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GENERALIDADES

UNIDAD 1
GENERALIDADES

GENERALIDADES
1.1.

GENERALIDADES

La Microbiologa es la ciencia encargada del estudio de los microorganismos,


seres vivos pequeos (de micros "pequeo", bios, "vida" y logos, "estudio"),
tambin conocidos como microbios. Es la rama de la biologa dedicada a
estudiar los organismos que son solo visibles a travs del microscopio (virus,
procariontes y eucariontes simples). Son considerados microbios todos los
seres vivos microscpicos consistentes en una sola clula, es decir
unicelulares, as como aquellos que forman agregados celulares en los cuales
todas las clulas son equivalentes (en los cuales no existe diferenciacin
celular). Los microorganismos pueden ser eucariotas (las clulas poseen
ncleo), tales como los hongos y los protistas, o procariotas (clulas carentes
de ncleo), como las bacterias y los virus (aunque los virus no son
considerados seres vivos estrictamente hablando).
1.2.

MICROORGANISMO

Son seres que forman parte de una vida pequea, por lo que no son
observados a simple vista sino con la ayuda del microscopio, adems estos
organismos pueden cumplir con una accin benfica como patgena. Los
microorganismos se subdividen en: parsitos, bacterias, mohos, levaduras,
virus, algas y protozoarios.
1.3.

IMPORTANCIA Y BENEFICIOS DE LA MICROBIOLOGA

Los microbilogos han hecho contribuciones fundamentales a la biologa y


medicina, especialmente en los campos de la bioqumica, gentica y biologa
celular. Los microbios tienen muchas caractersticas que los hacen organismos
modelo ideales:

Son pequeos, por lo que no consumen muchos recursos.


Algunos tienen tiempos de generacin muy cortos (el tiempo necesario
para la divisin de una clula baterial en dos en condiciones ptimas; 30
minutos para E. coli, pero de 12 a 24 horas para Mycobacterium
tuberculosis).
Las clulas pueden sobrevivir fcilmente separadas de otras clulas.
Los eucariontes unicelulares se reproducen por divisin mittica y los
procariontes mediante fisin binaria. Esto permite la propagacin de
poblaciones clnicas genticamente iguales.
Pueden permanecer congelados por grandes perodos de tiempo. An y
cuando el 90% de las clulas mueran en el proceso de congelacin,
existen millones de clulas en cada mililitro de lquido cultural.

A pesar de que los microbios son a menudo vistos negativamente a causa de


su asociacin con muchas enfermedades humanas, stos son tambin los

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responsables de muchos procesos beneficiosos, entre ellos las fermentaciones
industriales (para la produccin de bebidas alcohlicas o productos lcteos), la
produccin de antibiticos o la de otros productos de inters farmacutico o
biotecnolgico (hormonas, enzimas,...). Finalmente, cabe tambin destacar el
papel esencial que los microorganismos juegan en los laboratorios de
investigacin biolgica de todo el mundo como herramientas para la clonacin
de genes y la produccin de protenas.
1.4.

TIPOS DE MICROBIOLOGIA

El campo de la microbiologa puede ser dividido en varias ramas:


1.4.1. FISIOLOGA MICROBIANA:
Estudio a nivel bioqumico del funcionamiento de las clulas microbianas.
Incluye el estudio del crecimiento, el metabolismo y la estructura microbiana.
1.4.2. GENTICA MICROBIANA:
Estudio de la organizacin y regulacin de los genes microbianos y como stos
afectan el funcionamiento de las clulas. Est muy relacionada con la Biologa
Molecular.
1.4.3. MICROBIOLOGA MDICA:
Estudio del papel de los microbios en las enfermedades humanas. Incluye el
estudio de la patognesis microbiana y la epidemiologa y est relacionada con
el estudio de la Patologa de la enfermedad y con la Inmunologa.
1.4.4. MICROBIOLOGA VETERINARIA
Estudio del papel de los microbios en la medicina veterinaria, as mismo incluye
la patognesis microbiana y la epidemiologa.
1.4.5. MICROBIOLOGA AMBIENTAL:
Estudio de la funcin y diversidad de los microbios en sus entornos naturales.
Incluye la Ecologa Microbiana, la geomicrobiologa, la diversidad microbiana y
la biorremediacin.
1.4.6. MICROBIOLOGA EVOLUTIVA:
Estudio de la evolucin de los microbios. Incluye la Sistemtica y la Taxonoma
bacterianas.

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1.4.7. MICROBIOLOGA INDUSTRIAL:
Estudia la explotacin de los microbios para uso en procesos industriales.
Ejemplos son la fermentacin industrial y el tratamiento de aguas residuales.
Muy cercana a la industria de la biotecnologa.
1.4.8. AEROMICROBIOLOGA
Estudio de los microorganismos transportados por el aire, que pueden ejercer
su fisiologa en otros ambientes.
1.2.10. MICROBIOLOGA DE LOS ALIMENTOS
Estudio de los microorganismos que hacen que los alimentos se estropeen o
se alteren, provocando modificaciones en su composicin.
1.3. RELACIN DE LA MICROBIOLOGA CON OTRAS CIENCIAS
La Microbiologa como ciencia biolgica se relaciona con otras ramas ya que
actan de una manera dependiente, esa decir en una forma conjunta con otras
ciencias.
1.3.1. Biologa:
Es el estudio de la vida.
1.3.2. Qumica Inorgnica:
Se encarga de describir los compuestos inorgnicos.
1.3.3. Qumica Analtica:
Estudia las diferentes reacciones entre compuestos.
1.3.5. Qumica Orgnica:
Se relaciona con los compuestos orgnicos.
1.3.6. Bioqumica:
Estudia los diferentes procesos metablicos.
1.3.7. Anatoma:
Se refiere al estudio de la morfologa de las diferentes partes del cuerpo.

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1.3.8. Fisiologa:
Estudia la funcin de los diferentes sistemas, rganos y tejidos.
1.3.9. Patologa:
Se encarga de la descripcin de las diferentes enfermedades.
1.3.10. Farmacologa:
Se ocupa de la composicin y accin de los diferentes frmacos.
1.5.

RESEA HISTRICA

El desarrollo de la microbiologa, se da por las referencias de hombres que


convencieron al mundo, de aquellos que desarrollaron una tcnica, un objetivo
o un concepto adoptado de manera general o explicaron sus descubrimientos
tan clara que la ciencia creci y prosper. El conocimiento humano sobre los
efectos producidos por los microorganismos ha estado presente incluso desde
antes de tener conciencia de su existencia; debido a procesos de fermentacin
provocados por levaduras se puede hacer pan, bebidas alcohlicas y productos
derivados de la leche. En la antigedad la causa de las enfermedades era
atribuida a castigos divinos, fuerzas sobrenaturales o factores fsicos (La
palabra malaria significa mal aire, se crea que era el aire viciado de los
pantanos el que provocaba esta enfermedad). Durante este periodo previo al
descubrimiento de los microorganismos, los naturalistas solo podan especular
sobre el origen de las enfermedades.
El descubridor de los microbios fue el holands "ANTHONY
VANLEEUWENHOEK" que combinaba una destreza como observador e
intrprete cientfico. Este descubrimiento posibilit que 200 aos ms tarde
(1822-1895), se compruebe la participacin de esos microorganismos en las
reacciones de fermentacin y que Robert Koch, Pasteur y otros, establecieron
su relacin con las enfermedades. Koch es recordado por el aislamiento de
bacterias del Carbunco y la Tuberculosis considerados posteriormente agentes
causales de enfermedades.
En 1590 HANS y HANSEN crearon la lupa, considerado como una especie de
microscopio simple; pero ya en 1610 GALILEO elabora el primer microscopio
simple como tal. En 1675 con las observaciones microscpicas de ANTHONY
VANLEEUWENHOEK con lentes pulidos por el mismo (aumento hasta de 160
dimetros), descubre los microorganismos. En 1762 PLENC1Z reconoce el
posible significado del descubrimiento de los microorganismos de
LEEUWENHOEK y atribuye a cada enfermedad infecciosa un microorganismo
especfico.

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.El trmino bacteria fue introducido en el ao 1828 por Christian Gottfried


Ehrenberg. Sin embargo, la primera observacin microbiolgica registrada, de
los cuerpos fructferos de mohos, fue realizada en 1665 por Otilio Andres. La
bacteriologa (ms tarde una subdisciplina de la microbiologa) se considera
que fue fundada por Ferdinand Cohn, un botnico cuyos estudios sobre algas y
bacterias fotosintticas lo llev a describir varias bacterias, tales como Bacillus .
Ferdinand Cohn fue tambin el primero en formular un esquema para la
clasificacin taxonmica de las bacterias.
Louis Pasteur (1822-1895) y Robert Koch (1843-1910) fueron contemporneos
de Cohn y son considerados como los fundadores de la microbiologa mdica.
Entre1876 y 1890 es considerado un perodo de descubrimientos sobre los
cuales se desarrollo la bacteriologa moderna con las actividades realizadas por
PASTEUR y KOCH. Quiz el mayor logro de Pasteur consisti en la refutacin
mediante cuidadosos experimentos de la por aquel entonces muy respetada
teora de la generacin espontnea, lo cual permiti establecer firmemente a la
microbiologa dentro de las ciencias biolgicas. Pasteur tambin dise
mtodos para la conservacin de los alimentos (pasteurizacin) y vacunas
contra varias enfermedades como el anthrax, el clera aviar y la rabia, realiza
todos sus trabajos con medios lquidos que exiga una habilidad tcnica en el
aislamiento de bacterias. Robert Koch es especialmente conocido por su
contribucin a la teora de los grmenes de la enfermedad, donde, mediante la
aplicacin de los llamados postulados de Koch, logr demostrar que
enfermedades especficas estn causadas por microorganismos patognicos
especficos. KOCH introdujo los medios slidos facilitando enormemente la
tcnica bacteriolgica. Adems en 1881 hizo el primer frotis de bacterias. Koch
fue uno de los primeros cientficos en concentrarse en la obtencin de cultivos
puros de bacterias, lo cual le permiti en el ao de 1882 aislar y describir varias
especies nuevas de bacterias, entre ellas Mycobacterium tuberculosis, el
agente causal de la tuberculosis. En 1837 CAGNIARD DE LA TOUR prueba
que la fermentacin depende de la actividad de las levaduras. En el ao de
1838 EHEENBERG hizo un intento de clasificacin de las bacterias formando
parte del reino animal. En 1854 se produce la consolidacin de que la idea de
la fermentacin y la putrefaccin dependen de los microorganismos, refutacin
definitiva de la teora de la generacin espontnea, cuya iniciativa tuvo
PASTEUR.
Mientras Louis Pasteur y Robert Koch son a menudo considerados los
fundadores de la microbiologa, su trabajo no reflej fielmente la autntica
diversidad del mundo microbiano, dado su enfoque exclusivo en
microorganismos de relevancia mdica. Dicha diversidad no fue revelada hasta
ms tarde, con el trabajo de Martinus Beijerinck (1851-1931) y Sergei
Winogradsky (1856-1953). Martinus Beijerinck hizo dos grandes contribuciones
a la microbiologa: el descubrimiento de los virus y el desarrollo de tcnicas de

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cultivo microbiolgico. Mientras que su trabajo con el virus del mosaico del
tabaco estableci los principios bsicos de la virologa, fue su desarrollo de
nuevos mtodos de cultivo el que tuvo mayor impacto inmediato, pues permiti
el cultivo de una gran variedad de microbios que hasta ese momento no haban
podido ser aislados. A fines del siglo XIX Martinus Beijerinck puso ms nfasis
en el conocimiento de la microbiologa del suelo y sobre la inmunologa. En
1867 se promueve el desarrollo de la ciruga antisptica por LISTER, basado en
los trabajos de PASTEUR sobre la causa de la fermentacin. En1872 se
produce el perfeccionamiento del microscopio (correccin de la esfericidad, y de
la cromaticidad de los objetivos, objetivo de inmersin; condensador) gracias a
los trabajos de ABBE. En 1890 GRAM hizo una clasificacin de acuerdo a
cultivos puros de levaduras y bacterias
Durante el siglo pasado (XX), sucedieron una serie de acontecimientos que
contribuyeron al avance cientfico como los siguientes: la microscopa
electrnica, la microscopia de contraste de fases, la microscopa fluorescente,
la quimioterapia, la radioterapia, los antibiticos, los cultivos de tejidos, las
vacunas
Aunque los conocimientos microbiolgicos de que se dispone en la actualidad
son muy amplios, todava es mucho lo que queda por conocer y
constantemente se efectan nuevos descubrimientos en este campo. Tanto es
as que, segn las estimaciones ms habituales, slo un 1% de los microbios
existentes en la biosfera han sido estudiados hasta el momento. Por lo tanto, a
pesar de que han pasado ms de 300 aos desde el descubrimiento de los
microorganismos, la ciencia de la microbiologa se halla todava en su infancia
en comparacin con otras disciplinas biolgicas tales como la zoologa, la
botnica o incluso la entomologa.
1.6.

OBSERVACIONES MICROSCPICAS DE LOS ALIMENTOS

El microscopio es el instrumento ms comn en el laboratorio de microbiologa,


propicia un aumento que permite la observacin de microorganismos y
estructuras visibles a simple vista. Las unidades de medida utilizadas en
microbiologa son el micrn. Los microscopios pertenecen a dos categoras:
luminoso (ptico) y electrnico dependiendo del principio en que se basa la
aplicacin.
1.6.1. MICROSCOPIA LUMINOSA
La microscopia en la cual el aumento es obtenido por un sistema de lentes
pticos (microscopios luminosos) incluye:
Microscopa de Campo Luminoso
Microscopa de Campo Oscuro
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Microscopa de Fluorescencia
Microscopa de Contraste de Fase
FIGURA 1.1: MICROSCOPIA LUMINOSA

1.6.1.1.

MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO

Los microscopios de este tipo generalmente producen un aumento de 1000


veces el tamao original. El lmite lo tienen en unas 2000 veces. Las lentes de
un microscopio ptico son el condensador, el objetivo y el ocular. La luz que
entra en el sistema debe enfocarse sobre la preparacin y para esto se utiliza el
condensador. Elevando o bajando el condensador puede alterarse el plano del
foco de luz y elegirse una posicin que consiga el foco preciso. El objetivo es la
lente situada cerca del objeto que se observa. El aumento primario del objeto es
producido por la lente objetivo y la imagen se transmite al ocular, donde se
realiza
el
aumento
final.
Los microscopios que se usan normalmente en microbiologa estn equipados
con tres objetivos: bajo poder, alto poder y objetivo de inmersin. Estos
objetivos estn montados sobre una pieza que se llama revolver que puede
rotarse para alinear el objetivo deseado con el condensador.
La imagen formada por el objetivo es finalmente aumentada por el ocular. El
aumento total de un microscopio compuesto es el producto del aumento de su
objetivo y de su ocular. El microscopio compuesto es capaz de conseguir
aumentos considerablemente mayores que el microscopio construido con una
sola lente. Este ltimo, llamado microscopio simple, se usa principalmente
como
lupas
y
cristales
de
aumento.
Adems del aumento, una propiedad importante de un microscopio es su poder
resolutivo; esto es la capacidad de mostrar distintos y separados dos puntos
muy cercanos. Cuanto mayor sea el poder resolutivo, mayor ser la definicin
de un objeto. Los microscopios de gran poder resolutivo son especialmente
buenos para ver pequeas estructuras. El poder resolutivo de un microscopio
compuesto depende de la longitud de onda utilizada y de una propiedad ptica
de la lente conocida como apertura numrica. Como los microscopios pticos
utilizan luz visible, la longitud de onda est fijada y es por lo que la resolucin

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de un objeto es funcin de la apertura numrica; cuanto mayor sea la apertura,
el
objeto
resuelto
ser
ms
pequeo.
El Microscopio de campo claro usa como fuente de luz directa bien una bombilla
bien la luz solar. Ya que los microorganismos son transparentes es difcil
distinguirlos con este tipo de microscopa y es por lo que se suelen teir.
1.5.1.2. MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO:
Usa un microscopio ptico equipado con un condensador y objetivo especial
que iluminan los microorganismos en la muestra frente a un fondo oscuro. Este
mtodo se utiliza para visualizar microorganismos vivos sin teir. Se basa en el
lmite entre fases de ndice de refraccin distintos la luz se dispersa, este
microscopio no es ms que un microscopio convencional en el que el
condensador es sustituido por otro que da lugar a que el haz de luz ilumine el
objeto sin penetracin directa de la luz a travs del objetivo. La muestra
aparece brillante con un fondo oscuro.
1.5.1.3. MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
La muestra se tie con una sustancia fluorescente que absorbe la energa de
las ondas cortas de la luz (azul) y emite la luz de longitudes de ondas ms
largas (verde). Se utiliza en inmunofluorescencia, tcnica en la cual una
sustancia fluorescente se une a un anticuerpo especfico de ciertos
microorganismos. Si el anticuerpo fluorescente se une al microorganismo, este
microorganismo emite fluorescencia y se puede identificar. Esta tcnica se usa
en
clnica.
1.5.1.4. MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES:
Es un microscopio ptico modificado que permite contrastar sustancias de
diferente grosor o densidad. Mediante un condensador y un objetivo especial se
controla la iluminacin de tal manera que vaya en diferentes rutas a travs de
las distintas partes de una clula. El resultado es una imagen con diferentes
grados de brillo y oscuridad. Con este mtodo, el material denso aparece
brillante, mientras que las partes de la clula que tienen una densidad cercana
al H2O (citoplasma) aparecen oscuras. Se utiliza para visualizar estructuras
celulares sin necesidad de usar colorantes o matar microorganismos. Mediante
mtodos pticos las diferencias existentes entre el trayecto de las ondas
luminosas en diferencias de intensidad visibles y en consecuencia, en
contraste. Se emplea 1) un diafragma anular situado por debajo del
condensador y 2) un objetivo que contiene una placa de fase o de difraccin
situada en la porcin posterior del plano focal. Esta placa separa la onda directa
de la onda difractada, y aumenta la intensidad de la relacin entre las fases lo
que da lugar a la formacin de una imagen visible. El objetivo recibe la onda
directa y la difractada.
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1.6.2. MICROSCOPIA ELECTRNICA
Los microscopios electrnicos utilizan rayos de electrones en lugar de la luz, lo
que les permite tener un poder de resolucin muy elevado. La longitud de onda
de los rayos de electrones es de 0,005 - 0,0003 nm, muy corta comparada con
la de la luz visible (426 - 750 nm; violeta - rojo). Es posible con el microscopio
electrnico resolver objetos separados por una distancia de 0,003 m,
comparado con los 0,25 m de uno ptico. Los aumentos pueden llegar a ser
de
un
milln
de
veces.
A causa de la naturaleza de este instrumento slo pueden examinarse objetos
muy delgados; incluso una sola bacteria es demasiado gruesa para ser
observada directamente. Por lo que, para preparar muestras para el
microscopio electrnico se necesitan tcnicas especiales de cortes ultrafinos.
Para seccionar las clulas primero deben ser fijadas y deshidratadas (etanol o
acetona). Despus de la deshidratacin, la muestra se incluye en una resina y
es aqu donde se realizan cortes finos con un ultra micrtomo, por lo general
equipado con una cuchilla de diamante. Una sola clula bacteriana puede
cortarse en cinco o seis secciones muy finas. Si slo tiene que observarse el
contorno de un organismo, no son necesarias secciones finas por lo que se
montan clulas enteras que se recubren de una capa fina de un metal pesado
(oro). El rayo de electrones es dirigido sobre la preparacin y los electrones
dispersados por el metal pesado activan una pantalla de observacin
produciendo una imagen. A la primera tcnica se la denomina Microscopa
Electrnica de Transmisin (MET) y a la segunda Microscopa Electrnica de
Barrido (MEB).
FIGURA 1.2: MICROSCOPIA ELECTRONICA

1.7.

MEDIOS DE CULTIVO

Los medios de cultivo son una mezcla equilibrada de nutrientes (agua,


compuestos nitrogenados, fuentes de energa, factores de crecimiento, etc.)

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que en concentraciones adecuadas y con condiciones fsicas ptimas permiten
un buen crecimiento de los microorganismos. Contienen una base mineral;
fuente de carbono, nitrgeno y azufre; atmsfera adecuada y los factores de
crecimiento necesarios que de forma slida o liquida, posibilitan el crecimiento
de cualquier microorganismo. A los medios de cultivo, se les aade otra serie
de sustancias, segn la necesidad de crecimiento de cada microorganismo,
pues no podemos olvidar que hay bacterias cuyo ambiente ecolgico es
bastante restrictivo. De esto se deduce la existencia de una gran variedad de
medios de cultivo, si bien es posible destacar el agar-agar nutritivo como medio
base al que se va aadiendo otros componentes ms especficos del
crecimiento bacteriano.
El enrequicimiento es una tcnica que permite el desarrollo de un grupo de
microorganismos a partir de una muestra que contiene una gran variedad de
microorganismos. Se utiliza un medio para favorecer la competencia entre los
organismos y se incuba bajo determinadas condiciones. Aquellos
microorganismos para los que el ambiente sea ms favorable crecern ms que
los otros y finalmente sern predominantes
En la actualidad estos medios de cultivo se pueden conseguir preparados en
forma deshidratada o en placas (diversas firmas se dedican a su fabricacin);
Oxoid, Difco, Merck, etc.
1.7.1. CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
De acuerdo al propsito para el cual son fabricados los medios de cultivo,
existen diversos tipos de medios que pueden ser clasificados de la siguiente
forma:
Segn su estado fsico pueden ser: slidos, semislidos, lquidos
1.7.1.1.

MEDIO MNIMO

Son los medios que presentan la mnima cantidad de nutrientes capaz de


permitir el desarrollo de los microorganismos.
1.7.1.2.

MEDIO COMPLEJO

Medios que contienen nutrientes de composicin qumica variable o no


establecida. Son mezclas complejas y poco definidas de sustancias. Se forman
a partir de extractos animales, vegetales, etc. Se utilizan cuando se necesita
obtener una amplia gama de microorganismos.

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1.7.1.3.

MEDIO SINTTICO

Son los medios que contienen una composicin qumica definida


cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para el estudio de
requerimientos nutricionales y para obtener resultados reproducibles.
1.7.1.4.

MEDIOS DE CULTIVO BSICOS

Son medios que generalmente contienen los nutrientes esenciales para


promover el desarrollo de microorganismos poco exigentes nutricionalmente
Son utilizados para anlisis cuantitativos y muestreo de medio ambiente y
superficies. Ejemplo:
Caldo nutriente, agar nutriente, caldo tioglcolato y caldo triptosa.
1.7.1.5.

MEDIO SELECTIVO

Medio que slo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibe


el de otros. Permite seleccionar y aislar microorganismos a partir de
poblaciones mixtas, son muy utilizados cuando se trabaja con muestras
tomadas de sitios corporales que poseen una flora normal abundante (faringe,
boca, piel, nariz, vagina, etc.). En estos medio se incorporan sustancias
inhibitorias (colorantes, antibiticos, inhibidores del metabolismo, sales viliares,
selenitos, teluritos, citratos, tetrationatos etc.), que condicionan el no
crecimiento de un determinado grupo de microorganismos y favorecen el de
otros grupos. Son muy utilizados cuando se trabaja con muestras tomadas de
sitios corporales que poseen una flora normal abundante (faringe, boca, piel,
nariz, vagina, etc.). En estos medio se incorporan sustancias inhibitorias
(colorantes, antibiticos, inhibidores del metabolismo, sales viliares, selenitos,
teluritos, citratos, tetrationatos etc.), que condicionan el no crecimiento de un
determinado grupo de microorganismos y favorecen el de otros grupos. La
eleccin de un medio selectivo depender en definitiva, de la clase de alimento
y de las caractersticas de la flora que se vaya a estudiar. Es interesante
destacar dos tipos de medios que sirven para aislar dos grandes grupos de
microorganismos:
Medios para bacterias Gram negativas; llevan cristal violeta y medios para
bacterias Gram positivos; llevan telurito potsico, acetato de talio y acida
sdica. Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos
Staphilococos).
1.7.1.6.

MEDIOS NO SELECTIVOS

Son medios lquidos, constituidos por peptona, extracto de carne, cloruro sdico
y agua, o slidos, con caldos nutritivos solidificados con agar-agar de uso
general para el cultivo de la mayora de los microorganismos. Estos medios se
denominan caldos nutritivos si son lquidos y agares nutritivos si son slidos.
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1.7.1.7.

MEDIO ENRIQUECIDO

Medio que tiene un gran exceso de nutrientes y se utiliza para microorganismos


que tienen grandes exigencias nutricionales. Son medios suplementados con
otros elementos nutritivos que proporcionan "factores de crecimiento" cuya
finalidad es promover el crecimiento de microorganismos ms exigentes, por lo
que favorecen algn condicionamiento fisiolgico de los microorganismos que
se desea analizar. Estos medios se utilizan para incrementar el nmero de
microorganismos que se quiere aislar e identificar y que en el alimento objeto de
estudio aparecen en pequeas cantidades.
Ejemplo: agar sangre, agar
chocolate, agar suero, agar gliceerol y todos los medios adicionados con
plasma, vitaminas y aminocidos.
1.7.1.8.

MEDIO DIFERENCIAL

Medio que permite revelar caractersticas fisiolgicas de los microorganismos.


Permiten el reconocimiento rpido de los microorganismos, porque forman
colonias tpicas.
Agar sangre (permite visualizar la sntesis de hemolisinas).
Levine (permite visualizar la fermentacin de lactosa por viraje de un indicador
cido-base).
1.7.1.9.

MEDIOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES

A veces un nico medio cumple a la vez los dos objetivos, el selectivo y el


diferencial. Estos medios llevan un indicador que cambia el ph al crecer un
determinado tipo de microorganismos, es un ejemplo el medio MacConkey que
diferencia el grupo de enterobacterias, bacterias que fermentan la lactosa
(coliformes) y forman colonias rojas en el agar-agar, mientras que otras del
mismo grupo forman colonias incoloras.
1.7.1.10. MEDIO DE CULTIVO ANAEROBIO
Si los microorganismos que se van a cultivar son anaerobias estrictas, se
precisan ambientes carentes de oxgeno, para conseguirlos se recurren a
medios que contienen sustancias reductoras o se aaden estas sustancias a
otros medios, de tal forma que el ambiente se modifica (glucosa, cido
ascrbico etc.).
Para eliminar el oxgeno del medio de cultivo, este se calienta y se cubre con
una gruesa capa de agar-agar solidificado, o con otros tipos de cierres, como
vaselina y parafna slida para que el oxgeno no se difunda. As mismo existen
mtodos para incubar en atmsferas carentes de oxgeno: son las llamadas
vasijas anaerobias en las cuales el oxigeno se sustituye por hidrgeno o por
nitrgeno.
Muchos organismos anaerobios necesitan una atmsfera enriquecida con
anhdrido carbnico para crecer (ciertos tipos de Brucella). En estos casos se
genera una atmsfera con dicho gas cuando se pone un vaso con una solucin
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de HC1, 2N y se introduce en l un trozo de mrmol de 1 a 1,2 g. Tambin se
consigue utilizando generadores de anhdrido carbnico que suministran las
casas comerciales.
1.7.1.11. MEDIOS PARA EL ESTUDIO DE CARBOHIDRATOS
En los medios de cultivo, los carbohidratos y glucsidos son muy utilizados
como fuente de energa por los microorganismos y particularmente para
diferenciar gneros e identificar especies. Normalmente el agua peptonada es
utilizada como base para el estudio de los azcares. Las soluciones de
carbohidratos empleadas en estas pruebas deben ser esterilizadas por filtracin
ya que por el enriquecimiento (y por el sper enriquecimiento) los azcares
sufren varios fenmenos como la hidrlisis de los azcares completos, la
formacin de productos de oxidacin y reaccin con otros componentes del
medio de cultivo, como aminocidos. La descomposicin de un carbohidrato por
el calor, se manifiesta por la disminucin del ph, o visiblemente por el
oscurecimiento de la solucin. Ejemplo: medio Basal Of de Hugh & Leifson y
todos aquellos en los cuales se utiliza algn azcar en especial.
1.7.1.12. MEDIOS DE TRANSPORTE
Son los medios utilizados para el envo de las muestras al laboratorio. La
mayora de estos contiene sustancias y componentes para prevenir la
disociacin, oxidacin e inhibir las reacciones enzimticas autodestructivas,
conservando la muestra viable hasta la llegada al laboratorio.
Ejemplo: medio de Stuart, medio de Amies, caldo de tioglicolato, etc.

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