CROMATOGRAFA INICA

Fundamentos de la tcnica

QU ES LA CROMATOGRAFA?

CROMATOGRAFA INICA
Tanto FASE MVIL como FASE ESTACIONARIA son INICAS

INTERCAMBIADORES INICOS
Intercambiadores inicos: Fases slidas de matriz normalmente polimrica
sobre cuya superficie se fijan covalentemente grupos activos inicos. Debido
a la condicin de electroneutralidad hay siempre un contrain opuestamente
cargado en la vecindad del punto activo cargado. El contrain o ION
ELUYENTE normalmente se origina de la fase mvil.

PROCESOS DE RETENCIN SOBRE UN INTERCAMBIADOR INICO

x(RSO3- H+)
slido

+
M x+
disolucin

x(RSO3-) Mx+
slido

xH+
disolucin

cido fuerte: SO3cido dbil: COOcido dbil: PO32-

x(RN(CH3)3+OH-)
slido

Ax
disolucin

x(RN(CH3)3)+Ax- +
slido

base fuerte: NR3+

base dbil: NH3+

xOHdisolucin

ORDEN DE ELUCIN
(1) AFINIDAD de los iones por los puntos activos
A) CARGA
tR (Nitrato) < tR (Sulfato)
B) TAMAO
tR: F- < Cl- < Br- << IC) POLARIZABILIDAD
tR (Sulfato) < tR (Tiocianato)

(2) pH de la fase MVIL

(PO4)3pH>12
8mM Na2CO3
2mM NaOH

//

(HPO4)2pH=9.5
3.6mM de Na2CO3

//

(H2PO4)pH=9
4.5mMNa2CO3
1.4mM NaHCO3

//

H3PO4

ORDEN DE ELUCIN
(3) FUERZA INICA DE LA FASE MVIL
-FUERZA INICA
tR
- Vara la SELECTIVIDAD ENTRE IONES DE DISTINO SIGNO

(4) CONTENIDO EN DISOLVENTES ORGNICOS FASE MVIL

-Modifica la SELECTIVIDAD de la columna
- Generalmente tR

(5) T FASE MVIL

- Mayor eficiencia en la separacin
- Mayor efecto con eluyentes con disolventes orgnicos

FASE ESTACIONARIA
Composicin de la fase ESTACIONARIA:
- Sustrato/resina

- Partculas esfricas dimetros 2-10m

- Los ms usuales -Intercambiadores inicos de superficie funcionalizada
-Intercambiadores inicos peliculares

- Grupos activos

Capacidad de un intercambiador inico:

La capacidad de intercambio, Q , es el N de lugares disponibles para intercambio
inico. Se suele dar normalmente por gramo de material de relleno seco, en
microequivalentes o micromoles por gramo (ueq/g umol/g).

CAPACIDAD DE UN
INTERCAMBIADOR INICO
Materiales de BAJA capacidad: Q < 100 umol/g
Materiales de MEDIA capacidad: 100 < Q < 200 umol/g
Materiales de ALTA capacidad: Q >200 umol/g

CAPACIDAD TOTAL DE LA COLUMNA: mol(Cl-)/columna

SOBRECARGA O SATURACIN DE LA COLUMNA:
No superar el 5% de la capacidad de la columna en un solo pinchazo

Efectos:

- Deformacin picos (CORTADOS o SESGADOS, ASIMTRICOS)

EFICIENCIA separacin

- Variacin de los tR (iones que actan como ELUYENTE)

FASE MVIL
- Mantiene ionizados los grupos activos de la fase estacionaria
- Disuelve y transporta la muestra
-Controla la retencin de la muestra
- Regula el pH

ANIONES

CATIONES

NaOH
NaHCO3
Na2CO3

HNO3
cido metanosulfnico
cido tartrico

EFECTO DE UN MODIFICADOR ORGNICO:

-Disminuye la retencin de la materia orgnica
-Modifica la SELECTIVIDAD
-Metanol, acetonitrilo, THF, isopropanol, acetona,
FUERZA INICA DE LA FASE MVIL: Un aumento en la concentracin
se traduce normalmente en una separacin ms rpida, pero tambin en
una conductividad de fondo ms alta.

DETECCIN
Modos de deteccin:

Kc= L/A

Tanto los iones ANALITO como los iones ELUYENTE son especies cargadas, con
una determinada CONDUCTIVIDAD.

ELEVADA CONDUCTIVIDAD DE FONDO

MEDIDAS POCO SENSIBLES

SIN SUPRESIN
DE
CONDUCTIVIDAD

MODOS DE TRABAJO

CON SUPRESIN
DE
CONDUCTIVIDAD

CROMATOGRAFA INICA SIN SUPRESIN

-Se trabaja con sistemas MONO-COLUMNA

-Se usan INTERCAMBIADORES INICOS de BAJA CAPACIDAD.

CROMATOGRAFA ANINICA SIN SUPRESIN QUMICA

-Se usa como ELUYENTE iones GRANDES, Conductividad equivalente, Conductividad
ELUYENTES:
cidos carboxlicos aromticos
cidos carboxlicos alifticos
cidos sulfnicos
Hidrxidos alcalinos (Sosa, potasa)

- Fondos de conductividad MODERADA

- Sensibilidad y ruido ACEPTABLES
- Medidas de concentracin ALTAS
- Algunos cidos carboxlicos aliftico, de mayor conductividad
equivalente (oxlico, ctrico): DETECCIN UV
- RANGO LINEAL reducido

CROMATOGRAFA CATINICA SIN SUPRESIN QUMICA

ELUYENTES:
cidos minerales diluidos (HNO3, 3.5mM)
ELEVADA conductividad de FONDO (H+)
Medida DIRECTA de CONDUCTIVIDAD

MEJOR SIN SUPRESIN

CROMATOGRAFA INICA CON SUPRESIN

-Se reduce la conductividad del ELUYENTE en una reaccin POST-COLUMNA

-Se sustituyen los CONTRAIONES del eluyente dando H2O u otra especie poco disociada,
por lo que se reduce la conductividad de fondo.

CROMATOGRAFA ANINICA CON SUPRESIN QUMICA

VENTAJAS
La conductividad del eluyente es reducida
Se aumenta la seal del analito.

Eluyentes en basea HIDRXIDO

y CARBONATO
Baja detectabilidad de F-, Acetato