovirus o leptospira, desrdenes metablicos por

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ejemplo pancreatitis aguda, anemia hemoltica o causas traumticas como shock

trmico, hipoxia o traumas abdominales. Los signos clnicos en general son
inespecficos y podran ser: anorexia, depresin, vmitos, diarrea, aumento de la
sed y de la produccin de orina. La presencia de color amarillo en las mucosas y
conjuntivas (ictericia), es un signo ms especfico de compromiso heptico. Si
crnica ms estudiada es la producida por la acumulacin de cobre intraheptico.
Las razas ms predispuestas son: Doberman, Cocker spaniel, Labrador, West
Highland terrier. Los signos clnicos ms frecuentes son anorexia, disminucin de
peso, letargia, ictericia, ascitis, y tienden a ser de mal pronstico.
3.- EXPLIQUE CMO INTERVIENEN LAS PROTENAS EN EL METABOLISMO
DEL AGUA EN EL ESPACIO EXTRACELULAR Y POR CONSIGUIENTE, COMO
CONTRIBUYE SU CARENCIA A LA FORMACIN DE EDEMA.
Edema Carencial
El factor bsico en la fisiopatologa del edema carencial es la hipoproteinemia.
Desde el punto de vista clnico-fisiopatolgico, el edema aparece cuando la tasa
de albmina desciende (en trmino medio y como factor aislado), por debajo de 2
gr %.
Las protenas plasmticas y en especial, la albmina, representan una de las
fuerzas que tienden a retener lquidos en los vasos, o a reabsorber lquidos
extravasados. Esta fuerza esta representada por la presin coloidosmtica.
Las causas del edema carencial, tienen como ejemplos: ingestin deficiente de
protenas, prdida excesiva (por el rin o tubo digestivo), sntesis inadecuada y
catabolismo exagerado (neoplasias, hipertiroidismo, exceso de cortisol). En la
prctica, la asociacin de los factores antes descritos es lo ms frecuente.
An cuando la hipoproteinemia sea el factor bsico del edema carencial, otros
tambin participan. En los sndromes carenciales existe autofagia de las protenas
del organismo. Este fenmeno se produce especialmente en los msculos
esquelticos, produciendo la consuncin de las masas musculares. La falta de
sostn de las venas y linfticos por los tejidos musculares hace disminuir la
presin mecnica intersticial y la del flujo de estos vasos. De tal forma, en posicin
ortosttica especialmente se produce stasis sangunea en las venas de los
miembros inferiores y reduccin del volumen plasmtico circulante. De esto
resultar el estmulo de la secrecin de aldosterona y retencin de sodio y agua,
contribuyendo a la formacin del edema.
Los estados carenciales van acompaados generalmente por deficiencias
vitamnicas. La hipovitaminosis B1 conduce a la vasodilatacin capilar perifrica y
la deficiencia de vitamina C provoca trastornos de la permeabilidad vascular,
favoreciendo ambas la trasudacin.

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La ingestin de glcidos, por mecanismos an desconocidos, probablemente con

intervencin del potasio, provocara el estmulo de la secrecin de aldosterona con
retencin de agua y sodio, y el ulterior edema.
CONCLUSIN:
Como estudiantes de medicina debemos conocer acerca de la prctica de
protenas. Se debe tomar los valores de referencia para poder dar un diagnstico y
pronostico del paciente en cuestin. Siempre de manera profesional y con tica.
BIBLIOGRAFA:
Kathleen Morrison Treseler. Laboratorio Clnico y pruebas de diagnstico.
Editorial El Manual Moderno, S.A. de C.V.
http://apuntesfisiopatoedema.blogspot.mx/
http://www.henufood.com/nutricion-salud/aprende-a-comer/agua/
http://www.portaldog.com/textos/Proteinas_sericas.htm
http://www.facmed.unam.mx/publicaciones/libros/pdfs/laguna_41-56.pdfO