HEMATOXILINA Y EOSINA

Nota: cuando haga preguntas o ponga imgenes, las respuestas correctas

y referencias las pongo en blanco, asi primero lo piensan y despus se fijan
si esta bien lo que pensaron

La tcnica de H y E, tambin llamada tcnica convencional, utiliza como

fundamento la afinidad de las molculas cidas y bsicas para atraer a su
opuesto. As, una molcula cida tendr afinidad por una molcula bsica, y
viceversa. En esta tcnica el colorante bsico es la hematoxilina, mientras
que el cido es la eosina.
La hematoxilina, que es de color azulado violceo, tender a unirse a
molculas cidas (por ser de naturaleza bsica).
Qu molculas son cidas en una clula?
Ncleo celular: por ser rico en ACIDO Desoxirribonucleico (ADN). El
nucleolo tambien es basofilo ya que es rico en ARN.
Ribosomas y polirribosomas: ricos en ACIDO Ribonucleico (ARN)
Retculo Endoplasmtico Rugoso (REG): rico en RIBOSOMAS.
CONCLUSIN: Toda molcula cida, se unir al colorante bsico
hematoxilina. En este caso, la molcula se define como basfila (baso =
bsico, filia = afinidad)
Entonces, veamos imgenes

Clula del pncreas (clula productora de protenas). Flecha blanca: ncleo.

Flecha amarilla: nucleolo. Flecha roja: REG (no veo el REG, se que est ah
porque veo una regin basofila en el citoplasma
Con lo expuesto podemos concluir que una clula productora de protenas
tiene las siguientes caractersticas:
- Ncleo con cromatina laxa (ya que debe tener sus hebras de ADN
separadas para poder transcribirse)
- Nucleolo evidente (acurdense que en el nucleolo se sintetizan los
RIBOSOMAS

Citoplasma basfilo porque la organela que predomina es el REG

La eosina, que es de color rojo plido o rosado,

molculas bsicas (por ser de naturaleza cida).

tender a unirse a

Qu molculas son bsicas en una clula?

Mitocondrias: por estar cargadas de enzimas (protenas)
Protenas intracelulares: como la actina y la miosina del tejido muscular
Protenas extracelulares: como el colgeno del tejido conectivo.
CONCLUSIN: Toda molcula bsica, se unir al colorante cido eosina. En
este caso, la molcula se define como acidfila (o eosinfila, por su afinidad
al colorante eosina).
Veamos una imagen:
Clula parietal del estomago

Clula parietal del estomago. Flecha amarilla: ncleo. Flecha roja:

citoplasma
La funcin de la clula parietal es la de secretar protones y cloruro para
formar el acido clorhdrico. Para poder secretarlas en contra de gradiente
necesita energa y por lo tanto tener muchas mitocondrias. Por ende en este
caso el citoplasma es acidfilo ya que la organela que predomina es la
mitocondria. De lo dicho anteriormente podemos entonces sacar una
conclusin:
La coloracin final de un citoplasma depende SIEMPRE de la
organela que predomine en su interior.
As, una clula que sintetice protenas, tendr mayor cantidad de REG que
de mitocondrias, y por ende se teir su citoplasma basfilo.
Lo mismo ocurre con una clula encargada de la contraccin (tejido
muscular). Si bien tiene polirribosomas para la sntesis de protenas
endgenas (las protenas contrctiles), son estas ltimas las que
predominan en su interior, y por ende muestran un citoplasma acidfilo.
Una excepcin lo constituye el fibroblasto del tejido conectivo. Dicha clula
est encargada de la sntesis de protenas (como lo es el colgeno). Por
ende, presenta abundantes cantidades de REG en su interior. Las
micrografas electrnicas demuestran que efectivamente es as. Sin
embargo, al teirlas con H y E, su citoplasma se ve acidfilo. Esta aparente

paradoja histolgica se explica fcilmente cuando uno conoce la informacin

terica de la clula. Si bien tiene abundante REG, en su interior almacena a
los precursores de la protena colgena en vesculas de almacenamiento.
Dichas vesculas enmascaran al REG, dndole al citoplasma una sutil
acidofilia.
...Ahora, cuando una parte del preparado teido con la tcnica de H
y E no se tie, debo inferir que ah se encuentra una molcula
neutra? NO!!!!!!!!!!!
Muchas veces ocurre que vemos una clula cuyo citoplasma no se ha
teido. No necesariamente significa que haya estructuras neutras. Puede
darse el caso, como lo representan los lpidos, que no soportan el pasaje de
alcoholes de la tcnica de H y E. De esta manera, al perderse el contenido,
no hay nada que teir.
Entonces, que no se tie con H y E????
- aire o agua (por ejemplo las luces!)
- lpidos: Los lpidos tienen una tcnica especfica que preserva su
contenido, llamada Tcnica de Sudn.
- hidratos de carbono: Las estructuras con alto contenido en glcidos,
como el glucgeno, proteoglicanos y mucopolisacridos, tambin pueden
dar una imagen negativa (no se tien) con la tcnica convencional. Las
estructuras glucdicas presentan una tcnica selectiva para su tincin,
llamada tcnica de PAS (Peryodic Acid - Schiff).
SUDAN
Qu estructuras son sudanfilas? Todas las estructuras ricas en lpidos
Tejido adiposo blanco: presenta una gran vacuola lipdica que ocupa todo
su citoplasma.
Vainas de mielina de las neuronas
Vesculas de almacenamiento de colesterol de las clulas
productoras de hormonas esteroideas: como el espongiocito de la
corteza suprarrenal.
Retculo endoplasmtico Liso (REL).
Hay dos colorantes:
Sudan rojo: tie triglicridos (adipositos)
Sudan negro: tie fosfolpidos (vainas de mielina)
Imgenes:

Tcnica de PAS
Qu estructuras dan positivas a la reaccin de PAS?
Todas aquellas ricas en glcidos
Vacuolas de clulas caliciformes
Vesculas de almacenamiento de glndulas mucosas (como los acinos
mucosos o mixtos)
Vesculas de almacenamiento de glucgeno: como en el hepatocito o
las clulas musculares
Glucoclix
Imgenes:
1) Acino mucoso: PAS + H y E

2) Mucus producido por celulas del estomago (lo que se ve rojo es PAS)

3) celula caliciforme

CONCEPTOS FINALES
Se torna imprescindible comprender las distintas afinidades tintoriales
que tienen las estructuras intracelulares, para comprender la visin al
microscopio, y poder sacar conclusiones veraces.
A su vez, el ncleo de una clula SIEMPRE es basfilo. Podr ser
intenso (si la cromatina est condensada) o leve (si la cromatina esta laxa).
Pero siempre est en la gama de lo basfilo.
Es el citoplasma de una clula el que tiene variaciones en la
coloracin. Esto depende fundamentalmente de las organelas que se
encuentren en su interior.
Una clula que sintetice protenas de exportacin, tendr en su
citoplasma grandes cantidades de REG. Esto no significa que UNICAMENTE
tenga REG. Tambin tiene mitocondrias.
Nota: los contenidos desarrollados en este documento NO REEMPLAZAN
bajo ningn aspecto la BIBLIOGRAFIA existente, ni son suficientes para
cumplir los OBJETIVOS de la materia. El enfoque del mismo es prctico y
NO se desarrollan contenidos puramente tericos.