Prctica No.

8: Determinacin de prueba de Coombs indirecta

Objetivo: Detectar anticuerpos dirigidos contra antgenos de los hemates
distintos de los ABO.
Fundamento: En esta prueba la sensibilizacin se realiza in vitro, en la primera
etapa se sensibilizan los eritrocitos con el anticuerpo que se desee investigar y en
la segunda etapa por medio del reactivo de Coombs se hace visible la
sensibilizacin por medio del fenmeno de aglutinacin macroscpica.
Generalidades: Si se detecta algn anticuerpo, debe procederse a una prueba de
identificacin de anticuerpos para conocer cul de ellos est presente. Al verificar
la compatibilidad entre donante y receptor, y en el caso de que se detecten
anticuerpos, se realiza una prueba de Coombs indirecta modificada. Es importante
que la sangre del donante no contenga los antgenos frente a los cuales el
receptor presenta ya anticuerpos.
La prueba de Coombs indirecta se solicita siempre previamente a una transfusin
de sangre y tambin en todos los embarazos. En mujeres Rh-negativas, se realiza
a las 28 semanas previamente a la inyeccin de la Ig-Rh, y despus del
alumbramiento si el beb es Rh positivo. En mujeres embarazadas Rh-negativas
con anticuerpos de tipo Rh (sensibilizadas frente a antgenos extraos), se solicita
a veces la prueba de Coombs indirecta para conocer de manera aproximada la
cantidad de anticuerpo presente.
Material:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Equipo de venopuncin
Tubos de ensaye
Solucin salina
Centrifuga
Gradilla
Pipeta
Suero del receptor
Incubadora
Suero de Coombs

Tcnica:
1. Extraer muestra sangunea del receptor sin anticoagulante
2. Extraer una muestra sangunea del donador con anticoagulante, preparar
suspensin de eritrocitos al 2%
3. En un tubo de ensaye debidamente rotulado agregar 2 gotas del suero del
receptor y 2 gotas de la suspensin de eritrocitos al 2% del donador y
mezclar suavemente e incubar el tubo a 37C
4. Lavar el tubo 3 veces con solucin salina, escurriendo totalmente la ltima
lavada y decantando en el fondo del tubo
5. Agregar 2 gotas del suero de Coombs polespecifico

6. Incubar a 37C por 10 minutos

7. Centrifugar 1 minuto a 3400 rpm
8. Leer desprendiendo suavemente el botn y observar
Interpretacin:
1. Si la prueba de Coombs indirecta se observa aglutinacin significa que
estamos en presencia de anticuerpos regulares en el suero del receptor por
lo que debe proceder al estudio de identificacin de los anticuerpos
adquiridos
2. Si la prueba de Coombs indirecta resulta negativa hay ausencia de
anticuerpos especficos
Resultados: La prueba dio como resultado negativa

Observaciones: Hay ausencia de anticuerpos especficos

Conclusiones:
correctamente

Aprendimos

realizar

la

prueba

de

Coombs

indirecta

Bibliografa: http://www.labtestsonline.es/tests/Antiglobulin_Indirect.html?tab=3#3