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UNIVERSIDAD NACIONAL MICAELA BASTIDAS DE APURMAC

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y


ZOOTECNIA

PROYECTO DE TESIS

DISENTERA POR CONSUMO DE AGUA CONTAMINADA CON


COLIFORMES TOTALES Y TERMOTOLERANTES EN EL DISTRITO DE
TAMBURCO
PRESENTADO POR:
MIGUEL ARROYO RODRGUEZ
ASESOR:
DR. NILTON CSAR GMEZ URVIOLA
ABANCAY, PER
2015

NDICE

I.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA........................................................................3


1.1. DESCRIPCIN Y FORMULACIN DEL PROBLEMA.......................................................3
1.1.1. Descripcin del problema.................................................................................3
1.1.2. Formulacin del problema................................................................................5
1.2. JUSTIFICACIN E IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIN............................................5
1.3. OBJETIVOS................................................................................................................6
1.3.1. Objetivo general................................................................................................6
1.3.2. Objetivos especficos........................................................................................6

II. MARCO REFERENCIAL...............................................................................................7


2.1. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIN....................................................................7
2.2.MARCOTERICO...........................................................................................................12
2.2.1. El agua.............................................................................................................12
2.2.2. Parmetros bacteriolgicos.............................................................................13
2.2.3. Enterobacterias................................................................................................14
2.2.4. Coliformes.......................................................................................................15
2.2.5.diarrea aguda19
2.3.Marcoconceptual.....34
3.2.Variables......39
3.2.1. Operacionalizacin de variables.39
IV.

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN.............40

4.1. TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIN...........................................................................41


4.1.1. Tipo de investigacin......................................................................................41
4.1.2. Nivel de la investigacin.................................................................................41
4.2. POBLACIN.............................................................................................................42
4.2.1. Caractersticas y delimitacin.........................................................................43
4.2.2. Ubicacin espacio temporal.........................................................................44
4.3. MUESTRA Y TCNICA DE MUESTREO......................................................................45
4.4. DESCRIPCIN DE LA EXPERIMENTACIN.................................................................46
4.5. TCNICA E INSTRUMENTOS DE RECOLECCIN DE DATOS........................................47
2

V. ADMINISTRACIN DEL PROYECTO......................................................................48


5.1. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES.............................................................................49
5.2. RECURSOS INSTITUCIONALES, HUMANOS Y FINANCIEROS......................................49
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.........................................................................50
VII. ANEXOS......................................................................................................................54
I.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. Descripcin y formulacin del problema


1.1.1. Descripcin del problema
Segn datos de la FAO, hasta el ao 2007 aproximadamente 1 100 millones de seres
humanos en el mundo no tenan acceso al agua potable de calidad y en cantidad adecuada
para sus necesidades diarias y ms de 2 600 millones de personas no contaban con
instalaciones de saneamiento adecuadas. Adems, reportaron que aproximadamente 30 000
personas mueren por enfermedades asociadas al agua (OMS, 1998; UNESCO, 2008).
El inadecuado tratamiento del agua de consumo humano que permite la presencia de
coliformes termotolerantes y totales, constituyen uno de las principales causas de las
diarreas agudas en la poblacin infantil. Se calcula que esta enfermedad ocasiona 3.2
millones de defunciones anuales en el mundo (Allen, 1996). En un estudio realizado por la
organizacin Panamericana de la Salud en 1984, se determin que aproximadamente
75% de los sistemas de aguas locales y municipales en Amrica Latina estaban mal
desinfectados o carecan de sistemas de desinfeccin (Balcells, 1999). La Organizacin
Mundial de la Salud (OMS), tambin informa que el 80% de enfermedades infecciosas
microbiolgicas gastrointestinales y una tercera parte de defunciones causadas por estas se
deben al uso y consumo de agua insalubre. El rea ms afectada es la rural, ya que es donde
se concentran las poblaciones en extrema pobreza, analfabetas y que no cuentan con
servicios de agua potable y desage (Gadma, 2012). Adems de lo mencionado se pueden
aadir otros factores de riesgo que contribuyen a la presentacin de diarreas, como son el
3

mal uso de las letrinas, la falta de una cultura de buenas prcticas de higiene, inadecuado
manejo de basuras y excretas, entre otros. Lo anterior se refuerza con la evaluacin de la
OMS segn la cual el 90% de las infecciones intestinales agudas se deben a la ingesta de
agua de mala calidad y al inadecuado saneamiento bsico (Salvador y Guzman, 2009). Es
importante sealar que 5.5 millones de personas se enferman de infecciones
intestinales cada ao en el Per. La gran mayora de estos padecimientos se debe a
infecciones con bacterias fecales como la Escherichia coli, Campylobacter jejuni,
Yersinia

enterocolitica

Clostridium

difficile

(Conagua,

2010).

Entonces,

considerando que los coliformes totales y termotolerantes se pueden emplear

para

evaluar la calidad higinica y sanitaria del agua (Allen, 1996) y que el distrito de
Tamburco es deficiente en el abastecimiento de agua para consumo humano y no posee un
sistema de control de la calidad y sanitario, nos hacemos la siguiente interrogante:
Existe presencia de coliformes totales y termotolerantes en el agua de consumo humano y
esto ocasiona disenteras en el distrito de Tamburco?
I.2 Justificacin de la investigacin

Los pases en vas de desarrollo como es el caso del Per, enfrentan cotidianamente los
efectos de problemas relacionados con la salud pblica, los cuales ameritan integrar para
su solucin la participacin multidisciplinaria de diversos profesionales. Segn las
estadsticas que el MINSA maneja se han elaborado programas de salud (PAI, CRED,
PANFAR, PANTBC, etc.) con la finalidad de prevenir y controlar las enfermedades en las
poblaciones ms vulnerables, principalmente la infantil. El gasto que afronta el estado
peruano para controlar las enfermedades de curso gastroentrico es elevado y requiere que
se planteen estrategias para poder controlar su expansin. Sin embargo, la informacin
tcnico cientfica es insuficiente para que se puedan tomar decisiones oportunas y
adecuadas a cada regin o comunidad, sobre temas sanitarios, lo que nos conduce a
priorizar la realizacin de investigaciones en lo que concierne a las enfermedades
4

diarreicas agudas, dada su alta frecuencia e impacto econmico. Cabe indicar que las
enfermedades diarreicas agudas (EDA) mundialmente causan un promedio 4.6 millones de
muertes infantiles anuales, de los cuales el 70% ocurre por deshidratacin, complicacin
ms frecuente y grave de la enfermedad (MINSA, 2014). En todo caso existen varias
razones que justifican para que desde una ptica del saneamiento ambiental se realicen
investigaciones respecto a la contaminacin del agua y su relacin con la presentacin de
enfermedades.

1.2. OBJETIVOS
1.3.1. Objetivo general
Determinar la prevalencia de disenteras debido a la contaminacin del agua por
coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurmac, 2016.
1.3.1. Objetivos especficos

Determinar el cloro residual en el agua potable en cada sistema de abastecimiento en el


distrito de Tamburco, Apurmac, 2016.

Cuantificar los coliformes totales y termotolerantes presentes en el agua de consumo


humano en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurmac, 2016.

Determinar el nmero de casos de disenteras ocasionadas por contaminacin del agua


con coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay,
Apurmac, 2016.

II. MARCO REFERENCIAL


2.1 Antecedentes de la investigacin
Vilca (1997), en los estudios realizados en agua de consumo humano en el distrito de
Carmen Alto. San Juan Bautista, Santiago de Pischa y Acosvinchos, del total de 56
muestras procesadas, se encontraron microorganismos indicadores de contaminacin
fecal en un 37.5% (periodo secano) y 45.8% en (periodo lluvioso), los cuales mostraron
valores superiores a los recomendados por la OMS. Mientras que en los distritos de
Vinchos, Soccos, Ocros, Quinua y Chiara del total de muestras analizadas se reportaron
microorganismos indicadores de contaminacin fecal en un 55% en (periodo secano) y
67.5% (periodo lluvioso), los cuales mostraron valores superiores a los recomendados por
la OMS; en los distritos de Acocro, Tambillo y San Jos de Ticcllas se encontraron la
mayor carga microbiana en un 75% en (periodo secano), y 85.7% en (periodo lluvioso)
donde mostraron valores superiores a los recomendados por la OMS.

Botero (2004), en la ciudad de Huanta, encontr en la red de agua potable un promedio de


61 UFC/ml de microorganismos mesfilos heterotrficos viables y prcticamente ausencia
total tanto de coliformes totales y termotolerantes. En cambio, en la red de piletas
pblicas y en la red de distribucin del asentamiento humano Accoscca, hall un promedio
de microorganismos mesfilos hetertrofos viables de 49 x 102 y 22 x 103 UFC/100 ml,
respectivamente; el promedio para coliformes totales fue de 16 x 102 y 70 x 102
UFC/100 ml, respectivamente; y el promedio para coliformes termotolerantes fue del 1xl02
y 27 x 102 UFC/100 ml, respectivamente. La cantidad de microorganismos en los tres
sistemas

de

distribucin de agua se eleva entre los meses de agosto a noviembre,

disminuyendo en temporadas de lluvia; la disminucin podra deberse a un proceso de


dilucin de las fuentes con agua perclorada.
Allen (1996), observ que el 92.4% del total de muestras tomadas en el Valle de Mariquina,
presenta coliformes totales en lmites superiores a 1.8 bact/100 ml. Adems el 59.2% del
total de muestras evidenci presencia de coliformes fecales sobre 1.8 bact/100 ml y el
58.6% presencia de E. coli. Tambin se puede observar que tanto la Comuna de Mariquina
como la de Mfil presentan similares porcentajes de muestras positivas a CT. Al analizar
los CF y presencia de E. coli, Mariquina present una mayor cantidad de muestras positivas
en ambos parmetros, en comparacin con Mfil.
Cruz (2006), menciona que el 100 % de las muestras de agua del distrito de Pichari
analizadas presentaron valores respecto al nmero de Bacterias Mesfilas Hetertrofas
Viables, superiores a lo permisible (500 UFC/ml), en un rango de 698 000 a 13 000
UFC/ml; nmero de coliformes totales, superiores a lo permisible (0 UFC/100 ml), en un
rango de 545 000 UFC a 10 000 UFC/100 ml; nmero de coliformes fecales, superiores a
lo permisible (0 UFC/100 ml), en un rango de 553 000 a 10 000 UFC/100 ml y valores
para Enterococos, superiores a lo permisible (0 UFC/100 ml), en un rango de 680 000 a
10 000 UFC/100ml.

Por

lo

que

se concluye que no existe ningn sistema de

purificacin del agua de consumo humano.


7

UNAN (2012), recogi 63 muestras de agua de pozos ubicados en 14 comunidades, se


encontr que el 91.3% no son aptas para consumo humano segn las normas CAPRE para
los parmetros microbiolgicos. Basndose en los estndares del laboratorio de
microbiologa de agua de la UNAN-Len (anlisis completo), resultaron que el 97% no son
aptas para el consumo humano. Las comunidades que presentaron un mayor un nmero de
UFC de Coliformes totales y fecales fueron: Pintora 1, Monte Redondo 1, 2, y 3. Es decir
son las fuentes de agua que presentan mayor nivel de contaminacin microbiolgica. El
tipo de suelo que se ha encontrado en el sector noreste, arenoso o franco arenoso, es
altamente permeable por lo que podra ser un factor de riesgo para la contaminacin de los
acuferos de todas aquellas sustancias solubles en agua.
Torres (2010), refiere que los resultados muestran que el agua en estudio no es apta para
consumo humano debido a que en los distintos puntos y meses de muestreo se encontr
presencia de coliformes totales en un 100% y E. coli en un 86.6%, lo cual seala que estos
indicadores se encuentran en una proporcin mayor a lo establecido segn la normatividad.
Algunos de los microorganismos identificados son Citrobacter sp, Enterobacter sp,
Klebsiella sp, Escherichia coli y otros como Hafnia sp., Arizona sp. y Serratia sp., que
igualmente causan enfermedades.
Garcia (2011), aplic una encuesta para conocer las caractersticas socio demogrficas,
conocimientos y prcticas. Demostr que el 45% de personas no conoce sobre el concepto
del agua segura. Revela que las enfermedades causadas por la insalubridad del agua son:
diarrea (42%), clera (31%) y dengue (52%). El 30% si trata el agua y el 70% no
practica ningn mtodo de purificacin.
Gonzales (2010), muestra el nmero ms probable de coliformes totales y fecales del agua
en los tanques de los edificios sector 5 de la Urb. El Per. Se observ en el primer muestreo
la presencia de coliformes totales en el agua de los tanques I, III, IV, V (16 NMP/ml), cifra
que excede el valor de referencia de la OMS. De igual manera se observ la presencia de
coliformes fecales fuera de lo establecido en todas las muestras.
8

Chiluiza (2015), escribi sobre la presencia de coliformes fecales en el agua de consumo


humano y su relacin con enfermedades diarreicas agudas en los hogares de la Parroquia de
Pasa del Cantn Ambato en el mes de diciembre de 2014. Se realiz la recoleccin de
datos, mediante encuestas a 100 hogares de la Parroquia Pasa, distribuidos
proporcionalmente de acuerdo a sus 10 comunidades. Se tom en cuenta a 111 habitantes,
analizando la forma de captacin y uso del agua que llega a sus hogares, adems se indag
si presentaron episodios de enfermedad diarreica aguda, en el lapso de 6 meses de estudio,
de igual forma se tom 87 muestras de agua de cada uno de los hogares investigados, as
como 50 muestras de heces referidos a casos de EDA positivos.
Franklin (2014), tom 30 muestras de agua de casas al azar, analiz el agua utilizando el
mtodo de filtracin por membrana, teniendo como resultado que el agua de la parroquia
contiene altos ndices de coliformes y no cumple con la norma tcnica. Se aplicaron
encuestas a los estudiantes de la escuela Nicols Martnez, para determinar que las
enfermedades diarreicas agudas son producidas por el consumo del agua o por otros
factores, teniendo como resultado que el 90% de los estudiantes presentan diarreas por la
ingesta del agua y un 10% por otros factores.

2.2.

MARCO TERICO

2.2.1. El agua
Es un elemento natural indispensable para el desarrollo de la vida y de todas las actividades
del ser humano. En nuestro planeta cubre el 75% de la superficie, pero toda esta cantidad de
agua no se encuentra en condiciones aptas para el consumo humano. El 97.5% es agua
salada, el 2.5% es agua dulce que se encuentra en lagos, ros arroyos, vertientes, embalses,
esta mnima proporcin es la que podemos utilizar con ms facilidad (Van Pelt, 2010).
9

Agua potable
Se llama agua potable al agua dulce que tras ser sometida a un proceso de potabilizacin se
convierte en agua apta para el consumo humano, pudiendo consumirla sin ningn tipo de
restricciones, debiendo pasar primero por un control de calidad y aprobando las rigurosas
normas establecidas a nivel nacional e internacional, Para

asegurar

an

ms

la

potabilidad del agua, se le agrega cloro que elimina el exceso de bacterias y lo que es
muy importante,su desarrollo en el recorrido hasta las viviendas (Emapa, 2011).
Calidad del agua
El concepto de calidad del agua, encierra un conjunto de caractersticas fsicas, qumicas y
biolgicas que hacen que el agua sea apropiada para el consumo humano y se relaciona con
los procesos de abastecimiento, disponibilidad y sistemas de purificacin aplicados
(Emapa, 2011).
Parmetros que determinan la calidad del agua
Existen gran cantidad de parmetros que son de utilidad para medir el grado de
contaminacin y calidad del agua, y son categorizados dentro de los siguientes grupos:
caractersticas fsicas, qumicas, biolgicas y radiolgicas.
Cloro residual
El cloro es el agente ms utilizado en el mundo como desinfectante en el agua de consumo
humano, debido principalmente a:

Su carcter fuertemente oxidante

patgenos (en especial bacterias) y numerosos causantes de malos olores


Su ms que comprobada inocuidad a las concentraciones utilizadas.
La facilidad de controlar y comprobar unos niveles adecuados.

responsable

de la destruccin de los agentes

La cloracin del agua para suministro y residual sirve principalmente para destruir o
desactivar los microorganismos causantes de enfermedades. Una segunda ventaja
10

principalmente en el tratamiento de agua de bebida, reside en la mejora general de su


calidad, como consecuencia de la reaccin del cloro con el amoniaco, hierro, manganeso,
sulfuros y algunas sustancias orgnicas. Por ello empezar la determinacin de cloro
inmediatamente despus de tomar la muestra, evitando el exceso de luz o agitacin evita el
registro de datos falsos (Emapa, 2012).
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) establece un valor gua mximo de cloro libre
de 5 mg por litro, y afirma explcitamente que se trata de un valor conservador.
2.2.2. Parmetros bacteriolgicos
La bacteria Escherichia coli y el grupo coliforme en su conjunto, son los organismos ms
comunes utilizados como indicadores de la contaminacin fecal. Las bacterias coliformes
son microorganismos de forma cilndrica, capaces de fermentar la glucosa y la lactosa.
Otros organismos utilizados como indicadores de contaminacin fecal son los estreptococos
fecales y los Clostridium (Emapa, 2011).
Estos ltimos son anaerobios, formadores de esporas; estas son formas resistentes de
las bacterias capaces de sobrevivir largo tiempo. El anlisis del agua se realiza con el
mtodo de los tubos mltiples, o filtracin por membrana y se expresa en trminos de el
nmero ms probable (ndice NMP) en 100 ml de agua. Las aguas con un NMP inferior a
1, son potables (INEN, 2011).
Contaminacin del agua
El crecimiento de la poblacin a nivel mundial y el aumento del uso del agua para
diferentes actividades, ha incrementado los niveles de contaminacin. Esta contaminacin
est relacionada con los vertidos de origen domstico e industrial a los cuerpos de agua
(CYTED, 2012). Segn

la

OMS

(2010), el

agua est contaminada cuando su

composicin se haya alterado de modo que no rena las condiciones necesarias para ser
utilizada beneficiosamente en el consumo del hombre y de los animales. La contaminacin
del agua, es la presencia de cualquier agente fsico, qumico o biolgico, como tambin de
11

agentes productores de enfermedades como bacterias, virus, hongos, quistes de parsitos,


amebas. El principal riesgo de contaminacin del agua en la red de distribucin es debido a
la contaminacin por heces por infiltraciones. Normalmente el aumento de las bacterias se
debe a la ausencia de desinfectante residual en los valores de concentracin adecuados. Las
tuberas tienen sedimentos en el fondo que provocarn y favorecern el crecimiento de
microorganismos.
La contaminacin bacteriana se refiere a la presencia de Unidades Formadoras de Colonias
(UFC), de bacterias indicadoras de contaminacin de origen fecal. Estos organismos
formados en el agua pueden producir enfermedades en el cuerpo humano. Entre ellos se
incluyen bacterias como el coliforme fecal (Van pelt, 2010).
2.2.3. Enterobacterias
Las enterobacterias son un vasto grupo heterogneo de bacilos Gram negativos cuyo hbitat
natural es el intestino de humanos y animales (Murray, 2006). Esta familia incluye muchos
gneros como Escherichia, Shiguella, Salmonella, Enterobacter, Klebsiella, Serratia,
Proteus y otros. Las enterobacterias son microorganismos aerobios, fermentan una amplia
variedad de carbohidratos, poseen una estructura antignica compleja y producen varias
toxinas y otros factores de virulencia. Son el grupo ms comn de bacilos Gram negativos
cultivado en el laboratorio clnico y se encuentran entre las bacterias patgenas ms
comunes. La taxonoma de las entero bactericeas es compleja, comprenden 20 a 25
especies. Dentro de este grupo se encuentran los denominados Coliformes (Murray, 2006).
La familia enterobacteriaceae son bacilos Gram negativos dotados de movilidad

por

flagelos pertricos carentes de motilidad; crecen sobre peptona o medios con extractos de
carne sin adicin de cloruro de sodio (Na Cl) ni otros suplementos; crecen bien en agar Mac
Conkey, en condiciones aerobias y anaerobias (son anaerobios facultativos), fermentan la
glucosa en vez de oxidarla y con frecuencia producen gas; son catalasa positivos; oxidasa
negativos y reducen el nitrato a nitrito (Murray, 2006).
12

Estructura antignica
Las enterobacterias poseen una compleja estructura antignica. Se han clasificado ms de
150 diferentes antgenos somticos O (lipopolisacridos) termoestables, ms de 100
antgenos K (capsulares) termolbiles, y ms de 50 antgenos H (flagelares) (Murray,
2006). Los antgenos O son la parte ms externa de la pared lipopolisacarida de la clula y
constan de unidades repetidas de polisacaridos. Algunos polisacridos O contienen azcares
nicos. Aunque cada gnero de enterobacterias se asocia con grupos especficos O, un solo
microrganismo puede ser portador de varios antgenos O. Los antgenos K son antgenos O
externos sobre algunas, pero no todas, las enterobacterias. Algunos son polisacridos,
incluso los antgenos K de la E. coli; otros son protenas. Los antgenos K pueden interferir
con la aglutinacin por antisuero O, y a veces se asocian con la virulencia (Murray, 2006).
Los antgenos H se localizan sobre los flagelos y se desnaturalizan o retiran mediante calor
o alcohol. En las variedades de bacterias dotadas de motilidad se les puede conservar
mediante tratamiento con formalina. Estos antgenos H son una funcin de la secuencia de
aminocidos en la protena flagelar (flagelina). La mayor parte de las bacterias gram
negativas poseen lipopolisacridos complejos en su pared celular. Estas sustancias,
endotoxinas, muestran varios efectos fisiopatolgicos. Muchas bacterias entricas gram
negativas tambin producen exotoxinas de importancia clnica (Murray, 2006).
Bacilos entricos
Los coliformes son bacterias que tiene forma de bastoncillos, que no forman esporas,
y son Gram negativos aerobias y anaerobias facultativas, su caracterstica principal es que
fermenta la lactosa con formacin de gases al cabo de 48 horas a una temperatura de 35C a
37C, donde los coliformes fecales se diferencian de estas por ser termo tolerantes y
resistentes a temperaturas de 44C a 46C. Los coliformes, son pequeos, tienen forma de
bastoncillos (0.5 um por 3 um), no forman esporas, pueden ser mviles y formar cadenas
(Murray, 2006).

13

2.2.5. Coliformes
La clasificacin taxonmica de los coliformes es la siguiente:
Reino: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gamma proteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Gneros:
Escherichia
Klebsiella
Enterobacter
Citrobacter

Coliformes totales
Estas bacterias se definen como el grupo de organismos coliformes que pueden fermentar
la lactosa entre 44 y 45 C, comprende especies del gnero Escherichia y en menos grado,
especies de los gneros Proteus, Klebsiela, Enterobacter y Citrobacter. Los coliformes
fecales son microorganismos con una estructura parecida a la de una bacteria comn que se
llama Escherichia coli y se transmiten por medio de los excrementos. La Escherichia es
una bacteria que se encuentra normalmente en la flora intestinal del hombre y en el de
otros animales de sangre caliente. Hay diversas cepas de Escherichia; algunos no causan
dao en condiciones normales y otros pueden incluso ocasionar la muerte (OMS, 1996).
La prueba ms relevante utilizada para la identificacin del grupo Coliformes, es la
hidrlisis de la lactosa. El rompimiento de este disacrido es catalizado por la enzima B D
- Galactosidasa. Ambos monosacridos (la galactosa despus es transformada en glucosa
14

por reacciones bioqumicas) posteriormente son metabolizados a travs del ciclo glicoltico
y ciclo del citrato. Los productos metablicos de estos ciclos son cidos y/o CO2. Para la
determinacin de la B - Galactosidasa se utilizan medios

cromgenos tales como

chromocult (Manafi, 1998).


Coliformes fecales
Los coliformes fecales tambin denominados coliformes termotolerantes, llamados as
porque soportan temperaturas hasta de 45C, comprenden un grupo muy reducido de
microorganismos los cuales son indicadores de calidad, ya que son de origen fecal (Hayes,
1993). En su mayora estn representados por el microrganismo E. coli pero se pueden
encontrar, entre otros menos frecuentes, Citrobacter freundii y Klebsiella pneumoniae estos
ltimos hacen parte de los coliformes termotolerantes, pero su origen se asocia
normalmente con la vegetacin y solo ocasionalmente aparecen en el intestino (Hayes,
1993).
Los coliformes fecales integran el grupo de los coliformes totales, pero se diferencian de
los dems microorganismos que hacen parte de este grupo, en que son indol positivo, su
rango de temperatura ptima de crecimiento es muy amplio (hasta 45C) y son mejores
indicadores de higiene en alimentos y en aguas, la presencia de estos indica presencia de
contaminacin fecal de origen humano o animal, ya que las heces contienen dichos
microorganismos, presentes en la flora intestinal y de ellos entre un 90% y un 100% son E.
coli mientras que en aguas residuales y muestras de agua contaminadas este porcentaje
disminuye hasta un 59% (Gomez, 1999).
Distribucin de los coliformes
Las cepas de coliformes totales y fecales se encuentran en el suelo, alimentos, agua, polvo y
principalmente en el tracto intestinal del hombre y animales de sangre caliente. Estos
organismos se transmiten por contacto con el agua y alimentos contaminados y falta de
higiene (OPS, 1987).
15

Escherichia coli
Originalmente llamada Bacterium comune, fue aislada por primera vez en 1985 a partir de
heces de nios; son bacilos estrechos de 1.1 a 1.5 m de dimetro y de 2 a 6 m de
longitud, se encuentran solos o en parejas, Gram negativos, mviles por flagelos pertricos
o inmviles, anoxignicos facultativos, poseen metabolismo respiratorio y fermentativo.
Perteneciente a la familia Enterobariaceae, son coliformes capaces de producir indol a
partir de triptfano, en 21 +/- 3 horas a 44 +/- 0.5C. Tambin poseen la enzima B
-Galactosidasa, que reacciona positivamente en el ensayo del rojo de metilo y pueden
descarboxilar el cido L glutmico, pero no son capaces de utilizar citrato como nica
fuente de carbono o de crecer en un caldo con cianuro de potasio. E. coli es la nica especie
dentro de las Enterobacterias que presenta la enzima B D Glucoronidasa, que degrada el
sustrato 4 metilumberiferil D - glucornico (MUG), formando 4 metilumbeliferona, este producto tiene la propiedad de emitir fluorescencia azul/verde
cuando se ilumina con luz ultravioleta. La multitud de cepas capaces de producir
enfermedad se encuentra reflejada en la diversidad antignica de esta especie. Se ha
descrito un gran nmero de antgenos O, H y K, los cuales se utilizan para clasificar a las
cepas con fines epidemiolgicos. Algunos sero grupos antignicos especficos se asocian a
mayor virulencia (Murray, 2006).
Patogenia e inmunidad
Adems de los factores generales que comparten todos los miembros de la familia
Enterobacteriaceae, las cepas de Escherichia responsables de enfermedades como las IAU y
las gastroenteritis poseen unos factores de virulencia especializados. Estas dos categoras
generales son las adhesinas y las exotoxinas.
Adhesinas
E. coli es capaz de permanecer en el aparato urinario o en el aparato digestivo como
consecuencia de su capacidad de adherencia a las clulas en estas localizaciones para evitar
16

ser eliminado por el efecto de arrastre de la orina que se expulsa con la miccin o por la
motilidad intestinal. Las cepas de E. coli poseen numerosas adhesinas muy especializadas.
Estas incluyen factores antgenos del factor de colonizacin (CFA/I, CFA/II, CFA/lll),
fimbrias de adherencia y agregacin (AAF/I, AAF/III), pili que forman haces (Bfp),
intimina, pili P (que tambin se une a los antgenos del grupo sanguneo P), protena Ipa
(antgeno del plsmido de invasin) y fimbrias Dr (que se unen a los antgenos del grupo
sanguneo (Murray, 2006).
Exotoxinas
E. coli produce tambin un espectro variado de exotoxinas. Estas incluyen las toxinas Shiga
(Stx-1, Stx-2), las toxinas termoestables (STa, STb) y las toxinas termolbiles (LT-I y LTII). Por otra parte, las hemolisinas (HlyA) se consideran importantes en la patogenia de la
enfermedad producida por E. coli uropatgeno (Murray, 2006).
Las cepas de E. coli que provocan gastroenteritis se subdividen en los cinco principales
grupos siguientes: E. coli enteropatgena (ECEP), E. coli enterotoxgena (ECET), E. coli
enterohemorrgica (ECEH), E. coli enteroinvasiva (ECEI) y E. coli enteroagregativa
(ECEA) (Murray, 2006).
E. coli enteropatgena (ECEP)
Las cepas enteropatgenas de E. coli fueron las primeras en asociarse a la enfermedad
diarreica y continan siendo la principal causa de diarrea infantil en los pases pobres.
La enfermedad es rara en nios mayores y en adultos, tal vez debido al desarrollo de
inmunidad protectora. Aunque se han asociado algunos sero grupos especficos O a brotes
de diarrea por ECEP en las guarderas, no se recomienda estudiar el serotipo de una cepa E.
coli aislada en una infeccin espordica o endmica, salvo en caso de estudios
epidemiolgicos. La infeccin se caracteriza por la adhesin bacteriana a las clulas
epiteliales del intestino delgado con la destruccin posterior de las microvellosidades. Las
cepas ECEP forman micro colonias en la superficie de las clulas epiteliales en las que las
17

bacterias se unen a las clulas del organismo anfitrin a travs de unas estructuras en forma
de copa. Inicialmente se establece una unin laxa medida por los pili que forman haces,
seguida de una secrecin activa de protenas por el sistema de secrecin bacteriano de tipo
III hacia la clula epitelial anfitriona. Una protena, el receptor de la intimina translocada
(Tir), se inserta en la membrana epitelial (este proceso est mediado por otras dos protenas
secretadas) y acta como receptor de una adhesina bacteriana de la membrana externa, la
intimina. La diarrea acuosa tpica de esta entidad se debe a la absorcin inadecuada
derivada de la destruccin de las microvellosidades (Murray, 2006).
E. coli enterotoxgena (ECET)
La enfermedad producida por E. coli enterotoxgena se observa con mayor frecuencia en
los pases en vas de desarrollo (se ha estimado que se registran unos 650 millones de casos
al ao), aunque se calcula que casi 80 000 casos se producen anualmente en viajeros
procedentes de EE.UU. Las infecciones afectan a nios pequeos de los pases en vas de
desarrollo o a los que viajan a estas zonas. El inoculo para esta enfermedad ha de ser
grande, por lo que las infecciones se adquieren fundamentalmente a travs del consumo de
alimentos o de agua contaminada con restos fecales. No se produce transmisin de una
persona a otra. ECET sintetiza dos clases de enterotoxinas: toxinas termolbiles (LT-1, LTII) y toxinas termoestables (STa y STb). Mientras que la LT-II no se asocia a enfermedad en
el ser humano, LT-I es funcional y estructuralmente semejante a la toxina del clera y se
asocia a enfermedad en el ser humano. La diarrea secretora producida por ECET se
manifiesta tras un perodo de incubacin de 1 a 2 das, y se prolonga a lo largo de un
perodo medio comprendido entre 3 y 4 das. Los sntomas, espasmos abdominales,
nuseas, vmitos (raro) y diarrea acuosa son semejantes a los del clera, pero ms leves
(Murray ,2006).
E. coli enterohemorrgica (ECEH)
Las cepas de E. coli enterohemorrgica son las cepas que causan con mayor frecuencia
enfermedad en los pases desarrollados. Se estima que estas bacterias producen 73 000
18

infecciones y 60 muertes al ao en EE.UU. La ingestin de un inoculo que contenga menos


de 100 bacterias puede producir la enfermedad. La gravedad de la enfermedad producida
por ECEH vara desde una diarrea leve y no complicada hasta una colitis hemorrgica con
dolor abdominal grave, diarrea sanguinolenta, sin fiebre o con febrcula. Se han aislado ms
de 50 sero grupos de ECEH; sin embargo, se cree que la mayora de los causantes de
enfermedad en el ser humano en EE.UU. pertenecen al serotipo 0157:H7. El sndrome
hemoltico urmico (SHU), un trastorno que se caracteriza por insuficiencia renal aguda,
trombopenia y anemia hemoltica microangioptica, es una complicacin que afecta a una
proporcin comprendida entre el 5% y el 10% de los nios menores de 10 aos. La
enfermedad por ECEH es ms frecuente en los meses clidos, y su mayor incidencia se
registra en los nios menores de 5 aos. La mayora de los casos de esta enfermedad se ha
atribuido al consumo de carne de vaca o de otros productos crnicos poco cocinados, agua,
leche no pasteurizada o zumos de frutas (p. ej., sidra elaborada a partir de manzanas
contaminadas por heces de ganado), verduras crudas y frutas. Inicialmente se desarrolla en
los pacientes, tras un perodo de incubacin de 3 a 4 das, una diarrea no sanguinolenta con
dolor abdominal. Se observan vmitos en la mitad de los pacientes. Tras 2 das de
evolucin, la enfermedad puede progresar a diarrea sanguinolenta con dolor abdominal
grave en el 30% al 65% de los afectados. La resolucin de los sntomas suele tener lugar
entre el cuarto y el noveno da en la mayora de los pacientes que no reciben tratamiento;
sin embargo, el SHU es una complicacin grave de esta entidad, en especial en los nios
pequeos. La muerte puede ocurrir en el 3% al 5% de los pacientes aquejados de SHU, y
pueden quedar secuelas graves (p. ej., insuficiencia renal, hipertensin, manifestaciones del
SNC) en hasta el 30% de los pacientes (Murray, 2006).
E. coli enteroinvasiva (ECEI)
Las cepas de E. coli entero invasiva son infrecuentes tanto en EE.UU. como en los pases
en vas de desarrollo. Las cepas patognicas se asocian fundamentalmente a un nmero
limitado de serotipos 0: 0124, 0143 y 0164. Las cepas presentan una estrecha relacin con
las propiedades fenotpicas y patognicas de Shigella. Las bacterias son capaces de invadir
19

y destruir el epitelio colnico para producir una enfermedad que se caracteriza inicialmente
por diarrea acuosa. Una minora de pacientes evoluciona a la forma disentrica de la
enfermedad, la cual debuta con fiebre, espasmos abdominales y presencia de sangre y
leucocitos en las heces. Este proceso de destruccin de las clulas epiteliales con
infiltracin inflamatoria puede dar lugar a una ulceracin colnica (Murray, 2006).
E. coli enteroagregativa (ECEA)
Las cepas de E. coli enteroagregativo se han visto implicadas en una diarrea acuosa,
persistente y con deshidratacin en nios de los pases en vas de desarrollo y en personas
que han viajado a estos pases. La persistencia de estas bacterias se asocia a la presencia de
diarrea crnica y a un retraso del desarrollo de los nios afectados.
Las bacterias se caracterizan por su capacidad de aglutinarse entre s en una organizacin
de ladrillos apilados. Este proceso est mediado por unas fimbrias formadoras de haces
(fimbrias de adherencia agregativa I y II), las cuales son codificadas por un plsmido
(Murray, 2006).

Salmonella
Por una parte, los estudios de homologa del

cido desoxirribonucleico (ADN) han

demostrado que este gnero est formado por dos especies: Salmonella entrica y Shige
bongori. S. entrica se subdivide, a su vez, en seis subespecies, y la mayor parte de los
patgenos del ser humano se incluye en la primera subespecie, S. entrica sub
entrica. Lamentablemente, las dos especies se han subdivido en ms de 2 500 serotipos
diferentes; tradicionalmente se han llamado especies a los numerosos serotipos (p.ej. S.
typhi, Salmonella typhymurium, Salmonella enteritidis) (Murray, 2006).
Patogenia e inmunidad
20

Despus de ser ingeridas y de pasar a travs del estmago, las salmonelas son capaces de
invadir y de replicarse en las clulas M (micropliegues) que se localizan en las placas de
Peyer de la regin terminal del intestino delgado. Tpicamente estas clulas transportan
antgenos de cuerpos extraos hasta los macrfagos subyacentes para su eliminacin. Dos
sistemas separados de secrecin de tipo III intervienen en la invasin inicial de la mucosa
intestinal (isla de patogenicidad 1 de Salmonella [SPI-1]) y la enfermedad sistmica
posterior (SPI-2). Las especies de Salmonella se protegen tambin de los cidos del
estmago y del pH cido del fagosoma mediante un gen de respuesta de tolerancia a los
cidos (ATR). La catalasa y la superxido dismutasa son otros factores que protegen a las
bacterias frente a la destruccin intracelular. La

mayora

de

las

infecciones

son

consecuencia de la ingestin de productos alimentarios contaminados, y, en los nios, de


una transmisin directa por va fecal-oral. La incidencia de la enfermedad es ms elevada
en nios menores de 5 aos y en adultos mayores de 60 aos, que se infectan durante los
meses de verano y otoo cuando los alimentos contaminados se consumen en reuniones
sociales al aire libre. La gastroenteritis es la forma ms frecuente de salmonelosis. Los
sntomas suelen aparecer entre las 6 y las 48 horas siguientes a la ingestin de alimentos o
agua contaminada, con una sintomatologa inicial de nuseas, vmitos y diarrea no
sanguinolenta. Son tambin frecuentes la fiebre, los espasmos abdominales, las mialgias y
la cefalea. En la forma aguda de la enfermedad se puede demostrar la afectacin colnica.
Los sntomas pueden persistir entre 2 das y 1 semana antes de la resolucin espontnea
(Murray, 2006).
Shigella
Se han descrito cuatro especies con ms de 45 serogrupos basados en el antigeno O: S.
dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella boydi y Shigella sonnei. S. sonnei es la causa ms
frecuente de shigelosis en las naciones industrializadas, y S. flexneri es la causa ms comn
en los pases en vas de desarrollo. No obstante, los anlisis de ADN han determinado que
estas cuatro especies constituyen, en realidad, biogrupos de E. coli que difieren a
nivel serolgico (Murray, 2006).
21

Patogenia e inmunidad
Shigella causa la enfermedad al invadir y replicarse en las clulas que tapizan la mucosa
colnica. Las protenas de los genes estructurales intervienen en la adherencia de los
microorganismos a las clulas, as como en su invasin, replicacin intracelular y
diseminacin de una clula a otra. Las especies de Shigella parecen incapaces de unirse a
las clulas mucosas diferenciadas; en lugar de ello, parece que se unen en primer
lugar e invaden a las clulas M de las placas de Peyer. El sistema de secrecin de tipo III
interviene en la secrecin de cuatro protenas (IpaA, IpaB, IpaC, IpaD) hacia las clulas
epiteliales y en los macrfagos. Estas protenas hacen que se ondulen las membranas de las
clulas diana, lo que permite que las bacterias sean engullidas. Las shigelas sobreviven a la
fagocitosis al inducir la muerte celular programada (apoptosis). Este proceso comporta,
igualmente, la liberacin de IL-lb, lo que atrae a los leucocitos polimorfonucleares hacia los
tejidos infectados, desestabiliza la integridad de la pared intestinal y permite que las
bacterias lleguen hasta las clulas epiteliales ms profundas. Los brotes epidmicos de la
enfermedad ocurren en las

guarderas,

los jardines de infancia y las prisiones. La

shigelosis se transmite por va feco- oral, principalmente por personas con las manos
contaminadas, y con menor frecuencia por el agua y los alimentos. Debido a que un inoculo
menor de 200 bacterias

puede producir la enfermedad,

la shigelosis se extiende

rpidamente en comunidades en las que las condiciones sanitarias y la higiene personal son
deficientes. La shigelosis se caracteriza por la presencia de espasmos abdominales, diarrea,
fiebre y heces sanguinolentas. Los signos y sntomas clnicos de la enfermedad aparecen
entre 1 y 3 das tras la ingestin de los bacilos. Las shigelas colonizan inicialmente el
intestino delgado y comienzan a multiplicarse en las primeras 12 horas. El primer signo de
infeccin (una profusa diarrea acuosa sin indicios histolgicos de invasin mucosa) se
relaciona con la accin de una enterotoxina. Sin embargo, la caracterstica fundamental
de la shigelosis son los espasmos abdominales y el tenesmo, con abundante pus y sangre
en las heces. Es consecuencia de la invasin de la mucosa colnica por las bacterias. En las
heces se observan numerosos neutrfilos, hemates y mucosidad. La infeccin suele
22

resolverse de forma espontnea, aunque se recomienda el tratamiento antibitico con el fin


de reducir el riesgo de diseminacin secundaria a los miembros de la familia y a otros
contactos (Murray, 2006).
Vibrio cholerae
El Vibrio cholerae produce una enterotoxina que est formada por una subunidad A y otra
subunidad B. El Vibrio llega a la superficie del enterocito, se adhiere a ella y produce la
toxina colrica. La subunidad A se desprende de la bacteria y se une a un receptor de
membrana GM-1, en la superficie del enterocito mientras que la subunidad B se une a la
membrana celular. Posteriormente la subunidad A penetra en la membrana celular, se une a
un receptor, en la membrana basolateral del enterocito, y se genera el AMPc intracelular, el
cual estimula el canal de cloro en las criptas intestinales, lo que incrementa la secrecin de
agua y electrlitos e inhibe el cotransporte de sodio y cloro en las clulas de las
vellosidades. Como resultado de estas dos acciones en las criptas y en las vellosidades por
la toxina colrica, la secrecin de lquidos en el lumen intestinal lleva a una diarrea
secretora. La toxina colrica (TC) puede estimular al intestino delgado por activacin
secundaria de los metabolitos del cido araquidnico, y aumentar la produccin de
prostaglandinas, las cuales activan el sistema nervioso entrico. Este proceso parece
estar mediado por la 5- hidroxitriptamina (5- HT) liberada por las clulas cromafines y la
neurotoxina liberada por las clulas neuroendocrinas (Murray, 2006).
Clostridium difficile
La colitis por Clostridium difficile es una enfermedad mediada por toxinas de accin local y
en raras ocasiones puede invadir el torrente circulatorio. Produce 2 tipos diferentes de
toxinas: la toxina A es una entero toxina y el factor patognico de mayor importancia,
mientras que la toxina B es una cito toxina con un efecto muy pequeo o nulo en ratones.
El primer paso en su patognesis es el enlace de la toxina A un receptor especfico. La
actividad de la toxina A enlazada y su respuesta biolgica es muy baja al nacimiento y
23

aumenta durante las primeras 3 semanas de vida para alcanzar los niveles del adulto a los
30 o 40 das de edad. La baja actividad de la toxina enlazada puede explicar la falta de
respuesta de la enfermedad en nios colonizados por Clostridium difficile. Despus de
enlazarse con el receptor existente en el "borde en cepillo" del enterocito, la toxina A es
internalizada y despus de un perodo de latencia de 1 a 2 horas ocurren alteraciones en la
estructura del citoplasma, con inclusin de la despolimerizacin de actinas filamentosas, se
abren en las clulas intestinales las uniones hermticas y aumentan la permeabilidad
transepitelial. La accin principal de la toxina A en el intestino es su habilidad para producir
una respuesta inflamatoria aguda con activacin de macrfagos, mastocitos y movilizacin
de neutrfilos. Estos mecanismos que envuelven
complejos

la

respuesta

inflamatoria

son

involucran la liberacin en varias clulas, de potentes mediadores de la

inflamacin y citocinas incluyendo prostaglandina E2, leucotrieno B4 y C2, factor de


activacin plaquetaria, interleucina- 1 y 8 (IL-1, IL-8) e histamina (Murray, 2006).
2.2.6. Diarrea aguda
Ms de 90% de los casos de diarrea aguda se deben a agentes infecciosos; estos casos se
manifiestan a menudo por vmito, fiebre y dolores abdominales. La proporcin de 10%
restante se debe a medicamentos, ingestin de sustancias txicas, isquemia y otros
trastornos (Harrison, 2005).
Agentes infecciosos
La mayor parte de las diarreas infecciosas se transmite por va fecal-oral, a travs de
contactos personales directos o, con mayor frecuencia, al ingerir alimentos o agua
contaminados con los microorganismos patgenos que estn en las heces de humanos o de
animales. En las personas inmuno competentes, la flora fecal saprofita, que abarca a ms de
500 especies taxonmicas distintas, rara vez produce diarrea, y en realidad puede
desempear un papel protector, impidiendo la proliferacin de agentes patgenos ingeridos.
La lesin o infeccin aguda aparece cuando el agente patgeno ingerido supera a las
defensas inmunitarias y no inmunitarias (cido gstrico, enzimas digestivas, secrecin de
24

moco, peristaltismo y flora saprofita supresora) de las mucosas digestivas del hospedador.
La diarrea aguda es la emisin de heces de consistencia lquida debido a inflamacin y/o
disfuncin del intestino producida por un microrganismo o sus toxinas, que se puede
acompaar de sangre o moco en las heces, fiebre, vmitos y/o dolor abdominal. Dura
menos de 4 semanas. La diarrea suele basarse en criterios cuantitativos: tres o ms
deposiciones por da y un peso de las heces por encima del lmite normal (200 g/da en el
adulto sano) (Harrison, 2005).
Patologa
La diarrea es una consecuencia de la disfuncin en el transporte de agua y electrlitos a
nivel del intestino. Como resultado de esta alteracin se produce un aumento de la
frecuencia, cantidad y volumen de las heces, as como un cambio en su consistencia por el
incremento de agua y electrlitos contenidos en ellas. Los mecanismos patognicos que
ocasionan diarrea estn en dependencia de los agentes causales que la producen (Nelson,
2004).
Clasificacin clnica de la diarrea
Diarrea aguda.- Se manifiesta por la prdida diaria de tres o ms evacuaciones intestinales
lquidas o semilquidas sin sangre visible, que pueden acompaarse de vmitos, fiebre baja,
disminucin del apetito e irritabilidad; el cuadro se inicia agudamente y tarda menos de
catorce das, aunque la mayora se resuelve en menos de siete (Nelson, 2004).
Diarrea persistente.- Este tipo de enfermedad diarreica se inicia como un episodio agudo
de diarrea lquida, pero persiste por ms de 14 o ms das.

En estos casos ocurre

frecuentemente prdida marcada de peso. El volumen de la prdida fecal puede ser


grande, pudiendo causar deshidratacin (Nelson, 2004).
Diarrea crnica.- Diarrea de tipo recurrente o de larga duracin, es de causa no infecciosa,
tal como sensibilidad al gluten o desrdenes metablicos hereditarios. Puede considerarse
cuando el proceso diarreico dura ms de 21 das (Nelson, 2004).
25

Disentera.- Diarrea con presencia de sangre, moco y/o pus en heces, independientemente
de su duracin. Entre los efectos que produce incluye anorexia, prdida de peso rpida y
dao a la mucosa intestinal causado por agentes invasores (Nelson, 2004).
Clasificacin funcional de la diarrea
En funcin de las alteraciones fisiolgicas que provocan en el organismo, las diarreas se
clasifican en cuatro grupos:
Diarrea osmtica.- Se presentan cuando existen solutos en la luz intestinal, las cuales
tienen actividad osmtica e inducen el movimiento de lquidos y electrlitos del enterocito
hacia la luz intestinal, superando la capacidad de absorcin de la mucosa. En proporcin, se
pierde una cantidad mayor de agua que de sodio, lo que incrementa las concentraciones de
este ion en la sangre, aunque el colon intenta conservar agua y sodio no retiene potasio,
que se pierde en las heces. El efecto final es un agotamiento de agua y potasio. Las
evacuaciones son cidas y las causas ms comunes son la deficiencia de enzimas
disacaridasas como lactasa y sacarasa, la ingestin de laxantes polivalentes, la desnutricin
tipo Kwashiorkor, el esprue tropical y la gastroenteritis, entre otras (Nelson, 2004).
Diarrea secretora.- Se presentan como consecuencia de un aumento importante del
movimiento de agua y electrlitos hacia la luz intestinal. Este efecto se produce por el
incremento en la secrecin, por la disminucin en la absorcin o por la combinacin de
ambas situaciones. La afluencia de lquido a la luz intestinal supera la capacidad de
absorcin del colon, lo que ocasiona la diarrea. Las heces son isotnicas en relacin con el
plasma; sin embargo, a pesar de existir Una composicin inica similar, se fuerza al
mximo la absorcin de sodio y cloro, lo que condiciona la prdida de potasio y
bicarbonato hacia la luz intestinal. Debido a que las diarreas secretoras no son provocadas
por factores dietticos, habitualmente no mejoran con el ayuno. Una excepcin es la
diarrea secretora secundaria a una mala absorcin de cidos grasos, en la que el efecto de la
microbiota bacteriana sobre stos produce cido 10- hidroxi-esterico, que es un potente
secretagogo (Nelson, 2004).
26

Diarrea secundaria a alteraciones de motilidad.- Se producen tanto por una disminucin


anormal de la motilidad intestinal que condicionan sobre crecimiento bacteriano, como por
un aumento en la peristalsis, que reduce el tiempo de contacto entre el contenido
intestinal y la mucosa (Nelson, 2004).
Las principales causas de este tipo de diarreas son el abuso de laxantes, la enfermedad
diverticular del colon, el sndrome del intestino irritable y la neuropata diabtica.
Diarrea por alteraciones morfolgicas de la mucosa.- Se deben a lesiones anatmicas
de las estructuras encargadas del proceso de absorcin. Esto impide el ingreso de los
nutrientes o bien la salida de productos de escasa absorcin, como sangre, moco, pus o
protenas completas, hacia la luz del intestino. Entre las principales causas de este tipo de
diarreas se encuentran la gastroenteritis infecciosa persistente, la enfermedad de Whipple,
el sndrome de inmunodeficiencia adquirida y la enfermedad inflamatoria intestinal
(Nelson, 2004).
Diarrea infecciosa aguda
La diarrea infecciosa aguda es aquella que tiene una duracin menor de 14 das.
Actualmente se clasifica de manera prctica en diarrea acuosa y diarrea con sangre
(Nelson, 2004).
La diarrea acuosa a su vez puede ser secretora u osmtica y la diarrea con sangre puede ser
invasiva o no invasiva.
Diarrea secretora
Se define como un cuadro diarreico, aqul que es el resultado del movimiento neto de agua
y electrlitos desde la mucosa intestinal hasta el lumen, y cuyo volumen excede los 10
mL/kg/da y cuya osmolaridad es similar al plasma. La diarrea secretora es una diarrea
acuosa abundante que

produce deshidratacin

con

trastornos

del

equilibrio

hidroelectroltico y cido bsico y es producida principalmente por el Vibrio cholerae y la


27

Escherichia coli enterotoxignica (ECET), aunque otras bacterias como la Shigella spp, la
Yersinia enterocoltica y las Aeromonas tambin pueden producirla (Nelson, 2004).
Diarrea osmtica
La diarrea osmtica es aqulla que se produce por un incremento de carbohidratos en el
lumen intestinal, como consecuencia de lesiones en forma de parches en las vellosidades
intestinales y por la invasin de los enterocitos de la vellosidad y la posterior aglutinacin
de las vellosidades afectadas. La necrosis de la porcin superior (pex) de las vellosidades
da lugar a que en un perodo de 12 a 40 horas, los enterocitos de las criptas, que son
enterocitos secretores, cubran totalmente la vellosidad y den lugar a reas donde hay
secrecin de lquidos y la absorcin est disminuida o ausente. En la medida que las
lesiones se hacen ms extensas tendr lugar una menor absorcin y se aumentar la
secrecin. Este mecanismo de produccin de diarrea osmtica es el que provocan los
agentes virales, principalmente los rotavirus. Otro mecanismo de produccin de diarrea
osmtica es el que ocurre por la adhesin de algunos protozoos al "borde en cepillo" del
enterocito que bloquean la entrada de agua, electrlitos y micronutrientes lo que produce un
exceso de carbohidratos a nivel del lumen intestinal, que son atacados por las bacterias con
produccin de cido lctico, lo cual da lugar a una diarrea cida que se traduce
clnicamente por un marcado eritema perianal. Los parsitos que con mayor frecuencia
presentan este tipo de diarrea con acentuada mal absorcin a los carbohidratos son la
Giardia lamblia, Cryptosporidium parvum, Ciclospora cayetanensis y los Microsporidios,
aunque los pacientes inmunosuprimidos presentan un componente de hipersecrecin.
Tambin puede producirse una diarrea osmtica cuando se ingiere una sustancia
osmticamente activa de pobre absorcin, esto puede suceder cuando se administran
purgantes como el sulfato de magnesio. Si la sustancia es ingerida con una solucin
isotnica, el agua y los solutos pasan por el intestino sin adsorberse, y esto da lugar a la
diarrea osmtica. Este tipo de diarrea se puede observar en los pacientes con mal absorcin
a los disacridos (lactosa) y en lactantes alimentados con el seno materno (exceso de
28

lactosa) o cuando se administran grandes cantidades de leche animal o leches muy


concentradas (Nelson, 2004).
Diarrea con sangre
La diarrea con sangre se presenta con una elevada frecuencia en nios menores de 5 aos.
Constituye un problema de salud en los pases subdesarrollados y puede expresarse con
manifestaciones clnicas severas que pueden llevar al paciente a la muerte y, en otras
ocasiones, su cuadro clnico es ms benigno por tener sus agentes causales una vida auto
limitada (Nelson, 2004).
Diarrea con sangre invasiva
La diarrea con sangre invasiva tiene como prototipo a la Shigella, aunque tambin puede
ser producida por otros agentes bacterianos entero patgenos como son: Escherichia coli
enteroinvasiva, Salmonella, Campylobacter jejuni, Yersinia enterocoltica y Vibrio
parahaemolyticus (Nelson, 2004).
Diarrea con sangre no invasiva
La diarrea con sangre no invasiva tiene como prototipo a la Escherichia coli entero
hemorrgica (ECEH). Los primeros estudios de este tipo de Escherichia coli se realizaron
en 1983, cuando se asociaron cepas de Escherichia coli del serotipo O157H7 raramente
encontradas con anterioridad. Con un brote de una nueva enfermedad, la colitis
hemorrgica, caracterizada por diarrea con abundante sangre y sin fiebre. Estudios
realizados posteriormente pusieron de manifiesto que dichas cepas pueden producir
tambin un sndrome hemoltico urmico y llevar a una insuficiencia renal aguda. Las cepas
de serotipo O157H7 elaboran 2 potentes cito toxinas que destruyen las clulas Vero, por lo
que reciben el nombre de vero toxinas (VT-1 y VT-2). Estas toxinas estn relacionadas,
biolgica y estructuralmente, con la toxina Shiga sintetizada por la Shigella disenteriae
tipo l (Sdl) por lo que se propuso la denominacin de toxinas similares a la toxina Shiga
(SLT-1 y SLT-2). El aspecto clnico ms relevante de la ECEH es su habilidad para causar
29

el

sndrome

hemoltico

urmico,

caracterizado

por

anemia

microangioptica,

trombocitopenia e insuficiencia renal (Nelson, 2004).


Manifestaciones clnicas
Se puede asociar a otros sntomas y signos como nauseas, vmitos, dolor abdominal en
forma de retortijn, fiebre, deposiciones sanguinolentas, tenesmo

y/o

urgencia

defecatoria, claro est que esto puede variar de acuerdo al tipo de germen causante
(Rodrguez, 2010).

Cuadro 3. Caractersticas clnicas de la infeccin debida a determinados patgenos


seleccionados que producen diarrea.

30

2.3 Marco conceptual


2.3.1 El agua
El agua es esencial para la vida, constituye el principal componente del protoplasma celular
y representa 2/3 del peso total del hombre y hasta 9/10 del peso de algunos vegetales. Del
latn aqua, el agua es una sustancia cuyas molculas estn compuestas por un tomo de
oxgeno y dos tomos de hidrgeno. Se trata de un lquido inodoro (sin olor), inspido (sin
sabor) e incoloro (sin color), aunque tambin puede hallarse en estado slido (cuando se
conoce como hielo) o en estado gaseoso (Beltrn, 2008).

31

2.3.2 Agua potable


Se denomina agua potable al agua bebible en el sentido que puede ser consumida por
personas y animales sin riesgo de contraer enfermedades satisface las condiciones y
requisitos fsicos, qumicos, organolpticos y microbiolgicos. El trmino se aplica al agua
que ha sido tratada para su consumo humano segn unas normas de calidad
promulgadas por las autoridades locales e internacionales (OPS-OMS, 2010).
2.3.3 Cloracin del agua
Es un proceso de higienizacin que se llev a cabo por primera vez en los sistemas de
abastecimiento de agua potable. Surge como alternativa eficiente para eliminar las
enfermedades infecciosas transmitidas por el agua; aunque pueda resultar extrao y a la vez
sorprendente, la cloracin ha sido responsable en gran parte del 50% de aumento de
expectativa de vida en los pases desarrollados durante el siglo XX (Prada, 1990).
2.3.4. Contaminacin del agua
La contaminacin de las aguas puede proceder de fuentes naturales

o de actividades

humanas. En la actualidad la ms importante, sin duda es la provocada por el hombre,


debido a que es un fenmeno ambiental, se inicia desde los primeros intentos de
industrializacin, para transformarse en un problema generalizado, a partir de la revolucin
industrial, iniciada a comienzos del siglo XIX. Es la alteracin en la composicin qumica,
propiedades fsicas y bacteriolgicas, de tal manera que resulta menos apta para los
propsitos en los cuales es empleada como consumo humano, riego para la produccin
agropecuaria, la industria, generacin de energa, etc. La contaminacin del agua afecta a
las precipitaciones, a las aguas superficiales, a las subterrneas y como consecuencia
degrada los ecosistemas naturales (Coronel y Jimenez, 2006).

32

II.

HIPTESIS Y VARIABLES
3.1. Formulacin de hiptesis
3.1.1. Hiptesis general
Existe una moderada prevalencia de disenteras debido a la contaminacin del agua por
coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurmac, 2016.
3.1.2. Hiptesis especficas

Los casos de disenteras son ocasionados por contaminacin del agua con coliformes

totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurmac, 2016.


Existe una cantidad de coliformes totales y termotolerantes en el agua de consumo
humano no permitida por la Direccin General de Salud Ambiental de Apurmac, en el

distrito de Tamburco, Abancay, Apurmac, 2016.


El nivel de cloro residual supera el lmite mximo permisible establecido en el Per.

3.2.

Definicin operacional de variables.

Tabla 2. Operacionalizacin de variables


Variables
Independientes
Presencia de coliformes termotolerantes
Presencia de coliformes totales
Cloro residual en agua potable

Indicadores
Coliformes /100 ml
Coliformes /100 ml
mg/l
33

Dependiente
Casos de disenteras

Casos detectados positivos


Muy baja (menos al 10%).
Baja (entre 10% y 20%).
Mediana (entre 21% y 35 %).
Alta (entre 36% y 40%).
Muy alta (mayor al 40%).
IV. METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN
4.1. Tipo y nivel de investigacin
4.1.1. Tipo
El presente estudio rene las condiciones metodolgicas de una investigacin:

Observacional, porque no habr intervencin del investigador solo se observar los

valores de coliformes totales y termotolerantes.


Prospectivo, los datos con los que se trabajar sern planeados y obtenidos a travs de

registros de anlisis de control de resultados de muestreo.


Transversal, porque se tomar los datos en un momento determinado.
Analtico, debido que se estudiar ms de dos variables.

4.1.2. Nivel de investigacin:


Esta investigacin rene las caractersticas de un estudio relacional, porque relaciona
variables en estudio.
4.2 Mtodo y diseo de investigacin
4.2.1 Ubicacin
El estudio se realizar en el distrito de Tamburco, provincia de Abancay, regin de
Apurmac, que limita con las regiones de Arequipa, Cusco y Ayacucho. El distrito de
Tamburco tiene una superficie de 54.6 km2. Se encuentra ubicado en los pisos ecolgicos
34

correspondientes a las regiones quechua, suni y Puna entre 2 581 y 4 800 msnm. Latitud Sur
133705 y Latitud oeste 7252'18".

Figura 1. Mapa de Abancay y ubicacin del distrito de Tamburco


Los lmites del distrito de Tamburco son:
Nor Oeste
Nor Este
Este
Sur
Sur Oeste

: Huanipaca.
: San Pedro Cachora.
: Curahuasi.
: Abancay.
: Abancay.

Se divide geogrficamente en 16 sectores: Ccanabamba, San jorge Chillihua, Ccorhuani,


Kerapata, Mosoccpampa, Soccoshuaycco, Bancapata, Antabamba Alta y Baja, Sahunay,
Maucacalle, San Antonio, Colcaqui, Nueva Rioja, Miraflores, Vctor Acosta Segunda
Etapa, Vctor Acosta y Juan Pablo II Primera Etapa, Nueva Granja y Tamburco Alto y Bajo.
4.3 Poblacin y muestra
La poblacin de Tamburco es de 7 275 habitantes (INEI, 2007). El agua que se consume
proviene de las captaciones, reservorios y piletas domiciliarias. Existen en Abancay 14
captaciones administradas por Juntas Administradoras de Servicio y Saneamiento (JASS),
35

Municipios y EMUSAP. El muestreo que se utilizar es el de conveniencia, se considerar


para el anlisis del agua de consumo humano, 80 piletas domiciliarias elegidas
aleatoriamente segn la presentacin de casos de disenteras diagnosticados en el Comit
Local de Administracin de Salud de Tamburco (CLAS-Tamburco).
4.4 Tcnica de investigacin
4.4.1 Recoleccin de informacin
Los datos provenientes del anlisis de laboratorio del agua muestreada en las piletas
domiciliarias se registrarn en hojas de observacin (Ficha 1, anexos). Adems se aplicar
un cuestionario a cada uno de los pacientes con disenteras detectadas en el CLASTamburco, para poder tener informacin complementaria que nos permita plantear
recomendaciones a rganos decisores del sector salud (Cuestionario 1, anexos).
4.4.2 Procedimiento para la captacin de pacientes con disentera
a) Coordinaciones administrativas.- Inicialmente se coordinar con las autoridades del
CLAS-Tamburco y el personal de laboratorio, para que se nos brinden todas las
facilidades, durante todo el periodo que dure la investigacin.
b) Colocacin de avisos en el rea de medicina.- Se colocar avisos en cada una de las
salas de medicina, indicando que una vez se detecte un caso de disentera, se ponga en
contacto con el personal responsable de la toma de muestras de agua.
4.4.3 Procedimiento para la recogida de muestras de agua
a) Se prepararn 80 frascos para el recojo del agua identificndolos adecuadamente.
b) Inmediatamente captado al paciente con disentera en el Centro de Salud de Tamburco,
se proceder a realizar el muestreo del agua en su pileta domiciliaria.
c) Una vez recogida el agua se determinar el cloro residual mediante la tcnica
colorimtrica, apuntando los resultados.
36

d) Luego el frasco debidamente identificado ser trasladado al laboratorio referencial de la


Direccin General de Salud Ambiental-Apurmac, para el anlisis correspondiente,
respecto a los coliformes termotolerantes y totales.

4.3.4 Tipos de pruebas de laboratorio a emplearse


a) Prueba presuntiva.- Consiste en colocar volmenes determinados de muestra de agua
en una serie de tubos conteniendo caldo lauril triptosa (CLT) que luego son incubados
a 35 0.5C durante 24 48 horas.
Procedimiento:

Antes de inocular en los tubos estos deben estar a temperatura ambiente.

Colocar los tubos en gradillas y codificarlos anotando el nmero asignado a la


muestra y dilucin a inocular.

En el caso del agua de consumo humano se utilizar 10 tubos de 10 ml de CLT.

Se agitar el frasco de la muestra vigorosamente unas 25 veces.

De la muestra original se transferir 1 ml a cinco tubos con CLT de concentracin


simple y 10 ml en cinco tubos con CLT de doble concentracin.

Se incubar los tubos inoculados a 35 0.5 C. Despus de 24 2 horas se


examinar y separar los tubos con CLT positivos, aquellos que presentan
formacin de gas y turbiedad.

Todos los tubos positivos pasarn a la siguiente fase, la prueba confirmativa.

b) Prueba confirmativa.- Para la determinacin de coliformes totales se inocular los


tubos positivos de la prueba presuntiva en el caldo lactosado verde brillante bilis
(CLVBB), y se les incubar a 35 0.5 C por 48 horas, para coliformes fecales en caldo
EC y para Escherichia coli en caldo EC con MUG, ambos tubos se incubarn a 44.5
0.2 C por un tiempo de 24 horas. La formacin de gas en los tubos de Durham as
como la presencia de fermentacin y turbiedad en los tubos, se considerar reaccin
37

positiva. Los resultados se expresarn en trminos de Nmero Ms Probable (NMP) de


microorganismos.
Procedimiento:
Coliformes totales

Antes de inocular en los tubos estos deben estar a temperatura ambiente.


Se agitar los tubos positivos de la prueba presuntiva antes de ser inoculados en los

tubos de CLVBB.
Con el asa de siembra estril, se transferir una o ms asadas de un cultivo positivo
de CLT a un tubo con CLVBB. Repetir el procedimiento para todos los tubos

presuntivos.
Se incubar los tubos inoculados a 35 0.5 C por 24 3 horas.
Despus de 24 3 horas de incubacin, se retirar los tubos, agitndolos y

observando la produccin de gas.


Se proceder a realizar la lectura considerando positiva toda formacin de gas en los

tubos Durham (Fermentacin) y turbiedad en los tubos. Se anotar los resultados.


Luego se tendr que reincubar los tubos negativos por otras 24 3 horas.
A las 48 horas, se retirar los tubos, agitndolos y observando la produccin de gas,
asimismo se proceder a realizar la lectura considerando positiva toda formacin de
gas en los tubos Durham (Fermentacin) y turbiedad en los tubos. Se anotar los

resultados.
Con las lecturas obtenidas a las 24 y 48 horas se calcular el NMP de
microorganismos de acuerdo a una frmula establecida (anexo).

Coliformes termotolerantes

Antes de inocular en los tubos estos deben estar a temperatura ambiente.


Se agitar los tubos positivos de la prueba presuntiva antes de ser inoculados en los

tubos de caldo EC.


Con el asa de siembra estril, se transferir una o ms asadas de un cultivo positivo
de CLT a un tubo con caldo EC. Repetir el procedimiento para todos los tubos

presuntivos.
Luego se tiene que incubar los tubos inoculados a 44.5 0.2 C en Bao Mara por
24 2 horas.
38

Luego de la incubacin, se retirar los tubos, observando la produccin de gas y


procediendo a realizar la lectura, considerando positiva toda formacin de gas en
los tubos Durham (Fermentacin) y turbiedad en los tubos. Se anotar los

resultados.
Con las lecturas obtenidas se calcular el NMP de microorganismos de acuerdo a
las porciones y combinaciones empleadas.

Escherichia coli

Con el asa de siembra estril, se transferir una o ms asadas de un cultivo positivo


de CLT a un tubo con caldo EC con MUG. Repetir el procedimiento para todos los
tubos presuntivos.

Se incubar los tubos inoculados a 44.5 0.2 C en Bao Mara por 24 2 horas.

Los tubos positivos (que presenten gas y turbiedad), se expondrn a una lmpara de
luz UV de 365 nm, la presencia de una fluorescencia azul se considera como una
reaccin positiva para E. coli. Se anotar los resultados.

Paralelo a los anlisis de las muestras, se analizar los controles positivos de la cepa
de E. coli (MUG positiva), un control negativo cepa termotolerante de Klebsiella
pneumoniae (MUG negativa) y un medio de cultivo sin inocular.

Se anotar los resultados obtenidos y se calcular el NMP de microorganismos de


acuerdo a la frmula que se puede ver en anexos.

4.3.5 Materiales y Equipos


Medios de cultivo y reactivos

Caldo lauril triptosa o sulfato (CLT).


Caldo lactosado verde brillante bilis (CLVBB).
Caldo EC.
Caldo EC MUG.
Agua de dilucin.
Tiosulfato de sodio al 3%.
39

Equipos y Materiales.

Incubadora a 35 0,5 C.
Bao Mara a 44,5 0,2 C.
Frascos de dilucin, capacidad de 100 ml autoclavables.
Pipetas serolgicas de 10 ml, tolerancia de 2.5%.
Tubos de ensayos, resistentes al autoclavado, con dimensiones de 16 18 x 150
mm (para medios de concentracin simple) y 20 x 150 mm (para concentracin

doble).
Tubos (campanas) Durham.
Probetas, matraces, esptulas, vasos de precipitacin, magnetos.
Asas de siembra de nquel-cromo o platino de 3,0 a 3,5 mm de dimetro.

4.3.6 Determinacin del nmero ms probable (NMP)


El clculo de la densidad probable de bacterias coliformes totales, fecales y E. coli est
basado en la combinacin de los resultados positivos y negativos obtenidos en cada
dilucin. La densidad de coliformes se expresa como NMP de coliformes por 100 ml y se
obtiene a travs de la una tabla (anexo) en la que se presenta el lmite de confianza de 95%
para cada valor de NMP determinado. Los valores de NMP presentados en el anexo 2 se
refieren especficamente a la combinacin de resultados positivos obtenidos cuando son
inoculados una serie de 10 tubos con volmenes de 10 ml de muestra. Los valores de NMP
presentados en el anexo 3 se refieren especficamente a la combinacin de resultados
positivos obtenidos cuando son inoculados series de 5 tubos con volmenes de 10 ml, 1 ml,
0,1 ml de muestra. Cuando se inoculan ms de tres series de diluciones decimales,
seleccionar las tres diluciones segn los ejemplos que se detallan. Como primer nmero del
cdigo seleccionar la lectura correspondiente a la dilucin ms alta que de resultados
positivos en los 5 tubos y la lectura de las dos diluciones subsiguientes para completar el
cdigo. Si la dilucin ms baja examinada tiene menos de cinco porciones con resultados
positivos, seleccinela y las siguientes dos diluciones mayores. Cuando ocurra un resultado
positivo en una dilucin ms alta que en las tres seleccionadas, se cambiar la seleccin a la
dilucin ms baja que tenga menos de cinco resultados positivos y las siguientes dos
40

diluciones mayores. Cuando todas las reglas de seleccin dadas hayan dejado sin
seleccionar cualquier dilucin mayor con resultados positivos, se aadir el resultado de
aquellas diluciones mayores con resultados positivos al resultado de la dilucin anterior.

4.3.7

Composicin y preparacin de los medios de cultivos y reactivos.

Caldo lauril triptosa


Composicin:

Tryptosa
Lactosa
Dipotasio hidrgeno fosfato K2HPO4
Potasio dihidrgeno fosfato, KH2PO4
Cloruro de sodio
Lauril sulfato de sodio
Agua destilada

20.0 g
5.0 g
2,75 g
2,75 g
5,0 g
0,1 g
1L

Preparacin:
Disolver 35.6 g del medio deshidratado por litro de agua destilada (caldo simple). Ajustar
el pH a 6.8 0.2 y distribuir 10 ml del medio en tubos de ensayo de 16 18 x 150 mm
provisto en su interior con un tubo de fermentacin invertido (Durham), tapar y esterilizar
a 121C durante 15 minutos. Para caldo de doble concentracin, disolver 71.2 g del medio
deshidratado por litro de agua destilada. Ajustar el pH a 6.8 0.2. Distribuir 10 ml del
medio en tubos de ensayo de 20 x 150 mm provistos tambin en su interior con tubos
Durham y proceder como en el caso anterior.
Tabla 5. Concentracin de caldo lauril triptosa en funcin al volumen de muestra
adecuado
41

Tubos con CLT

Volumen de

Concentracin del

(ml)
10

muestra (ml)
0.1 a 1.0

10

10

medio
1 x (simple)
2

x (doble)

CLT g/L
35.6
71.2

Caldo lactosado verde brillante bilis lactosa (CLVBB):


Composicin:

Peptona

10,0 g

Lactosa

10,0 g

Oxgall

20,0 g

Verde brillante 1 L.
Preparacin:
Disolver 40 g de medio CLVBB en un litro de agua destilada. Distribuir 10 ml. En tubos de
ensayo provisto con tubos Durham invertidos. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos a
121 C.
Caldo EC
Composicin
Triptosa o tripticasa
Lactosa
Mezcla de sales biliares N 3
Dipotasio hidrogeno fosfato K2HPO4
Potasio dihidrogeno fosfato, KH2PO4
Cloruro de sodio
Agua destilada

20,0 g
5,0 g
1,5 g
2,75 g
2,75g
5,0 g
1L

42

Preparacin:
Disolver 37 g de medio EC - MUG en un litro de agua destilada. Distribuir 10 ml. En
tubos de ensayo provisto con tubos Durham invertidos. Esterilizar en autoclave durante 15
minutos a 121 C.
Caldo EC MUG
Composicin:
Triptosa o tripticasa

20,0 g

Lactosa

5,0 g

Mezcla de sales biliares N 3

1,5 g

Dipotasio hidrgeno fosfato K2HPO4

2,75 g

Potasio dihidrgeno fosfato, KH2PO4

2,75g

Cloruro de sodio

5,0 g

4-metylumberiferil--D-glucoronido (MUG) 0,05 g


Agua destilada

1L

Preparacin:
Disolver 37 g de medio EC - MUG en un litro de agua destilada. Distribuir 10 ml. En
tubos de ensayo provisto con tubos Durham invertidos. Esterilizar en autoclave durante 15
minutos a 121 C.
Agua de dilucin
Para el agua de dilucin, es necesaria la preparacin de soluciones Stock A y B. Solucin
Stock A: Disolver 34 g de fosfato monopotsico (KH2PO4) en 500 ml. De agua destilada,
al ajustar el pH a 7.2 0.5 con hidrxido de sodio (NaOH 1N), y completar el volumen a
43

un litro con agua destilada. Autoclavar por 15 minutos a 121C. Solucin Stock B: Disolver
81.1 g de cloruro de magnesio (MgCl26H2O) en un litro de agua destilada. Autoclavar por
15 minutos a 121C. Agregar 1.25 ml. De la dilucin Stock A y 5 ml de la solucin Stock
B a un litro de agua destilada. Distribuir en frascos en cantidades que aseguren, luego de
llevarlo a la autoclave por 15 minutos a 121C, un volumen de 90 2 ml
Tiosulfato de sodio
Disolver 3 g de tiosulfato de sodio en 100 ml de agua destilada para obtener una
concentracin del 3%. Para agua potable, agua clorada, colocar en los frascos de muestreo
0,1 ml de esta solucin (antes de su esterilizacin), por cada 100 ml de capacidad del
frasco.
4.5 Anlisis estadstico
4.5.1 Anlisis del estadstico Chi-cuadrado ( x

Para determinar la relacin de la presencia de disenteras (Si/No) frente a la presencia de


coliformes termotolerantes y totales (Si/No) se emplear el estadstico de prueba siguiente:

(Oij - Eij)2

x =
i=1 j=1

con (I-1) (J-1) grados de libertad


Eij
Oi. Oj
Eij =
O..

donde Oij es el valor observado en la celda. Sea Oi. la suma de los valores observados en el
rengln

i , sea O la suma de los valores observados en la columna


j

j , y sea O.. la

suma de los valores observados en todas las celdas. Se denota Eij el valor esperado que es
44

igual a la proporcin de ensayos cuyo resultado est en la columna

j , multiplicado por

el Oi. de ensayos en el rengln i (Navidi, 2006).

4.5.2 Anlisis descriptivo


Se calcular para las variables cuantitativas, se calcular la media aritmtica, la desviacin
estndar, y los intervalos de confianza al 95%.
4.5.3

Clculo de la prevalencia de disenteras por contaminacin del agua con


coliformes totales y termotolerantes

Se determinar la prevalencia de disenteras debido a la contaminacin del agua por

coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurmac, 2016,


en un periodo determinado, utilizando la frmula siguiente:

Nmero de disenteras debido a coliformes totales y termotolerantes


P=

-------------------------------------------------------------------------------------------------------

Nmero total de casos diagnosticados de disentera en Tamburco

45

X 100

V.

ADMINISTRACIN DEL PROYECTO


La presente investigacin tendr una duracin de 4 meses de experimentacin, desde 1 de
enero al 31 de abril de 2016, y 2 meses dedicados a la redaccin y preparativos para la
sustentacin.
5.1 Cronograma de actividades

2015
JulActividad

Nov-

Ene-

Mar-

May-

Jul-

Dic

Feb

Abr

Jun

Ago

Set-Oct
Ago

Elaboracin

2016

del
X

proyecto
Aprobacin

del
X

proyecto
Coordinaciones en

X
46

campo
Ejecucin

del
X

proyecto
Anlisis estadstico

Redaccin

Presentacin

de
X

informe
Publicacin

47

5.2 Presupuesto
RECURSOS

CANTIDAD

P.

TOTAL

UNITARIO
Recursos materiales

S/.

Papel Bond 80gr.

02 millares

S/. 26.00

52.00

Fichas.

02 cientos

S/. 8.00

16.00

Impresin

------------

S/. 0.10

300.00

Pasajes.
Gastos diversos.

01 Aprox.
01 Aprox.

-------------------

1000.00
500.00

Bibliografa

-------------

------------

500.00

Internet

20

10

200.00

tiles de escritorio

---------

---------

100.00

Empastado
Fotografas.
Reportera digital
Cmara fotografa digital
Cmara firmadora digital
CDs
Recursos humanos
Digitador
Encuestador

5 Unidades
Aproximados
01 Unidad
01 Unidad
01 Unidad
01 Ciento

S/. 16.00
S/. 0.60
S/. 200.00
S/. 800.00
S/. 2,000.00
S/. 80.00

01
01
TOTAL

-----------------

VI. BIBLIOGRAFA

48

80.00
100.00
200.00
800.00
2,000.00
80.00
100.00
400.00
S/. 8,438.00

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19. 50. Organizacin Mundial de la Salud (OMS). (2008). [Consultado el 10 de 09 de 2011].
Disponible en:EMAPA, (2012). Datos del agua potable. www.aguapotable.com.ec .
20. 51. INEC. (2010). Principales causas de muerte en la niez., [Consultado el 14 de 02 de
2012].
21. 52. Nelson Tratado de Pediatra. (2004). (R. M. Richard E. Behrman, Ed.)., 17, Pgs. 12721276 Madrid-Espaa: El Sevier INTE INEN 108 (2011). Norma tcnica Ecuatoriana de
Agua Potable
22. Navidi, W., 2006. Estadstica para ingenieros y cientficos. Ed. Mc Graw
Hill/Interamericana. Mxico, pp. 623-659.
23.
24. 53. Murray Microbiologa Mdica. (2006). (P. Murray K. Rosenthal), 5, Pags. 7-473
Espaa.
25. 54. Harrison Principios de Medicina Interna. (2005). (K.Hauser B. Longo), 16, Pags.
26. 1644-1658Madrid-Espaa: GrawHill.
27. 55. Gadma. (2012). Diagnstico territorial Plan Ambato 20/20., (3), 140-151. Ambato
INTE INEN 108 (2011). Norma tcnica Ecuatoriana de Agua Potable

52

VI.

ANEXOS
ANEXO 1

CADENA DE CUSTODIA

COD
N
LAB

LO
CA

DIS
TRI
TO

ORIGE
N DE
FUENT
E

NOMBRE
DEL

PUN
TO
DE
MUE

CLORO

LABORATORIO DESA PARA MUESTRA DE AGUA


SOLICITANTE: MINSA-EE.SS ( ) INSTITUCIONES ONGs ( ) TERCEROS ( ) JASS (
DEPARTAMENTO__________ PROVINCIA______________DISTRITO__________
MICRO RED_____________
E.E.S.S.:___________
NOMBRE DEL MUESTREADOR___________
FECHA Y HORA DE
L MUESTREO

53

FECHA Y HORA DE
ENTREGA

TIPO DE ANALISIS

LID
AD

SISTEMA
A.S

METALES

QUIMICO

RESIDUAL

A.S.
T.

FISICO

STR
EO

SAP.

Hora:

/
SAP.

Hora:

/
SAP.

Hora:

Hora:
/

Hora:
/

Hora:

MUESTRA RECIBIDA
A.- Condicin de recipiente

Bueno ( )
Malo ( )

OBSERVACIONES:

Leyenda: (AS) agua superficial (AST) agua subterrnea (AR) agua rio (AL) agua de lago
(ARC) agua de canal de riego (AT) aguas termales.

Entregado por

Recibido por
VB Jefe

Inmediato

ANEXO 2. Vigilancia de la calidad de agua de consumo humano y monitoreo de cloro


residual
GOBIERNO REGIONAL APURMAC
DIRECCIN REGIONAL DE SALUD APURMAC
DIRECCIN EJECUTIVA DE SALUD AMBIENTAL
VIGILANCIA DE LA CALIDAD DE AGUA DE CONSUMO HUMANO
MONITOREO DE CLOR RESIDUAL
MICRO RED__________________________________ PROVINCIA_______________________
LOCALIDAD__________________E.E.S.S.:______________________________________
DISTRITO.________________________
N DE CONEXIONES:___________

54

BACTERIAS

RESPONSABLE :___________________________
__________

FECH
A

HO
RA

NOMBR
E DEL
SISTEM
A

PUNTO
DE
MUESTR
EO

NOMBRE
DE
USUARI
O

POBLACIN USUARIA:________________

DIRECCI
N

Prueba de cloro
residual
5.00
ppm/l
it

5.00
ppm/l
it

Mues
tra
micro
b N

MES:

Continuid Firma y
ad
DNI del
hora/das usuario

1
2

5
6

OBSERVACIONES: llenar esta ficha en forma mensual por cada sistema de agua y
remitirlo a DESA punto de muestreo: desde el reservorio hasta las conexiones domiciliarias
(Pileta Domiciliaria)

Firma del responsable

Firma y sello del jefe del Establecimiento

ANEXO 3. Diagrama de anlisis bacteriolgico de agua subterrnea proveniente de piletas


domiciliaria y reservorio del distrito de Tamburco.
TCNICA:

FERMENTACIN

EN

TUBOS
55

MLTIPLES

(APHA,

AWW.WEF. Part. 9221B. 21 th ed. 2005)


Muestra
de agua
subt
err
nea

10 ml

10 ml

10 ml

Caldo CLVBB Doble


Caldo CLVBB simple
Concentrado
Concentrado

Gas
(-)
24
ho
ra
s
Reincubar 24
Horas

Gas
(+)
24
hor
as

Gas (+) 48
horas:
Prueba
positiva
para
Coliformes
totales
56

Gas (-) 48
horas:
Prueba
negativa

Prueba de temperatura elevada


en Caldo
Brilla e incubar a 44,5 +/0,2 C

Gas (+)
24
horas

Prueba confirmativa
positiva para
Coliforme
Termotolerante

Gas (-)
24
hora
s

Prueba negativa

ANEXO 4. Diagrama de anlisis bacteriolgico de agua subterrnea proveniente de de piletas


domiciliaria y reservorio del distrito de Tamburco.
PREPARACIN DE AGAR CUENTA COLONIAS +
TTC AL 0,5 %

Filtro de
celulosa
estril de 45
m

Agua
destilada
estril
+ 0,5 g
de TTC

Solucin TTC
al 0,5 %
estril

Agar Cuenta
Colonias PCA +
TTC 0,5%

ANEXO 5. Diagrama de anlisis bacteriolgico de agua subterrnea proveniente de


piletas domiciliaria y reservorio del distrito de Tamburco.
TCNICA: MTODO DE PLACA FLUIDA (APHA, AWW, WEF Part. 9215B
21 th ed. 2005). Agregar 90
ml de H2o
Peptonada
Se desecha
Agregar
10 ml de
muestra
9 ml de H2o
Peptonada

1 ml

9 ml de H2o
Peptonada

1 ml

1 ml

Agar Cuenta
colonias PCA
+ TTC al 0,5
% 1520 ml

1 ml

10

-1

1
ml

1 ml

10
2

-3
10

INCUBAR A 37 C /24 48 HRS

ANEXO 6. Diagrama de flujo del procedimiento

ANEXO 7. ndice de NMP al 95% de confianza para resultados de combinaciones de

tubos positivos y negativos cuando se usan 10 tubos inoculados con 10 mL de muestra.


N de tubos positivos
de 10 tubos

(volumen de 10 mL c/u)
0

ndice de NMP/100
mL

< 1,1

Lmite de confianza al 95%

Bajo

Alto

----

3,4

1,1

0,051

5,9

2,2

0,37

8,2

3,6

0,91

9,7

5,1

1,6

13

6,9

2,5

15

9,2

3,3

19

12

4,8

24

16

5,8

34

23

8,1

53

10

> 23

13

----

ANEXO 8. ndice de NMP al 95% de confianza para varias combinaciones de


resultados positivos cuando se usan 5 tubos por dilucin (10ml, 1,0 ml, 0,1 ml).
NMP /
Combinaci 100 mL
n de
positivos
000
< 1.8
001
010
011
020
021
030
100
101
102
110
111

1.8
1.8
3.6
3.7
5.5
5.6
2
4
6
4
6.1

Lmite de
Confiabilidad
Bajo
Alto

0.09
0.09
0.7
0.7
1.8
1.8
0.1
0.7
1.8
0.71
1.8

Combinaci NMP /
n de
100
positivos
mL

6.8

403

6.8
6.9
10
10
15
15
10
10
15
12
15

410
411
412
413
420
421
422
423
430
431
432

25
17
21
26
31
22
26
32
38
27
33
39

Lmite de Confiabilidad
Bajo

Alto

9.8
6

70
40

6.8
9.8
10
6.8
9.8
10
14
9.9
10
14

42
70
70
50
70
70
100
70
70
100

1
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
4

1
2
2
3
3
4
0
0
0
1
1
1
2
2
2
3
3
4
0
0
0
1
1
1
2
2
2
3
3
3
4
4
5
0

2
0
1
0
1
0
0
1
2
0
1
2
0
1
2
0
1
0
0
1
2
0
1
2
0
1
2
0
1
2
0
1
0
0

8.1
6.1
8.2
8.3
10
10
4.5
6.8
9.1
6.8
9.2
12
9.3
12
14
12
14
15
7.8
11
13
11
14
17
14
17
20
17
21
24
21
24
25
13

3.4
1.8
3.4
3.4
3.5
3.5
0.79
1.8
3.4
1.8
3.4
4.1
3.4
4.1
5.9
4.1
5.9
5.9
2.1
3.5
5.6
3.5
5.6
6
5.7
6.8
6.8
6.8
6.8
9.8
6.8
9.8
9.8
4.1

22
15
22
22
22
22
15
15
22
17
22
26
22
26
36
26
36
36
22
23
35
26
36
36
36
40
40
40
40
70
40
70
70
35

440
441
442
450
451
500
501
502
503
510
511
512
513
520
521
522
523
524
530
531
532
533
534
540
541
542
543
544
545
550
551
552
553
554

401

17

5.9

36

555

402

21

6.8

40

34
40
47
41
48
23
31
43
58
33
46
63
84
49
70
94
120
150
79
110
140
170
210
130
170
220
280
350
430
240
350
540
920
160
0
>160
0

14
14
15
14
15
6.8
10
14
22
10
14
22
34
15
22
34
36
58
22
34
52
70
70
36
58
70
100
100
150
70
100
150
220
400
700

100
100
120
100
120
70
70
100
150
100
120
150
220
150
170
230
250
400
220
250
400
400
400
400
400
440
710
710
1100
710
1100
1700
2600
4600

ANEXO 9. Lmites mximos permisibles de parmetros microbiolgicos y parasitolgicos


Parmetros

Unidad de medida

1. Bactrias Coliformes Totales.

UFC/100 mL a 35C

Lmite mximo
permisible
0 (*)

2. E. Coli

UFC/100 mL a 44,5C

0 (*)

3. Bactrias Coliformes

UFC/100 mL a 44,5C

0 (*)

UFC/100 mL

Termotolerantes o Fecales.
4. Bactrias Heterotrficas
UFC/mL a 35C
5. Huevos y larvas de Helmintos, N org/L
quistes

ooquistes

500
0

de

protozoarios patgenos.
6. Vrus
7. Organismos de vida libre,
como algas, protozoarios,
coppodos, rotferos, nemtodos

UFC / mL

0
N org/L

CENTRO DE SALUD TAMBURCO


CUESTIONARIO 1
DIRIGIDO A LOS USUARIOS DE AGUA DE CONSUMO HUMANO DEL DISTRITO DE
TAMBURCO-2016.
Datos del paciente:
Edad: -------- Sexo: M/F
Procedencia: -------------------------Fecha: -----------------------------------1) De dnde proviene el agua que utiliza para consumo.
a)
b)
c)
d)
e)

EMUSAP (Potable)
JASS.
Municipio.
Otro.
No sabe.

2) Cmo llega el agua a su casa.


a)
b)
c)
d)
e)

Tubera
Tanquero
Tubera y tanquero
Otro
Ninguno

3) El agua est disponible en forma:


a) Permanente
b) Racionada
4) Realiza algn proceso adicional de tratamiento del agua
a)
b)
c)
d)
e)

Clora el agua
Hierve el agua
F iltra el agua
Expone al sol el agua
Ninguna

5) De donde utiliza el agua para beber o cocinar


a)
b)
c)
d)

Directo del grifo


Del lugar de almacenamiento
Otro
Ninguno

6) Alguna vez le han capacitado sobre cmo tratar el agua de manera casera:
Si / No
7) En los ltimos 6 meses, cuantas veces se ha enfermado con diarrea
a) 1 a 4 veces
b) 4 a 6 veces
c) 6 a 9 veces
d) +10 veces
8) Cuantos das ha durado con la diarrea
a) Menos de 4 semanas
b) Ms de 4 semanas
9) Toma directamente el agua del grifo en el distrito de Tamburco, esto sucede:
a) Siempre
b) A veces
c) Nunca
10) Se lava las manos antes de ingerir los alimentos.
a) Siempre
b) A veces
c) Nunca
11) Tuvo un proceso diarreico despus de ingerir agua.
a) Siempre
b) A veces
c) Nunca

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