Terapia gnica

La terapia gnica consiste en la insercin de genes funcionales ausentes en

el genoma de un individuo. Se realiza en las clulas y tejidos con el objetivo de
tratar una enfermedad o realizar un marcaje.
La tcnica todava est en desarrollo, motivo por el cual su aplicacin se lleva
principalmente a cabo dentro de ensayos clnicos controlados, y para el
tratamiento de enfermedades severas o bien de tipo hereditario o adquirido. Al
principio se plante slo para el tratamiento de enfermedades genticas, pero
hoy en da se plantea ya para casi cualquier enfermedad.
Entre los criterios para elegir este tipo de terapia se encuentran:
Enfermedad letal sin tratamiento.
La causa sea un nico gen que est ya clonado.
La regulacin del gen sea precisa y conocida.
Aplicaciones

Marcaje gnico: El marcaje gnico tiene como objetivo, no la curacin

del paciente, sino hacer un seguimiento de las clulas, es decir, comprobar si
en un determinado sitio del cuerpo estn presentes las clulas especficas que
se han marcado. Un ejemplo de ello sera la puesta a punto de vectores para
ensayos clnicos, permitiendo, por ejemplo, que en ocasiones en las que un
paciente de cncer (leucemia) y al que se le ha realizado un autotransplante
recae se pueda saber de donde proceden las clulas, si son de clulas
trasplantadas o si son clulas que han sobrevivido al tratamiento.
Terapia de enfermedades monognicas hereditarias: Se usa en
aquellas enfermedades en las que no se puede realizar o no es eficiente la
administracin de la protena deficitaria. Se proporciona el gen defectivo o
ausente.
Terapia de enfermedades adquiridas: Entre este tipo de
enfermedades la ms destacada es el cncer. Se usan distintas estrategias,
como la insercin de determinados genes suicidas en las clulas tumorales o la
insercin de antgenos tumorales para potenciar la respuesta inmune.
Tipos de terapia gnica
Terapia gnica somtica y germinal

Terapia gnica somtica:

se realiza sobre las clulas somticas de un individuo, por lo que las
modificaciones que implique la terapia slo tienen lugar en dicho paciente.
Terapia in vivo: la transformacin celular tiene lugar dentro del paciente al
que se le administra la terapia. Consiste en administrarle al paciente un gen a
travs de un vehculo (por ejemplo un virus), el cual debe localizar las clulas a
infectar. El problema que presenta esta tcnica es que es muy difcil conseguir
que un vector localice a un nico tipo de clulas diana.
Terapia ex vivo: la transformacin celular se lleva a cabo a partir de una
biopsia del tejido del paciente y luego se le trasplantan las clulas ya
transformadas. Como ocurre fuera del cuerpo del paciente, este tipo de terapia

es mucho ms fcil de llevar a cabo y permite un control mayor de las clulas

infectadas. Esta tcnica est casi completamente reducida a clulas
hematopoyticas pues son clulas cultivables, constituyendo as un material
transplantable.

Terapia gnica germinal: se realizara sobre las clulas germinales del

paciente, por lo que los cambios generados por los genes teraputicos seran
hereditarios. No obstante, por cuestiones ticas y jurdicas, sta clase de
terapia gnica no se lleva a cabo hoy en da.
Vectores en terapia gnica
La gran diversidad de situaciones en las que podra aplicarse la terapia gnica
hace imposible la existencia de un solo tipo de vector adecuado. Sin embargo,
pueden definirse las siguientes caractersticas para un "vector ideal" y
adaptarlas luego a situaciones concretas:
Que sea reproducible.
Que sea estable.
Que permita la insercin de material gentico sin lmite de tamao.
Que permita la transduccin tanto en clulas en divisin como en aquellas
que no estn proliferando.
Que posibilite la integracin del gen teraputico en un sitio especfico del
genoma.
Que se integre una vez por clula, para poder controlar la dosis.
Que reconozca y acte sobre clulas especficas.
Que la expresin del gen teraputico pueda ser regulada.
Que carezca de elementos que induzcan una respuesta inmune.
Que pueda ser caracterizado completamente.
Que sea inocuo o que sus posibles efectos secundarios sean mnimos.
Que sea fcil de producir y almacenar.
Que todo el proceso de su desarrollo tenga un coste razonable.
Los vectores van a contener los elementos que queramos introducir al
paciente, que no van a ser slo los genes funcionales, sino tambin elementos
necesarios para su expresin y regulacin, como pueden ser promotores,
potenciadores o secuencias especficas que permitan su control bajo ciertas
condiciones.
Podemos distinguir dos categoras principales en vectores usados en terapia
gnica: virales y no virales.

Vectores Virales
Retrovirus
Adenovirus
Virus Adenoasociados (AAV)
Herpes virus
Protena "pseudotyping" de vectores virales

Mtodos no virales
ADN desnudo
Oligonucletidos
Cromosomas artificiales

Lipoplexes y poliplexes
El vector de ADN puede ser cubierto por lpidos formando una estructura
organizada, como una micela o un liposoma. Cuando la estructura organizada
forma un complejo con el ADN entonces se denomina lipoplexe.
Mtodos hbridos
Debido a las deficiencias de muchos de los sistemas de transferencia gnica se
han desarrollado algunos mtodos hbridos que combinan dos o ms tcnicas.
Dendrmeros
Un dendrmero es una macromolcula muy ramificada con forma esfrica o
variable. Su superficie puede ser funcional de muchas formas y de sta derivan
muchas de sus propiedades. Adems, su tamao, en la escala nano-, permite
su uso en biomedicina.
Clulas diana
Las clulas diana se seleccionan en funcin del tipo de tejido en el que deba
expresarse el gen introducido, y deben ser adems clulas con una vida media
larga, puesto que no tiene sentido transformar clulas que vayan a morir a los
pocos das. Igualmente, se debe tener en cuenta si la diana celular es una
clula en divisin o quiescente, porque determinados vectores virales, como los
retrovirus, slo infectan a clulas en divisin.
En funcin de estas consideraciones, las clulas diana ideales seran las clulas
madre, puesto que la insercin de un gen en ellas producira un efecto a largo
plazo.

Debido a la experiencia en transplante de mdula sea, una de las dianas

celulares ms trabajadas son las clulas madre hematopoyticas. La terapia
gnica en estas clulas es tcnicamente posible y es un tejido muy adecuado
para la transferencia ex vivo. Otras dianas celulares con las que se ha
trabajado son:
Linfocitos:
Epitelio respiratorio:
Hepatocitos
Fibroblastos drmicos:
Clulas musculares:
Enfermedades y terapia gnica
Son numerosas las enfermedades objeto de la terapia gnica, siendo las ms
caractersticas las tratadas a continuacin:
- ADA
deficiencia en adenosn deaminasa (ADA) que provoca un trastorno de la
inmunidad,
- Cncer
- Sndrome de Wiskott-Aldrich(WAS)
- Beta Talasemia