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Q.

Vanessa Monserrat Aldana Castolo


Q. Tabata Karewit Prez Contreras

PROTOCOLO DE TESIS

Titulo
Crecimiento y capacidad de biorremediacin de Chlorella vulgaris cultivada en
aguas residuales con efluentes de origen domstico, industrial y agrcola en el lago
de Chapala.
Introduccin
En los pases en va de desarrollo, existe un crecimiento sin control ni planeacin
tanto de industrias como de asentamientos humanos, originando entre otros el
problema de alteracin de la calidad del agua en los ecosistemas acuticos, ya que
se utilizan como un sistema de eliminacin muy cmodo, en donde los ros tienen
un papel fundamental, dada su naturaleza ltica. El deterioro de la calidad del agua,
supone un grave problema medioambiental y socioeconmico, que se acenta en
zonas de escasos recursos. El uso del agua potable para abastecimiento urbano e
industrial, debe ir acompaado de una correcta depuracin que permita su
reutilizacin para riego agrcola, de reas verdes, aguas recreativas, reutilizacin
industrial, piscicultura, o bien como elemento que no perturbe el equilibrio biolgico
de la zona de vertido y que evite la contaminacin de acuferos subterrneos y
masas superficiales de aguas continentales o marinas 1.
En el caso del lago de Chapala, el ro Lerma constituye la principal fuente de
contaminacin debido a que todos los desechos que son vertidos en l
desembocan en el lago2.
El Lago de Chapala ha estado expuesto a diversas fuentes y niveles de
contaminacin, como descargas municipales de diferentes comunidades, aguas de
retorno agrcola y aguas residuales provenientes del ro Lerma, vertidas por
industrias3.
La inmensa mayora de los usuarios no tratan el agua una vez que la utilizan, y ms
bien la aprovechan como vehculo para eliminar desechos. Ejemplo de ello ha sido
la escasa infraestructura de saneamiento para tratar las descargas de las industrias
ms importantes de la cuenca, el incumplimiento de reglamentos y condiciones de

descarga, las bajas tarifas por uso de agua, as como el incremento en el volumen
de los efluentes urbanos y de los retornos agrcolas de zonas de riego.
En ambientes acuticos naturales o artificiales, marinos o de agua dulce, las
microalgas estn siempre asociadas a bacterias ya sea como promotoras de
crecimiento, simbiontes o bien contaminantes 4. Las microalgas, organismos
auttrofos que ocupan el primer eslabn en la cadena trfica, han recibido mucha
atencin en los ltimos aos, especialmente en las regiones tropicales y
subtropicales, en donde se emplean como un biosistema alternativo para la
remocin de nutrientes de este tipo de aguas. Estos microorganismos incorporan
nitrgeno en forma de amonio que es utilizado para formar aminocidos; aunque
tienen la capacidad de incorporarlo en forma de nitrato 5.
El uso de las microalgas, como biosistema alternativo, en el tratamiento de las
aguas residuales, ha sido el objeto de numerosas investigaciones debido a su
capacidad de remover cantidades significativas de N y P durante su crecimiento,
absorber metales y acelerar la inactivacin de bacterias patgenas 6. Adems la
biomasa algal producida, durante el procesamiento de estos efluentes, representa
una fuente potencial de alimentos, qumicos y pigmentos, entre otras importantes
aplicaciones7.
El gnero Chlorella as como algunas especies del grupo de las cianobacterias, se
han descrito en el tratamiento de diferentes tipos de aguas residuales, destacando
las provenientes de plantas de tratamiento convencionales 8, de origen industrial,
urbano y las derivadas de excretas animales. El objetivo de la presente
investigacin es evaluar el uso de Chlorella vulgaris para la remocin de nitrgeno,
fsforo y DQO del lago de Chapala.
Antecedentes
El tratamiento de las aguas residuales es solo una parte del sistema de limpieza del
agua, la produccin de lodos y el manejo del agua tratada es otro aspecto de esta
actividad. Existen varios mtodos para el tratamiento de aguas residuales. De
acuerdo con el grado de complejidad y del espectro de sustancias, materiales y
organismos eliminados, se dividen en los siguientes niveles: primario, el cual
elimina el 60 % de los slidos suspendidos, un 30 % de materia orgnica y entre un

5 a un 15 % de nutrientes; secundario, elimina el 90 % de los slidos suspendidos y


el 90 % de la demanda bioqumica de oxgeno. El deterioro de la calidad del agua,
supone un grave problema medioambiental y socioeconmico, que se acenta en
zonas de escasos recursos. El uso del agua potable para abastecimiento urbano e
industrial, debe ir acompaado de una correcta depuracin que permita su
reutilizacin para riego agrcola, de reas verdes, aguas recreativas, reutilizacin
industrial, piscicultura, o bien como elemento que no perturbe el equilibrio biolgico
de la zona de vertido y que evite la contaminacin de acuferos subterrneos y
masas superficiales de aguas continentales o marinas 9.
Diferentes estudios se han realizado para probar los efectos de crecimiento y
capacidad de biorremediacin de Chlorella vulgaris; Las microalgas, organismos
auttrofos que ocupan el primer eslabn en la cadena trfica, han recibido mucha
atencin en los ltimos aos, especialmente en las regiones tropicales y
subtropicales, en donde se emplean como un biosistema alternativo para la
remocin de nutrientes de este tipo de aguas. Estos microorganismos incorporan
nitrgeno en forma de amonio que es utilizado para formar aminocidos; aunque
tienen la capacidad de incorporarlo en forma de nitrato 10. La utilizacin de
microalgas para remocin de nutrientes ha sido estudiada por ms de 50 aos,
comprobando que la biomasa algal obtenida tiene un alto contenido de protenas,
lpidos, carbohidratos, y otros productos de valor agregado. Por lo tanto, los
esfuerzos para cultivar este tipo de microorganismos en aguas residuales han
buscado conseguir un doble beneficio, la produccin de biomasa para diferentes
usos y un efluente limpio con una tecnologa relativamente simple 11.
Los gneros Chlorella y Scenedesmus, as como algunas especies del grupo de las
cianobacterias, se han reportado para el tratamiento de diferentes tipos de aguas
residuales, destacando las provenientes de plantas de tratamiento convencionales
de origen industrial y urbano12.
Planteamiento Del Problema (Justificacin)
El lago de Chapala est siendo contaminado por las descargas de ciudades,
industrias y la agricultura. Aunque grandes esfuerzos se han hecho para
incrementar el nmero y la capacidad de plantas de tratamiento de aguas
residuales en la cuenca y en la ribera del lago, hoy grandes volmenes de efluentes

son todava descargados sin ningn tratamiento previo. La concentracin existente


de nutrientes en el lago genera eutroficacin asociada por el crecimiento de
vegetacin acutica flotante que podran causar problemas de sabor y olor en agua
para abastecimiento urbano y afectar la sanidad del ecosistema.
Hiptesis
Es el razonamiento ordenado para explicar, demostrar y fundamentar el
planteamiento terico.
La realidad de uno de los problemas que se plantea en el lago Chapala es la gran
cantidad de sedimentos que recibe de sus afluentes. Cada ao el lago recibe
930.000 toneladas de slidos que van en aumento desde los ltimos aos. Las
causas de este aumento se atribuyen a la reduccin en el volumen almacenado de
agua, as como a la disminucin de salidas por el ro Santiago desde 1981. Los
cambios en el uso del suelo a lo largo del Lerma tambin contribuyen a que reciba
un mayor volumen de sedimentos. Los procesos de deforestacin propiciados por
prcticas agrcolas tradicionales contribuyen tambin al azolve del lago.
Otro problema en el lago es su alta contaminacin, solo el 8% del agua del lago se
considera aceptable, el 92% restante est contaminado en diferentes niveles, el
52% est moderadamente contaminado y el 41% est altamente contaminado. La
contaminacin del lago se produce por residuos industriales, qumicos agrcolas y
aguas negras municipales. La contaminacin del agua, se puede clasificar en dos
tipos diferentes: Bacteriolgica, por las aguas residuales urbanas y de centros de
produccin porcina, y, qumica, de origen tambin urbano pero fundamentalmente
en las reas industriales. El agua est altamente contaminada con DDT, qumicos
agrcolas, cobre, plomo, cromo, zinc, cianuro, aguas negras y fsforo. Un estudio
de las descargas de nueve plantas de tratamiento que vacan directamente en el
lago encontr niveles de fsforo 74 veces ms elevado que la norma de USEPA. El
64% del agua que llega al lago est sin tratar y se considera que se necesitaran
unas 130 plantas de tratamiento de aguas negras para mejorar la calidad del lago.
Las consecuencias ambientales y econmicas an se desconocen, pero se advierte
un fuerte deterioro ambiental y, con ello, la degradacin del medio ambiente a largo
plazo. Salvar el Lago de Chapala sera congruente con una poltica sustentable,

para lo cual se propone probar la capacidad y crecimiento de la alga verde


Chlorella vulgaris en dichas aguas para su biorremediacin.
Objetivos
Objetivo general:

Desarrollar tecnologas eficientes y de bajo costo para el tratamiento de


aguas residuales de uso domstico.

Objetivo especfico particular:

Evaluar el crecimiento y la eficacia de remocin de nutrientes de Chlorella


vulgaris en efluentes generados por poblacin jalisciense de origen
domstico, industrial y agrcola en el lago de Chapala.

Metodologa
Empleando sepas de Chlorella vulgaris, aisladas. para el medio de cultivo se
utilizara agua residual proveniente del lago de Chapala. Por lo tanto el agua que
analizaremos solo ser sometida a un tratamiento preliminar de cribado, por lo que
contendr mayor concentracin de nutrientes. Tomando dos muestras ms; una
sometida a esterilizacin durante 20minutos a 121C y 15 libras de presin,
mientras que la otra alcuota solamente ser filtrada usando dos veces papel
Whatman N 42. Las muestras sern rotuladas como:
Agua con contaminacin inicial.
Agua esterilizada.
Agua filtrada.
Los tratamientos controles se prepararon con agua destilada esterilizada y medio
de Cultivo ALGAL13 a una concentracin equivalente a 6,0 mM de NaNO3 y 0,3 mM
de NaHPO4 como nicas fuentes de nitrgeno y fosfato.
Los bioensayos se iniciaran con un inculo de 0.64x106 de Chlorella vulgaris, el
cual provenan de cultivo en fase exponencial y desarrollado en medio ALGAL a 6,0
mM de NaNO3. Los experimentos se desarrollaron, por triplicado, en recipientes de
vidrio con un volumen de 200 mL, se mantuvieron con una radiacin de 137
mol.q.m2.s1, bajo ciclos de luz:oscuridad de

12:12 horas, a una temperatura promedio de 282C y sin aireacin por un perodo
de 27 das.
DENSIDAD CELULAR, CONTENIDO DE PIGMENTOS Y DE PROTENAS
El crecimiento de cada microalga se determin mediante el conteo celular de los
cultivos cada 3 das, utilizando una cmara de Neubaer. El contenido de clorofila
total y de carotenoides se cuantific a partir del extracto metanlico de la biomasa
algal fresca cada 3 das. Los extractos obtenidos se clarificaron por centrifugacin y
la concentracin de los pigmentos se determin mediante espectrofotometra.
ANLISIS FSICOQUMICOS
El contenido de fosfato (P-PO43), nitrgeno amoniacal (N-NH4 +) y DQO. Estos
anlisis se realizaron en:
a) Agua residual cruda: agua residual sin ningn tratamiento.
b) Agua residual para el cultivo de las microalgas: agua residual esterilizada y agua
residual filtrada no esterilizada, y luego de inocular la microalga a las 24 h y a los 27
das de iniciado el experimento.
En estos anlisis se utilizaron los sobrenadantes de los cultivos por rplica de cada
tratamiento, luego de una centrifugacin de 30 mL de cada cultivo durante 15
minutos a 1000 rpm.
ANLISIS ESTADSTICO
Los resultados se expresaron como los promedios de los triplicados de cada
tratamiento.
Cronograma De Actividades
Actividades

Fechas

Inicio de protocolo de tesis

27 de agosto de 2015

Indagar algn tema de inters

3-15 de septiembre de 2015

Redaccin del titulo

17 de septiembre de 2015

Anlisis e investigacin del tema

24 de septiembre-17 de octubre de

Introduccin del tema

2015
19-23 de octubre de 2015

Consulta de antecedentes

26 de octubre de 2015

Justificacin

e importancia

investigacin
Objetivos de la investigacin

de

la 3 de noviembre de 2015
5 de noviembre de 2015

Mtodos a utilizar
Recoleccin
datos
Diseo

de

9 de noviembre
procesamiento

de 11 de noviembre de 2015

presentacin

de 13 de noviembre de 2015

diapositivas
Revisin y correccin del trabajo final

16-20 de noviembre de 2015

Entrega de protocolo de tesis

20 de noviembre de 2015

(trabajo final)

Bibliografa
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tertiolecta

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