El jarabe de glucosa y licor de maz como alternativa a los sustratos de
melaza para la produccin de levadura calidad de coccin G. Spigno, MD
Fumi, DM De Instituto Faveri de Enologa e Ingeniera de Alimentos Universidad Catlica del Sacro Cuore Via Emilia Parmense, 84-29100 Piacenza (Italia) En el presente estudio la posibilidad de sustituir la melaza con jarabe de glucosa producida a partir de almidn de maz y complementado con licor de maz (CSL) (un subproducto de proceso de extraccin de almidn de maz) se investig como una fuente de protenas, vitaminas y oligoelementos. Para este propsito, las fermentaciones discontinuas alimentadas con volumen constante se llevaron a cabo para evaluar la influencia de la melaza azcares de reemplazo (0-30-60-100%) por jarabe de glucosa sobre el crecimiento de la biomasa, coeficiente de rendimiento (YX / S) para la conversin de sustrato en biomasa, el nitrgeno y el fsforo (como P2O5) el contenido de la biomasa final. Se utiliz una mezcla de caa y de remolacha melaza y las integraciones de nitrgeno, fsforo, biotina, tiamina, inositol, nicotinamida, cido nicotnico, piridoxin y zinc fueron suministrados Para fermentaciones con el 100% de azcares como glucosa, adems de empinada maz fue considerado y calculado sobre la base de CSL y melaza composicin. Una sustitucin de los azcares de melaza hasta 60% condujo nicamente a una ligera reduccin en el contenido de nitrgeno de la biomasa. La sustitucin completa de melaza azcares trados a la reduccin de rendimiento de biomasa (en parte debido al poder de tamponamiento ausente de la melaza y luego a una reduccin excesiva pH del medio durante la fermentacin), YX / S, el contenido de nitrgeno, y un mayor contenido de fsforo. En este caso, la adicin de CSL podra compensar en parte los efectos negativos. 1. Introduccin Saccharomyces cerevisiae (levadura de panadera) es el microorganismo industrial ms popular, ya que utiliza materiales baratos para el crecimiento y la produccin, y es capaz de fermentar muchos azcares. La fuente menos costosa y ms comn de azcares metabolizables para la fermentacin de la levadura de Baker es la melaza, un subproducto de la produccin de azcar. Esto es cierto en regiones donde la melaza se produce o al menos fcilmente disponibles a un precio bajo, ya que las materias primas son los principales contribuyentes a los costes de produccin de productos de bajo valor, como la levadura para panificacin. En Italia, por ejemplo, debido a modificaciones en la legislacin europea, la mayora de las plantas productoras de azcar han sido o sern obligados a cerrar. Es por eso que la exploracin de otras fuentes fermentables baratas y disponibles a nivel local de azcar para la sustitucin total o parcial de la melaza es sustratos alternativos esenciales y diferentes han sido ya investigado por otros autores (Champagne et al., 1990;. Daniel Ferrari et al, 2001; Ejiofor ota al, 1996;.. Khan et al, 1995). En el presente trabajo de estudio de jarabe de glucosa para este propsito se investig principalmente porque, aunque no necesariamente ms barato que la melaza, puede ser de fcil acceso
y con caractersticas estndar y constantes, a diferencia de la melaza
cuya composicin vara mucho y, por lo general, no hay manera los fabricantes de levadura pueden cambiar este hecho, excepto que se pueden mezclar diferentes calidades. Obviamente, Saccharomyces cerevisiae requiere otros factores nutricionales que los hidratos de carbono, tales como vitaminas, minerales, nitrgeno y compuestos de fosfato. A pesar de que ambos melaza remolacha y de caa contienen minerales, vitaminas y compuestos de nitrgeno, suplementos de nitrgeno, fsforo y oligoelementos son generalmente necesario. Es por eso que el uso de jarabe de glucosa conducir inevitablemente a una mayor necesidad de la adicin de nutrientes. En el presente Adems investigacin de licor de maz fermentado (CSL), un subproducto del procesamiento de almidn de maz, se consider debido a su contenido tpico de muchas vitaminas, aminocidos, compuestos de nitrgeno y materia mineral, lo que hace que sea un sustrato nutritivo muy adecuado en las fermentaciones industriales (Filipovi, 2002). El objetivo del estudio fue verificar la viabilidad de la sustitucin de la melaza por jarabe de glucosa y de la adicin de corn steep como proveedor de nutrientes. 2.Materials y Mtodos 2.1Inoculum un inculo comercial de S. cerevisiae fue proporcionada por la planta industrial de la levadura de panadero local. Crema de levadura procedente del penltimo paso de la produccin industrial, se utiliz como inculo. La crema se diluy hasta ~ 8 g peso seco / l para las fermentaciones. 2.2Fermentations Todas las fermentaciones se llevaron a cabo en una operacin de alimentacin por lotes, en matraces de 2 L, con un volumen medio constante de 0,6 L, en un agitador orbital termosttico a 30 C, 200 rpm durante 8 h (ALC 4237R de centrfuga). Cada 2 h, un 10% del volumen se descart para el anlisis y sustituido con un volumen igual de medio concentrado fresco (la concentracin de azcar de este medio fue elegido sobre la base de ensayos de cribado con el fin de llevar la concentracin de azcar de nuevo al valor de partida 50-60 g / l), y el valor de pH de nuevo a 5 con H2SO4 o NaHCO3. La melaza (una mezcla de caa de azcar y remolacha melaza) fue proporcionada por la planta industrial de la levadura de la misma panadero, oportunamente centrifugan pasteurizada y se diluyeron antes de usar. El nitrgeno (como 30% NH4OH), se aadieron fsforo (como 85% H3PO4), biotina, tiamina, piridoxin, Nicotinamid, cido nicotnico, inositol y ZnSO4 de acuerdo con la indicacin dada por la fbrica de levadura de panadero. El jarabe de glucosa (materia seca 32%) y la empinada maz fueron proporcionados por una fbrica de almidn de local (Roquette Italia). Todas las fermentaciones se llevaron a cabo por cuadruplicado. Mtodos 2.3Analytical muestras de caldo recogieron cada dos horas y al final de las fermentaciones, se analizaron para el pH, la biomasa contenido en peso seco y contenido de azcar. El peso en seco celular se determin por medicin de la densidad ptica (DO) a 660 nm despus de la centrifugacin y agua
de dilucin y utilizando una curva de calibracin para DO frente a
peso seco (determinado en un horno a 70 C hasta peso constante). Al final de la fermentacin, tambin se analiz la biomasa recuperada por el contenido de nitrgeno (por el mtodo Kjeldahl) y el contenido de fsforo como P2O5 (por un mtodo espectrofotomtrico, en el que la muestra es mineralizada con cido sulfrico y el catalizador cprico, se neutraliz con NaOH, aadido con el reactivo vanadato-molibdato y se ley a 420 nm). Los azcares se determinaron como azcares reductores totales (por el mtodo Fehling) despus de la inversin de la sacarosa con HCl hidrlisis caliente. 2.4Experiments Con el fin de investigar la parcial a completa sustitucin de los azcares de melaza por jarabe de glucosa, las fermentaciones con el aumento de porcentaje de azcares procedentes de la glucosa (0-60-100%) se llevaron a cabo. En estos ensayos nutrientes suministros eran siempre los mismos. En el caso de slo el jarabe de glucosa como fuente de azcares, la adicin de corn steep a una concentracin de 50 g / l se investig. Los resultados se compararon sobre la base de los siguientes parmetros: tendencia OPh con tendencia osugar tiempo con tiempo oBiomass tendencia con tiempo (g peso seco / l) aumento de la biomasa ototal (g de peso celular seco) YX rendimiento de conversin oSubstrate / S (g de azcares consumida / g de biomasa seca producida) contenido oNitrogen de biomasa N definitiva% (g nitrgeno / 100 g de masa celular seca) Contenido oPhosphorus de P2O5 biomasa final% (g de P2O5 / 100 g de masa celular seca) Anlisis 2.5Statistical La influencia de la sustitucin de la melaza de azcar con jarabe de glucosa, as como del maz Adems empinada, en los parmetros considerados se evalu mediante anlisis de Anova y prueba post hoc de Tukey para la media discriminacin en un nivel de confianza superior al 95% (p <0,05), mediante el programa estadstico SPSS v .13.0. 3.Resultados 3.1Replacement de azcares melaza con el crecimiento de la biomasa jarabe de glucosa fue significativamente influenciado por la sustitucin de la melaza de azcar hasta un 60%, mientras que con slo el jarabe de glucosa como fuente de hidratos de carbono, el crecimiento de la levadura fue bloqueada (Fig. 1), segn ha confirmado la concentracin de azcar (Fig. 2). Esto fue debido tanto a una disminucin de los nutrientes distintos de los hidratos de carbono (desde la melaza contienen algunos nutrientes) y a una capacidad de tamponamiento medio reducida cuando la melaza fue sustituido, como se evidencia por la tendencia pH (Fig. 3) (Thomas et al., 2.002) . A pesar de que para la fermentacin con el 100% de jarabe de glucosa, pH se regul a cada hora en lugar de cada 2, esto no fue suficiente. Fermentaciones con 60% de azcares procedentes de jarabe de glucosa dieron una biomasa final similar en trminos de contenido de fsforo pero con menor contenido de nitrgeno,
mientras que utilizando slo jarabe de glucosa el contenido de fsforo
aument estadsticamente. ig. 2: La concentracin de azcar (antes de concentrarse adicin de medio) durante fermentaciones a diferentes porcentajes de sustitucin melaza. 2345602468time (h) Syr pH 0% Syr 60% Syr 100% Syr 100% + CSFig. 3: Variacin del pH del medio (antes de concentrarse adicin de medio) durante fermentaciones a diferentes porcentajes de sustitucin melaza. 2Fermentation Slo con jarabe de glucosa y escarpado de maz Para tratar de resolver los problemas ocasionados con la sustitucin completa de melaza azcares con la glucosa, se investig la administracin de suplementos de nutrientes con empinada maz. Teniendo en cuenta que la cantidad y la calidad de la biomasa obtenida con 60% de jarabe fue casi el mismo que el obtenido con slo melaza, la composicin de nutrientes de la antigua sustrato fue tomada como referencia ptima. Luego, sobre la base de melaza y maz composicin empinada, se calcul para agregar empinada maz a 50 g / l de concentracin. Esta cantidad debe reemplazar todos los nutrientes melaza (excepto para el calcio que se agreg como CaCO3), sino tambin algunos de los suplementos dados, es por eso que decidimos no aadir cido nicotnico, inositol, tiamina, zinc, nitrgeno y fsforo ms. Resultados (. Figs 1-3 y Tabla 1) mostraron un crecimiento de la biomasa superior con un menor consumo de azcares (inferior Y / S), probablemente tambin gracias al poder de tamponamiento de la CS (Fig. 3), pero un nitrgeno decididamente superior y contenido de fsforo de la biomasa recuperada, lo que podra influir negativamente en el poder fermentativa de la levadura del panadero final (parmetros no investigados). 4. Conclusiones Nuestros resultados mostraron que melaza azcares podran ser reemplazadas por jarabe de glucosa para un 60% sin ninguna influencia estadstica sobre crecimiento de la biomasa, contenido de biomasa fsforo y rendimiento de conversin del sustrato. Cuando la melaza fue completamente reemplazado, el poder tampn reducida y el valor nutritivo del medio condujeron a un crecimiento de la biomasa reducida. En este caso, adems de la empinada maz podra amortiguar el medio y un rendimiento de biomasa ms alta se observ. Maz empinada tambin podra dar a las ventajas de menor consumo de azcares (mayor rendimiento de conversin de sustrato) y una reduccin de los suplementos de nutrientes, pero el fsforo y el nitrgeno de la levadura composicin final fue estadsticamente superior, lo que subraya la necesidad de una mejor optimizacin del sustrato.