Ao 3, nm.1
Portugal
Disciplina forense
de toxicologa del laboratorio
de polica
J. alegre, J. Rodrigues,
M. J. Caldeira y A. Cardoso
Costa R ica
Espaa
adn lmite: extraccin de
polimorfismos de adn a partir
de vainas percutidas
C. D. Snchez Castillo
Mxico
Brasil
Cuestiones relacionadas
con las bases de datos
de adn
N. Sueli Bonaccorso
Ao 3, nm. 1
Abril 2013
07/05/13 10:00
DIRECTORIO
del instituto nacional
de ciencias penales
R afael Estrada Michel
Director General
Alejandro Porte Petit
Encargado de la Secretara General Acadmica
Jorge M artnez Iglesias
Encargado de la Secretara General de Extensin
M arysol Morn Blanco
Encargada de la Direccin de Publicaciones
REVISTA de
criminalstica
y estudios forenses
Ao 3, nm. 1, abril-septiembre de 2013
i n a ci p e
Contenido
Portugal
Joana Alegre, Joo Rodrigues, Maria Joo Caldeira
y Ana Cardoso Matias
Disciplina forense de toxicologa del laboratorio
de polica. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
Portugal
Fernando Jos Viegas
Los retos presentes y futuros de la inspeccin ocular . . . . . . . . 17
Costa Rica
Carlos Andrey Gonzlez Blanco,
Marco Martnez Esquivel y Guillermo Brenes Aguilar
Conduccin y accidente automovilstico bajo
la influencia de tolueno . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Espaa
Carlos David Snchez Castillo
adn lmite: extraccin de polimorfismos de adn a partir
de vainas percutidas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
Espaa
Vctor Molina Moreno
Anlisis forense de drogas de abuso
por espectroscopia Raman. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55
Mxico
Rafael Moreno Gonzlez
El perito qumico forense y la investigacin criminalstica . . . . 87
Brasil
Norma Sueli Bonaccorso
Cuestiones relacionadas con las bases de datos de adn. . . . . . . 99
portugal
La trayectoria tcnico-cientfica del Laboratorio de Polica Cientfica (lpc) tiene ms de medio siglo de historia, ya que inici su
actividad el 2 de enero de 1960, tras la publicacin del Decreto
Ley nm. 41306.
La toxicologa es una de las disciplinas forenses que se desarrollan en el lpc. Su actividad pericial consiste en la deteccin, identificacin y/o cuantificacin de sustancias de naturaleza vegetal,
*Joana Alegre Pires Santos (joana.santos@pj.pt), Joo Manuel Abreu Rodrigues (joao.rodrigues@pj.pt), Maria Joo Nunes Caldeira (joao.caldeira@
pj.pt) y Ana Isabel Cardoso Matias (anai.matias@pj.pt) se desempean como
especialistas superiores en el rea de Biotoxicologa, Toxicologa de la Polica
Judicial de Portugal. Rua Gomes Freire, 174, 1169-007, Lisboa, Portugal.
9
Joana Alegre, Joo Rodrigues, Maria Joo Caldeira y Ana Cardoso Matias
Figura 2. Laboratorio de
anlisis instrumental.
ciencia forense
Nmero de peritajes
8000
6000
4000
2000
0
2008
2009
2010
ms que la mayor parte del volumen de trabajo pericial se relaciona con la identificacin, cuantificacin y comparacin de drogas
de abuso.
Como se aprecia en la grfica 1, el nmero de solicitudes de
exmenes periciales durante el periodo 2008-2010 fue muy elevado. No obstante, la capacidad de respuesta del lpc fue satisfactoria,
ya que consigui, en media, atender todas las solicitudes.
Por lo general, la cocana, la herona y el cannabis son los estupefacientes ms significativos de la casustica del rea en lo referente a cantidades, lotes y muestras.
La grfica 2 presenta la relacin entre el nmero de peritajes
solicitados en 2008, 2009 y 2010, y los tipos de drogas ms comunes. Aqu destaca el elevado nmero de incautaciones de cannabis
(tanto en forma de hojas como de resina), seguido de la cocana
y la herona, la cual muestra el menor nmero de incautaciones.
De acuerdo con los criterios de muestreo el rea observa las
normas propuestas por las Naciones Unidas y el European Network
of Forensic Science Institutes (enfsi), a una incautacin puede
corresponder ms de un lote y, a la vez, de un mismo lote pueden
constituirse varias muestras. La grfica 3 vincula el nmero de lotes y muestras analizadas entre 2008 y 2010. Como se comprueba,
en este periodo se verific una disminucin del nmero de muestras recibidas, mientras que en 2010 se produjo un aumento significativo del nmero de lotes.
ciencia forense
11
Joana Alegre, Joo Rodrigues, Maria Joo Caldeira y Ana Cardoso Matias
Nmero de peritajes
4000
3000
2000
1000
0
2009
2008
2010
500000
12500
400000
12000
11000
200000
10500
100000
0
12
11500
300000
10000
2008
ciencia forense
2009
2010
9500
Nmero de lotes
Nmero de muestras
4000
Nmero de muestras
3000
2500
15000
2000
10000
1500
1000
5000
Nmero de lotes
3500
20000
500
0
in
ta
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fe
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na
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as
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h
ac
H
ra
to
)
13
Joana Alegre, Joo Rodrigues, Maria Joo Caldeira y Ana Cardoso Matias
Anfetamina
Cannabimticos
Polvo (g)
1675.9
ciencia forense
En fechas ms recientes, se aprob su candidatura a la Academia Iberoamericana de Criminalstica y Estudios Forenses (aicef)
y se presentaron en la reunin del Grupo Iberoamericano de Trabajo de Anlisis de Drogas de Abuso (gitada), que tuvo lugar en
noviembre de 2012 en Madrid, Espaa. Como miembros efectivos
del gitada, los especialistas del rea de toxicologa contribuirn
con su larga experiencia en las ciencias forenses para lograr un
intercambio fructfero de experiencias y nuevas realidades, as
como en la dinamizacin del grupo.
Observaciones finales
El anlisis de estupefacientes constituye el grueso de los peritajes
realizados por la disciplina forense de toxicologa del Laboratorio
de Polica Cientfica de la Polica Judicial. A pesar del elevado volumen de trabajo, el rigor siempre ha sido una constante y uno de
los objetivos prioritarios del equipo. Su evolucin tcnico-cientfica obedece a los retos diarios que enfrenta a diario, con el objeto
de proporcionar una respuesta eficaz y objetiva.
Por otra parte, la cooperacin internacional contribuye para
la armonizacin de mtodos y procedimientos entre los diversos
laboratorios que trabajan en esta rea.
ciencia forense
15
portugal
ciencia forense
cin de la Investigacin Criminal, en la que se encuentran plasmadas las competencias de cada una de estas policas al respecto.
En resumen, la citada ley refiere que la competencia para investigar los delitos de mayor gravedad y/o complejidad descritos
pertenece en exclusiva a la Polica Judicial, mientras que la atribucin para investigar los dems delitos pertenece a las otras dos
fuerzas policiales segn el rea geogrfica donde ocurran.
Debido a la complejidad de los delitos aludidos y a la importancia que tiene el correcto anlisis del lugar de los hechos para
el xito de su investigacin criminal, define tambin con toda claridad que el rgano de polica criminal al que se le comunique la
comisin de un delito y no tenga competencia para investigarlo,
slo puede implementar las medidas cautelares necesarias y urgentes para preservar los medios de prueba.
Cabe aadir que lo antes mencionado es una parfrasis de lo
que se asienta en el Cdigo de Proceso Penal portugus respecto
de las medidas cautelares y de polica y de los medios de obtencin de prueba. Esto quiere decir que, tras recibir la noticia de la
comisin de un delito, el rgano de polica criminal, si no tiene
competencia para investigar el caso, slo debe aislar y preservar
el lugar de los hechos y contactar inmediatamente a la polica que
cuente con competencia para su investigacin.
De este modo, queda claro que el legislador tuvo el cuidado de
crear los mecanismos de operacin y articulacin de los rganos
de polica criminal, con el propsito de proteger la consecucin de
la pesquisa criminal.
De acuerdo con lo antes dicho, la evolucin cientfica de todas las ramas de la ciencia a lo largo del siglo xx aport, como es
evidente, herramientas de trabajo muy poderosas para la investigacin criminal y dio a la prueba material un valor probatorio
mucho ms riguroso que el de la prueba testifical.
El anlisis del lugar de los hechos tambin experiment una
importante evolucin, no slo en lo que respecta a la correcta interpretacin de lo que ah ocurri, sino en la bsqueda, identificacin e recoleccin de indicios que puedan relacionar al autor
con el acto delictivo. Asimismo, dicha evolucin destac, de forma
significativa, los riesgos de la contaminacin y del movimiento de
objetos y materiales existentes en el lugar.
Como se expres en prrafos anteriores, a partir de las actuales
potencialidades de las tcnicas de anlisis de la escena del crimen
y del campo de laboratorio, el correcto aislamiento y preservacin
ciencia forense
19
de las escenas del crimen, sobre todo en delitos de mayor gravedad y/o complejidad, es decisivo para culminar la investigacin
criminal.
Ante las actuales posibilidades que hay de llevar a cabo el anlisis de la escena del crimen, se desarroll una forma tcnico-cientfica de aproximacin a sta para los delitos de mayor gravedad
y/o complejidad, pero se mantiene el enfoque clsico para los
delitos de menor gravedad. En el caso de un delito de hurto, el mtodo de actuacin debe centrarse, en lo esencial, en la bsqueda
de huellas dactilares y, como excepcin, en los restos biolgicos
cuando sean evidentes, teniendo en cuenta las caractersticas del
lugar de los hechos y las declaraciones de los testigos. En contraste, la aproximacin a un delito de mayor complejidad o gravedad
debe hacerse de forma metdica, con un componente tcnicocientfico muy elevado, por profesionales con mucha experiencia
en este tipo de escenas, que sepan manejar el equipo y los productos qumicos que se requieren para la correcta ejecucin del
anlisis y con una formacin extensa en las diversas reas de las
ciencias forenses.
En esta metodologa de carcter tcnico-cientfico, se puede
afirmar que son los vestigios existentes en el lugar los que hablan, los que explican con claridad los sucesos y cual es el potencial valor probatorio que cada uno de esos vestigios tiene en
la esfera de la investigacin criminal. Se comienza por establecer
caminos para acceder al interior de la escena del crimen y se contina con el anlisis meticuloso del espacio, es decir, a relacionar
los vestigios detectados con la consiguiente interpretacin tcnico-cientfica de los sucesos. En ocasiones, cuando se precisa la
intervencin de otras personas que no suelen ejecutar este tipo de
trabajo, como los patlogos forenses para proceder a examinar
un cadver, los entomlogos forenses para recoger muestras
de esa naturaleza y otros, se crean equipos multidisciplinares
constituidos por miembros con funciones delimitadas.
En virtud de ello, se debe tener en cuenta que en la actualidad las ciencias forenses, en particular la criminalstica, son una
herramienta de trabajo extremamente poderosa; sin embargo, si
son mal aplicadas pueden llevar a gastos excesivos sin obtener
resultados prcticos. Esto, conjugado con las dificultades econmicas que prevalecen en el entorno mundial, obliga a realizar una
evaluacin permanente de la tipologa de vestigios que se deben
recoger segn el tipo de delito en causa o, por lo menos, una eva20
ciencia forense
luacin rigurosa de los vestigios que se deben enviar para su anlisis en laboratorio.
En los pases que cuentan con mayor desarrollo en investigacin criminal, hace ya muchos aos se entendi que ste no es un
mundo perfecto y que como los recursos financieros son limitados, deben ser sometidos a un control serio y responsable. Todos
concuerdan en que la aplicacin de los recursos debe adecuarse al
tipo de delito que se investiga.
En Portugal operan tres fuerzas policiales facultadas para la
investigacin criminal, aunque en campos debidamente delimitados, y dos entidades con competencias periciales forenses: el
Laboratorio de Polica Cientfica (lpc), dependiente de la Polica
Judicial, y el Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses (inml). Con base en las particularidades antes mencionadas, respecto tanto de la capacidad tcnico-cientfica en el anlisis
del lugar de los hechos como de las dificultades econmicas mundiales aun debido a la insuficiente capacidad de respuesta oportuna por parte de dichos laboratorios forenses ante el volumen
de pedidos de peritajes, es indispensable crear mecanismos de
control respecto de la calidad del trabajo efectuado en la escena
del crimen y del tipo/cantidad de indicios enviados para peritaje
en el laboratorio de acuerdo con el tipo de delito, as como definir
qu ventajas reales proporcionaron esos peritajes en un procedimiento de investigacin criminal especfico.
En conclusin, a una dcada de la implementacin de una
nueva realidad de investigacin criminal en Portugal que incluye a tres fuerzas policiales activas, aunque en el plano jurdico-funcional se instauraron mecanismos legales a fin de que
las investigaciones no decayeran, ahora es imperioso someter el
trabajo forense a una evaluacin rigurosa que contraste los gastos
econmicos y los resultados obtenidos. Esto llevara a establecer
mecanismos legales que permitieran evaluar de forma rigurosa el
trabajo efectuado para que la investigacin criminal en Portugal
corresponda al nivel de excelencia que ambicionamos.
Para eso, la Escuela de Polica Judicial debe centralizar la formacin impartida, la cual tiene que adecuarse a las necesidades
reales de investigacin de cada una de las fuerzas policiales; deben desarrollarse metodologas de actuacin para los miembros
policiales de proximidad, a fin de preservar mejor las escenas
del crimen; deben crearse reglas que delimiten los tipos de indicios que se tienen que recoger segn el tipo de delito investigado
ciencia forense
21
y, por ltimo, deben instituirse mecanismos de control sancionatorio para quien incumpla.
Mientras no se apliquen estas medidas, hay dos situaciones
extremosas que dificultan enormemente la consecucin del objetivo. Por una parte, la preservacin deficiente y el anlisis del
lugar de los hechos incorrecto conducen a la prdida de indicios
y a la elaboracin de interpretaciones equivocadas de los sucesos.
Por la otra, el exceso de indicios recogidos en escenas de crmenes
de menor gravedad supone gastos onerosos innecesarios para el
erario pblico, as como dificultades para que el lpc y del inml den
respuesta oportuna a las necesidades de investigacin de delitos
de mayor gravedad. Estos dos extremos causan graves perjuicios
al correcto progreso y logro de la investigacin criminal.
22
ciencia forense
costa Rica
e reporta el caso de conduccin de un automvil bajo la influencia de tolueno. Un conductor con alteracin del sensorio choca con otro automvil en una interseccin; en su
automvil se encuentra un frasco con pegamento de zapatero. A
este conductor se le detect 2.57 mg/dL de tolueno al momento
de la primera toma de muestra de sangre, y 30 minutos despus
tena 2.38 mg/dL de tolueno en sangre.
Debido a los efectos depresores que ejerce el tolueno sobre el
sistema nervioso central, se concluye que un individuo con estos
niveles de esta sustancia en sangre tiene graves impedimentos
para conducir. No se recomienda la determinacin de tolueno en
todos los casos de conduccin temeraria, pero es un txico potencial que se debe considerar cuando la historia del caso permite
sospechar de su abuso.
Introduccin
El tolueno (metilbenceno, toluol) es una sustancia aromtica que
muestra alta volatilidad a temperatura ambiente y cuyo abuso
*Lic. Microbiologa y Qumica Clnica, Perito Judicial 2. Seccin de Toxicologa Forense, Departamento de Ciencias Forenses del Poder Judicial, Costa Rica. Correos electrnicos: cgonzalezb@poder-judicial.go.cr y litos1518@
yahoo.com.
**Lic. Microbiologa y Qumica Clnica, Perito Judicial 2. Seccin de Toxicologa Forense, Departamento de Ciencias Forenses del Poder Judicial, Costa
Rica. Correo electrnico: mmartinez@poder-judicial.go.cr.
***MCs. en Toxicologa, Jefe de la Seccin de Toxicologa Forense, Departamento de Ciencias Forenses del Poder Judicial, Costa Rica. Correo electrnico:
GBrenesA@poder-judicial.go.cr.
23
recreativo como inhalante es comn, ya que hay reportes al respecto en casi todas las latitudes y lugares del mundo (Baselt,
2000). Este hidrocarburo se suele utilizar en altas concentraciones
para remover pintura y para diluirla (thinner o disolvente). Por su
naturaleza no polar, se emplea tambin como constituyente de
pegamentos, tintas, pinturas y selladores de huecos para tuberas
y cemento, adems de ser un componente comn de la gasolina
(Balster y Stolerman, 2010).
Por lo general, las personas que abusan de tolueno lo inhalan
directamente de una botella o de un pedazo de tela impregnado, y
en algunos casos se colocan en la cabeza una bolsa plstica cuyo
interior impregnan con el txico.
Alrededor del mundo millones de personas estn expuestas a
vapores de solventes orgnicos industriales como el tolueno y el
xileno. El primero, debido a que tiene una enorme gama de usos,
est presente en un nmero muy elevado de puestos de trabajo.
La produccin anual mundial de tolueno es de cinco a 10 millones
de toneladas (Martin, 2009).
El tolueno es un solvente orgnico con caractersticas lipoflicas que en el cuerpo humano tiene alta afinidad por tejidos
con alto porcentaje de lpidos, como el cerebro. Por esta razn, el
sistema nervioso central (snc) es el ms afectado por sus efectos
txicos en humanos y mamferos en general. Algunos sntomas
que comnmente resultan de la exposicin a este solvente son
deficiencias cognitivas y mentales, disminucin de la capacidad
auditiva, irritacin ocular, mareos, dficit de atencin, depresin
y fatiga, entre otros (Gopal, 2008).
La mayor parte de la informacin disponible sobre las consecuencias del tolueno en la salud humana proviene de estudios en
trabajadores con exposicin crnica al mismo o de personas que
inhalan altos niveles de tolueno para su autointoxicacin intencional. Algunos estudios han examinado los efectos neuropsiquitricos de la exposicin aguda a vapores del tolueno, casos en los
que predomina una disfuncin integrada entre el cerebelo y el
snc (Agency for Toxic Substances and Disease Registry, 2001). En
el largo plazo, los efectos neuropsiquitricos y las alteraciones de
comportamiento se vuelven ms evidentes y constantes. Asimismo, se ha documentado toxicidad de esta sustancia en riones, hgado, corazn y otros rganos, con efectos fisiolgicos reversibles
(Omar et al., 2012). Sin embargo, los efectos fisiolgicos del tolueno en el cerebro y los nervios (tanto centrales como perifricos)
24
ciencia forense
25
abuso se realiza por medio de la tcnica de inmunoensayo fluorescente polarizado, que comprende cinco drogas de abuso: anfetaminas, cannabinoides, opiceos, benzodiacepinas y metabolitos
de cocana. No se detect ninguna de las cinco drogas en la sangre
del Conductor 1.
Debido a que se indic en la solicitud la presencia de un frasco de pegamento de zapatero en el vehculo del paciente pero
no se detect ningn txico en anlisis de rutina, se realiz un
escrutinio en las muestras de sangre para detectar hidrocarburos,
sustancias aromticas, sustancias halogenadas y otros voltiles.
Dicho escrutinio de voltiles se lleva a cabo, asimismo, por medio
de Cromatografa de gases con doble columna y doble detector de
ionizacin en llama, con previa preparacin de las muestras por
medio de la tcnica de espacio de cabeza (Head-Space). El mtodo
cromatogrfico sirve para confirmar 25 sustancias, entre sustancias aromticas (benceno, tolueno, xilenos), halogenados (cloroformo y diclorometano), hidrocarburos (hexano, heptano e isooctano) y anestsicos voltiles (sevoflurano, isoflurano, desflurano,
etc.). Se escogieron tubos con sangre que, por no haberse destapado an, se mantenan cerrados al vaco. Ambas muestras de
sangre analizadas resultaron positivas por tolueno. Los resultados
se describen en el cuadro 1.
Discusin
La problemtica actual del abuso de tolueno en Costa Rica est
poco documentada, as que fue imposible encontrar datos recientes y confiables sobre su incidencia nacional.
Para el caso en cuestin, se puede afirmar que hubo ingreso
de tolueno al organismo del paciente. Adems, debido a que el
tolueno causa efectos nocivos sobre el snc, se concluye, a partir
de los resultados en sangre, que el paciente se encontraba bajo los
26
ciencia forense
27
ciencia forense
Omar A. et al. (2012), Reported Survival with Severe Mixed Acidosis and
Hyperlactemia After Toluene Poisoning, Saudi Journal of Anaesthesia, vol. 5, nm. 1, enero-marzo, pp. 173-175.
Shelly R. et al. (2000), Toluene Optic Neurotoxicity: Magnetic Resonance Imaging and Pathologic Features, Human Pathology, nm. 42,
pp.295-298.
Win-Shwe, Tin-Tin (2010), Neurotoxicity of Toluene, Toxicology Letters,
vol. 198, nm. 2, pp. 93-99.
ciencia forense
29
Espaa
Resumen
sin percutir, pero al repetir la operacin de percutirlos no se recuper adn de ninguna vaina percutida. Asimismo, las concentraciones de adn detectadas eran muy bajas, por lo que se trataba de muestras muy pobres en restos celulares. No se detect
inhibicin de la reaccin en cadena de la polimerasa (pcr, siglas
en ingls de Polymerase Chain Reaction) producida por la posible
presencia de metales pesados en las muestras.
Introduccin
El presente estudio se basa en un principio fundamental de la
ciencia forense, al que se recurrir para relacionar a un criminal
con el delito que ha cometido, el principio de intercambio o transferencia de Locard (en honor de Edmond Locard, criminalista francs fundador del Instituto de Criminalstica de la Universidad de
Lyon) (Saferstein, 1988).
Este principio fundamental sostiene que cualquier persona u
objeto que entra en la escena del crimen deja un rastro en la escena o en la vctima, y viceversa (se lo lleva consigo); en otras
palabras, cada contacto deja un rastro. En el mundo real significa
que si alguien pisa la escena del crimen, con toda seguridad dejar algo suyo ah, ya sea pelo, sudor, huellas, etc. Pero tambin
se llevar algo consigo cuando abandone la escena del crimen, ya
sea barro, olor, una fibra, etc. Con algunas de estas evidencias, los
forenses pueden demostrar con bastante certeza la estancia del
criminal en la escena del crimen.
El hecho de que algunos individuos tienen ms facilidad que
otros para dejar restos de adn simplemente con tocar objetos ha
sido documentado en estudios precedentes (Van Oorschot y Jones, 1997; Lowe et al., 2002). Esto se debe a que las clulas de la
piel se transfieren a travs del aceite y del sudor de las huellas
dactilares (Kisilevsky y Wickenheiser, 1999). Este hecho es muy
importante para la ciencia forense porque, en principio, permite
obtener perfiles de adn a partir de huellas dactilares posadas en
artefactos explosivos, vainas percutidas u otros indicios encontrados en la escena del crimen.
A pesar de este potencial, es muy difcil obtener adn de vainas
percutidas debido a los bajos niveles de adn en este tipo de indicios, que resulta de la degradacin del material gentico provoca32
ciencia forense
33
ciencia forense
Flujo de trabajo
Se organiz un flujo de trabajo destinado a reducir al mximo el
riesgo de contaminaciones, tanto en la fase de anlisis como en la
de recoleccin de indicios, con base en las medidas de efectividad
probada de acuerdo con la acreditacin que posee este laboratorio.
En resumen, se separaron fsicamente las reas de trabajo previas y posteriores a la pcr, se destin equipamiento exclusivo para
cada rea, se utilizaron equipos de flujo laminar para el montaje de
las reacciones y la purificacin del adn, y se us en todo momento
vestuario estril, guantes y pipetas a prueba de aerosoles.
En la fase de campo, se procedi a esterilizar la recmara del
arma empleada en cada uno de los disparos. Cada vez que se utilizaron, las pinzas que sirvieron para recoger las vainas fueron
impregnadas en alcohol y flameadas con un mechero bunsen.
Tanto en las extracciones, las cuantificaciones, las amplificaciones y las secuenciaciones se incluyeron controles positivos cargados con una muestra de adn conocido y controles negativos que
contenan todos los reactivos que se usaron para dicho proceso,
pero sin la muestra recogida.
Analisis de adn
Extraccin de adn
Tanto si se trata de adn nuclear (ubicado en el interior del ncleo
celular) como de adn mitocondrial (localizado en un orgnulo celular llamado mitocondria), el proceso de extraccin consiste en
la rotura de la doble membrana lipdica, ya sea citoplasmtica,
nuclear o mitocondrial, para posibilitar la liberacin del adn que
se halla en su interior.
En este estudio se emple un protocolo definido en la it-bi-20
(Servicio de Criminalstica de la Guardia Civil, 2009a), instruccin
tcnica que se aplica en general en este laboratorio y que fue aprobada por el Departamento de Calidad del Servicio de Criminalstica. sta comprende la extraccin de adn de muestras de sangre,
saliva y tejidos orgnicos como piel, vsceras, msculo, etc., con
un tampn de lisis para romper las posibles clulas (tris, edtadisdico, NaCl y sds), y extraccin orgnica con fenol/cloroformoisoamlico para la posterior cuantificacin, amplificacin y tipado
de marcadores genticos de adn nuclear.
ciencia forense
35
Cuantificacin de adn
Una vez que se ha conseguido extraer el adn, en mayor o menor
cantidad y ms o menos purificado, es necesario saber qu cantidad de ste se tiene antes de proceder a analizarlo.
Para el siguiente paso del anlisis (la amplificacin mediante
la pcr), es muy importante conocer esa informacin, ya que tanto
el defecto como el exceso de adn pueden dar lugar a resultados
negativos o a problemas en la interpretacin de resultados.
Las muestras forenses tienen, adems, la peculiaridad de que
los indicios son tan variables que nunca se sabe cul es la cantidad
de adn que se puede obtener. Dos manchas de sangre o, como en
este caso, la manipulacin de cartuchos de bala por una sola persona y en el mismo momento, que sugiere que contienen la misma cantidad de adn, pueden dar concentraciones muy diferentes
de ste. Por lo tanto, es indispensable cuantificar el adn antes de
la amplificacin.
Como ya se dijo, la cuantificacin se realiz con base en la
it-bi-57 (Servicio de Criminalstica de la Guardia Civil, 2009b), instruccin tcnica que tambin es de uso comn en el laboratorio
y que, a su vez, fue aprobada por el Departamento de Calidad del
Servicio de Criminalstica. Esta tcnica consiste en la cuantificacin de adn nuclear humano basada en la tcnica Real Time pcr,
para lo que se ocupan sondas Taqman mgb, y posterior deteccin
de fluorescencia mediante el equipo Real Time pcr 7500 Sequence
Detection Systems y los kits de cuantificacin Quantifiler Duo dna
Quantification Kit para adn total y cromosoma Y en una misma
reaccin. De este modo, es posible conocer de primera mano si el
adn a estudiar procede de un varn, o bien es una mezcla de adn
de varn y mujer (muy til en agresiones sexuales). Esta tcnica
permite la cuantificacin entre 50 nanogramos/microlitro y 0.023
nanogramos/microlitro, y es factible incrementar la sensibilidad
de la prueba para detectar cantidades de adn ms pequeas que
las indicadas.
Amplificacin de adn
Luego de conocer la cantidad de adn que se logra extraer, esta
fase del procedimiento analtico tiene como objetivo aumentar el
nmero de copias, en particular de aquellas regiones que son de
inters para su ulterior secuenciacin.
36
ciencia forense
37
ciencia forense
Cuadro 1.
Nombre/muestra
Varn/001/BI/1
Varn/001/BI/2
Varn/001/BI/3
Varn/001/BI/4
Varn/001/BI/5
Varn/001/BI/6
Varn/001/BI/7
Varn/001/BI/8
Varn/001/BI/9
Varn/001/BI/10
Varn/001/BI/11
Varn/001/BI/12
Varn/001/BI/13
Varn/001/BI/14
Varn/001/BI/15
Varn/001/BI/16
Varn/001/BI/17
Varn/001/BI/18
Varn/001/BI/19
Varn/001/BI/20
Varn/001/BI/21
Varn/001/BI/22
Varn/001/BI/23
Varn/001/BI/24
Varn/001/BI/25
cn_ext
adn
(ng/ul)
0.030
0.028
0.032
0.006
0.013
0.056
0.006
0.004
0.004
0.039
0.008
0.008
0.004
0.035
0.002
0.006
0.003
0.004
0.023
0.005
0.015
0.026
0.005
ct_ipc
29.67
29.58
29.71
29.56
29.55
29.70
29.79
29.79
29.89
29.72
29.68
30.11
29.74
29.72
29.66
29.67
29.93
29.63
30.05
29.80
29.80
29.79
29.83
29.83
29.79
29.35
Presencia
de inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Quanty male
(ng/ul)
0.043
0.027
0.035
0.006
0.017
0.026
0.005
0.048
0.001
0.006
0.002
0.001
0.006
0.001
0.004
0.015
0.021
0.005
Cuantificacin positiva: 10
Cuantificacin negativa: 15
Porcentaje de positivos: 40%
ciencia forense
39
Cuadro 2.
Nombre/muestra
Varn/002/BI/1
Varn/002/BI/2
Varn/002/BI/3
Varn/002/BI/4
Varn/002/BI/5
Varn/002/BI/6
Varn/002/BI/7
Varn/002/BI/8
Varn/002/BI/9
Varn/002/BI/10
Varn/002/BI/11
Varn/002/BI/12
Varn/002/BI/13
Varn/002/BI/14
Varn/002/BI/15
Varn/002/BI/16
Varn/002/BI/17
Varn/002/BI/18
Varn/002/BI/19
Varn/002/BI/20
Varn/002/BI/21
Varn/002/BI/22
Varn/002/BI/23
Varn/002/BI/24
Varn/002/BI/25
cn_ext
adn
(ng/ul)
0.046
0.012
0.035
0.007
0.026
0.028
0.007
0.003
0.004
0.034
0.014
0.006
0.011
0.005
0.010
0.036
0.020
0.030
0.012
0.019
0.003
ct_ipc
30.00
29.85
30.05
30.05
30.02
30.08
30.11
30.00
30.02
30.04
29.88
29.99
30.07
30.12
30.02
29.98
30.18
30.11
29.77
30.05
29.98
29.98
30.10
30.12
30.05
29.77
Presencia de
inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Cuantificacin positiva: 7
Cuantificacin negativa: 18
Porcentaje de positivos: 28%
40
ciencia forense
Quanty male
(ng/ul)
0.043
0.009
0.031
0.003
0.026
0.032
0.005
0.001
0.025
0.016
0.011
0.013
0.005
0.006
0.033
0.015
0.056
0.018
0.016
0.001
Cuadro 3.
Nombre/muestra
Mujer/001/BI/1
Mujer/001/BI/2
Mujer/001/BI/3
Mujer/001/BI/4
Mujer/001/BI/5
Mujer/001/BI/6
Mujer/001/BI/7
Mujer/001/BI/8
Mujer/001/BI/9
Mujer/001/BI/10
Mujer/001/BI/11
Mujer/001/BI/12
Mujer/001/BI/13
Mujer/001/BI/14
Mujer/001/BI/15
Mujer/001/BI/16
Mujer/001/BI/17
Mujer/001/BI/18
Mujer/001/BI/19
Mujer/001/BI/20
Mujer/001/BI/21
Mujer/001/BI/22
Mujer/001/BI/23
Mujer/001/BI/24
Mujer/001/BI/25
cn_ext
adn
(ng/ul)
0.071
0.021
0.026
0.029
0.013
0.023
0.013
0.028
0.011
0.016
0.001
0.033
0.026
0.006
0.006
0.016
0.012
0.012
0.044
0.002
0.003
ct_ipc
28.84
29.89
29.67
30.07
29.89
30.99
29.31
29.9
30.45
29.72
29.68
30.11
29.74
29.72
29.24
29.77
30.42
30.12
29.97
29.80
29.80
29.78
29.84
30.23
29.82
29.37
Presencia
de inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Quanty male
(ng/ul)
Cuantificacin positiva: 8
Cuantificacin negativa: 17
Porcentaje de positivos: 32%
ciencia forense
41
Cuadro 4.
Nombre/muestra
Mujer/002/BI/1
Mujer/002/BI/2
Mujer/002/BI/3
Mujer/002/BI/4
Mujer/002/BI/5
Mujer/002/BI/6
Mujer/002/BI/7
Mujer/002/BI/8
Mujer/002/BI/9
Mujer/002/BI/10
Mujer/002/BI/11
Mujer/002/BI/12
Mujer/002/BI/13
Mujer/002/BI/14
Mujer/002/BI/15
Mujer/002/BI/16
Mujer/002/BI/17
Mujer/002/BI/18
Mujer/002/BI/19
Mujer/002/BI/20
Mujer/002/BI/21
Mujer/002/BI/22
Mujer/002/BI/23
Mujer/002/BI/24
Mujer/002/BI/25
cn_ext
adn
(ng/ul)
0.061
0.028
0.074
0.065
0.045
0.011
0.028
0.002
0.073
0.004
0.014
0.024
0.036
0.011
0.043
0.001
0.039
0.006
0.001
0.028
0.021
0.012
0.016
0.016
0.003
ct_ipc
30.02
30.11
29.77
29.98
30.11
29.77
30.11
30.02
29.77
30.11
29.77
29.98
29.98
30.00
30.02
29.98
30.00
30.11
30.11
30.05
29.98
30.00
30.02
29.98
30.02
30.04
Presencia
de inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Cuantificacin positiva: 12
Cuantificacin negativa: 13
Porcentaje de positivos: 52%
42
ciencia forense
Quanty male
(ng/ul)
Cuadro 5.
Nombre/muestra
adn
ct_ipc
(ng/ul)
Varn/001/BI/1
Varn/001/BI/2
Varn/001/BI/3
Varn/001/BI/4
Varn/001/BI/5
Varn/001/BI/6
Varn/001/BI/7
Varn/001/BI/8
Varn/001/BI/9
Varn/001/BI/10
Varn/001/BI/11
Varn/001/BI/12
Varn/001/BI/13
Varn/001/BI/14
Varn/001/BI/15
Varn/001/BI/16
Varn/001/BI/17
Varn/001/BI/18
Varn/001/BI/19
Varn/001/BI/20
Varn/001/BI/21
Varn/001/BI/22
Varn/001/BI/23
Varn/001/BI/24
Varn/001/BI/25
cn_ext
0.002
0.012
29.75
29.89
29.83
29.79
29.72
29.78
29.77
29.96
29.85
30.25
30.00
29.95
29.93
29.99
29.94
29.98
29.84
29.75
29.91
29.91
29.58
30.11
30.06
30.05
30.03
29.95
Presencia
de inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Quanty male
(ng/ul)
0.003
0.013
Cuantificacin positiva: 0
Cuantificacin negativa: 25
Porcentaje de positivos:
0%
ciencia forense
43
Cuadro 6.
Nombre/muestra
Varn/002/BI/1
Varn/002/BI/2
Varn/002/BI/3
Varn/002/BI/4
Varn/002/BI/5
Varn/002/BI/6
Varn/002/BI/7
Varn/002/BI/8
Varn/002/BI/9
Varn/002/BI/10
Varn/002/BI/11
Varn/002/BI/12
Varn/002/BI/13
Varn/002/BI/14
Varn/002/BI/15
Varn/002/BI/16
Varn/002/BI/17
Varn/002/BI/18
Varn/002/BI/19
Varn/002/BI/19
Varn/002/BI/20
Varn/002/BI/21
Varn/002/BI/22
Varn/002/BI/23
Varn/002/BI/24
Varn/002/BI/25
cn_ext
adn
(ng/ul)
0.001
0.001
0.001
0.002
0.001
0.002
0.003
ct_ipc
30.00
29.98
29.87
29.85
29.73
29.88
29.88
30.10
30.02
30.02
29.93
29.96
29.94
29.74
29.82
29.77
29.76
29.79
29.81
29.81
30.01
29.95
29.95
29.73
29.71
29.77
29.72
Presencia de
inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Cuantificacin positiva:
0
Cuantificacin negativa: 25
Porcentaje de positivos:
0%
44
ciencia forense
Quanty male
(ng/ul)
0.001
Cuadro 7.
Nombre/muestra
adn
ct_ipc
(ng/ul)
Mujer/001/BI/1
Mujer/001/BI/2
Mujer/001/BI/3
Mujer/001/BI/4
Mujer/001/BI/5
Mujer/001/BI/6
Mujer/001/BI/7
Mujer/001/BI/8
Mujer/001/BI/9
Mujer/001/BI/10
Mujer/001/BI/11
Mujer/001/BI/12
Mujer/001/BI/13
Mujer/001/BI/14
Mujer/001/BI/15
Mujer/001/BI/16
Mujer/001/BI/17
Mujer/001/BI/18
Mujer/001/BI/19
Mujer/001/BI/20
Mujer/001/BI/21
Mujer/001/BI/22
Mujer/001/BI/23
Mujer/001/BI/24
Mujer/001/BI/25
cn_ext
0.001
0.001
0.002
0.000
0.001
0.002
0.001
29.56
29.95
29.85
29.79
29.72
29.95
29.98
30.01
30.02
30.18
29.97
29.95
29.98
29.98
30.01
30.07
29.90
29.97
29.95
29.99
30.00
30.12
30.10
30.12
29.97
29.99
Presencia
de inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Quanty male
(ng/ul)
Cuantificacin positiva:
0
Cuantificacin negativa: 25
Porcentaje de positivos:
0%
ciencia forense
45
Cuadro 8.
Nombre/muestra
adn
ct_ipc
(ng/ul)
Mujer/002/BI/1
Mujer/002/BI/2
Mujer/002/BI/3
Mujer/002/BI/4
Mujer/002/BI/5
Mujer/002/BI/6
Mujer/002/BI/7
Mujer/002/BI/8
Mujer/002/BI/9
Mujer/002/BI/10
Mujer/002/BI/11
Mujer/002/BI/12
Mujer/002/BI/13
Mujer/002/BI/14
Mujer/002/BI/15
Mujer/002/BI/16
Mujer/002/BI/17
Mujer/002/BI/18
Mujer/002/BI/19
Mujer/002/BI/19
Mujer/002/BI/20
Mujer/002/BI/21
Mujer/002/BI/22
Mujer/002/BI/23
Mujer/002/BI/24
Mujer/002/BI/25
cn_ext
0.001
0.001
0.004
0.001
0.002
0.011
0.002
0.002
0.001
0.001
29.97
30.09
29.83
29.81
29.92
29.93
30.04
30.11
30.25
30.10
30.00
29.94
29.99
29.96
29.95
29.89
29.82
29.94
30.00
30.10
30.18
29.97
30.12
29.86
29.97
29.81
29.88
Presencia
de inhibidores
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
no
Cuantificacin positiva:
0
Cuantificacin negativa: 25
Porcentaje de positivos:
0%
46
ciencia forense
Quanty male
(ng/ul)
Estudio de la inhibicin
El control interno para cada muestra de anlisis (ipc), tanto para
las muestras recogidas previas como posteriores al disparo, oscil entre los valores 28 y 31, como se muestra en cada uno de los
cuadros, por lo que se encuentran en el rango aceptable segn
la empresa fabricante de los reactivos y del aparato de medicin
(Applied Biosystems, 2008a y 2008b).
Deteccin de polimorfismos de adn
Se procedi a cargar en el secuenciador todas las muestras recogidas de los indicios, tanto las previas como las posteriores al disparo, aunque no en todas ellas se detect una concentracin mnima
de adn suficiente para la obtencin de perfiles genticos. Los resultados obtenidos son los siguientes:
Se identific la presencia de adn, con lo que se consigui
un perfil gentico vlido para el estudio forense, en todas
las muestras previas al disparo que tuvieron una cuantificacin positiva superiores a concentraciones de 0.023 nanogramos/microlitro.
No se obtuvo ningn perfil gentico, ni siquiera parcial, para
ninguna de las muestras recogidas posteriores al disparo.
Discusin
Cuantificacin del adn
Cuadro 9.
Varn 1
Varn 2
Mujer 1
Mujer 2
Varn 1
Varn 2
Mujer 1
Mujer 2
Slope
3.314
3.5
3.588
3.03
3.414
3.366
3.306
3.3
R2
0.984
0.997
0.99
0.99
0.994
0.988
0.998
0.997
ciencia forense
47
Al analizar las diferentes rectas estndar, las curvas de amplificacin y el informe de resultados se concluye lo siguiente (Applied
Biosystems, 2008a, 2008b y 2008c):
El Slope de todas las rectas se encuentra dentro del rango para considerar aceptable una pendiente (entre 3.0 y
3.6).
La R2 de todas las rectas fue superior a 0.98.
El ipc para cada muestra de anlisis no sobrepas el valor
31, que se considera como lmite.
Por lo tanto, los parmetros claves fijados por el fabricante
para determinar si la rt-pcr se llevaron a cabo de acuerdo con las
condiciones establecidas estuvieron dentro de los rangos aceptables. Esto indica que las concentraciones detectadas de cada una
de las muestras son las correctas.
En el primer ensayo, previo al disparo [Cuadros 1 a 4]
Salvo la Mujer 2, que cuantific 48% de los cartuchos manipulados, los dems casos calificaron positivo mucho menos de la mitad
de los cartuchos manipulados y la media entre las cuatro personas
fue de 34% de positivos. Adems, en todos los casos las concentraciones detectadas fueron muy bajas y muy cercanas al lmite de
deteccin del aparato.
Al comparar estos resultados con los de otros estudios, destaca
que aqu se hicieron manipulaciones muy breves del indicio (de
unos cinco segundos) con la finalidad de ajustarse lo ms posible a un caso real. Ello explica que se haya producido un menor
arrastre celular de la epidermis de las manos hacia los cartuchos
manipulados (idem).
Una posible solucin para ello que este laboratorio ya realiza de forma rutinaria es hisopar varios cartuchos por muestra.
De esta forma se arrastran las clulas de varios de stos y se concentra ms material celular en un mismo hisopo, con lo que se
detectan concentraciones de adn superiores, de las que se pueden
obtener polimorfismos de adn con ms facilidad.
Otro hecho significativo es la disparidad en los resultados de los
porcentajes de cuantificacin entre los individuos, que van de 48%
para la M2 a 24% para el V2. Esto quiz se explique porque
No todas las personas tienen la misma capacidad de regeneracin de las clulas de su epidermis, as que al mani48
ciencia forense
49
ciencia forense
51
De los indicios manipulados previos al disparo, se identificaron todos los perfiles genticos para las muestras en las que se
consiguieron cuantificaciones superiores al umbral de deteccin
del aparato.
En este trabajo se emple un kit nuevo de alta sensibilidad,
el ya citado ngm select de Applied Biosystems, que es distinto de
cualquiera de los utilizados en otros estudios referidos. Por este
motivo y por los expuestos en puntos anteriores, es difcil comparar los resultados que arrojan las diferentes investigaciones.
Nuevos retos
A la vista de los resultados, es preciso realizar un mayor nmero
de ensayos para tener datos suficientes que lleven a una conclusin fiable, dada la importancia de obtener perfiles genticos tiles para fines de investigacin criminal. Asimismo, aplicar otros
mtodos de amplificacin complementarios, como los de los kits
Minifiler o Powerplex para la amplificacin del adn celular, y la
utilizacin del adn mitocondrial (til para casos de adn degradado
o poca cantidad de muestra de partida, como tejidos en descomposicin, huesos o dientes).
Se considera importante efectuar ensayos para distintos tiempos de manipulacin de los indicios. De este modo se podr tener una idea de cmo varan las concentraciones de adn segn se
producen manipulaciones ms extensas en el tiempo, as como
el hisopado de varios cartuchos por un mismo hisopo, variando tambin el nmero de vainas y cartuchos por hisopo pasado,
y observar como cambian las concentraciones de material gentico en cada caso.
Es conveniente resaltar que este estudio constituye en s mismo el inicio para la creacin de una lnea de investigacin en el
mbito forense, relativa al uso de otros mtodos de recoleccin
de restos biolgicos de las muestras, como son las cintas adhesivas
forenses (Barash et al., 2010) u otros soportes, la tcnica de doble
hisopado (Sweet et al., 1997) y el descrito en este trabajo.
Por lo tanto, a mi entender, es indispensable aplicar de forma
consecuente los resultados obtenidos y compararlos con los experimentos que realizar en el futuro el Laboratorio de Criminalstica de la Guardia Civil.
52
ciencia forense
Conclusiones
Se detect presencia de adn en 34% de los cartuchos estudiados.
De los indicios con presencia de adn se obtuvieron los perfiles genticos correspondientes a los individuos que haban
manipulado la municin.
En las vainas percutidas no se identific presencia de adn.
No se detect inhibicin de la pcr por los metales pesados
tras la combustin.
Las muestras tratadas en este estudio se pueden considerar
como lmite debido a la poca cantidad de adn que contienen.
Referencias
Applied Biosystems (2008a), GeneScan id v 3.2 Anlisis Software, Users
manual, Foster City, Estados Unidos.
Applied Biosystems (2008b), Quantifiler Duo dna Quantification Users
Manual, nm. 4391294 Rev. A., Foster City, Estados Unidos.
Applied Biosystems (2008c), Utilizing the Quantifiler Duo dna Quantification Kit As a Guide to Efficient Forensic Evidence Sample Processing,
nm. 112AP05-01, Foster City, Estados Unidos.
Barash, M. et al. (2010), The Use of Adhesive Tape for Recovery of
dna from Crime Scene Items, Journal Forensic Science, nm. 55,
pp. 1058-1064.
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ciencia forense
53
54
ciencia forense
Espaa
herramienta muy til gracias a la demanda de las industrias farmacutica y forense. Entre las ventajas que presenta, destaca la
facilidad de la tcnica, su amplio rango de posibilidades de aplicacin y su carcter no destructivo que permite la recuperacin de
la muestra sin alterar (Jickells y Negrusz, 2008).
El efecto Raman debe su nombre al fsico hind Chandrasekhara Venkata Raman, quien descubri en 1928 que la longitud
de onda de una pequea fraccin de la radiacin dispersada por
determinadas molculas es diferente de la del haz incidente, as
como que los desplazamientos de la longitud de onda dependen de
la estructura qumica de las molculas. Por este descubrimiento y
su estudio gan el premio Nobel de Fsica en 1931 (Skoog, Holler
y Nieman, 2000). El fenmeno revelado por Raman se relaciona
con los cambios vibracionales cuantizados que se producen en la
absorcin infrarroja. Por ello, la diferencia de longitud de onda entre la radiacin visible incidente y la dispersada corresponde a las
longitudes de onda de la regin del infrarrojo medio. Por lo tanto,
el espectro de dispersin Raman y el espectro de absorcin infrarrojo suelen ser similares para una misma especie. No obstante,
las diferencias entre los grupos funcionales que son activos en
Raman y los que lo son en infrarrojo, hacen que ambas tcnicas
sean complementarias. La espectroscopia Raman, sin embargo,
muestra la ventaja de obtener espectros en disoluciones acuosas y
trabajar con cubetas de cuarzo o vidrio (Jickells y Negrusz, 2008;
Skoog, Holler y Nieman, 2000).
La espectroscopia Raman ha hecho numerosas aportaciones
para el anlisis de las drogas de abuso. Se ha aplicado con xito en
la identificacin de xtasis, cocana, barbitricos y benzodiazepinas, as como en el anlisis cuantitativo de drogas de abuso mezcladas con cafena, glucosa, manitol, lactosa, maltosa, polvo de
talco, harina y leche materna (Ali, Edwards y Scowen, 2011). Asimismo, se presenta como una tcnica ventajosa y eficaz a la hora
de proporcionar un anlisis no destructivo de muestras a granel
o microscpicas al no separar el analito de su sustrato. En ese
sentido, estudios vinculados con la deteccin e identificacin de
drogas de abuso en textiles han demostrado la capacidad de la espectroscopia Raman para superar las dificultades de las bandas de
espectros del sustrato (fibras textiles) y de la presencia de un fondo de fluorescencia para detectar con xito las drogas en cuestin
(Ali, Edwards y Scowen, 2011; Ali et al., 2008a). La contaminacin
por fondo de fluorescencia es una dificultad habitual en los espectros Raman, no slo respecto de la identificacin de drogas en
56
ciencia forense
fibras textiles (en particular las teidas) sino en los estudios realizados sobre uas con esmalte y sobre huellas dactilares reveladas
con humo de cianocrilato. Estas dificultades se superaron al discriminar la muestra con el microscopio confocal y al eliminar las
bandas de interferencia por sustraccin espectral (Ali, Edwards
y Scowen, 2011; Ali et al., 2008a y 2008b; Ng et al., 2009; Day et al.,
2004a y 2004b).
En la actualidad, adquiere creciente importancia la aplicacin
de la espectroscopia Raman en contextos externos al laboratorio,
como ocurre en el caso de los controles aeroportuarios y fronterizos. Con este objeto, es preciso disponer de los recursos adecuados
para una rpida deteccin y discriminacin de drogas de abuso
(Weyermann et al., 2011; Hargreaves et al., 2008). Un Raman porttil ha demostrado eficacia al momento de detectar drogas de abuso
en diferentes mezclas y contenedores sin necesidad de abrirlos
(Weyermann et al., 2011; Hargreaves et al., 2008; Olds et al., 2011),
y es la espectroscopia Raman compensada espacialmente (sors,
siglas en ingls de Spatially Offset Raman Spectroscopy) la tcnica
que mejores resultados ofrece para estos fines. La innovacin de
sors ha sido adaptar esta tcnica espectroscpica para conseguir
la recuperacin de espectros puros, emanados desde capas mucho ms profundas de lo que el Raman convencional es capaz de
analizar. Por lo tanto, se ha demostrado para la recuperacin de
muestras situadas detrs de capas opacas de materiales no absorbentes como polmeros, papel, vidrio, polvos, materiales turbios o
incluso biolgicos. Siempre que la capa no sea demasiado gruesa,
los fotones llegan a la sustancia interior (Olds et al., 2011).
Los resultados obtenidos con la espectroscopia Raman se optimizan al complementarse con otras tcnicas de anlisis de drogas
de abuso. As, en conjuncin con la cromatografa (hplc), resonancia magntica nuclear (rmn) y el infrarrojo (ir), es posible determinar propiedades biolgicas y fsicoqumicas in vitro de una serie
de derivados de mdma. En este estudio, la espectroscopia Raman
sirve para caracterizar pastillas de xtasis y puede identificar formas esteroisomricas como cis-mdnp y trans-mdnp, que presentan
seales a 1650 cm-1 y 1300 cm-1, respectivamente (Belhadj-Tahar
et al., 2010). La espectroscopia Raman se ha aplicado tambin junto con ensayos voltamtricos en la caracterizacin conformacional de mdma y mda, combinada con clculos de mecnica cuntica
(dft) (Milhazes et al., 2007).
En definitiva, la espectroscopia Raman ha logrado avances significativos en su aplicacin en los anlisis de drogas en los aos
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57
ciencia forense
59
ciencia forense
61
ciencia forense
63
1200
1000
(d ) 20 X
t.exp=4.0s
n exp=30
800
600
(c )
t.exp= 5.3s
n exp=2 2
400
(b)
200
t.exp=3.9s
n exp=30
t.exp=3.9s
n exp=30
(a)
02
000
ciencia forense
1400
1200
1000
800
(b)
20X
t.exp= 1.0s
n exp=3 0
600
400
200
(a)
t.exp=0.9s
n exp=133
02
000
ciencia forense
65
3000
(d)
2500
t.exp=7.2s
n exp=16
2000
(c)
1500
t.exp=7.2s
n exp=16
1000
(b)
t.exp=7.2s
n exp=16
500
(a)
0
0
2000
t.exp=7.2s
n exp=16
Al disponer de los espectros Raman de la cinta adhesiva Guardia Civil, el siguiente paso fue estudiar su utilidad para recoger
drogas de abuso. Se utiliz paracetamol de tres formas en este
estudio: en primer lugar, se espolvore en la superficie de la cinta
por su lado adhesivo y se analiz por el mismo en el espectrmetro Raman (grfica 3, espectro (b)); en segundo lugar, se recogi de
una mesa con la cinta adhesiva, se peg en un portamuestras y se
analiz por el lado del vidrio (grfica 3, espectro (c)); por ltimo,
se recolect de una mesa, se pleg la cinta adhesiva sobre s misma, se despleg y se analiz en forma directa (grfica 3, espectro
(d)).
El resultado obtenido fue muy bueno, y en la grfica se aprecia
con claridad que los espectros corresponden a la misma sustancia.
De esta manera se concluye que el anlisis que utiliza la espectroscopia Raman en drogas es eficaz y no se ve afectado por la cinta adhesiva. Tampoco interfiere el vidrio del portamuestras en la
identificacin. Se observa un buen resultado aunque la partcula
se impregne del adhesivo en el ensayo con la cinta plegada.
Sin embargo, el uso de esta cinta adhesiva conlleva un problema. El fondo adhesivo de color blanco dificulta la localizacin de
las partculas de la droga de abuso, ya que suelen ser cristalinas o
blancas. Por tal motivo, se propuso trabajar con una cinta adhesiva
66
ciencia forense
transparente, que favoreciera la inmediata localizacin de las partculas y con la que se redujera el tiempo total para practicar los
anlisis necesarios. Al final, se decidi trabajar con la cinta adhesiva transparente Fingerprint Lifting Tape, de laboratorios Sirchie
conocida en el mbito de la Polica Judicial. El uso principal de
esta cinta es la recoleccin de huellas dactilares y fibras textiles.
Estudio con cinta adhesiva transparente Fingerprint
Se obtuvo el espectro Raman de la cinta adhesiva transparente de
la misma forma que se hizo con la Guardia Civil, importante para
comprobar si el espectro de la droga de abuso se ve afectado por
la cinta. Se analiz tanto la parte adhesiva como la no adhesiva.
Parte adhesiva
Se observ al microscopio una zona lisa (figura 8) poblada de rugosidades (figura 9).
67
1200
1000
800
600
400
(b)
20X
t.exp=1.0s
n exp=50
200
(a)
t.exp=1.0s
n exp=100
2000
para conocer de modo concluyente la composicin de la cara adhesiva de la cinta transparente. La base de datos indic que es
Poly (2-octyl acrylate), con un match de 98.12 por ciento.
Parte no adhesiva
Se distingue una zona lisa (figura 10) cubierta de rugosidades parecidas a burbujas de aire (figura 11).
68
ciencia forense
1200
1000
800
(b)
50X
t.exp=1.0s
n exp=50
600
400
200
(a)
t.exp=1.0s
n exp=50
2000
69
1500
match=82,23%
1000
match=92,25%
match=92,51%
500
match=94,84%
(e)
20X
(d)
20X
t.exp=1.0s
n exp=100
t.exp=1.0s
n exp=100
(c)
20X
t.exp=1.0s
n exp=100
(b)
20X
t.exp=1.0s
n exp=100
(a)
2000
t.exp=24.0s
n exp=15
el espectro (e) posee el porcentaje de similitud ms bajo. No obstante que se identifican a la perfeccin los picos que corresponden a la herona, se nota que la cinta adhesiva afecta la morfologa
del espectro con ese pico tan intenso a unos 2940 cm-1. El resultado es bueno y permite la identificacin de la herona. Por ende, se
concluye que la presencia de la cinta no impide la identificacin
de la droga de abuso. Es de inters el espectro (e), ya que puede
suponer un nuevo modo de conservar la muestra y analizarla sin
alteracin ni contaminacin. El espectro tipo (d) es menos interesante, puesto que es similar al tipo (e) en el sentido de que primero el lser tiene que atravesar la cinta para incidir en la muestra,
y no se utilizar de ahora en adelante. Con los espectros (b) y (c)
los resultados son buenos.
Cocana HCl
En la grfica 7 se evidencia que el resultado de analizar directamente la cocana que est pegada en la cinta adhesiva es muy
70
ciencia forense
1500
1000
match=98,94%
(c)
10X
t.exp=1.0s
n exp=50
500
match=94,19%
(b)
50X
t.exp=1.0s
n exp=50
(a)
2000
t.exp=1.0s
n exp=50
71
3,4-mdma HCl
1200
match=75,61%
1000
20X
(d)
t.exp=1.0s
n exp=50
800
600
match=90,03%
400
match=94,12%
(c)
(b)
200
50X
t.exp=1.0s
n exp=50
10X
t.exp=1.0s
n exp=50
(a)
0
0
2000
t.exp=6.0s
n exp=50
Cafena
2200
2000
1800
match=90,82%
1600
(d)
10X
t.exp=1.0s
n exp=50
1400
1200
match=96,44%
1000
(c)
50X
t.exp=1.0s
n exp=50
800
600
match=95,16%
400
(b)
20X
t.exp=1.0s
n exp=50
200
0
(a)
2000
t.exp=1.0s
n exp=50
72
ciencia forense
match=94,27%
1600
(d)
20X
t.exp=1.0s
n exp=50
1400
1200
match=92,34%
1000
(c)
800
match=97,02%
600
10X
t.exp=1.0s
n exp=50
(b)
20X
t.exp=1.0s
n exp=50
400
200
0
(a)
2000
t.exp=3.0s
n exp=29
Sulfato de anfetamina
1200
match=90,90%
1000
(d)
50X
t.exp=1.0s
n exp=50
800
600
match=96,40%
(c)
50X
t.exp=1.0s
n exp=50
400
match=93,44%
(b)
200
10X
t.exp=1.0s
n exp=50
(a)
2000
t.exp=1.0s
n exp=50
ciencia forense
73
Se observa, de modo general, que el mejor mtodo de anlisis mediante espectroscopia Raman, empleando la cinta adhesiva
Fingerprint, es el que se lleva a cabo de manera directa de la droga
recogida con la cinta. Ello es lgico porque nada interfiere entre
el lser y la partcula de droga. Se obtuvieron asimismo resultados
muy buenos cuando se analiz la cinta pegada al portamuestras
de vidrio, puesto que el lser lo atraviesa e incide sobre la muestra. Cabe destacar que se observ experimentalmente que en este
caso igual que cuando las muestras estn introducidas en un
vial de vidrio (los patrones) y son analizadas por espectroscopia
Raman en estas condiciones se produjo una elevacin en el espectro Raman obtenido en la franja aproximada de los 200-600 cm1. Eso s, los picos del espectro de la droga de abuso permanecen
y sta sigue quedando muy bien identificada. Por tanto, el vidrio
usado produce este efecto sobre el espectro Raman en muchos
casos.
En cuanto a la cinta plegada sobre s misma, se apreci una
cierta influencia de la cinta en el espectro Raman de la droga de
abuso. No obstante, con un enfoque adecuado este efecto se reduce al mximo y se logran porcentajes de similitud muy altos
que pueden superar 90-95%. Se advierte con claridad que coincide
con la droga de abuso a estudiar. Adems, con el software omnic
es posible comparar los picos y la morfologa del espectro. Por
consiguiente, como se mostraba en las grficas anteriores, es factible identificar una droga de abuso contenida dentro de la cinta
adhesiva plegada. En la grfica 8, espectro (d), se logr mejorar la
seal hasta llegar a un match de 88.36% aumentando a un objetivo
de 50X.
Como consideraciones generales, hay que destacar la enorme
importancia del enfoque de la partcula de la droga de abuso. ste
es fundamental en el anlisis porque condiciona los resultados.
De hecho, un buen enfoque puede hacer que se obtengan mucho
mejores resultados al analizar con la cinta plegada que al estudiar directamente la partcula con un peor enfoque. En l influye
mucho el objetivo empleado en el microscopio (10X, 20X, 50X,
100X) y, por supuesto, el tamao de la partcula objeto de estudio.
Para las partculas muy pequeas (de pocas micras) es necesario
utilizar objetivos de ms aumentos, sobre todo en el caso de cinta
plegada sobre s misma. De modo general, la partcula debe cubrir
el cuadrado que se percibe con el microscopio, que marca la zona
donde incide el lser. En caso contrario, se tendr que recurrir a
un mayor aumento.
74
ciencia forense
De este modo, resulta que se puede proponer un procedimiento de anlisis de drogas de abuso mediante espectroscopia Raman.
Procedimiento de anlisis de drogas
de abuso mediante espectroscopia Raman
El proceso para llevar a cabo el anlisis de drogas de abuso a partir
de la espectroscopia Raman comprende los pasos siguientes:
1. Localizacin de los restos, objetos o zonas a muestrear en
busca de posibles partculas de drogas de abuso. Preparacin de la cinta adhesiva transparente Fingerprint Lifting
Tape nm. 144L Transparent. Para ello, se procede a cortar
unos 15 cm y a plegar unos 2 cm por los laterales.
2. Toma de la muestra o realizacin del muestreo con un
fragmento de cinta adhesiva. Al finalizar, se dobla la cinta
sobre s misma. De este modo se conserva la muestra. Se
sealiza en la cinta, si se visualizan, las partculas objeto
de anlisis. Se rotula para identificar la cinta como prueba
forense. Se transporta la cinta dentro de un sobre, tambin
rotulado con el nmero de identificacin y se enva al laboratorio segn protocolo. Es importante la vigilancia y
el cumplimiento de las observaciones sobre la cadena de
custodia.
3. Recepcin del sobre en el laboratorio qumico-forense.
4. Estudio del fragmento de cinta adhesiva (mediante un estereomicroscopio si fuera necesario) para reconocer visualmente las partculas de inters contenidas en la cinta. Si
se precisa la futura conservacin de la muestra dentro de
la cinta, se analiza plegada por espectroscopia Raman. En
caso contrario, se despega y se analiza de manera directa.
5. Preparacin del ensayo: se utiliza el lser de 532 nm a potencia de 10 mW; la apertura debe ser de 25 micrmetros
pinhole, el tiempo de exposicin, de 1.0 s, y el nmero de
exposiciones o acumulaciones, de 50. Para obtener los espectros, se enfoca la partcula con el objetivo de 10X, se
efecta el anlisis y se coteja con la biblioteca del equipo.
Si el resultado no es satisfactorio, se practican sucesivos
anlisis mejorando el enfoque. En caso de que se agoten
los objetivos sin obtener un buen resultado, se despliega la
cinta, si no se hizo antes. No se dan positivos con un match
inferior a 80% en drogas de abuso. Siempre se estudia
ciencia forense
75
76
ciencia forense
particula desc 3
t.exp=1.0s
n exp=50
1200
particula desc 2
1000
t.exp=1.0s
n exp=50
800
particula desc1
600
t.exp=1.0s
n exp=50
400
200
cinta adhesiva
t.exp=1.0s
n exp=100
0
0
2000
ciencia forense
77
En la grfica 13 se observa el espectro Raman obtenido de partculas tipo 1, en este caso de una partcula de azcar. Su bsqueda en librera result infructuosa porque el azcar no se haba introducido en
la base de datos. Como las partculas tienen un tamao considerable,
se ven a simple vista y su espectro tiene las bandas bien definidas.
2200
2000
1800
1600
1400
1200
10X
1000
part 1
t.exp=1.0 s
n exp=50
800
600
400
200
0
0
2000
ciencia forense
800
match=93,76%
600
50X
part 2
t.exp=1.0 s
n exp=50
400
200
t.exp=3.0 s
n exp=100
0
PENTOBARBITAL BASE
2000
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79
2000
1800
20X
1600
1400
match=96,34%
1200
part 3
t.exp=1.0 s
n exp=50
1000
800
600
400
t.exp=1.0 s
n exp=50
AMOBARBITAL
200
0
0
2000
match=95,29%
5000
part 4
t.exp=1.0 s
n exp=50
10X
4000
3000
2000
1000
0
0
t.exp=4.0 s
n exp=20
2000
80
ciencia forense
3500
part Fig 39
3000
t.exp=1.0s
n exp=50
2500
20X
part Fig 38
2000
t.exp=1.0s
n exp=50
1500
20X
1000
part Fig 37
500
part Fig 36
part Fig 35
t.exp=1.0s
n exp=50
t.exp=1.0s
n exp=50
2000
t.exp=1.0s
n exp=50
ciencia forense
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5000
match= 97,01%
part Fig 41
t.exp=1.0 s
n exp=50
4000
3000
2000
1000
TEBANA BASE
0
0
t.exp=1.0 s
n exp=100
2000
De este modo se prueba la utilidad de la cinta adhesiva transparente Fingerprint para recoger pequeas trazas de drogas de
abuso, que se puede doblar la propia cinta adhesiva por la mitad para inmovilizar dichas partculas en su interior, adems de
asegurar la conservacin de la muestra de un modo rpido, sencillo y barato, y que dicha cinta plegada se puede analizar por
espectroscopia Raman sin necesidad de desdoblarla o someterla
a tratamientos complejos, todo ello con resultados positivos en
la identificacin de la droga. En adicin, el anlisis instrumental
es rpido, no destructivo y no requiere preparacin o manipulacin adicional. En sntesis, puede suponer un nuevo mtodo
de muestreo rutinario para unidades operativas, con la ventaja de
ser rpido, barato, fiable y efectivo.
Conclusiones
Todos los ensayos practicados llevan a los resultados siguientes:
1. Las drogas de abuso ensayadas ofrecen un espectro Raman
caracterstico, capaz de diferenciar sustancias cuyas estructuras sean muy similares.
2. En los anlisis para la identificacin de drogas de abuso
por espectroscopia Raman no se aceptarn identificaciones
con un match inferior a 80% y siempre estar ligada a la
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comparacin de los espectros con los de un patrn. Es recomendable confrontar los resultados con los de otra tcnica
alternativa.
3. Es posible utilizar una cinta adhesiva para recoger pequeas muestras, incluso no visibles, de drogas de abuso, ya
que es un mtodo sencillo, barato, rpido y con garantas.
Podra suponer una nueva rutina de trabajo para aquellas
unidades encargadas de la recoleccin de muestras. Tambin podr extraerse la droga de abuso de la cinta para analizarla mediante otras tcnicas analticas.
4. La cinta adhesiva Guardia Civil podra emplearse para recoger muestras de drogas de abuso, aunque se aconseja no
hacerlo si se dispone de otra cinta adhesiva alternativa (incolora), sobre todo por la dificultad que entraa visualizar
las partculas de droga en un fondo blanco.
5. La cinta adhesiva transparente Fingerprint es til en la recoleccin de muestras de drogas que luego se vayan a analizar
por espectroscopia Raman, puesto que permite el anlisis
Raman con la cinta plegada sobre s misma, conteniendo
en su interior la muestra aislada del entorno, con lo que se
evitan contaminaciones.
6. Aquellas partculas de drogas de abuso que posean seales
Raman ms dbiles, ofrecern ms dificultades cuando la
partcula est embutida dentro de la cinta adhesiva, dado
que la seal de la cinta se notar ms. En estos casos es
deseable mejorar el enfoque.
7. Por ser rpido y sencillo, se propone un procedimiento de
anlisis de drogas de abuso mediante espectroscopia Raman.
Agradecimientos
Este estudio es fruto de un proyecto de investigacin realizado
en el Mster de Criminalstica de la Universidad de Alcal. Por lo
tanto, quiero dar las gracias a mis tutores por haberme orientado
y ayudado en la elaboracin del mismo. A Mara Lpez Lpez,
por su apoyo, y a los miembros del Laboratorio de Qumica y
Medio Ambiente del Servicio de Criminalstica de la Guardia Civil
(Secrim), por resolver cualquiera de mis dudas, y por ltimo, por
supuesto, al Instituto Universitario de Investigacin en Ciencias
Policiales (iuicp).
84
ciencia forense
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86
ciencia forense
Mxico
Introduccin
A lo largo de cien aos, las ciencias fsico-naturales proporcionaron a los creadores de la investigacin criminal los materiales
para los grandes cimientos sobre los que se asienta hoy la lucha
de alcance mundial contra el crimen en todos sus grados y
formas.
As, se tiene que al vigoroso desarrollo de la medicina forense,
que se verific a lo largo del siglo xix, contribuyeron, de forma
sustancial, la cada vez ms acusada intervencin del Estado en la
sociedad, con el consiguiente recurso al dictamen pericial del mdico (problemas laborales, policiales, forenses, etc.), y la metdica
aplicacin de la fsica, la qumica y la biologa a la resolucin de
los problemas que plantea la relacin entre la medicina y la ley.
Al estudiar algunos textos de medicina forense que datan desde principios del siglo xix hasta finales del xx, es posible comprobar que contienen, en su mayora, captulos relativos al examen
87
De esta manera da cumplimiento a lo estipulado en su magistral tratado que le vali el nombramiento de mdico de Luis XVIII,
en el sentido de que para afirmar que ha habido envenenamiento
es necesario comprobar la existencia del veneno, haciendo las experiencias qumicas que lo prueben de un modo convincente; es
decir, los juicios periciales solamente tienen valor si son resultado de su comprobacin cientfica. La criminalstica como bien
apunt Israel Castellanos en ninguna de sus ramas es arte adivinatorio, magia blanca, ni superchera, sino una disciplina cientfica nutrida, sostenida y vigorizada por todas las ramas del saber
humano.
Por su parte, incluyen interesantes captulos sobre envenenamientos Pedro Mata en su Tratado de medicina y ciruga legal
(1846), Ch. Vibert en su Prcis de mdecine lgale (1893), Cesare
Lombroso en sus Lezioni di medicina legale (1900), Victor Balthazard en su Manual de medicina legal (4 ed. en espaol, 1933), Jos
Antonio Gisbert Calabuig en su Medicina legal y toxicologa (1977),
Nerio Rojas en su Medicina legal (12 ed., 1979), Guillermo Uribe
Cualla y Camilo Uribe Gonzlez en su Medicina legal, toxicologa
y siquiatra forense (11 ed., 1981) y, por ltimo, Alfredo Achaval
en su Manual de medicina legal (3 ed., 1988), entre muchos auto88
ciencia forense
89
ciencia forense
la peritacin qumico-forense
91
la biologa y la investigacin cientfica de los delitos. Como resultado, la investigacin qumica ocupa un lugar preponderante en
las universidades, en los programas industriales y en los planes
de gobierno.
En el transcurso del siglo pasado prolifer la interpretacin
matemtica de los fenmenos qumicos. El punto de vista fsicoqumico penetr en las otras ramas de la qumica, aun en los dominios orgnico y biolgico.
Hoy, que los mtodos instrumentales han cobrado relevancia
en qumica analtica y en el estudio de las relaciones estructurales, se obtienen con rapidez informaciones que eran inaccesibles
con los mtodos tradicionales. Quiz se vislumbre cierta unificacin del conocimiento cientfico y afn de sntesis, pero, sobre todo, una extraordinaria conjuncin de ciencia pura y ciencia
aplicada.
Sin duda, toda investigacin cientfica fundamental es un servicio social de la mayor trascendencia. Aun los partidarios de la idea
de que el papel esencial de la ciencia es la consecucin del bienestar material de la sociedad, reconocen que las ciencias fundamentales son ms valiosas para ese fin que las ciencias aplicadas.
Slo habr progreso si se cultivan las investigaciones en las
ciencias fundamentales, al margen de si tienen o no utilidad inmediata. Tarde o temprano, todo descubrimiento o nocin verdadera tiene aplicaciones. La investigacin fundamental es la fuente
de los grandes descubrimientos, mientras las investigaciones aplicadas nicamente resuelven problemas limitados.
La aparicin de equipos de investigacin es un hecho que reviste particular importancia, ya que a menudo los conforman grupos de especialistas que representan no slo a las diversas ramas
de la qumica, sino a las matemticas, la biologa y la medicina.
As, los descubrimientos adquieren un carcter colectivo como
nunca antes; por ejemplo, la memoria en la que se anunci el
descubrimiento del einstenio y del fermio enumera los nombres
de los 16 cientficos que participaron en ste.
La investigacin slo puede desarrollarse si est en manos de
hombres de ciencia bien preparados; en el presente caso, de qumicos forenses profesionales de la investigacin criminalstica.
Dar recursos a los incompetentes es malgastar el dinero y engendrar una burocracia improductiva de mediocres envanecidos que
ocasionara un gran dao social.
En la actualidad, los qumicos y los bilogos forenses disponen
de poderosas herramientas algunas muy sofisticadas para obte92
ciencia forense
93
94
ciencia forense
ciencia forense
95
Los problemas de orden criminalstico que el perito tiene que resolver requieren de l cierta postura intelectual, caracterizada por
una actitud crtica que slo admite conclusiones cuando stas se
basan en la verificacin. El propio perito procurar establecer con
firmeza el procedimiento general que debe seguir, el orden de las
observaciones, experimentaciones y razonamientos. Una vez establecido ste, la ruta general sealar los procedimientos particulares o tcnicas (en su mayora de orden instrumental) que deber
aplicar para tal fin. En suma, el perito deber proceder con todo rigor cientfico, teniendo siempre presente que, como toda disciplina
fctica, el criterio de verdad de la criminalstica es la verificacin.
El perito qumico forense, al igual que los dems peritos de
otras especialidades, tiene el derecho a razonar y pensar libremente bajo su propia responsabilidad, pero a lo que no tiene derecho
es a equivocarse, pues si esto ocurre, el error judicial es seguro,
resultado, las ms de las veces, de su incompetencia tcnica, de su
inexperiencia, de su imprudencia y de su precipitacin, enemiga
mortal de la investigacin, puesto que sta requiere determinados
pasos y, cada uno, determinado tiempo. Omitir pasos y acortar
tiempos conduce, de manera ineludible, al error. Se debe tener
presente que el crimen impune no afecta a la seguridad jurdica,
mas s la vulnera en su esencia misma el castigo al inocente.
Para concluir, es cierto que la justicia recurre con frecuencia
a la prueba pericial qumica o toxicolgica, cuando considera que
semejante medida pueda llevarla al descubrimiento de la verdad.
Tal decisin, sin embargo, resulta beneficiosa si el perito procede,
en el curso de la peritacin con: ciencia, estricto rigor metdico,
conciencia y una permanente actitud crtica.
Pongo punto final a estos conceptos con la mencin de las que,
a mi juicio, son las tres condiciones incompatibles con la misin
del perito: el orgullo que ciega, la ignorancia que no hace dudar de
nada y la deshonestidad que envilece y degrada.
Bibliografa
Babini, Jos, Ciencia y tecnologa (Breve historia), Columba, Buenos Aires,
1967 (Coleccin Esquemas).
96
ciencia forense
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97
brasil
CUESTIONES RELACIONADAS
con LAS BASES DE DATOS DE adn1
Norma Sueli Bonaccorso
Principales cuestiones ticas
Principios ticos y sus directrices
99
A raz de estas preocupaciones, existen los esfuerzos de la Biotica4 y de los instrumentos emitidos con el propsito de inhibir
apropiaciones indebidas, como es el caso de la Declaracin Internacional sobre los Datos Genticos Humanos (unesco, 2003) y
de las Resoluciones nmero 196 (Ministrio da Sade-Conselho
Nacional de Sade, 1996) y nmero 340 (Ministrio da Sade-Conselho Nacional de Sade, 2004) en Brasil.
En palabras de Boccatto (2008, p. 24), varios hechos y documentos influyeron en el origen y desarrollo de la Biotica. El Cdigo de Nremberg, de 1947, fue el marco inicial para la discusin
sobre la tica en la investigacin que involucra seres humanos.
Este edicto se dio a causa de las atrocidades experimentadas durante la Segunda Guerra Mundial.
Varios deslices ticos ocurridos en la investigacin biomdica estadounidense fueron relatados por Belmont, quien en 1978,
para reforzar el principio de privacidad propuesto en la Declaracin de Helsinki (1954) sobre la tica mdica, incluy los principios de autonoma, beneficencia y justicia. En 1979 Beauchamp y
Childress agregaron el principio de no maleficencia. La discusin
de esos principios impuls el surgimiento de una corriente en la
Biotica denominada principialista.
Para Beiguelman (1997, p. 525), con base en el principio de
privacidad,5 la informacin gentica y los resultados de los extaca el poder conferido por el conocimiento del adn de las personas, pueblos
y naciones, esto es, el adn-poder, y destaca que en ese escenario, solamente
la rigurosa observancia del compromiso tico celebrado entre el Estado, los
investigadores y la sociedad ofrece formas de reglamentar el acceso al adnpoder.
4
Benatar (2003, p. 25) alerta que un enfoque de suma importancia en el
contexto del debate biotico moderno ha sido el rediseo de las relaciones mdico-paciente. El fortalecimiento de los vulnerables se est consiguiendo con el
nfasis en los derechos humanos y en el respeto por la dignidad individual. No
obstante, continan los desequilibrios de poder en el contexto de los cuidados
de la salud. En gran medida esto se relaciona con una atencin insuficiente a la
justicia social. Tales desequilibrios de poder, sumados al desarrollo de nuevas
formas de poder, por ejemplo, la nueva biotecnologa gentica, aumentan el
espectro de la creciente injusticia social.
5
Segn Romeu Casabona (1996, p. 84), deben distinguirse los conceptos de
privacidad e intimidad. La intimidad consiste en aquellas manifestaciones de la
personalidad individual (o familiar), cuyo conocimiento o desarrollo se reservan a su titular o a las personas sobre las cuales ejerce alguna forma de control
cuando estn involucrados terceros (particulares o poderes pblicos). La privacidad constituye un conjunto ms amplio, ms universal, que la intimidad. Son
100
ciencia forense
101
fuera de esa vulnerabilidad, los seres humanos son afectados por vulnerabilidades circunstanciales debidas a la pobreza, la falta de acceso a la educacin,
la enfermedad y la discriminacin. El desposeimiento impide a las personas
atender sus necesidades y realizar sus deseos, predisponindolas a infortunios
adicionales. La privacin restringe las capacidades y la libertad, por lo que se
requieren acciones teraputicas especficas que alivien el desposeimiento. La
biotica tiene una particular preocupacin al respecto de esa vulnerabilidad
secundaria y circunstancial causada por los riesgos que enfrentan las personas susceptibles de ser perjudicadas por la explotacin provocada por acciones
biomdicas.
ciencia forense
Declaracin Internacional
sobre los Datos Genticos Humanos
Entre los instrumentos puestos en marcha para el establecimiento de los principios fundamentales de la Biotica, en cuanto a la
proteccin de los datos genticos, destacan las disposiciones presentes en la Declaracin Internacional sobre los Datos Genticos
Humanos y en las Resoluciones nmeros 196 y 340 del Consejo
Nacional de Salud brasileo.
Es necesario recordar que, conforme seala Romeo Malanda
(2006, p. 96), la Declaracin Universal sobre el Genoma Humano y los Derechos Humanos (unesco, 1997) puede ser vista como
una fuente de soluciones a todos los desafos tecnolgicos, ticos
o jurdicos, surgidos con los avances en el campo de la gentica
humana que se produjeron en la segunda mitad del siglo xx, los
cuales no encontraron respuesta en la Declaracin Universal de
Derechos Humanos, formulada en una poca en la que la ingeniera gentica era algo menos que una utopa.
La Declaracin Internacional sobre los Datos Genticos Humanos, a su vez, fue aprobada por unanimidad y aclamacin el da 16
de octubre de 2003, durante la 32 sesin de la Conferencia General de la unesco, con lo que se extendi la Declaracin Universal
sobre el Genoma Humano y los Derechos Humanos8 de 1997.
El objetivo de la nueva Declaracin fue garantizar el respeto a
la dignidad humana9 y la proteccin de los derechos humanos y
De acuerdo con Sguin (2001, p. 70), el Consejo Europeo estudia la propuesta de incluir la intangibilidad de la herencia gentica en la lista de los derechos humanos. En ese sentido, Ropsigliosi (2007, p. 10) alerta que todas las
constituciones del mundo defienden los derechos humanos, ya que stos son
la columna vertebral que permite la existencia de una sociedad. Sin embargo,
la biotecnologa es una de las principales fuentes de violacin de estos derechos
hoy en da y, en consecuencia, debe ser vigilada por la constitucin.
9
Costa (2008, p. 37) sostiene que
8
actualmente ya no se concibe ms el Estado de Derecho como una construccin formal; es necesario que el Estado respete la dignidad humana y los derechos fundamentales para que pueda ser considerado un Estado de Derecho en
sentido material. El Estado de Derecho se legitima por la subordinacin a la ley
y, al mismo tiempo, a determinados valores fundamentales, consubstanciados
en la dignidad humana. La dignidad como fundamento jurdico no se resume,
empero, en traducir y expresar las elecciones polticas, desempeando tambin una funcin importante en lo que se refiere a los derechos fundamentales.
La dignidad humana es el fundamento filosfico y jurdico de los derechos
fundamentales y se expresa jurdicamente, en gran medida, por medio de los
derechos fundamentales, como resalta Celso Lafer: El valor de la persona huciencia forense
103
de las libertades fundamentales en materia de recoleccin, tratamiento, uso y conservacin de datos genticos humanos, de conformidad con los imperativos de igualdad, justicia y solidaridad.
Tambin tiene el propsito de definir los principios que debern orientar a los Estados en la formulacin de sus legislaciones
y sus polticas sobre estas materias.10 Por eso, viene acompaada
de una resolucin de aplicacin que compromete a los Estados a
adoptar todas las medidas apropiadas para promover los principios enunciados en ella y promover su aplicacin, y por lo tanto,
cuenta con el apoyo del Comit Internacional de Biotica de la
unesco (cib) y del Comit Intergubernamental de Biotica (cigb).
En lo que concierne al presente artculo, son dignas de ser
destacadas y comentadas las siguientes disposiciones de esa Declaracin:
Artculo 1: Objetivos y alcance [...]
(c) Las disposiciones de la presente Declaracin se aplicarn a la
recoleccin, el tratamiento, la utilizacin y la conservacin de datos
genticos, datos protemicos humanos y muestras biolgicas, excepto
cuando se trate de la investigacin, el descubrimiento y el enjuiciamiento de delitos penales o de pruebas de determinacin de parentesco, que
estarn sujetos a la legislacin interna que sea compatible con el derecho
internacional relativo a los derechos humanos [nfasis de la autora].
Cabe subrayar que tal dispositivo, de forma inteligente, demuestra respeto y celo por las directrices legislativas penales internas, al mismo tiempo que seala ya los lmites de lege ferenda,
como es el caso de Brasil, respecto de la creacin de bases de datos
criminales de adn.
mana como el origen del orden de la vida en sociedad encuentra su expresin
jurdica en los derechos fundamentales del hombre.
104
ciencia forense
el tratamiento de datos sensibles solamente se podr dar bajo hiptesis excepcionales previstas con carcter restrictivo por la propia ley y que se relacionan
con los motivos de inters pblico, y as tambin mediante disposicin legal o
autorizacin de la Comisin Nacional de Proteccin de Datos o, en el caso de
datos referentes a la salud y la vida sexual, incluidos los datos genticos, el permiso para su tratamiento se limita a la hiptesis comprobada de su necesidad
para efectos de medicina preventiva, diagnstico mdico, prestacin de cuidados o tratamientos mdicos o de gestin de servicios de salud, y a partir de que
esos datos sean tratados por un profesional de salud u otra persona sujeta al
sigilo o secreto profesional, habiendo sido tal tratamiento de datos notificado
a la Comisin Nacional de Proteccin de Datos, y a partir de que incluso se
garanticen medidas de seguridad de la informacin.
ciencia forense
105
identificacin directa de la persona y garanticen la proteccin fsica e informtica de los datos amparados, y eviten cualquier riesgo
de divulgacin ilcita.12
Los datos del inciso xi, desde la perspectiva de un banco de datos criminales genticos, deben ser aquellos pertenecientes a las
personas sospechosas de cometer ilcitos que donaron material biolgico y mostraron perfiles determinados, pero que al confrontarse con otros perfiles no coincidieron. Sus datos irreversiblemente
disociados pueden permanecer en la base slo para fines estadsticos o para servir como padrn de comparacin con el propsito de mejorar el funcionamiento del sistema informtico, de ser
necesario.
Artculo 5: Finalidades
Los datos genticos humanos y los datos protemicos humanos podrn ser recolectados, tratados, utilizados y conservados solamente
con los fines siguientes: [...]
(iii) medicina forense y procedimientos civiles o penales u otras actuaciones legales, teniendo en cuenta las disposiciones del prrafo c)
del Artculo 1 [nfasis de la autora].
Esta disposicin delimita la investigacin genmica y establece parmetros para la creacin de bancos de datos criminales de
adn relativos a su funcin.
Artculo 6: Procedimientos
[...]
(d) Por imperativo tico, deber facilitarse informacin clara, objetiva, suficiente y apropiada a la persona cuyo consentimiento previo,
libre, informado y expreso se desee obtener. Adems de proporcionar otros pormenores necesarios esa informacin deber especificar
la finalidad con que se van a obtener datos genticos humanos y
datos protemicos humanos a partir de muestras biolgicas y se van
a utilizar y conservar estos datos. De ser preciso, en esa informacin
deberan describirse tambin los riesgos y consecuencias. Debera
indicarse que la persona interesada puede revocar su consentimienDe acuerdo con Mora Snchez (2001, p. 273), algunos autores europeos,
estudiosos del Derecho pblico, pregonan la existencia de un nuevo derecho
fundamental en el mbito de los archivos informatizados de datos personales,
que se denominara libertad informtica o derecho de autodeterminacin informativa. En ese mismo sentido, Nicols Jimnez (2006, p. 85) dice que [...] se trata
de datos personales....
12
106
ciencia forense
to sin sufrir presiones sin que ello deba suponerle ningn tipo de
perjuicio o sancin.
Tal disposicin se destac aqu porque se vincula con el prrafo a del artculo 9 que se tratar ms adelante.
Artculo 8: Consentimiento
(a) Para recolectar datos genticos humanos, datos protemicos humanos o muestras biolgicas, sea o no invasivo13 el procedimiento
utilizado, y para su ulterior tratamiento, utilizacin y conservacin,
ya sean pblicas o privadas las instituciones que se ocupen de ello,
debera obtenerse el consentimiento previo, libre, informado y expreso de la persona interesada, sin tratar de influir en su decisin
mediante incentivos econmicos u otros beneficios personales. Slo
debera imponer lmites a este principio del consentimiento por razones
poderosas el derecho interno compatible con el derecho internacional relativo a los derechos humanos [nfasis de la autora].
Igual que las disposiciones del prrafo c del artculo 1 y III del
artculo 5, ese precepto establece parmetros para la creacin de
bases de datos criminales de adn.
Artculo 9: Revocacin del consentimiento
(a) Cuando se recolecten datos genticos humanos, datos protemiDe acuerdo con Queijo (2003, pp. 244-246),
13
hay pruebas en el proceso penal que, para su produccin, exigen la intervencin corporal del acusado. Como define ngel Gil Hernndez, la intervencin
corporal es la realizacin de actos de investigacin u obtencin de pruebas en
el cuerpo del propio acusado. Para la produccin de las pruebas mencionadas, adems del nemo tenetur se detegere, intervienen otros valores que tambin
constituyen derechos fundamentales: el derecho a la libertad, a la intimidad, a
la dignidad humana y a la intangibilidad corporal. Las pruebas que implican la
intervencin corporal del acusado pueden ser invasivas o no invasivas. Se consideran invasivas las intervenciones corporales que presuponen la penetracin
del organismo humano, por instrumentos o sustancias, en cavidades naturales
o no naturales. Entre las pruebas invasivas se pueden enumerar diversas pericias como exmenes de sangre en general, el examen ginecolgico y la identificacin dental e, incluso, la endoscopa y el examen rectal, que se emplean con
mucha frecuencia en bsquedas personales. La bsqueda personal, tambin denominada revista, se puede realizar por medio de intervenciones corporales invasivas o no invasivas. Las pruebas no invasivas incluyen otros tantos peritajes,
como los exmenes de materia fecal, los exmenes de adn realizados a partir de
cabellos o vello corporal; las identificaciones dactiloscpicas, de impresiones de
pies, uas y palmar, as como la radiografa empleada en bsquedas personales.
107
ciencia forense
Sobre este dispositivo, cabe mencionar su generalidad al referirse a los datos genticos. Es verdad que algunos tipos de investigacin genmica podran generar datos cuya divulgacin representara un riesgo significativo a la salud o al orden pblico, o aun a la
seguridad nacional. No obstante, el riesgo causado por el acceso a
la informacin generada por el perfil gentico destinado a la identificacin criminal, por lo que se sabe hasta ahora, es nulo.
Para minimizar los perjuicios que la restriccin al acceso a los
datos genticos del acusado pudiera implicar para la amplia defensa
y la contradiccin, se puede sugerir que sus datos genticos sean
irreversiblemente disociados, aunque no se demuestre su inocencia.
Resoluciones del Consejo Nacional de Salud
La Resolucin nmero 196 del cns, del 10 de octubre de 1996, establece las directrices y normas que reglamentan la investigacin
ciencia forense
109
ciencia forense
trmino de autorizacin para que se haga, con propsitos judiciales, el cruzamiento de datos genticos obtenidos del material
del donante con otros datos almacenados. Esa medida, dados los
alcances de sus exigencias, defiende los derechos humanos.
V- Trmino de Consentimiento Libre y Esclarecido (tcle):
V.1- El tcle debe ser elaborado de acuerdo con lo dispuesto en el captulo IV de la Resolucin del cns nm. 196/96, con nfasis especial
en los siguientes artculos: [...]
f) informacin con respecto a las medidas de proteccin de datos individuales, resultados de exmenes y tests, as como del prontuario, que
solamente ser puesto a disposicin de los investigadores involucrados y bajo ninguna circunstancia a terceros (aseguradoras, empleadores, supervisores jerrquicos, etctera) [nfasis de la autora].
111
fin. Esta necesidad surge principalmente del ejercicio de la contradiccin y de la amplia defensa, por los mismos motivos que ya
se abordaron con anterioridad.
Como corolario de esos principios y con la reforma introducida
por la Ley nmero 11.690/08 en el artculo 159 del Cdigo de Proceso Penal (cpp), es posible nombrar asistentes tcnicos (art. 159,
3, del cpp), que tambin podrn examinar los materiales remanentes del peritaje (art. 159, 6, del cpp), extendiendo el ejercicio
de contradiccin15 y reforzando la necesidad de almacenamiento
de material.16,17
Otros preceptos que corroboran esa necesidad son los includos en el artculo 170 del cpp, relacionados con la necesidad de
guardia de material para un nuevo peritaje eventual, y la institucin de la revisin criminal.
Segn Queijo (1998, p. 9), la revisin criminal (art. 621, inc.
III, del cpp) se presenta directamente vinculada al error judicial, lo
que denota su enorme importancia. Subraya la autora que el error,
en la revisin, no se refiere fundamentalmente a una falla proSegn Gomes Filho (2001, p. 41),
15
En un segundo momento de participacin activa propiamente dicha, la contradiccin engloba un amplio y complejo conjunto de prerrogativas, poderes
y facultades utilizados por las partes, los cuales convergen para obtener un
resultado favorable por medio del proceso. De entre ellos, destacan sobre todo
las actividades relacionadas con la prueba de los hechos que fundamentan las
pretensiones de las partes, pues son stas las que se refieren a los mismos hechos y son ms aptas para demostrarlos en el proceso; por eso mismo, tambin
son las partes las que poseen los mejores elementos para responder y analizar
las pruebas presentadas por el adversario, posibilitando al juzgador una visin
ms completa (y ms crtica) de la realidad.
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113
De acuerdo con el Consejo Nacional de Investigacin estadounidense (nrc, por sus siglas en ingls) (1992, p. 163), las consideraciones ticas relativas al uso de la tecnologa de adn en la ciencia forense terminan por anteponerse a una serie de cuestiones
sociales y legales que incluyen derechos reales y procesales de las
personas, as como los costos y beneficios globales no financieros
que resultan de la aplicacin de esa tecnologa en los procesos.
En este campo cabe subrayar una propuesta de justificacin
en el campo de la Biotica. Segn Feldhaus (2003, p. 174), Richard
Hare llama pendiente resbaladiza a la objecin que se suscita muy
a menudo cuando se pretende la introduccin o el cambio de una
determinada teora o comportamiento; es el proceso mediante,
una vez admitido cierto comportamiento, queda facilitada la progresin para otro comportamiento, alineado con el primero, pero
menos admisible.
Richard Hare sostiene que no estar sujeto a objecin es muy
importante para cualquier concepcin tica o biotica en funcin
del uso frecuente que se hace de ella contra los bioeticistas. De
esa manera, la demostracin de que dicha nocin no est sometida a ese tipo de crtica se convierte un medio de defensa de esta
misma, pues la pendiente resbaladiza es una objecin a la capacidad de la propia teora de conseguir determinar el mbito en el
cual no es moralmente correcta (Feldhaus, 2003, p. 174).
En la presentacin de un estudio sobre problemas bioticos
relacionados con la formacin de una base de datos de adn para
la identificacin humana, Moreira y Guimares Neto (2003, p. I)
afirman que la pendiente en este tipo de base de datos puede ser
refutada por el hecho de que la informacin gentica revelada
carece de significacin social y, por lo tanto, de potencial discriminatorio del individuo, ms all de la comparacin de muestras.
Sin embargo, en la actualidad ya se aventura la hiptesis de
que en el futuro los alelos del perfil gentico derivados del anlisis de regiones de adn no codificante podran revelar las caractersticas fenotpicas del individuo. Como advierte Fidalgo (2006,
p. 119), la nica seguridad que se tiene es que, si se descubre un
marcador gentico que pueda informar algo adems de la simple
identificacin del individuo, ste dejar de ser utilizado.19 La autora agrega que, aunque se centre apenas en los aspectos positivos
Es lo que dice el artculo III.2 de la Resolucin del Consejo de la Unin
Europea (2001/C 187/01) del 25 de junio de 2001, relativa al intercambio de
resultados de anlisis de adn (cue, 2001).
19
114
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El consentimiento informado
El consentimiento informado, como seala Patro Neves (2003,
p.488), en su expresin angloamericana, o consentimiento esclarecido, consonante con una propuesta de reformulacin de la expresin original por parte de una Europa latina, o simplemente
consentimiento,23 designa la anuencia explcita a una propuesta de
En ese sentido tambin Mora Snchez (2001, p. 118).
Ibidem, p. 277.
22
Artculo 18.1. Se garantiza el derecho al honor, a la intimidad personal y
familiar y a la propia imagen. Disponible en: http://www.der.uva.es/constitucional/verdugo/18.html. Consulta: 15 de julio de 2011.
23
En palabras de Patro Neves (2003, p. 488),
20
21
115
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117
1.
2.
3.
4.
5.
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29
El preso tiene derecho a ser informado del examen de adn (art. 5, inc. LXIII,
de la cr), sindole facultado rehusarse a proporcionar el material, porque su
integridad fsica y moral es inviolable en la Ley Mayor (art. 5, inc. XLIX, de la
cr). Sin mencionar el derecho a la preservacin del propio cuerpo, del Nuevo
Cdigo Civil (art. 13 del cc). El Estado no puede, a su vez, obtener material
gentico sin el consentimiento de la persona humana, ni la ley podra prever situacin en que la investigacin criminal se sobrepondra a los referidos valores
constitucionales inherentes a la dignidad del hombre, porque stos presentan
una mayor importancia de orden axiolgico que los derechos en la Constitucin de la Repblica.
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En trminos jurdicos, la asignacin del trmino de recoleccin por el acusado garantiza de manera formal que la prueba resultante a partir de su material biolgico fue obtenida por medios
lcitos,31 pudiendo as disponer los elementos colocados a disposicin del juicio para la formacin de la libre conviccin sobre la
autora del crimen perpetrado.
Por lo tanto, la Resolucin ssp/sp 194/99, que establece normas
para la colecta y examen de materiales biolgicos para identificacin humana en el estado de So Paulo, prev en su artculo 6
que en toda toma de material biolgico de personas vivas, sospechosas, vctimas o parientes consanguneos de primer grado y de
involucrados en crmenes se estipule un trmino de recoleccin.
En respuesta a la criminalidad, hay consenso popular en favor
de la posible realizacin obligatoria del examen, con base en el
no es fcil, empero, alcanzar el punto de equilibrio. Por un lado, es necesario
proveer al Estado de poderes suficientes para enfrentar la criminalidad, creciente, violenta, organizada; por el otro, el ciudadano debe tener garantizada
su tranquilidad, su intimidad, su imagen y, principalmente, ser dotado de remedios eficaces para hacer frente a los excesos y abusos de los rganos oficiales. No se puede, en nombre de la seguridad social, comprender una garanta
absoluta de privacidad, del sigilo, en el proceso penal, pero tampoco se puede
concebir, en honor al principio de la verdad real, que la bsqueda incontrolada
y desmedida de la prueba pueda, sin motivos ponderables y sin observancia de
un criterio de proporcionalidad, ofender sin necesidad al investigado o acusado en sus derechos fundamentales y en su derecho a que la prueba producida
contra l sea obtenida por medios lcitos. [...] Sin embargo, va tomando forma
entre nosotros la aceptacin de la teora de la proporcionalidad, con objeto de
evitar la aplicacin demasiado rgida del inc. LVI del art. 5 cuando la ofensa
a determinada prohibicin constitucional se hace para la proteccin del valor
mayor tambin garantizado por la Constitucin.
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esta actuacin del Estado, a travs del Derecho penal, exige, adems de la ultima ratio, la atencin a las formalidades previstas en la ley y la observancia de
los derechos fundamentales, derivados de la dignidad humana, por tratarse del
instrumento ms violento que existe en el mbito social, porque, en general,
establece restricciones a la libertad, que deben ser soportadas como ltima y
grave consecuencia por el individuo o grupo social.
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a raz de la concepcin humanitaria de la pena, el preso no debe sufrir restricciones mayores a aquellas previstas en la ley y, aun as, la pena debe ser ejecutada en los lmites de la sentencia. Es decir, que el preso, pese a tener libertad
restringida debido a la condena contina siendo sujeto de derechos y no puede
ser privado de las garantas constitucionales previstas para los ciudadanos, con
clara excepcin de aqullas cuya supresin sea consecuencia de la prctica del
delito. (Clemente, 2008, p. 304).
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ISSN 20072708
Ao 3, nm.1
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de toxicologa del laboratorio
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M. J. Caldeira y A. Cardoso
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